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急性冷应激对阿勒泰羊HSP60、HSP70和HSP90基因mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 魏殿华 高静雯 +2 位作者 汪骁轩 张莉 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3680-3689,共10页
为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组(15℃±2℃)与冷应激组(-25℃±2℃),每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组(冷应激24 h后)和常温组的心脏、... 为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组(15℃±2℃)与冷应激组(-25℃±2℃),每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组(冷应激24 h后)和常温组的心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织。采用实时荧光定量PCR技术对HSP60、HSP70和HSP90 mRNA含量变化进行检测,并对HSP 60、HSP 70和HSP 90基因进行同源性分析。结果显示,HSP 70和HSP 90基因与已有绵羊序列同源性高于99%,而HSP 60基因与已有波斯金牛序列同源性高于99%;冷刺激后HSP 60基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肾脏中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 70基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 90基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏组织中表达量差异显著(P<0.05),而在脾脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01)。表明急性冷应激极大程度地刺激了机体的产热机能,通过通路中的产热相关基因的相互调节使其能量代谢发生改变,从而提高细胞生存率,增强机体对环境胁迫的耐受力,能更好地适应环境温度的变化。试验结果为进一步深入研究急性冷应激对阿勒泰羊机体的影响提供一定理论依据。 展开更多
关键词 急性冷应激 HSP 60基因 HSP 70基因 HSP 90基因
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pH、氨氮胁迫对中国对虾HSP90基因表达的影响 被引量:17
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作者 王芸 李健 +5 位作者 张喆 何玉英 常志强 陈萍 李吉涛 刘德月 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2013年第5期43-50,共8页
研究了pH、氨氮胁迫对中国对虾Fenneropenaeus chinensis血细胞、肝胰腺、鳃和肌肉组织HSP90基因时空表达的影响.分别将中国对虾暴露于pH7.0、9.0的水体中148h和不同氨氮浓度的水体中96h,结果表明,pH(7.0,9.0)胁迫条件下中国对虾鳃、... 研究了pH、氨氮胁迫对中国对虾Fenneropenaeus chinensis血细胞、肝胰腺、鳃和肌肉组织HSP90基因时空表达的影响.分别将中国对虾暴露于pH7.0、9.0的水体中148h和不同氨氮浓度的水体中96h,结果表明,pH(7.0,9.0)胁迫条件下中国对虾鳃、肌肉和血细胞HSP90基因表达均上调,肝胰腺HSP90基因表达对两种pH胁迫差异明显:pH7.0胁迫条件下,HSP90基因表达3h达峰值后明显降低;pH 9.0胁迫时,HSP90基因表达水平逐渐升高,整个胁迫过程中均显著高于对照组(P<0.05),说明中国对虾肝胰腺组织是高pH胁迫的响应器官.6mg/L氨氮浓度组鳃和肌肉组织HSP90基因表达水平24h达最高值,分别为对照组的5.46和1.55倍;各胁迫组肝胰腺和血细胞HSP90基因表达水平分别于6h和48h达到最高值,为对照组的1.33~2.08倍和2.20~5.45倍.肝胰腺组织对氨氮胁迫表现敏感,短时间内(6h)通过上调HSP90基因表达水平保护细胞;鳃组织HSP90基因表达波动范围最大,说明鳃组织需要更高表达量的HSP90保护细胞.当氨氮浓度持续48~96h维持在2~6mg/L,各组织HSP90基因表达水平显著降低. 展开更多
