快速cDNA文库筛选和淀粉合成酶基因的分离与鉴定 被引量：9

1

作者 徐军望 朱祯 李旭刚 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第8期1-6,共6页

建立了一种以PCR为基础的快速筛选cDNA文库的方法。该方法利用 96孔板和一对特异的引物 ,逐级从cDNA文库筛选目标克隆 ,最终获得目标DNA片段。与同位素杂交筛选方法相比 ,该方法具有快速、简单、省时等优点 ,数日内即可完成目标片段的克... 建立了一种以PCR为基础的快速筛选cDNA文库的方法。该方法利用 96孔板和一对特异的引物 ,逐级从cDNA文库筛选目标克隆 ,最终获得目标DNA片段。与同位素杂交筛选方法相比 ,该方法具有快速、简单、省时等优点 ,数日内即可完成目标片段的克隆 ;同时 ,还可极大地降低实验费用 ,且无需使用同位素。本文利用这一方法从水稻南粳37未成熟种子的cDNA文库筛选出了完整的水稻可溶性淀粉合酶基因cDNA序列。 展开更多

关键词 基因克隆 PCR CDNA文库 水稻可溶性淀粉俣酶基因 基因分离 分子生物学

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一种快速测定发酵液中ε-聚赖氨酸的方法 被引量：10

2

作者 程传荣 田丰伟 +1 位作者 张灏 陈卫 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期133-136,共4页

为了建立一种快速方便的ε-聚赖氨酸检测方法,该研究基于ε-聚赖氨酸与Dragendorff’s试剂的沉淀复合物可与硫脲产生显色反应,提出了一种利用分光光度计快速检测ε-聚赖氨酸的新方法。ε-聚赖氨酸含量与反应复合物吸光度在pH2.0-5.0,反... 为了建立一种快速方便的ε-聚赖氨酸检测方法,该研究基于ε-聚赖氨酸与Dragendorff’s试剂的沉淀复合物可与硫脲产生显色反应,提出了一种利用分光光度计快速检测ε-聚赖氨酸的新方法。ε-聚赖氨酸含量与反应复合物吸光度在pH2.0-5.0,反应时间在45 min以内,具有较高的线性相关性。分光光度计测定波长为435nm。浓度在0-1.50 g/L,ε-聚赖氨酸工作曲线线性相关系数为R2=0.9999,RSD=3.63%,检出限为0.01 g/L。回收率为96.50%-100.53%。该方法相比于Itzhaki法具有较高的准确性。最后以该方法为依据建立了一种利用96孔板高通量快速检测ε-聚赖氨酸的方法。 展开更多

关键词 Ε-聚赖氨酸 Dragendorff’s沉淀 分光光度法 96孔板

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超高速流式细胞仪MoFlo Astrios^(EQ) 96孔板单细胞分选方案的优化 被引量：1

3

作者 程玲慧 《中国医疗器械信息》 2023年第9期67-70,共4页

主要建立了超高速流式细胞仪MoFlo Astrios^(EQ)96孔板单细胞分选的优化方案,实现高活性高效率分选,并着重分析了对仪器设置和管理人员操作细节上七大优化要点,供广大技术人员参考借鉴。

关键词 单细胞分选 流式细胞仪 垂直分选 96孔板 单克隆形成率

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2种圆形微孔板内部流场的CFD数值模拟

4

作者 朱建勇 刘秀敏 +1 位作者 陈吴西 李德茂 《化学工程》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期84-89,共6页

为改善96孔板传质率和剪切力低的情况,提出一种带挡板的96孔板模型。基于VOF模型和RNG k-ε模型结合建立了孔板内部的流体动力学模型,利用仿真软件FLUENT对其数值进行模拟。在不同转速下,对其气液交界面面积、气液比表面积、平均液膜传... 为改善96孔板传质率和剪切力低的情况,提出一种带挡板的96孔板模型。基于VOF模型和RNG k-ε模型结合建立了孔板内部的流体动力学模型,利用仿真软件FLUENT对其数值进行模拟。在不同转速下,对其气液交界面面积、气液比表面积、平均液膜传质系数和体积平均气液传质系数等传质相关系数和平均剪切应变率进行对比。模拟结果表明:在不同转速下,带挡板96孔板的体积平均传质系数和剪切应变率都要高于普通96孔板;并且考察了带挡板96孔板在特定转速下不同装液量对其传质性能的影响。模拟结果表明:随着装液量的增加带挡板96孔板的气液传质系数逐渐降低,得出66.56μL为最佳装液量。综上所述,带挡板96孔板有效提高了普通96孔板的传质性能,并为其提供了更好的剪切环境,为孔板的设计和优化提供了参考。 展开更多

