miR-374靶向下调TRIM35表达可促进乳腺癌细胞增殖和侵袭 被引量：1

1

作者 王蓉 邢连翔 +1 位作者 黄克亮 李欣 《检验医学》 CAS 2023年第9期812-817,共6页

目的探讨miR-374在乳腺癌中的作用及其与三基序蛋白35(TRIM35)的关系。方法选取乳腺癌患者42例,收集癌组织和癌旁组织(距肿瘤切缘>2 cm)。收集所有患者的临床病理资料。检测癌组织和癌旁组织miR-374和TRIM35的表达。根据不同处理方... 目的探讨miR-374在乳腺癌中的作用及其与三基序蛋白35(TRIM35)的关系。方法选取乳腺癌患者42例,收集癌组织和癌旁组织(距肿瘤切缘>2 cm)。收集所有患者的临床病理资料。检测癌组织和癌旁组织miR-374和TRIM35的表达。根据不同处理方法将乳腺癌细胞系MCF-7分为3组:对照组(未作任何处理)、干扰组(加入100 nmol/L miR-374抑制剂)和空载体组(加入100 nmol/L随机序列)。采用细胞增殖试验和Transwell试验评估miR-374对乳腺癌细胞系MCF-7增殖活性和侵袭能力的影响。采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-374和TRIM35之间的相互作用。结果与癌旁组织比较,癌组织miR-374相对表达量显著升高(P<0.001),TRIM35相对表达量显著降低(P<0.001)。不同肿瘤大小和有无淋巴转移、远隔转移的乳腺癌患者之间miR-374相对表达量差异均有统计学意义(P<0.05)。不同年龄和TNM分期的乳腺癌患者之间miR-374相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。干扰组miR-374相对表达量显著低于对照组和空载体组(P<0.001)。干扰组培养48、72 h后的细胞增殖率和侵袭细胞数均显著低于空载体组和对照组(P<0.001),TRIM35相对表达量显著高于空载体组和对照组(P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-374可直接抑制靶基因TRIM35的转录表达。结论miR-374与TRIM35存在相互作用,miR-374通过靶向下调TRIM35表达促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多

关键词 微小RNA-374 三基序蛋白35 乳腺癌 细胞增殖 细胞转移

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miR-374a通过PTEN/AKT信号通路调节乳腺癌细胞增殖与凋亡作用分析

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作者 刘军 叶涛 任永昌 《中外医药研究》 2023年第31期3-5,共3页

目的:探讨microRNA-374a(miR-374a)通过PTEN/AKT信号通路对乳腺癌细胞增殖与凋亡的调节作用。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对人乳腺癌细胞MCF-7和正常乳腺细胞Hs 578Bst中的miR-374a和PTEN mRNA转录水平进行检测。此外,通过... 目的:探讨microRNA-374a(miR-374a)通过PTEN/AKT信号通路对乳腺癌细胞增殖与凋亡的调节作用。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对人乳腺癌细胞MCF-7和正常乳腺细胞Hs 578Bst中的miR-374a和PTEN mRNA转录水平进行检测。此外,通过蛋白免疫印迹(Western blot)方法,测定MCF-7和Hs 578Bst细胞以及对照组和MiR-374a抑制剂处理组中PTEN和AKT及其磷酸化形式蛋白的表达变化。采用CCK-8法和TUNEL法,分别评估对照组和MiR-374a抑制剂处理组的细胞增殖和凋亡情况。同时,利用Western blot技术检测两组细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-9的表达变化。结果:在乳腺癌细胞中,MiR-374a的表达水平显著下调。通过转染技术抑制MiR-374a的表达后,乳腺癌细胞的增殖速率增快,凋亡率降低。同时,Western blot分析表明,抑制MiR-374a的表达导致PTEN蛋白水平下调,并伴随着AKT磷酸化水平的升高,从而激活PTEN/AKT信号通路。结论:MiR-374a通过靶向调节PTEN/AKT信号通路,对乳腺癌细胞的增殖和凋亡发挥重要的调节作用,为乳腺癌的治疗提供了新的潜在靶点和治疗策略。 展开更多

关键词 microRNA-374a PTEN/AKT信号通路 乳腺癌 细胞增殖 细胞凋亡

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新型精胺氧化酶抑制剂SI-4650对人恶性黑素瘤A375细胞侵袭和迁移的抑制作用研究 被引量：3

3

作者 黄娇娇 周游 +5 位作者 王艳林 曹春雨 孙丽丹 刘钰妮 王世恩 杨建林 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期800-802,837,共4页