关键词 中国对虾 HSP90基因 PH胁迫 氨氮胁迫
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人类染色体17p13.3位点新克隆基因HC56、HC71和HC90对Jurkat细胞活力的作用 被引量:6
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作者 吴向华 王嵘 +4 位作者 万大方 杜均样 张海伟 郑佩娥 顾建人 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2002年第4期278-279,282,共3页
目的 探讨人类染色体 17p13.3位点新克隆基因HC5 6、HC71和HC90对T淋巴瘤细胞株Ju rkat细胞活力的作用。方法 应用脂质体介导的基因转染方法 ,将外源基因HC5 6、HC71和HC90分别导入Jurkat细胞 ,用苔盼兰拒染试验 ,观察基因的瞬时表达... 目的 探讨人类染色体 17p13.3位点新克隆基因HC5 6、HC71和HC90对T淋巴瘤细胞株Ju rkat细胞活力的作用。方法 应用脂质体介导的基因转染方法 ,将外源基因HC5 6、HC71和HC90分别导入Jurkat细胞 ,用苔盼兰拒染试验 ,观察基因的瞬时表达对细胞活力的作用。结果 Jurkat细胞瞬时转染HC5 6和HC71基因后 ,与转染PBK/CMV空载体的实验对照组比较 ,第 2 4、4 8、72和 96h ,细胞的活力明显受抑制 (P <0 .0 1) ;Jurkat细胞瞬时转染HC90基因后 ,仅在第 96h细胞的活力受抑制 (P <0 .0 5 ) ,而第 2 4、4 8和 72h ,未发现细胞的活力受抑制 (P >0 .0 5 )。结论 外源HC5 展开更多
关键词 染色体17p13.3 HC56基因 JURKAT细胞 基因转染 HC71基因 HC90基因 T淋巴瘤细胞株
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果蔗Hsp90基因的电子克隆及序列分析 被引量:4
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作者 林生 潘大仁 +3 位作者 周以飞 陈观水 张绪璋 张燕云 《热带作物学报》 CSCD 2009年第12期1824-1830,共7页
以克隆到的果蔗HSP90基因片段作为探针,利用电子克隆和序列拼接方法获得一个全长为2097bp的cDNA序列。通过ORF软件分析,预测得到的蛋白质具有698个氨基酸。应用生物信息学对果蔗HSP90蛋白的理化性质、二级结构、疏水性/亲水性、信号肽... 以克隆到的果蔗HSP90基因片段作为探针,利用电子克隆和序列拼接方法获得一个全长为2097bp的cDNA序列。通过ORF软件分析,预测得到的蛋白质具有698个氨基酸。应用生物信息学对果蔗HSP90蛋白的理化性质、二级结构、疏水性/亲水性、信号肽、功能结构域分析及其蛋白功能、高级结构和同源性进行了预测分析。结果表明,该蛋白的相对分子量为80.2ku,在N端有一个ATP结合位点,具有内源ATPase活性。序列分析表明,该蛋白可能具有信号转导、转录调控、胁迫应答、生长因子等功能。利用梢腐病病原Gibberella fujikuroi接种果蔗福安叶片,检测到HSP90基因的转录水平逐渐提高。 展开更多
关键词 果蔗 HSP90基因 电子克隆 生物信息学
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马传染性贫血弱毒疫苗株致弱过程中表面蛋白gp90的进化分析 被引量:6
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作者 王雪峰 王帅 +6 位作者 韩秀娥 林跃智 姜成刚 吕晓玲 赵利平 王凤龙 周建华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期93-96,共4页
为进一步研究马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗的减毒机制,本实验对EIAV弱毒疫苗的原始种毒EIAVLN40、亲本病毒株EIAVDV、驴白细胞弱毒疫苗EIAVDLV121和EIAVDV减毒过程中的3个中间代次病毒(EIAVDLV32、EIAVDLV62和EIAVDLV92)的gp90基因... 为进一步研究马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗的减毒机制,本实验对EIAV弱毒疫苗的原始种毒EIAVLN40、亲本病毒株EIAVDV、驴白细胞弱毒疫苗EIAVDLV121和EIAVDV减毒过程中的3个中间代次病毒(EIAVDLV32、EIAVDLV62和EIAVDLV92)的gp90基因进行测序分析。结果显示,适应白细胞培养的病毒株的进化距离更接近,与亲本病毒株处于进化树的不同分支。与强毒株相比,适应白细胞培养的病毒株在9个位点发生优势氨基酸的转换和V3区糖基化位点191NSSN194的缺失。此外,伴随EIAV毒力减弱的过程,有8个位点出现优势氨基酸残基的转换,在各代次病毒株中V4区具有糖基化位点237NNTW240和246NETW249的克隆所占的比例逐渐降低,其中EIAVDLV121的糖基化位点237NNTW240完全缺失。 展开更多