关键词 96孔板 计算流体力学 气液传质 剪切

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溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基促生长能力的评价分析 被引量：2

5

作者 杨美琴 马仕洪 +1 位作者 刘鹏 胡昌勤 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2071-2075,共5页

目的:通过对铜绿假单胞菌在溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基中生长性能差异的分析,建立培养基的评价分析方法。方法:利用96孔板设置不同培养基处方(3种胨源×2种培养基配方)、溴化十六烷基三甲铵浓度(6水平)和铜绿假单胞菌浓度(4水平... 目的:通过对铜绿假单胞菌在溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基中生长性能差异的分析,建立培养基的评价分析方法。方法:利用96孔板设置不同培养基处方(3种胨源×2种培养基配方)、溴化十六烷基三甲铵浓度(6水平)和铜绿假单胞菌浓度(4水平)的组合,分析在各种不同的组合条件下铜绿假单胞菌的生长情况。结果:不同溴化十六烷基三甲铵琼脂促生长能力的差异主要由胨源和配方所决定;USP/EP收载的溴化十六烷基三甲铵琼脂配方优于目前中国药典收载的配方。结论:多因素多水平的微量分析方法可较好地揭示影响培养基促生长能力的诸因素,为培养基配方的筛选开拓新思路。 展开更多

关键词 溴化十六烷基三甲铵琼脂 培养基配方 铜绿假单胞菌 促生长能力 胨 96孔板 2个总体率的假设检验 相关分析

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96孔板-PCR排除法筛选猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因 被引量：1

6

作者 魏冬霞 邓艳 +3 位作者 吴绍强 林瑞庆 宋慧群 朱兴全 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期731-733,共3页

为了从猪蛔虫雌虫cDNA文库中筛选出猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因,本研究根据猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因的EST序列为模板设计引物,采用96孔板-PCR排除法对猪蛔虫雌虫cDNA文库进行筛选,并筛选出阳性克隆F993-G10-A10。测序结果表明,该基因序列... 为了从猪蛔虫雌虫cDNA文库中筛选出猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因,本研究根据猪蛔虫雌虫卵黄蛋白原基因的EST序列为模板设计引物,采用96孔板-PCR排除法对猪蛔虫雌虫cDNA文库进行筛选,并筛选出阳性克隆F993-G10-A10。测序结果表明,该基因序列长621bp,有完整的3'端。经BLAST分析,其推导的氨基酸序列与秀丽隐杆线虫(C.elegans)的卵黄蛋白原基因(Vit1、Vit2、Vit3、Vit4和Vit5)的氨基酸序列的一致性分别为35%、35%、34%、34%和35%,核苷酸序列相似性分别为55%、57%、54%、54%和53%。该阳性克隆的获得为该基因的深入研究奠定了基础。同时也证明了96孔-PCR排除法是一种高效、简便、低成本的筛选文库方法。 展开更多

关键词 旋猪蛔虫 卵黄蛋白原基因 96孔板-PCR排除法 文库筛选

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香蕉果实SMART cDNA文库的构建及利用PCR方法筛选香蕉Actin2基因 被引量：16

7

作者 徐碧玉 苏伟 +2 位作者 张建斌 刘菊华 金志强 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期375-380,共6页

利用SMART(switching mechanismat5’end of RNA transcript)技术,提取果实少量总RNA,经15-25轮LD-PCR扩增获得全长ds-cDNA,构建了海南主栽的食用香蕉巴西蕉(Musa AAA Group Cavendish)果实的cDNA文库。所构建的文库容量为5×106Pfu... 利用SMART(switching mechanismat5’end of RNA transcript)技术,提取果实少量总RNA,经15-25轮LD-PCR扩增获得全长ds-cDNA,构建了海南主栽的食用香蕉巴西蕉(Musa AAA Group Cavendish)果实的cDNA文库。所构建的文库容量为5×106Pfuml-1,重组率93%。利用此cDNA文库,采用96孔板PCR法筛选香蕉Actin2基因,测序结果显示,序列全长1723bp,编码区长1134bp,编码378个氨基酸,与蝴蝶兰Actin2基因序列同源率达83%,已递交GenBank,接受号692696。 展开更多

