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表达分泌荧光素酶的重组流感病毒构建及体外生物学特性研究
被引量：
1
1
作者
王东红
邓瑶
+6 位作者
叶飞
周剑芳
王文
黄保英
王梦微
孟昕
谭文杰
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期823-828,共6页
目的采用不同的流感病毒骨架构建表达分泌荧光素酶(Gaussia luciferase,Gluc)的重组流感病毒,同时研究其生长特性、遗传稳定性、Gluc表达水平、体外抗流感药物活性。方法在PR8NA的C端插入猪捷申病毒2A肽(porcine teschovirus-2A autocle...
目的采用不同的流感病毒骨架构建表达分泌荧光素酶(Gaussia luciferase,Gluc)的重组流感病毒,同时研究其生长特性、遗传稳定性、Gluc表达水平、体外抗流感药物活性。方法在PR8NA的C端插入猪捷申病毒2A肽(porcine teschovirus-2A autocleavage peptide,P2A)自剪切位点及Gluc编码基因,其余7个质粒分别来源于A/Puerto Rico/8/34(PR8)(H1N1)和A/WSN/1933(WSN)(H1N1),通过流感病毒反向遗传学8质粒系统拯救重组病毒,分别命名为PR8NAGluc/PR8和PR8NAGluc/WSN。检测重组病毒遗传稳定性;对比PR8NAGluc/PR8和PR8NAGluc/WSN的荧光强度;检测重组病毒的生长动力学;同时测定PR8NAGluc/WSN荧光强度与半数组织培养感染剂量(median tissue culture infective dose,TCID_(50))的相关性及对奥司他韦、法匹拉韦和莲花清瘟的体外抗流感药物活性。结果通过反向遗传学成功拯救出以PR8和WSN为骨架表达Gluc的重组病毒。相对于PR8骨架,以WSN为骨架明显提高了Gluc的表达且遗传稳定,复制动力学比野生型稍低。PR8NAGluc/WSN荧光强度与TCID_(50)有较好的相关性,其对奥司他韦、法匹拉韦和莲花清瘟具有良好的敏感性。结论以WSN为骨架的重组病毒荧光表达强度比PR8骨架高,为高通量筛选抗流感病毒药物及研发流感病毒载体疫苗提供参考。
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关键词
流感病毒
反向遗传学
荧光素酶
A/
wsn
/
1933
(
h
1
n
1)
重组病毒
原文传递
题名
表达分泌荧光素酶的重组流感病毒构建及体外生物学特性研究
被引量：
1
1
作者
王东红
邓瑶
叶飞
周剑芳
王文
黄保英
王梦微
孟昕
谭文杰
机构
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期823-828,共6页
基金
国家自然科学基金(82041041)
国家重点研发计划(2022YFC2304100)。
文摘
目的采用不同的流感病毒骨架构建表达分泌荧光素酶(Gaussia luciferase,Gluc)的重组流感病毒,同时研究其生长特性、遗传稳定性、Gluc表达水平、体外抗流感药物活性。方法在PR8NA的C端插入猪捷申病毒2A肽(porcine teschovirus-2A autocleavage peptide,P2A)自剪切位点及Gluc编码基因,其余7个质粒分别来源于A/Puerto Rico/8/34(PR8)(H1N1)和A/WSN/1933(WSN)(H1N1),通过流感病毒反向遗传学8质粒系统拯救重组病毒,分别命名为PR8NAGluc/PR8和PR8NAGluc/WSN。检测重组病毒遗传稳定性;对比PR8NAGluc/PR8和PR8NAGluc/WSN的荧光强度;检测重组病毒的生长动力学;同时测定PR8NAGluc/WSN荧光强度与半数组织培养感染剂量(median tissue culture infective dose,TCID_(50))的相关性及对奥司他韦、法匹拉韦和莲花清瘟的体外抗流感药物活性。结果通过反向遗传学成功拯救出以PR8和WSN为骨架表达Gluc的重组病毒。相对于PR8骨架,以WSN为骨架明显提高了Gluc的表达且遗传稳定,复制动力学比野生型稍低。PR8NAGluc/WSN荧光强度与TCID_(50)有较好的相关性,其对奥司他韦、法匹拉韦和莲花清瘟具有良好的敏感性。结论以WSN为骨架的重组病毒荧光表达强度比PR8骨架高,为高通量筛选抗流感病毒药物及研发流感病毒载体疫苗提供参考。
关键词
流感病毒
反向遗传学
荧光素酶
A/
wsn
/
1933
(
h
1
n
1)
重组病毒
Keywords
I
n
flue
n
za virus
Reverse ge
n
etics
Gaussia luciferase
A/
wsn
/
1933
(
h
1
n
1)
Recombi
n
a
n
t virus
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达分泌荧光素酶的重组流感病毒构建及体外生物学特性研究
王东红
邓瑶
叶飞
周剑芳
王文
黄保英
王梦微
孟昕
谭文杰
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
原文传递
已选择
0
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参考文献
引证文献
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