关键词 马传染性贫血病毒 GP90基因 进化分析
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陆川猪热休克蛋白90基因的克隆与序列分析 被引量:5
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作者 黄建芳 鄢胜飞 +5 位作者 吴敏 陈秋明 周亭亭 蒋钦杨 郭亚芬 兰干球 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1505-1510,共6页
【目的】对陆川猪热休克蛋白90(HSP90)基因进行克隆与序列分析,为研究HSP90与陆川猪抗热应激的相关性及寻找猪耐热性分子标记奠定基础。【方法】根据Gen Bank已发表的猪HSP90基因序列(登录号NM_213973.1)设计引物,RT-PCR扩增HSP90基因... 【目的】对陆川猪热休克蛋白90(HSP90)基因进行克隆与序列分析,为研究HSP90与陆川猪抗热应激的相关性及寻找猪耐热性分子标记奠定基础。【方法】根据Gen Bank已发表的猪HSP90基因序列(登录号NM_213973.1)设计引物,RT-PCR扩增HSP90基因编码区序列,并应用Laser Gene、Meg Align等生物软件进行序列分析及蛋白质结构预测。【结果】克隆获得陆川猪HSP90基因编码区序列长2202 bp,编码733个氨基酸,分子质量84774.8 U,理论等电点4.93;与野猪的亲缘关系最近,其氨基酸同源性为100.0%,与牛、绵羊、人类、大猩猩的氨基酸同源性也在96.2%以上。陆川猪HSP90蛋白N端有1个HATPase_c superfamily保守结构域,C端最末端有一个MEEVD保守序列,氨基酸序列中存在5个HSP90家族特有保守信号区,其成熟肽包含有α螺旋、β转角、延长线和无规卷曲4种二级结构元件。【结论】猪HSP90基因高度保守,可作为研究陆川猪抗热应激的候选基因之一。 展开更多
关键词 陆川猪 HSP90基因 克隆 序列分析
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中国南瓜CmHSP90基因的克隆及其在逆境胁迫下的表达分析 被引量:5
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作者 王彬 陈敏氡 +2 位作者 林珲 朱海生 温庆放 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第12期2332-2341,共10页
热激蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)广泛介导胁迫信号的传递,在植物逆境应答反应中起重要作用。为探究HSP90基因的功能,该研究采用RT-PCR方法从中国南瓜(Cucurbitamoschata)幼苗中分离到2个HSP90基因的开放阅读框(ORF)全长,分别... 热激蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)广泛介导胁迫信号的传递,在植物逆境应答反应中起重要作用。为探究HSP90基因的功能,该研究采用RT-PCR方法从中国南瓜(Cucurbitamoschata)幼苗中分离到2个HSP90基因的开放阅读框(ORF)全长,分别命名为CmHSP90-5和CmHSP90-6。二者的序列长度分别为2357和2472 bp,编码793和824个氨基酸。蛋白序列分析显示,2个CmHSP90蛋白均属于亲水性蛋白,含信号肽,无跨膜区,结构上都含有典型的ATPase保守结构域,亚细胞分别定位于叶绿体和线粒体。同源比对和进化分析发现,2个CmHSP90蛋白与苦瓜(Momordica charantia)、甜瓜(Cucumis melo)和黄瓜(Cucumis sativus)HSP90蛋白的相似性最高且遗传距离最近。qRT-PCR分析显示,2个CmHSP90基因对高温、低温、ABA、高盐、H2O2、干旱和水杨酸(SA)等多种胁迫均具有明显的应答反应,但响应的速度和强度并不相同,其中对高温和水杨酸处理均表现出短时间强烈响应,推测CmHSP90基因可能在中国南瓜热胁迫和水杨酸信号途径中发挥调节作用。该研究结果为深入了解HSP90基因功能以及阐明中国南瓜的抗逆机制提供理论依据。 展开更多
关键词 中国南瓜 CmHSP90基因 逆境胁迫 表达分析