关键词 香蕉 果实 SMART CDNA文库 96孔板PCR Actin2基因

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96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的研究 被引量：16

8

作者 罗莉斯 李能威 +3 位作者 李丽 郭伟群 郁建平 张晓琳 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第2期133-137,共5页

考察了刺糖多孢菌在96孔板固体培养基和液体培养基中的生长情况,建立了96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的方法。结果表明:96孔板三明治盖能同时满足过滤杂菌和刺糖多孢菌生长耗氧所需,刺糖多孢菌在96孔板固体培养基中的生长情况与传... 考察了刺糖多孢菌在96孔板固体培养基和液体培养基中的生长情况,建立了96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的方法。结果表明:96孔板三明治盖能同时满足过滤杂菌和刺糖多孢菌生长耗氧所需,刺糖多孢菌在96孔板固体培养基中的生长情况与传统斜面培养相当,种子培养最适种龄为60h,每孔发酵培养基装液量为0.4mL。与传统摇瓶发酵筛选平台相比,该方法能显著提高多杀菌素高产菌株的筛选效率。 展开更多

关键词 刺糖多孢菌 多杀菌素 96孔板 高通量筛选

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高通量固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定人尿中8种环境酚类内分泌干扰物 被引量：13

9

作者 林潇 邱天 +3 位作者 张续 胡小键 杨艳伟 朱英 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1456-1464,共9页

建立了人尿中8种环境酚类化合物的96孔板固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(96-well SPE LC-MS/MS)检测方法,其中包括7种双酚类化合物和三氯生。尿样解冻到室温,经β-葡萄糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶37℃过夜酶解。实验比较了3种96孔板... 建立了人尿中8种环境酚类化合物的96孔板固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(96-well SPE LC-MS/MS)检测方法,其中包括7种双酚类化合物和三氯生。尿样解冻到室温,经β-葡萄糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶37℃过夜酶解。实验比较了3种96孔板固相萃取柱和不同淋洗条件对人尿样的净化效果和目标化合物的回收率。结果显示,采用Oasis HLB 96孔板(60 mg)对样品进行萃取和用30%(v/v)乙腈水溶液进行淋洗净化的纯化效果最好。纯化后目标物用甲醇溶液洗脱,经氮气吹干,用0.5 mL甲醇-水(1∶1,v/v)溶液定容,目标化合物用UPLC-MS/MS进行检测。比较了2种分析柱(C18和T3分析柱)以及不同的有机流动相对分离样品中目标物的影响。结果显示,以BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)作为分析柱,乙腈/水作为流动相,以流速0.3 mL/min梯度洗脱时,目标物的分离效果最好。质谱条件选择串联质谱负离子电喷雾(ESI-)多反应监测模式(MRM)进行检测。对样品的基质效应进行评估发现,双酚A、双酚F、双酚S、双酚B和双酚AF的绝对基质效应为3.47%~15.32%,不需要补偿措施;四氯双酚A、四溴双酚A和三氯生的绝对基质效应分别是49.58%(中等基质效应)、71.99%和86.93%(强基质效应),均需要补偿效应。因此,该方法采用了一一对应的同位素内标法抵消基质效应。用6份实际尿样基质评估相对基质效应,8种内标的峰面积的相对标准偏差为3.63%~9.06%,说明相对基质效应稳定。在优化条件下,双酚A和双酚AF在0.50~50μg/L内、四氯双酚A和双酚S在0.05~50μg/L内、双酚F和四溴双酚A在0.01~50μg/L内、双酚B在1.00~50μg/L内、三氯生在5.00~200μg/L内线性关系良好,相关系数大于0.9995。方法检出限为0.002~1.09μg/L,定量限为0.007~3.63μg/L。3个加标水平的加标回收率为81.0%~101.9%,日内精密度为0.4%~19.4%,日间精密度为2.5%~17.8%。应用该方法对2019-2020年采集的北京地区64份尿� 展开更多

关键词 固相萃取 超高效液相色谱-串联质谱 环境酚类化合物 内分泌干扰物 尿样 96孔板

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氧化苦参碱体外抑菌活性的研究 被引量：13

10

作者 李媛媛 阎旭 +5 位作者 李墨林 甄宇红 邓卅 杨阳 王雪 舒晓宏 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期244-245,250,共3页