目的研究新型精胺氧化酶抑制剂-SI-4650对人恶性黑素瘤A375细胞侵袭迁移的影响及其作用机制。方法体外培养A375细胞,将A375细胞分为3组:空白对照组(正常培养)和低、高2个浓度实验组(SI-4650:40,80μmol·L-1),均培养48 h。Transwel... 目的研究新型精胺氧化酶抑制剂-SI-4650对人恶性黑素瘤A375细胞侵袭迁移的影响及其作用机制。方法体外培养A375细胞,将A375细胞分为3组:空白对照组(正常培养)和低、高2个浓度实验组(SI-4650:40,80μmol·L-1),均培养48 h。Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法检测上皮-钙黏素(E-cadherin)、神经-钙黏素(N-cadherin)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平。结果空白对照组与低、高2个浓度实验组的迁移数分别为268±35,86±26和32±19;这3组的侵袭穿膜细胞数分别为234±28,32±15和9±5;这3组的E-cadherin蛋白相对表达量分别为1.00±0.06,1.55±0.33和3.34±0.50;这3组的N-cadherin蛋白相对表达量分别为1.00±0.04,0.42±0.06和0.15±0.03;这3组的MMP2蛋白相对表达量分别为0.74±0.03,0.63±0.04和0.34±0.01。上述指标:低、高2个浓度实验组与空白对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论 SI-4650可高效抑制人恶性黑素瘤A375细胞迁移和侵袭,其机制可能与影响A375细胞上皮-间质转化进程相关。 展开更多

关键词 精胺氧化酶抑制剂 A375细胞 上皮-间质转化 侵袭 迁移

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胶质瘤中MicroRNA-374的表达及其临床意义 被引量：2

4

作者 沈云龙 安泰学 +3 位作者 李和珍 杨勇 王雪娟 刘丽红 《解剖学研究》 CAS 2016年第4期289-293,共5页

目的研究人脑胶质瘤组织中微小RNA-374(microRNA-374,miR-374)的表达及其与临床病理特征之间的关系,探讨其在胶质瘤患者中的临床意义。方法采用RT-PCR法检测85例胶质瘤和30例正常脑组织中的miR-374表达;Kaplan-Meier法分析胶质瘤患者的... 目的研究人脑胶质瘤组织中微小RNA-374(microRNA-374,miR-374)的表达及其与临床病理特征之间的关系,探讨其在胶质瘤患者中的临床意义。方法采用RT-PCR法检测85例胶质瘤和30例正常脑组织中的miR-374表达;Kaplan-Meier法分析胶质瘤患者的总生存期;观察慢病毒过表达miR-374载体转染U251和U87细胞株后对肿瘤细胞增殖的影响。结果胶质瘤组织中miR-374的表达明显下调;miR-374的表达与WHO分级(P=0.008)、Karnofsky评分(KPS)(P=0.021)和生存时间(P=0.01)显著相关;Kaplan-Meier分析结果表明,miR-374低表达与高表达患者总生存期(P<0.01)的差异有统计学意义,miR-374低表达的患者预后较差。多因素分析显示胶质瘤中miR-374的差异表达是预测胶质瘤患者预后的独立危险因素(HR:5.75,95%CI:3.56-6.93,P=0.005)。体外实验表明,过表达miR-374可以显著抑制胶质瘤细胞的增殖。结论 miR-374在胶质瘤中是低表达的,与胶质瘤患者预后显著相关;miR-374高表达可抑制胶质瘤细胞的增殖。 展开更多

关键词 胶质瘤 miR-374 U251细胞株 U87细胞株 增殖

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基于CRISPR/Cas9技术的miR-374a低表达细胞系的构建及鉴定

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作者 谢柱 李崇慧 +5 位作者 方军 陈佳唯 李浩 寇志华 李军锋 周育森 《蚌埠医学院学报》 CAS 2019年第5期561-565,共5页

目的:运用CRISPR/Cas9技术构建miR-374a低表达细胞系。方法:设计针对miR-374a成熟体gRNA,合成DNA,插入pSpCas9(BB)-2A-Puro,将鉴定正确的载体转染入肺癌细胞系A549细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的细胞;PCR方法扩增,序列测定分析细胞基因组... 目的:运用CRISPR/Cas9技术构建miR-374a低表达细胞系。方法:设计针对miR-374a成熟体gRNA,合成DNA,插入pSpCas9(BB)-2A-Puro,将鉴定正确的载体转染入肺癌细胞系A549细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的细胞;PCR方法扩增,序列测定分析细胞基因组中靶位点区域序列;定量PCR方法检测转染细胞中miR-374a及其靶基因TGFA的表达情况;细胞增殖实验检测miR-374a基因编辑对细胞生长情况的影响。结果:构建了靶向miR-374a成熟体基因序列的基因编辑载体,转染细胞经过加压筛选,序列分析结果提示靶向位点的基因发生了缺失或插入突变;定量PCR结果显示,转染基因编辑载体的细胞miR-374a表达水平较对照细胞明显下降(P<0.01),而靶基因TGFA表达则明显上升(P<0.05);细胞增殖实验显示miR-374a低表达的细胞增殖能力发生了明显改变(P<0.05~P<0.01)。结论:成功构建了miR-374a低表达细胞系,为后续研究该分子的功能提供了基础。 展开更多