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水芹HSP90基因的原核表达及条件优化 被引量:4
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作者 胡艳平 蔡兴来 +5 位作者 周曼 王敏 朱白婢 黄文枫 廖道龙 陈贻诵 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2886-2891,共6页
植物热激蛋白90 (HSP90)在响应高温胁迫中起到重要作用。本研究从水芹中克隆到HSP90基因(基因登录号:MF961800),将其连接到原核表达载体pET30a上,构建重组质粒pET30a-OjHSP90。对大肠杆菌菌株BL21表达重组蛋白的起始菌液浓度、IPTG浓度... 植物热激蛋白90 (HSP90)在响应高温胁迫中起到重要作用。本研究从水芹中克隆到HSP90基因(基因登录号:MF961800),将其连接到原核表达载体pET30a上,构建重组质粒pET30a-OjHSP90。对大肠杆菌菌株BL21表达重组蛋白的起始菌液浓度、IPTG浓度、诱导温度和诱导时间进行了优化。结果显示,OjHSP90基因在大肠杆菌中可实现诱导表达,目的蛋白分子质量约为80 kD,与预期结果相符。当重组菌的起始OD600值达到0.8时表达量最高,pET30a-OjHSP90的最佳IPTG诱导浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导温度为37℃,最适诱导时间为4 h。本研究通过诱导条件的优化可以使目的蛋白的表达量显著增加,以期为研究OjHSP90的耐热功能提供理论依据。 展开更多
关键词 HSP90基因 原核表达 条件优化 水芹
原文传递
禽网状内皮增生症病毒gp90蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:4
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作者 石星明 张晶 +7 位作者 赵妍 王玫 魏秀英 胡顺磊 全炎铭 闫帅 崔红玉 王云峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1289-1294,共6页
为获得分泌抗禽网状内皮增生症病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,通过表达pET32a-gp90重组蛋白,以纯化的gp90蛋白为抗原,免疫BALB/c鼠,筛选分泌抗REV McAb的杂交瘤细胞株。经过细胞的融合及筛选,共获得能稳定分泌抗REV gp90的McAb细胞系2株,... 为获得分泌抗禽网状内皮增生症病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,通过表达pET32a-gp90重组蛋白,以纯化的gp90蛋白为抗原,免疫BALB/c鼠,筛选分泌抗REV McAb的杂交瘤细胞株。经过细胞的融合及筛选,共获得能稳定分泌抗REV gp90的McAb细胞系2株,分别命名为A9E8和B3F8。2株细胞培养上清的效价均在1∶4×102以上,腹水效价均在1∶8×103以上。亚型鉴定结果表明,2株皆为IgG型,轻链均为κ链;Western blot及间接免疫荧光结果显示,这2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均能识别REV全病毒抗原,与其发生特异性反应,并且不与禽类其他病毒发生反应;病毒中和试验结果表明,获得的单克隆抗体均能REV临床分离株发生中和反应,具有较好的中和活性。利用制备的单克隆抗体建立了REV的间接免疫荧光检测方法,临床病料检测结果表明,该方法与病毒分离及PCR的检测结果基本一致,阴、阳性符合率分别为100%和90%。作者制备了针对REV gp90的McAb,为REV的快速诊断及抗原表位分析与鉴定等奠定了基础。 展开更多
关键词 禽网状内皮增生症病毒 GP90基因 单克隆抗体
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白背飞虱HSP90全长cDNA的克隆与特性分析 被引量:4
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作者 张道伟 陈静 郭玉双 《黑龙江农业科学》 2012年第6期13-18,共6页