目的评估氧化苦参碱对条件性致病菌——大肠埃希菌的抑菌活性。方法采用滤纸片法和96孔板法对氧化苦参碱的抑菌活性进行检测,根据不同浓度氧化苦参碱对大肠埃希菌的抑菌率,利用origin 75拟合标准曲线计算氧化苦参碱对大肠埃希菌IC50。... 目的评估氧化苦参碱对条件性致病菌——大肠埃希菌的抑菌活性。方法采用滤纸片法和96孔板法对氧化苦参碱的抑菌活性进行检测,根据不同浓度氧化苦参碱对大肠埃希菌的抑菌率,利用origin 75拟合标准曲线计算氧化苦参碱对大肠埃希菌IC50。结果滤纸片法检测结果发现,256、128、64、32 mg/mL的氧化苦参碱对大肠埃希菌的抑菌圈大小分别为7.75、7.25、6.50和6.00 mm,而阳性对照5 000 IU/mL庆大霉素的抑菌圈大小为27.00 mm。96孔板法检测结果发现,氧化苦参碱对大肠埃希菌的抑制率均随用药剂量的增加抑制率增大,呈"S"型曲线。用药后6、12、24、48和72 h时氧化苦参碱的IC50值分别为27.27、26.81、24.75、20.29和17.01 mg/mL。结论氧化苦参碱对大肠埃希菌生长有抑制作用,其抑菌作用随氧化苦参碱用药作用时间的延长而增强,但抑菌活性较低。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 大肠埃希菌 抑菌活性 滤纸片法 96孔板法

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几种检测乳酸菌抑制真菌性能的方法比较 被引量：10

11

作者 郝湘妹 王宇航 +5 位作者 王媛 杨逢源 赵珊珊 张华 宋育超 王雁萍 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2020年第9期45-49,共5页

为建立抑制真菌乳酸菌的高效筛选方法,该文比较96孔板法、牛津杯琼脂扩散法、打孔法以及双层平板划线法检测乳酸菌抑菌性能的简便性、灵敏性和可行性。结果表明,在测定乳酸菌发酵上清液抑制黑曲霉孢子生长的方法中,与通过测定透明圈的... 为建立抑制真菌乳酸菌的高效筛选方法,该文比较96孔板法、牛津杯琼脂扩散法、打孔法以及双层平板划线法检测乳酸菌抑菌性能的简便性、灵敏性和可行性。结果表明,在测定乳酸菌发酵上清液抑制黑曲霉孢子生长的方法中,与通过测定透明圈的牛津杯琼脂扩散法与打孔法相比,96孔板法通过测定黑曲霉孢子经过乳酸菌发酵上清液培养后的吸光度值,在检测乳酸菌抑菌性能时较为灵敏且简便快捷;双层平板划线法通过测定在乳酸菌菌落周围形成的透明圈,在测定乳酸菌菌株及其发酵产物抑制黑曲霉孢子生长的抑菌性能方面效果明显,且与96孔板法相比更能显示出测试乳酸菌菌株间抑菌性能的细微差异。 展开更多

关键词 乳酸菌 抑制真菌 黑曲霉 96孔板法 牛津杯琼脂扩散法 打孔法 双层平板划线法

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流式细胞仪MoFlo Astrios^(EQ)96孔板单细胞分选方法的条件优化 被引量：8

12

作者 张小翠 符蓉 赵犇鹏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期845-850,共6页

目的·优化流式细胞仪MoFlo Astrios EQ 96孔板单细胞分选方法,为单细胞技术的应用奠定基础。方法·通过对仪器精确调节及各项参数优化,采用不同孔径喷嘴、不同分选方式对32D、U937、iBMDM和293T共4种细胞进行单细胞分选,观察... 目的·优化流式细胞仪MoFlo Astrios EQ 96孔板单细胞分选方法,为单细胞技术的应用奠定基础。方法·通过对仪器精确调节及各项参数优化,采用不同孔径喷嘴、不同分选方式对32D、U937、iBMDM和293T共4种细胞进行单细胞分选,观察分选后单细胞孔数以及单细胞所形成克隆孔数。结果·在单细胞分选模式下,70、100μm喷嘴分选获得单细胞的孔数分别为83~91、87~93孔。分选后的单细胞经7~10 d培养后,70μm喷嘴分选获得的单细胞所形成克隆的孔数为36~58孔;100μm喷嘴条件下电荷式分选、"无电"直接分选获得的单细胞所形成克隆的孔数分别为53~78、69~81孔。结论·进行单细胞分选时,选择100μm喷嘴和"无电"直接分选方式可得到较好的细胞活性与较高的细胞克隆率。 展开更多

