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A型猪流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：7
1
作者 欧阳振宇 唐连飞 +4 位作者 朱中武 肖家勇 孟芳 黄萍 吴愈柏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第9期75-77,共3页
根据WHO推荐的检测A型猪流感病毒的引物和探针序列,建立了A型猪流感病毒实时荧光定量PCR检测方法。使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,检测结果表明,该方法的敏感性可达100拷贝/25μL反应体系,显示出良好的敏感性和重复... 根据WHO推荐的检测A型猪流感病毒的引物和探针序列,建立了A型猪流感病毒实时荧光定量PCR检测方法。使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,检测结果表明,该方法的敏感性可达100拷贝/25μL反应体系,显示出良好的敏感性和重复性,临床上已用于实验室鼻拭子样品的检测,并成为一种快速定量检测A型猪流感病毒的方法。 展开更多
关键词 A型猪流感病毒 实时荧光定量PCR H1N1亚型
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A型猪流感病毒TaqMan探针荧光RT-PCR检测方法的建立 被引量：1
2
作者 王建华 陈小金 +8 位作者 肖妍 王玉玲 谭旭菲 赵丹 张俊哲 陈本龙 王乃福 董志珍 赵祥平 《中国动物检疫》 CAS 2016年第12期85-88,共4页
根据A型猪流感病毒(SIV)的基质蛋白(M)编码基因保守序列设计合成一对特异性引物和一条Taq Man探针,建立了一种检测A型SIV的荧光RT-PCR方法。结果显示,该方法对H1N1、H3N2和H9N2亚型SIV均呈特异性扩增,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病... 根据A型猪流感病毒(SIV)的基质蛋白(M)编码基因保守序列设计合成一对特异性引物和一条Taq Man探针,建立了一种检测A型SIV的荧光RT-PCR方法。结果显示,该方法对H1N1、H3N2和H9N2亚型SIV均呈特异性扩增,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒等猪的其他常见病毒无交叉扩增反应;该方法对M基因RNA对照(SIV-M-RNA)的最适线性检测范围为3.8×10~1~3.8×10~8拷贝数/反应,标准曲线方程为Y=-3.4365X+40.091,相关系数(R^2)为0.999 8,最低检出限为38个拷贝数的SIV-M-RNA。对3个不同浓度(3.8×10~3~3.8×10~5 copies/μL)的SIV-M-RNA进行组间和组内重复试验,每个浓度的Ct值变异系数均小于1.5%,具有良好的重现性。用该方法对860份进口猪的鼻拭子样本和78份国内猪场猪鼻拭子样本进行SIV检测,结果进口猪鼻拭子样本的SIV检测均为阴性,17份国内猪场猪鼻拭子样本SIV检测为阳性。本研究提供了一种快速、敏感和特异的A型猪流感病毒检测方法。 展开更多
关键词 A型猪流感病毒 TAQMAN探针 荧光RT-PCR
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中国类禽型H1N1亚型猪流感病毒的发现和遗传分析 被引量：1
3
作者 田云 屈源泉 +3 位作者 孙彦伟 卢受昇 查云峰 孔令辰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期36-40,共5页
采用禽流感病毒通用引物，对2006年发现的1株H1N1亚型的类禽型猪流感病毒的全基因组进行了测序，并进行了遗传学分析。序列分析表明它的8个片段与欧洲的类禽型猪流感病毒A／swine／Ileet Viiaine／1455／99（H1N1）病毒和A／swine／Cot... 采用禽流感病毒通用引物，对2006年发现的1株H1N1亚型的类禽型猪流感病毒的全基因组进行了测序，并进行了遗传学分析。序列分析表明它的8个片段与欧洲的类禽型猪流感病毒A／swine／Ileet Viiaine／1455／99（H1N1）病毒和A／swine／Cotesd＇Armor／1488／99（H1N1）病毒的相应基因具有高度的同源性，同源性可达97％～99％，表明类禽型猪流感病毒已在中国出现。其血凝素基因的190E→D和225G→E的突变使得其结合NeuAca2，6Gal受体的能力高于NeuAca2，3Gal受体。欧洲的类禽型猪流感病毒可以直接感染人，并且可导致人的肺炎和死亡。中国类禽型猪流感病毒的发现及其的NeuAca2，6Gal受体结合特性使其成为一个潜在可感染人的病毒。 展开更多
关键词 类禽型猪流感病毒 H1N1亚型 遗传分析
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