利用同源克隆及RACE的方法,从白背飞虱Sogatella furcifera中克隆获得热激蛋白HSP90基因的全长cDNA序列(Genbank登录号:JQ743628),该基因全长为2 707bp,包含421bp的3′非编码区域(UTR)和93bp的5′UTR,开放阅读框(ORF)为2 193bp,编码730... 利用同源克隆及RACE的方法,从白背飞虱Sogatella furcifera中克隆获得热激蛋白HSP90基因的全长cDNA序列(Genbank登录号:JQ743628),该基因全长为2 707bp,包含421bp的3′非编码区域(UTR)和93bp的5′UTR,开放阅读框(ORF)为2 193bp,编码730个氨基酸。该基因预测的蛋白分子量为83.85kD,等电点为4.94,无信号肽、糖基化位点及跨膜结构。在N端具有HSP90基因保守的ATPase结构,含有HSP90家族的C末端的保守序列MEEVD。从进化分析结果看出,白背飞虱的HSP90与其它昆虫的HSP90蛋白的同源性较高,与褐飞虱相比较,同源性高达98%。HSP90基因的克隆和比较分析为进一步深入研究白背飞虱的抗逆机理、耐受性及进化具有重要意义。 展开更多
关键词 白背飞虱 HSP90基因 克隆 特性分析 序列分析
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三叶斑潜蝇热激蛋白Hsp90基因的克隆及其在高温胁迫下的表达分析 被引量:4
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作者 吉青战 王海鸿 +3 位作者 雷仲仁 张靠稳 王娇 张烨 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期110-116,122,共8页
采用RT-PCR及RACE技术克隆了三叶斑潜蝇Hsp90基因全长cDNA序列,并用实时定量RT-PCR的方法检测其在不同发育阶段受到高温胁迫后的表达水平。该基因的cDNA序列全长2 408bp,开放阅读框为2 145bp,编码714个氨基酸;5′非编码区为151bp,3′非... 采用RT-PCR及RACE技术克隆了三叶斑潜蝇Hsp90基因全长cDNA序列,并用实时定量RT-PCR的方法检测其在不同发育阶段受到高温胁迫后的表达水平。该基因的cDNA序列全长2 408bp,开放阅读框为2 145bp,编码714个氨基酸;5′非编码区为151bp,3′非编码区为112bp。该基因推导的氨基酸序列与其他昆虫同源序列比较有很高的相似性(80%~99%)。聚类分析结果显示三叶斑潜蝇与美洲斑潜蝇和南美斑潜蝇的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测结果表明三叶斑潜蝇Hsp90基因的表达受到热胁迫的诱导,诱导3龄幼虫最大表达量的温度比诱导其他发育阶段的温度低,在43℃时预蛹和蛹的表达量在整个生命周期中最高,在检测的高温胁迫条件下,雄虫比雌虫的表达量更高。该结果为阐明三叶斑潜蝇胁迫耐受能力及其对其他潜蝇种群的取代机制奠定了分子基础。 展开更多
关键词 三叶斑潜蝇 HSP90基因 热胁迫 表达
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马氏珠母贝hsp90基因的克隆及芘胁迫对其表达水平的影响 被引量:4
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作者 杜俊俏 廖承红 +4 位作者 周海龙 刁晓平 陈好 李玉虎 王富强 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期503-511,共9页
利用简并引物PCR(polymerase chain reaction,PCR)方法和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得马氏珠母贝Pinctada martensii hsp90基因cDNA序列,全长为2 584 bp。根据所得序列设计定量特异性PCR引物,采用... 利用简并引物PCR(polymerase chain reaction,PCR)方法和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得马氏珠母贝Pinctada martensii hsp90基因cDNA序列,全长为2 584 bp。根据所得序列设计定量特异性PCR引物,采用半定量RT-PCR以及实时荧光定量(real-time PCR)PCR检测了马氏珠母贝外套膜、鳃、肝胰腺、闭壳肌、性腺、腹足等组织中hsp90基因的表达水平。同时,利用荧光定量PCR技术检测了芘暴露处理前后马氏珠母贝肝胰腺组织中hsp90基因的表达水平。研究结果表明:马氏珠母贝hsp90基因在不同组织中的表达水平为性腺>鳃>肝胰腺>外套膜>腹足>闭壳肌,表现出组织差异性。芘胁迫对马氏珠母贝hsp90基因的表达有一定的诱导作用,暴露后第1天和第5天,随染毒浓度的增加,hsp90基因的表达上调,呈现出一定的剂量-效应关系,于染毒后第7天基本恢复。研究结果显示,马氏珠母贝hsp90基因可以作为一种理想的分子生物标记物用于监测海洋环境中芘的污染。 展开更多
关键词 HSP90基因 马氏珠母贝 实时荧光定量PCR 肝胰腺