关键词 微小RNA-374a 转化生长因子 CRISPR/CAS9技术 细胞增殖

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miR-374b-5p靶向调控ING1表达及对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响 被引量：7

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作者 李霞 任玉嫄 +1 位作者 林洁 周琦 《解放军医药杂志》 CAS 2020年第2期26-31,共6页

目的研究miR-374b-5p在乳腺癌组织中的表达,探讨miR-374b-5p对乳腺癌细胞增殖、侵袭、转移的影响和对生长抑制因子1(ING1)的靶向调控作用。方法检测miR-374b-5p在50例乳腺癌组织和癌旁组织及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、HCC1937和... 目的研究miR-374b-5p在乳腺癌组织中的表达,探讨miR-374b-5p对乳腺癌细胞增殖、侵袭、转移的影响和对生长抑制因子1(ING1)的靶向调控作用。方法检测miR-374b-5p在50例乳腺癌组织和癌旁组织及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、HCC1937和正常乳腺细胞系MCF 10A中的表达水平。选取miR-374b-5p表达水平最高的乳腺癌细胞和正常乳腺细胞,转染miR-374b-5p抑制剂(miR-374b-5p inhibitor),转染48 h后检测2组的miR-374b-5p表达水平,检测细胞增殖率、细胞侵袭和转移能力。研究miR-374b-5p对ING1基因的靶向作用;miR-374b-5p模拟物(miR-374b-5p mimic)对ING1 mRNA表达影响。结果乳腺癌组织中miR-374b-5p表达高于癌旁组织(P<0.05)。miR-374b-5p在乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、HCC1937的表达高于其在MCF 10A细胞中的表达水平(P<0.05);选取表达水平最高MCF-7细胞用于后续实验。转染48 h,miR-374b-5p inhibitor组miR-374b-5p水平低于对照组(P<0.05)。miR-374b-5p Inhibitor组的细胞增殖率、穿膜细胞数低于对照组(P<0.05);ING1为miR-374b-5p的靶基因,miR-374b-5p mimic组ING1 mRNA的表达减少(P<0.05)。结论miR-374b-5p在乳腺癌组织和细胞系中均高表达,miR-374b-5p可能通过负调控ING1抑制乳腺癌的侵袭和转移。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 miR-374b-5p 生长抑制因子1 细胞增殖 侵袭 转移

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miR-374b-5p靶向调控PTEN抑制七氟醚诱导的小鼠海马神经元HT22细胞凋亡

7

作者 葛晓丹 康佳静 +1 位作者 李瑜 贾英萍 《河南医学高等专科学校学报》 2024年第4期425-432,共8页

目的 探究miR-374b-5p对七氟醚(sevoflurane,Sev)引起的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的保护作用。方法 将HT22细胞并分为6组:对照组、Sev组、miR-con+Sev组、miR-374b-5p+Sev组、miR-374b-5p+pcDNA+Sev组、miR-374b-5p+pcDNA-PTEN+Sev组... 目的 探究miR-374b-5p对七氟醚(sevoflurane,Sev)引起的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的保护作用。方法 将HT22细胞并分为6组:对照组、Sev组、miR-con+Sev组、miR-374b-5p+Sev组、miR-374b-5p+pcDNA+Sev组、miR-374b-5p+pcDNA-PTEN+Sev组。RT-qPCR检测各组miR-374b-5p和PTEN mRNA的表达水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测各组PTEN、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3的表达水平,双荧光素酶活性实验验证miR-374b-5p对PTEN的靶向作用,CCK8检测HT22细胞活性;流式细胞术检测HT22细胞凋亡;DCFH-DA探针检测HT22细胞ROS水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HT22细胞中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果 与对照组比较,在Sev处理组miR-374b-5p的表达水平下降,PTEN mRNA和PTEN蛋白表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-374b-5p通过与HT22细胞中PTEN mRNA的3’UTR结合而抑制PTEN的表达。与对照组比较,Sev组HT22细胞中PTEN mRNA、PTEN、ROS、MDA含量、Cleaved caspase-3、Bax表达量和细胞凋亡率升高,而miR-374b-5p、GSH含量、Bcl-2表达量和细胞存活率降低,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-con+Sev组比较,miR-374b-5p+Sev组的HT22细胞中PTEN mRNA、PTEN、ROS、MDA含量Cleaved caspase-3、Bax表达量和细胞凋亡率降低,而miR-374b-5p、GSH含量、Bcl-2表达量和细胞存活率升高,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-374b-5p+pcDNA+Sev组比较,miR-374b-5p+pcDNA-PTEN+Sev组的HT22细胞中PTEN mRNA、PTEN、ROS、MDA含量、Cleaved caspase-3、Bax表达量和细胞凋亡率升高,而GSH含量、Bcl-2表达量和细胞存活率含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 预处理miR-374b-5p可能通过抑制PTEN抑制Sev处理HT22细胞凋亡,从而发挥对神经细胞的保护作用。 展开更多