关键词 流式细胞仪 96孔板 单细胞分选 喷嘴 “无电”直接分选 单细胞培养

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96孔板药敏试验自动判读系统设计

13

作者 陈晓丹 《现代仪器与医疗》 CAS 2023年第6期39-43,59,共6页

目的探讨96孔板药敏试验自动判读系统的设计与开发。方法选用数字相机对96孔板进行图像采集,运用机器视觉技术进行图像识别,从而得到药敏试验判读结果。采用图像拼接技术,将96孔板分为8个区域,运用二维运动平台进行多次采集,既提高了图... 目的探讨96孔板药敏试验自动判读系统的设计与开发。方法选用数字相机对96孔板进行图像采集,运用机器视觉技术进行图像识别,从而得到药敏试验判读结果。采用图像拼接技术,将96孔板分为8个区域,运用二维运动平台进行多次采集,既提高了图像的分辨率,也克服了图像畸变带来的判读误差。结果制作了96孔板药敏试验自动判读系统,判读准确率达到100%,判读用时为人工的1/4~1/3h,且实现判读结果自动统计存储。结论自动判读系统能提高96孔板药敏试验的精度和效率。 展开更多

关键词 96孔板 药敏试验 机器视觉 图像畸变 图像拼接

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鱼鳞胶原蛋白基抗菌凝胶的抑菌效果 被引量：4

14

作者 叶忱 王喆 钟青萍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期106-111,共6页

采用96孔板法探究了牛至精油、溶菌酶和茶多酚3种天然抑菌剂对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concent... 采用96孔板法探究了牛至精油、溶菌酶和茶多酚3种天然抑菌剂对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),同时采用吸光度法测定了抑菌率。结果发现,添加牛至精油、溶菌酶和茶多酚的鱼鳞胶原蛋白凝胶对E.coli的MIC分别为2.5μL/m L、6.25 mg/m L和0.156 mg/m L,MBC分别为2.5μL/m L、25 mg/m L和0.156 mg/m L,抑菌率分别为87.53%、49.26%和79.81%;对S.aureus的MIC分别为1.25μL/m L、12.5 mg/m L和0.156 mg/m L,MBC分别为2.5μL/m L、25 mg/m L和0.156 mg/m L,抑菌率分别为83.22%、51.16%和75.22%。可见添加3种天然抑菌剂的鱼鳞胶原蛋白凝胶对E.coli和S.aureus均有明显的抑制作用,且MIC均是:茶多酚<牛至精油<溶菌酶,抑菌率均是:牛至精油>茶多酚>溶菌酶,抑菌效果均是:茶多酚>牛至精油>溶菌酶。因此,添加牛至精油、溶菌酶和茶多酚的鱼鳞胶原蛋白凝胶具有较好的抑菌效果和应用前景。 展开更多

关键词 天然抑菌剂 最小抑菌浓度(MIC) 最小杀菌浓度(MBC) 鱼鳞胶原蛋白凝胶 96孔板

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产谷氨酰胺转胺酶菌株的高通量筛选 被引量：4

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作者 刘颖 田沛霖 +5 位作者 陈佳 高红亮 鲁伟 鲁心安 常忠义 金明飞 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第6期167-172,共6页

【目的】用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量筛选高产谷氨酰胺转胺酶(MTG)的茂原轮枝链霉菌菌株。【方法】利用紫外诱变获得茂原轮枝链霉菌突变体库后,分别利用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量初筛产MTG菌株,然后依次用试管和摇瓶... 【目的】用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量筛选高产谷氨酰胺转胺酶(MTG)的茂原轮枝链霉菌菌株。【方法】利用紫外诱变获得茂原轮枝链霉菌突变体库后,分别利用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量初筛产MTG菌株,然后依次用试管和摇瓶发酵法复筛,并对96孔板高通量筛选方法的条件进行了优化。【结果】利用醋酸纤维素膜显色法从3 000株紫外诱变的菌株中筛选出1株高产MTG茂原轮枝链霉菌,其MTG活性为4.9U/mL,较出发株(MTG活性2.7U/mL)提高了80%。优化的96孔板高通量筛选方法为:直径为3mm左右的单菌落接种至150μL发酵培养基中,30℃200r/min培养72h;利用该法从3 415株紫外诱变的菌株中筛选获得了2株MTG高产株,其MTG活性为5.4U/mL,较出发株(MTG活性为3.0U/mL)提高了80%。【结论】利用基于醋酸纤维素膜和96孔板的2种高通量筛选方法分别筛选到1株和2株高产MTG的茂原轮枝链霉菌;相较传统的选育方法,这2种高通量筛选方法都大大降低了经济成本,提高了筛选效率,缩短了选育周期。 展开更多