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分子伴侣Jiv90基因的克隆及其在猪脐静脉血管内皮细胞中的表达 被引量:3
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作者 刘伟 杨幼聪 +1 位作者 李宇立 张彦明 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第6期26-30,共5页
为研究分子伴侣Jiv90对猪瘟病毒复制的影响,克隆了分子伴侣Jiv90基因,构建了真核表达载体并在猪脐静脉血管内皮细胞中表达。根据牛的Jiv90基因序列和真核表达载体pEGFP-C1设计引物,经PCR扩增,成功克隆到猪Jiv90基因,回收后与pEGFP-C1载... 为研究分子伴侣Jiv90对猪瘟病毒复制的影响,克隆了分子伴侣Jiv90基因,构建了真核表达载体并在猪脐静脉血管内皮细胞中表达。根据牛的Jiv90基因序列和真核表达载体pEGFP-C1设计引物,经PCR扩增,成功克隆到猪Jiv90基因,回收后与pEGFP-C1载体连接,构建重组表达载体pEGFP-C1-Jiv90,提取质粒并采用脂质体法转染猪脐静脉血管内皮细胞。转染24 h后,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,经G418抗性筛选得到阳性克隆。本研究成功构建了pEGFP-C1-Jiv90真核表达载体,得到稳定表达Jiv90的细胞株,为今后开展分子伴侣对猪瘟病毒复制影响的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 真核表达 猪脐静脉血管内皮细胞 Jiv90基因
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SLE患者HSP90基因表达及其与IL-6相关性的研究 被引量:2
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作者 朱里 涂亚庭 +2 位作者 冯爱平 黄长征 刘厚君 《中国麻风皮肤病杂志》 2006年第1期5-7,共3页
目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中热休克蛋白90(HSP90)基因mRNA及IL-6的水平,探讨SLE患者HSP90基因的表达及其与IL-6间存在的相关性。方法:分别使用原位杂交法、双抗体夹心ELISA法检测45例SLE患者外周血中HSP90mRNA和IL-6... 目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中热休克蛋白90(HSP90)基因mRNA及IL-6的水平,探讨SLE患者HSP90基因的表达及其与IL-6间存在的相关性。方法:分别使用原位杂交法、双抗体夹心ELISA法检测45例SLE患者外周血中HSP90mRNA和IL-6的表达,并进行直线相关性分析。取15份健康人血样进行正常对照。结果:SLE活动期、非活动期PBMC中HSP90mRNA表达的平均光度值分别为0.350±0.225,0.221±0.040,均显著高于正常对照组0.114±0.009(P<0.01,P<0.05)。SLE活动期HSP90mRNA表达显著高于SLE非活动期(P<0.05)。SLE活动期、非活动期血清IL-6水平分别为(16.82±1.79)pg/mL,(12.58±1.12)pg/mL,均显著高于正常对照组(10.13±2.95)pg/mL(P<0.01,P<0.05)。SLE活动期IL-6水平显著高于SLE非活动期(P<0.01)。IL-6的表达与HSP90mRNA的含量之间呈直线正相关关系(r=0.413,P<0.01)。结论:SLE患者体内存在IL-6的过度表达,可导致HSP90mRNA表达的增多,进而导致HSP90蛋白增高,高表达的HSP90可参与SLE的自身免疫反应,这可能在SLE的发病机制中起着一定的作用。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 热休克蛋白90基因 白细胞介素6
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马传染性贫血驴强毒gp90基因的克隆和序列分析
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作者 刘永刚 张宝山 +3 位作者 孔宪刚 杨威 刘胜旺 贾永清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期244-248,共5页