关键词 七氟醚 miR-374b-5p 氧化应激 细胞凋亡

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circAGFG1对非小细胞肺癌生物学行为的影响机制研究

8

作者 杨燕君 董跃华 +7 位作者 高永山 姜伟华 王贵刚 王大伟 魏玉磊 苏华 张振明 李晓媛 《局解手术学杂志》 2024年第4期306-311,共6页

目的 探讨环状RNA(circRNA)AGFG1通过靶向微小RNA(miR)-374a-5p/血管内皮生长因子C(VEGFC)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)生物学行为的影响机制。方法 qRT-PCR检测55例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织以及人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)、人NSCLC... 目的 探讨环状RNA(circRNA)AGFG1通过靶向微小RNA(miR)-374a-5p/血管内皮生长因子C(VEGFC)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)生物学行为的影响机制。方法 qRT-PCR检测55例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织以及人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)、人NSCLC细胞系(HCC827、H1975、A549、H1299)中circAGFG1、miR-374a-5p、VEGFC mRNA表达水平。以A549细胞为研究对象,设置对照组、circAGFG1小干扰RNA(si circAGFG1)组及阴性对照(si NC)组、si circAGFG1+miR-374a-5p抑制物(miR-374a-5p inhibitor)组以及si circAGFG1+抑制物对照组(inhibitor NC)组。qRT-PCR检测各组A549细胞中circAGFG1、miR-374a-5p、VEGFC mRNA表达水平;CCK-8及Transwell实验分别检测细胞活力及迁移、侵袭能力;Western blot检测增殖蛋白Ki-67、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及VEGFC蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证circAGFG1、VEGFC分别与miR-374a-5p的靶向关系。结果 癌组织及人NSCLC细胞系中circAGFG1、VEGFC mRNA表达水平显著增加,miR-374a-5p表达显著降低(P<0.05)。与对照组、si NC组比较,si circAGFG1组培养24 h、48 h的OD450值,迁移数,侵袭数及Ki-67、MMP-9、circAGFG1、VEGFC表达水平显著下降/减少(P<0.05),miR-374a-5p表达显著增加(P<0.05);与si circAGFG1+inhibitor NC组比较,circAGFG1+miR-374a-5p inhibitor组培养24 h、48 h的OD450值,迁移数,侵袭数及Ki-67、MMP-9、VEGFC表达水平显著增加(P<0.05),miR-374a-5p表达显著降低(P<0.05),但circAGFG1无显著变化(P>0.05)。circAGFG1、VEGFC分别与miR-374a-5p存在靶向关系。结论 干扰circAGFG1表达可通过调控miR-374a-5p/VEGFC轴抑制A549细胞的恶性生物学行为发展。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 circAGFG1 miR-374a-5p/VEGFC轴 生物学行为

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miR-374b-5p靶向调控UHMK1对前列腺癌PC-3细胞的影响

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作者 秦策 王洋 +2 位作者 吴媛媛 张冬 史英 《生物技术》 CAS 2023年第2期213-218,207,共7页

[目的]探讨miR-374b-5p调控UHMK1表达对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移及凋亡的作用。[方法]萤光霉素报告检测miR-374b-5p对UHMK1的调控作用,将miR-NC、miR-374b-5p inhibitor和miR-374b-5p mimic转染到前列腺癌PC-3细胞。采用CCK-8法检测... [目的]探讨miR-374b-5p调控UHMK1表达对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移及凋亡的作用。[方法]萤光霉素报告检测miR-374b-5p对UHMK1的调控作用,将miR-NC、miR-374b-5p inhibitor和miR-374b-5p mimic转染到前列腺癌PC-3细胞。采用CCK-8法检测细胞存活率,改良的Matrigel Boyden室测定对细胞的侵袭性实施检测,划痕实验对细胞的具体迁移力实施检测,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-qPCR检测miR-374b-5p和UHMK1 mRNA表达,Western Bloting检测UHMK1蛋白表达。[结果]与对照组比较,miR-374b-5p inhibitor组细胞存活率、迁移率、侵袭数、miR-374b-5p表达水平、UHMK1 mRNA表达和蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05);miR-374b-5p mimic组细胞存活率、迁移率、侵袭数、miR-374b-5p表达水平、UHMK1 mRNA表达和蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。与miR-374b-5p inhibitor组比较,miR-374b-5p mimic组细胞存活率、迁移率、侵袭数、miR-374b-5p和UHMK1 mRNA和蛋白表达水平显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。[结论]过表达miR-374b-5p可通过上调UHMK1表达来促进前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞的凋亡。 展开更多