关键词 茂原轮枝链霉菌 微生物谷氨酰胺转胺酶 高通量筛选 醋酸纤维素膜 96孔板

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氨氯地平对映体在健康男性人体的立体选择性药代动力学研究 被引量：3

16

作者 房晶 信长颖 +2 位作者 李金银 白政忠 范国荣 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期810-812,830,共4页

目的用HPLC-MS/MS法手性拆分氨氯地平,高通量分析氨氯地平对映体在健康人体内的立体选择性药代动力学。方法 12例健康男性受试者单次口服氨氯地平5 mg,用Oasis HLB 96孔固相萃取板提取氨氯地平,以氯氮为内标,用CHIRAL-AGP柱(4.0 mm... 目的用HPLC-MS/MS法手性拆分氨氯地平,高通量分析氨氯地平对映体在健康人体内的立体选择性药代动力学。方法 12例健康男性受试者单次口服氨氯地平5 mg,用Oasis HLB 96孔固相萃取板提取氨氯地平,以氯氮为内标,用CHIRAL-AGP柱(4.0 mm×150 mm,5μm)进行手性对映体分离,流动相10mmol·L^(-1)乙酸铵缓冲液(pH4.38)-异丙醇(98∶2)。结果 S-(-)-氨氯地平和R-(+)-氨氯地平主要药代动力学参数:C_(max)分别为(3.19±0.50),(1.99±0.27)ng·mL^(-1);t_(max)分别为(6.17±0.57),(6.80±1.60)h;t_(1/2)分别为(38.10±4.75),(32.54±6.58)h;AUC_(0-∞)分别为(195.48±39.20),(140.45±18.00)ng·mL^(-1)·h。结论本方法操作简便快速,灵敏度高,精密度好,可实现受试药人体手性药代动力学的高通量分析;S-(-)-氨氯地平对映体和R-(+)-氨氯地平对映体在健康男性人体内存在立体选择性差异。 展开更多

关键词 氨氯地平 串联质谱法 固相萃取 96孔板 药代动力学

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96孔板高通量选育嗜线虫致病杆菌高产帕克素菌株 被引量：3

17

作者 张易 李佳 +2 位作者 钟娟 邱德文 杨秀芬 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期437-442,共6页

帕克素(pekingmycin)是嗜线虫致病杆菌北京变种Xenorhabdus nematophilus var.pekinense CB6菌株代谢产生的广谱抗生素。研究证明帕克素对马铃薯晚疫病和辣椒疫病均具有较好的田间控制效果。为了进一步提高帕克素产量,为实现产业化奠定... 帕克素(pekingmycin)是嗜线虫致病杆菌北京变种Xenorhabdus nematophilus var.pekinense CB6菌株代谢产生的广谱抗生素。研究证明帕克素对马铃薯晚疫病和辣椒疫病均具有较好的田间控制效果。为了进一步提高帕克素产量,为实现产业化奠定基础,本文首次用96孔板高通量筛选技术进行了帕克素高产菌株的筛选。将原始菌株CB6用紫外、微波和亚硝基胍诱变后在96孔板固体培养基上培养72 h,35%甲醇浸提24 h,根据浸提液OD312紫外吸收值和抑菌圈直径筛选出10株活性较高的正突变株。但由于存在遗传不稳定现象,故对其中一株优良突变株90#(菌株编号为90)进行了二次累加诱变,经初筛和复筛,得到4株比出发菌株抑菌圈显著增加的突变株,较出发菌株抑菌圈直径提高了6.39%～11.94%。对其中的2株突变株进行了遗传稳定性测定,结果表明,连续培养6代后,突变株抑菌圈直径无显著变化,菌株特性能稳定遗传。 展开更多