以EIAV驴强毒株D_AmRNA为模板 ,利用RT_PCR技术 ,扩增了约 1 .4kb的gp90基因。将其克隆后进行了测序 ,测序结果表明所扩增的 1 3 3 8个核苷酸片段含有完整的gp90基因全序列。核苷酸和氨基酸序列比较分析结果表明 :D_AEIAV与国内分离株... 以EIAV驴强毒株D_AmRNA为模板 ,利用RT_PCR技术 ,扩增了约 1 .4kb的gp90基因。将其克隆后进行了测序 ,测序结果表明所扩增的 1 3 3 8个核苷酸片段含有完整的gp90基因全序列。核苷酸和氨基酸序列比较分析结果表明 :D_AEIAV与国内分离株辽系强毒L株差异率仅有 1 .8% ,而与国外毒株 (克隆 1 3 69,WENV1 7、WENV1 6、PSPEIAV1 9)核苷酸差异率在 3 5 .5 %~ 3 7.2 %之间 ;D_A株与国内分离株L株氨基酸水平差异率在 2 .9% ,而与国外毒株氨基酸水平上的差异率在 42 .6%~ 46.0 % ;D_AEIAV有 1 9个N_连接糖基化位点 ,L株、WENV1 7和WENV1 6是 1 8个 ,克隆 1 3 69、WENV1 6和WENV1 7亲本毒株PSPEIAV1 9是 1 2个。 展开更多
关键词 马传染性贫血 GP90基因 克隆 序列分析
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禽网状内皮增生症病毒gp90基因真核表达及ELISA检测方法的建立 被引量:3
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作者 石星明 赵妍 +9 位作者 王玫 张晶 魏秀英 杨桂花 高宏博 全炎铭 黄婷婷 张晓艳 崔红玉 王云峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期862-866,共5页
为建立禽网状内皮增生症病毒(REV)的ELISA检测方法,本研究通过RT-PCR方法扩增gp90基因,构建杆状病毒重组质粒,转化DH10Bac后,通过转座获得重组杆粒,并将其转染Sf9昆虫细胞,SDS-PAGE及western blot分析表明,表达的重组蛋白分子量约为45 ... 为建立禽网状内皮增生症病毒(REV)的ELISA检测方法,本研究通过RT-PCR方法扩增gp90基因,构建杆状病毒重组质粒,转化DH10Bac后,通过转座获得重组杆粒,并将其转染Sf9昆虫细胞,SDS-PAGE及western blot分析表明,表达的重组蛋白分子量约为45 ku,具有良好的反应原性。将表达的重组蛋白纯化后包被ELISA反应板,建立检测REV抗体的rgp90-ELISA方法。特异性试验结果表明该方法具有良好的特异性;将该方法与IDEXX公司生产的试剂盒共同检测包括63份已知背景的血清在内的黑龙江省和广东省的临床血清样品共477份,符合率分别为90.5%和86.4%。该方法的建立为禽群REV抗体的监测提供了方便、快捷、准确的技术手段。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生症病毒 GP90基因 真核表达 ELISA
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热休克蛋白90β基因上游片段的转录调控活性研究 被引量:2
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作者 刘巨洪 吴宁华 沈珝琲 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期241-249,共9页
以人工合成的一对寡聚核苷酸为引物和人外周血淋巴细胞λGEM-11基因文库为模板,通过PCR扩增并克隆了人HSP90β基因上游-1102/+68bp片段。将该片段删切后克隆在报告基因──萤火虫荧光素酶基因5'上游,转染... 以人工合成的一对寡聚核苷酸为引物和人外周血淋巴细胞λGEM-11基因文库为模板,通过PCR扩增并克隆了人HSP90β基因上游-1102/+68bp片段。将该片段删切后克隆在报告基因──萤火虫荧光素酶基因5'上游,转染Jurkat细胞后测定不同刺激条件下细胞裂解液中的荧光酶活性并同时测定荧光酶mRNA水平。结果表明,HSP90β基因上游片段在正常生理状态下通过启动子介导较高水平的基础转录;热休克时该片段起负调控作用,主要的负调控区位于-554/-171bp之间,删除5'远端上游序列后报告基因对丝裂原的反应性降低。 展开更多
关键词 HSP90基因 基因转录调控 荧光酶报告基因
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马铃薯HSP90基因家族的全基因组鉴定及高温干旱胁迫下的表达分析 被引量:3
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作者 杨芳 乔岩 +4 位作者 王永强 李茜 李丹 王亚士 柴薇薇 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期690-702,共13页