关键词 miR-374b-5p 前列腺癌 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 UHMK1

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hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用

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作者 朱亚雯 达静 +2 位作者 徐凤霞 姜树中 陆翠华 《解剖科学进展》 CAS 2023年第3期295-298,共4页

目的 探讨hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用。方法 TCGA数据集分析VEGFB在结直肠癌中的表达和对生存曲线的影响;免疫组织化学方法检测59例结直肠癌组织中VEGFB蛋白的表达;ELISA方法检测结直肠正常细胞和结直肠癌细胞中... 目的 探讨hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用。方法 TCGA数据集分析VEGFB在结直肠癌中的表达和对生存曲线的影响;免疫组织化学方法检测59例结直肠癌组织中VEGFB蛋白的表达;ELISA方法检测结直肠正常细胞和结直肠癌细胞中VEGFB的表达。重组人VEGFB蛋白或VEGFB抗体处理后,MTT法检测细胞活力;膜联蛋白V-PE和7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色法检测细胞凋亡水平;FASAria细胞分选仪检测细胞周期。miRNA测序检测细胞中miRNA总体表达水平;实时荧光定量PCR检测miRNA-374a-3p与VEGFB mRNA的表达水平;荧光素酶报告实验验证miRNA-374a-3p与VEGFB-3′-UTR的靶向关系。结果 VEGFB在结直肠癌组织中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常组织。VEGFB高表达患者的中位生存期明显低于低表达患者。与结直肠正常细胞相比,结直肠癌细胞VEGFB表达水平明显升高。VEGFB蛋白处理后,结直肠正常细胞NCM460的细胞活力水平上升、细胞凋亡水平下降。结直肠癌组织中miR-374a-3p与VEGFB的表达水平存在负相关。miR-374a-3p靶向VEGFB mRNA的3′端非编码区。敲低miR-374a-3p后,细胞中VEGFB的mRNA和蛋白表达水平均上升,细胞活力上升,细胞凋亡减少。结论 miR-374a-3p与VEGFB的表达水平在结直肠癌中存在负相关,VEGFB/miR-374a-3p轴调控结直肠癌细胞的增殖与凋亡。 展开更多

关键词 miR-374a-3p VEGFB 结直肠癌 凋亡 细胞活力

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非小细胞肺癌患者血清miR-374b-5p、VEGF-C的表达及与预后的关系

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作者 李敏婕 刘淑红 +1 位作者 陈洪云 余海青 《中国医药导报》 CAS 2023年第26期22-26,共5页

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清微RNA-374b-5p(miR-374b-5p)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及与预后的关系。方法选取2018年2月至2019年9月山东省临沂市肿瘤医院(以下简称“我院”)收治的105例NSCLC患者为NSCLC组,我院同期54... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清微RNA-374b-5p(miR-374b-5p)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及与预后的关系。方法选取2018年2月至2019年9月山东省临沂市肿瘤医院(以下简称“我院”)收治的105例NSCLC患者为NSCLC组,我院同期54名体检健康者为对照组。检测并比较两组血清miR-374b-5p与VEGF-C表达;TargetScan数据库预测miR-374b-5p与VEGF-C的关系;Pearson相关系数分析血清miR-374b-5p与VEGF-C表达的相关性;K-M法绘制不同miR-374b-5p、VEGF-C表达NSCLC患者生存曲线;NSCLC死亡的影响因素采用Cox回归分析。结果NSCLC组血清miR-374b-5p表达低于对照组,VEGF-C表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-374b-5p与VEGF-C的3’-非翻译区381-388和585-591处存在结合位点。NSCLC患者血清miR-374b-5p与VEGF-C表达呈负相关(r=-0.735,P<0.01)。不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移NSCLC患者血清miR-374b-5p、VEGF-C表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同miR-374b-5p、VEGF-C表达NSCLC患者生存曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、VEGF-C升高为NSCLC死亡的独立危险因素(HR=3.195、4.212、1.102,P<0.05),miR-374b-5p升高为独立保护因素(HR=0.988,P<0.05)。结论NSCLC患者血清miR-374b-5p低表达和VEGF-C高表达,与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 微RNA-374b-5p 血管内皮生长因子C 病理参数 预后

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2型糖尿病患者血清miR-374b的表达及其潜在机制 被引量：3

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作者 师苹 卢超 +5 位作者 郝丽美 王培 亢玉兰 陈亚平 丁玉芝 杨伟然 《临床与病理杂志》 2020年第9期2270-2275,共6页