关键词 帕克素 菌株选育 96孔板 紫外吸收 生物测定

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壳聚糖盐酸盐对几种水产致病菌的抑菌性研究 被引量：3

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作者 孙玉英 张继泉 《中国酿造》 CAS 北大核心 2015年第1期47-49,共3页

目前,对虾疾病仍然是困扰对虾养殖业的一大难题,由弧菌属(Vibrio)细菌引起的弧菌病(Vibriosis)是其中危害最大的细菌性疾病,给水产养殖业造成了严重的经济损失。本实验以副溶血弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌为供试菌种,采用滤纸片扩散法对... 目前,对虾疾病仍然是困扰对虾养殖业的一大难题,由弧菌属(Vibrio)细菌引起的弧菌病(Vibriosis)是其中危害最大的细菌性疾病,给水产养殖业造成了严重的经济损失。本实验以副溶血弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌为供试菌种,采用滤纸片扩散法对壳聚糖盐酸盐进行抑菌实验研究。在此基础上进一步采用96孔板法测定了壳聚糖盐酸盐对副溶血弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌的最小抑菌浓度(MIC),结果表明:壳聚糖盐酸盐对3种供试菌株均具有抑菌作用,最小抑菌质量浓度因供试菌的不同而不同,副溶血弧菌为2.5 mg/m L,哈维氏弧菌和鳗弧菌为3.25 mg/m L。 展开更多

关键词 壳聚糖盐酸盐 滤纸片扩散法 96孔板法 抑菌作用

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核黄素工业菌株高通量筛选方法的建立和应用 被引量：2

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作者 付首颖 夏苗苗 +3 位作者 张祎凝 刘川 涂然 张大伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期47-53,共7页

枯草芽孢杆菌是主要的核黄素工业生产菌之一,高通量筛选技术是选育获得高产核黄素菌株的关键环节。为实现工业菌种选育与高通量筛选技术相结合,对流式细胞分选、液滴微流控分选和96孔板筛选在核黄素工业菌株筛选中的应用进行了研究,并... 枯草芽孢杆菌是主要的核黄素工业生产菌之一,高通量筛选技术是选育获得高产核黄素菌株的关键环节。为实现工业菌种选育与高通量筛选技术相结合,对流式细胞分选、液滴微流控分选和96孔板筛选在核黄素工业菌株筛选中的应用进行了研究,并对96孔板筛选方法进行了优化。在流式细胞分析中,来源于同一株工业菌的低产菌株P1与高产菌株R1的细胞荧光与核黄素产量不成正相关。在液滴微流控分析中,P1和R1的发酵液上清荧光与核黄素产量成正相关,然而液滴分选后活细胞的数量很少。在96孔板筛选实验中,振荡培养后P1和R1的发酵液荧光分别为22 264 a.u.、28 647 a.u.;静置培养后荧光分别为7 095 a.u.、10 189 a.u.,核黄素产量与荧光成正相关,且二者荧光差异显著。利用96孔板静置培养的方法对工业菌株S1的突变体库进行筛选,得到的优选菌株核黄素产量为2.53 g/L,相比S1提高了15%。这些结果表明96孔板静置培养-荧光检测筛选可以应用于核黄素工业生产菌产量的提高。 展开更多

关键词 核黄素 枯草芽孢杆菌 96孔板筛选 静置培养 荧光检测

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基于细菌微量培养技术的氯霉素定量检测法 被引量：1

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作者 张德勇 陈蔚青 +1 位作者 俞燕 朱守记 《浙江树人大学学报（自然科学版）》 2009年第4期9-12,共4页

为了建立一种高通量低成本的抗生素残留量检测法,在96孔板上建立了藤黄微球菌的微量培养技术.通过加入倍比稀释的氯霉素并继续培养,2h后分析菌体的OD450值,并与对照孔进行比较.结果显示,氯霉素的剂量与菌体生长过程中OD450值的抑制程度... 为了建立一种高通量低成本的抗生素残留量检测法,在96孔板上建立了藤黄微球菌的微量培养技术.通过加入倍比稀释的氯霉素并继续培养,2h后分析菌体的OD450值,并与对照孔进行比较.结果显示,氯霉素的剂量与菌体生长过程中OD450值的抑制程度呈现良好的线性关系,并可建立回归方程.利用建立的公式对待检抗生素样品进行检测,表明可对氯霉素的含量进行测定. 展开更多

关键词 氯霉素 藤黄微球菌 微孔板

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