热激蛋白HSP90是植物中一类高度保守的分子伴侣,参与细胞内蛋白质稳态调控、底物蛋白的激活和热激因子的调控,在高温干旱等逆境胁迫中发挥重要作用。从12个茄科植物基因组中共鉴定出130个HSP90基因,包含马铃薯的11个HSP90基因,马铃薯HS... 热激蛋白HSP90是植物中一类高度保守的分子伴侣,参与细胞内蛋白质稳态调控、底物蛋白的激活和热激因子的调控,在高温干旱等逆境胁迫中发挥重要作用。从12个茄科植物基因组中共鉴定出130个HSP90基因,包含马铃薯的11个HSP90基因,马铃薯HSP90基因与番茄属植物的亲缘关系最近。马铃薯HSP90蛋白质基序较为保守;马铃薯HSP90基因启动子分析发现其包含植物激素、高温胁迫、干旱胁迫响应等顺式作用元件。通过对高温、干旱胁迫条件下的马铃薯HSP90基因进行qRT-PCR分析,热激后大多数HSP90基因显著上调,4个HSP90基因表达量极高;干旱胁迫下多数HSP90基因也呈上调趋势,其中1个HSP90基因表达量极高。STRING数据库预测出HSP90蛋白的22个伙伴蛋白,其功能涉及逆境胁迫应答、生长发育、信号转导等生物学过程;蛋白质互作网络分析发现5个高表达量HSP90基因参与调控内质网未折叠蛋白反应(UPR,unfolded protein response)、细胞内蛋白质降解与活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成,在抵抗极端逆境胁迫中发挥重要作用。 展开更多
关键词 茄科植物 马铃薯 高温干旱 HSP90基因家族 伙伴蛋白
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条斑紫菜HSP90基因实时荧光定量PCR检测方法的构建 被引量:1
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作者 周向红 阎斌伦 +1 位作者 王萍 易乐飞 《淮海工学院学报(自然科学版)》 CAS 2010年第2期81-84,共4页
以管家基因18S rRNA为内参,采用SYBR GreenI荧光染料法,构建了条斑紫菜HSP90基因实时荧光定量PCR的检测方法,为条斑紫菜HSP90和18S rRNA基因筛选出定量引物各1对,获得的扩增曲线基线平整、指数区明显、斜率大且固定。两基因的熔解曲线... 以管家基因18S rRNA为内参,采用SYBR GreenI荧光染料法,构建了条斑紫菜HSP90基因实时荧光定量PCR的检测方法,为条斑紫菜HSP90和18S rRNA基因筛选出定量引物各1对,获得的扩增曲线基线平整、指数区明显、斜率大且固定。两基因的熔解曲线显示单特异峰,Tm分别为88.5和85℃。两基因标准曲线的斜率分别为-3.307和-3.308,扩增效率都约为100.6%,Ct值在13~32范围内有良好的线性关系。构建的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强,准确可靠、重复性好,检测周期短,为进一步研究HSP90基因在胁迫下的表达差异奠定了基础。 展开更多
关键词 条斑紫菜 HSP90基因 18S RRNA基因 实时荧光定量PCR SYBR GreenI
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沙田柚热激蛋白HSP90基因的鉴定分析 被引量:2
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作者 郭丹妮 刘玉洁 +3 位作者 韩愈 覃信梅 李惠敏 秦新民 《贵州农业科学》 CAS 2016年第8期11-14,共4页
为探明沙田柚自交不亲和分子机理,以沙田柚(Citrus grandis var.Shatianyu Hort)自交和异交花柱为材料,对其进行转录组测序;通过差异分析获得相关基因,并研究其理化性质。结果表明:获得的Hsp90基因全长2 602bp(GenBank登录号:KU517851)... 为探明沙田柚自交不亲和分子机理,以沙田柚(Citrus grandis var.Shatianyu Hort)自交和异交花柱为材料,对其进行转录组测序;通过差异分析获得相关基因,并研究其理化性质。结果表明:获得的Hsp90基因全长2 602bp(GenBank登录号:KU517851),开放阅读框(ORF)全长为2 100bp,编码699个氨基酸,编码的蛋白质分子量为80.55KDa,理论等电点为5.01,含有1个与HSP90超家族(HSP90superfamily)相同的保守结构域。沙田柚Hsp90蛋白氨基酸的同源性与甜橙(XM_006490568)、克莱门柚(XM_006421973)亲缘关系较近,同源性高达99%,属同一进化分支。 展开更多
关键词 沙田柚 HSP90基因 理化性质
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