目的:研究血清miR-374b作为2型糖尿病患者(type 2 diabetes mellitus,T2DM)潜在诊断指标的可能性,并探究miR-374b在T2DM发病过程中潜在的分子机制。方法:运用qRT-PCR技术,检测30例T2DM患者及30例健康对照血清中miR-374b表达水平,测定相... 目的:研究血清miR-374b作为2型糖尿病患者(type 2 diabetes mellitus,T2DM)潜在诊断指标的可能性,并探究miR-374b在T2DM发病过程中潜在的分子机制。方法:运用qRT-PCR技术,检测30例T2DM患者及30例健康对照血清中miR-374b表达水平,测定相关生化指标,并且通过逻辑回归分析两组人群血清miR-374b对T2DM的辅助诊断价值。并且将miR-374b mimics转染进胰岛β细胞株MIN-6中,通过qRT-PCR检测miR-374b对促凋亡基因Bax和抑凋亡基因Bcl-2的mRNA水平的影响。结果:qRT-PCR分析结果显示:与健康对照组相比,miR-374b在T2DM患者的血清中水平显著升高(P<0.01)。进一步逻辑回归分析结果显示在血清中miR-374b的表达水平是T2DM独立影响因素。细胞转染实验结果显示:miR-374b能显著促进促凋亡基因Bax的mRNA表达并且抑制抑凋亡基因Bcl-2的mRNA表达。结论:血清miR-374b高表达是T2DM患者潜在的非侵入性辅助诊断标志物及独立危险因素。MiR-374b表达量升高会导致胰岛β细胞凋亡。 展开更多

关键词 2型糖尿病患者 miR-374b 胰岛Β细胞 荧光定量PCR

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微小RNA-374-5p对大鼠垂体泌乳素腺瘤细胞系 MMQ增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制 被引量：3

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作者 王大维 李振业 高华 《山东医药》 CAS 2020年第9期1-5,共5页

目的观察微小RNA-374-5p(miR-374-5p)对大鼠垂体泌乳素腺瘤细胞系MMQ增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法将对数生长期MMQ细胞分为A、B、C、D组。A组加入常规培养基,B组加入miR-374-5p类似物,C组加入miR-374-5p抑制剂,D组加... 目的观察微小RNA-374-5p(miR-374-5p)对大鼠垂体泌乳素腺瘤细胞系MMQ增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法将对数生长期MMQ细胞分为A、B、C、D组。A组加入常规培养基,B组加入miR-374-5p类似物,C组加入miR-374-5p抑制剂,D组加入miR-374-5p类似物和miR-374-5p抑制剂。各组培养0、24、48、72 h时,酶标仪在490 nm波长处检测各组细胞光密度值(OD值,以OD值表示细胞增殖能力)。各组细胞培养72 h时,离心收集细胞,加入Annexin V-FITC和PI染色,流式细胞仪检测Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数(以Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数表示细胞凋亡能力)。各组细胞培养72 h时,采用实时定量PCR法检测各组细胞侵袭相关基因[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、蜗牛家族转录阻遏物1(Snail)、波形蛋白(Vimentin),以侵袭相关基因mRNA的相对表达量表示细胞侵袭能力]及垂体肿瘤转化基因(PTTG)mRNA。将野生型(WT)PTTG荧光素酶载体和突变型(mut)PTTG荧光素酶载体分别与microRNA-NC或miR-374-5p类似物共转染至MMQ细胞,记为NC-WT组、NC-mut组、WT组、mut组,转染72 h后,使用双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞上清液中荧光素酶活性。结果与A、D组相比,培养24、48、72 h时,B组细胞增殖能力显著降低(P均<0.05),C组细胞增殖能力显著升高(P均<0.05)。A、B、C、D组Annexin V染色阳性细胞百分数分别为3.7%±1.4%、17.6%±5.3%、3.4%±1.5%、4.5%±1.4%,PI染色阳性细胞百分数分别为2.4%±0.9%、11.2%±3.7%、2.5%±1.2%、2.7%±0.9%,其中B组Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数与A、C、D组相比,P均<0.05。与A、D组相比,B组细胞E-cadherin mRNA、PTTG mRNA相对表达量显著降低(P均<0.05),N-cadherin mRNA相对表达量显著升高(P均<0.05)。NC-WT组、NC-mut组、WT组、mu 展开更多

关键词 微小RNA 微小RNA-374-5p MMQ细胞 泌乳素腺瘤 垂体肿瘤转化基因 细胞增殖 细胞凋亡 E-钙黏蛋白 N-钙黏蛋白

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miR-374a和miR-548b调控非小细胞肺癌对吉非替尼耐药的研究 被引量：3

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作者 朱彩华 曹新广 +5 位作者 吕慧芳 陈贝贝 唐菲 樊鑫鑫 秦建军 陈小兵 《医药论坛杂志》 2016年第4期1-3,7,共4页

目的探讨miR-374a和miR-548调控非小细胞肺癌对吉非替尼耐药的机制。方法 1qRT-PCR检测转染载体miR-Zip-347a或p-miR-548b的HCC827-Gef和Calul细胞中miR-374a或miR-548b的相对表达水平;并检测转染pcDNA-Wnt5a和pcDNA-CCNB1及其对照载体... 目的探讨miR-374a和miR-548调控非小细胞肺癌对吉非替尼耐药的机制。方法 1qRT-PCR检测转染载体miR-Zip-347a或p-miR-548b的HCC827-Gef和Calul细胞中miR-374a或miR-548b的相对表达水平;并检测转染pcDNA-Wnt5a和pcDNA-CCNB1及其对照载体的HCC827-Gef细胞中Wnt5a和CCNB1的相对表达水平。2MTS法检测敲除miR-374a或过表达miR-548b的HCC827-Gef和Calul细胞对吉非替尼的敏感性,并分析过表达蛋白Wnt5a或CCNB1的HCC827-Gef细胞对吉非替尼的敏感性;3荧光素酶报告基因检测共转染相应载体后的HEK293细胞中荧光素酶活性。4蛋白印迹分析转染p-miR-374a、p-miR-548b和p-miR-control的细胞中Wnt5a或CCNB1的表达水平。结果 1非小细胞肺癌细胞Calul和HCC827-Gef中miR-374a表达明显受到抑制或miR-548b过表达时,其对吉非替尼的敏感性显著升高;2HCC827-Gef细胞miR-374a和miR-548b过表达分别显著降低Wnt5a和CCNB1蛋白的表达;HCC827-Gef细胞中Wnt5a过表达可部分逆转非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的耐药;转染p-miR-548b的HCC827-Gef细胞中CCNB1的再表达也说明了细胞对吉非替尼的敏感性。结论 miR-374a和miR-548b分别通过靶向Wnt5a和CCNB1基因调控非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性。 展开更多

关键词 miR-374a miR-548b 非小细胞肺癌 吉非替尼

原文传递

血清miR-374a在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：2

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作者 余雪梅 吴啸天 +4 位作者 蔡伟 李代昆 赵钰玫 陈梅 薛建江 《检验医学与临床》 CAS 2017年第11期1584-1585,1588,共3页

目的探讨microRNA-374a(miR-374a)在非小细胞肺癌患者血清中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(SYBgreen法)检测65例非小细胞肺癌(NSCLC)患者和70例健康人(健康对照组)血清中miR-374a的表达水平。结果 miR-374a在NSCLC患者血... 目的探讨microRNA-374a(miR-374a)在非小细胞肺癌患者血清中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(SYBgreen法)检测65例非小细胞肺癌(NSCLC)患者和70例健康人(健康对照组)血清中miR-374a的表达水平。结果 miR-374a在NSCLC患者血清中表达水平显著高于健康对照组(3.84±1.21 vs.1.09±0.16,P<0.05),并且其表达与临床TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。血清miR-374a在受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.875~0.975)。当血清miR-374a临界值取1.615时,对NSCLC诊断的灵敏度为87.69%,特异度为97.14%。结论血清miR-374a有望成为一种新的生物标志物用于NSCLC的辅助诊断。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-374a 荧光定量PCR

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川陈皮素通过调控微RNA-374a-3p表达抑制氧化低密度脂蛋白诱导的人脑微血管内皮细胞损伤研究 被引量：1

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作者 刘拥军 李鹏 齐兵歌 《世界临床药物》 CAS 2022年第12期1545-1552,共8页

目的研究川陈皮素对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMECs)损伤的影响,分析其机制是否与调控微RNA(microRNA,miR)-374a-3p表达有... 目的研究川陈皮素对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMECs)损伤的影响,分析其机制是否与调控微RNA(microRNA,miR)-374a-3p表达有关。方法采用50μg/ml的ox-LDL培养HBMECs,建立体外细胞损伤模型。将HBMECs分为对照(control,Con)组、ox-LDL组、ox-LDL+川陈皮素低剂量组、ox-LDL+川陈皮素中剂量组、ox-LDL+川陈皮素高剂量组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-374a-3p组、ox-LDL+川陈皮素+anti-miR-NC组、ox-LDL+川陈皮素+anti-miR-374a-3p组。检测细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。分析细胞凋亡率和miR-374a-3p表达量。结果与Con组比较,ox-LDL组细胞MDA水平、凋亡率显著升高(P<0.01),SOD和CAT活性、miR-374a-3p表达显著降低(P<0.01)。与ox-LDL组比较,ox-LDL+川陈皮素低剂量组、ox-LDL+川陈皮素中剂量组、ox-LDL+川陈皮素高剂量组的MDA水平和凋亡率显著降低(P<0.01),SOD和CAT活性、miR-374a-3p表达显著升高(P<0.01)。与ox-LDL+miR-NC组比较,ox-LDL+miR-374a-3p组细胞MDA水平、凋亡率显著降低(P<0.01),SOD和CAT活性显著升高(P<0.01)。与ox-LDL+川陈皮素+anti-miR-NC组比较,ox-LDL+川陈皮素+anti-miR-374a-3p组细胞MDA水平、凋亡率显著升高(P<0.01),SOD和CAT活性显著降低(P<0.01)。结论川陈皮素通过上调miR-374a-3p表达,能够减轻ox-LDL诱导的HBMECs凋亡和氧化应激损伤。 展开更多

关键词 川陈皮素 微RNA-374a-3p 氧化低密度脂蛋白 人脑微血管内皮细胞 氧化应激 凋亡

原文传递

lncRNA BLACAT1通过抑制miR-374b-5p促进非小细胞肺癌细胞增殖和转移 被引量：1

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作者 李明如 林贵湖 +1 位作者 聂振凯 张凯华 《生物技术通讯》 CAS 2020年第3期262-268,共7页

目的:研究长链非编码RNA BLACAT1在非小细胞肺癌发生和转移过程中的作用机制。方法:starBase软件分析TCGA数据库中肺腺癌及肺鳞癌与癌旁组织之间BLACAT1表达差异;qRT-PCR检测人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、NCI-H1299、NCI-H23和正常... 目的:研究长链非编码RNA BLACAT1在非小细胞肺癌发生和转移过程中的作用机制。方法:starBase软件分析TCGA数据库中肺腺癌及肺鳞癌与癌旁组织之间BLACAT1表达差异;qRT-PCR检测人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、NCI-H1299、NCI-H23和正常肺上皮细胞BEAS-2B中BLACAT1的转录水平差异,筛选BLACAT1高表达非小细胞肺癌细胞系;CCK-8检测BLACAT1对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响;Transwell检测BLACAT1对非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;starBase软件预测BLACAT1作用的miRNA,采用qRT-PCR验证敲低BLACAT1对预测miRNA表达的影响,筛选与BLACAT1相互作用的miRNA,双萤光素酶报告基因实验验证结果;CCK-8检测BLACAT1/miR-374b-5p对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响;Transwell检测BLACAT1/miR-374b-5p对非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;Western印迹检测非小细胞肺癌细胞转移相关基因的蛋白表达水平。结果:肺腺癌及肺鳞癌组织中BLACAT1表达量显著高于癌旁组织;非小细胞肺癌细胞A549的BLACAT1表达量最高;敲低BLACAT1降低A549细胞活力、迁移和侵袭能力;BLACAT1作为海绵吸附miR-374b-5p;敲低BLACAT1增加miR-374b-5p的表达,抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论:BLACAT1通过抑制miR-374b-5p促进非小细胞肺癌细胞增殖和转移。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 BLACAT1 miR-374b-5p 增殖 转移

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miR-374a对肺腺癌细胞增殖与侵袭迁移的影响 被引量：1

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作者 孙继伟 袁五营 贾敬周 《实用癌症杂志》 2021年第1期11-15,19,共6页

目的探究分析miR-374a对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移等生物学行为能力的影响。方法采用RT-PCR检测miR-374a在正常肺上皮细胞CCD-8L及非小细胞肺癌细胞A549、H1975中的表达情况。采用miR-374a mimic和miR-374a inhibitor转染非小... 目的探究分析miR-374a对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移等生物学行为能力的影响。方法采用RT-PCR检测miR-374a在正常肺上皮细胞CCD-8L及非小细胞肺癌细胞A549、H1975中的表达情况。采用miR-374a mimic和miR-374a inhibitor转染非小细胞肺癌细胞A549、H1975,采用RT-PCR检测各组细胞转染效率。分别采用CCK8细胞增殖实验、平板克隆实验、Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验检测转染前后非小细胞肺癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力变化情况。结果与正常肺上皮细胞CCD-8L比较,非小细胞肺癌细胞A549、H1975中miR-374a呈稳定高表达(P<0.05)。miR-374a mimic、miR-374a inhibitor可分别瞬时过表达、低表达非小细胞肺癌细胞A549、H1975中miR-374a表达情况(P<0.05)。过表达miR-374a可促进非小细胞肺癌细胞A549、H1975的增殖、迁移和侵袭(P<0.05);靶向抑制miR-374a表达可抑制非小细胞肺癌细胞A549、H1975的增殖、迁移和侵袭(P<0.05),组间差异显著,具有统计学意义。结论miR-374a在非小细胞肺癌细胞A549、H1975中呈稳定高表达,过表达miR-374a可明显促进非小细胞肺癌细胞A549、H1975的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 miR-374a 非小细胞肺癌 增殖 侵袭 迁移

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