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人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5ku蛋白基因的克隆与表达
1
作者
董衍明
冯志鸿
+4 位作者
王也
张楠
王媛
徐鹏
李毅
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2010年第7期481-484,共4页
目的通过分子克隆技术,构建人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5kugene的原核表达载体,并诱导重组NS1和7.5ku融合蛋白的表达,为蛋白的纯化奠定基础。方法以含有B19病毒全基因组感染性克隆为模板,用PCR法扩增目的基因ns1和7.5kugene,以pET-...
目的通过分子克隆技术,构建人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5kugene的原核表达载体,并诱导重组NS1和7.5ku融合蛋白的表达,为蛋白的纯化奠定基础。方法以含有B19病毒全基因组感染性克隆为模板,用PCR法扩增目的基因ns1和7.5kugene,以pET-28a为表达载体,构建重组表达质粒pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,转化E.coliBL21(DE3),获得重组工程菌株。经IPTG诱导培养6h后,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物。结果成功构建了pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,IPTG诱导能获得较高的目的蛋白。结论人细小病毒B19的非结构基因能在大肠埃希菌中获得成功的表达,为蛋白的纯化和抗体制备奠定基础。
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关键词
人细小病毒B19
NS1
7.5
ku
基因
克隆与表达
原文传递
题名
人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5ku蛋白基因的克隆与表达
1
作者
董衍明
冯志鸿
王也
张楠
王媛
徐鹏
李毅
机构
华中师范大学生命科学学院
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2010年第7期481-484,共4页
基金
国家自然科学基金项目(No.30670081)
文摘
目的通过分子克隆技术,构建人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5kugene的原核表达载体,并诱导重组NS1和7.5ku融合蛋白的表达,为蛋白的纯化奠定基础。方法以含有B19病毒全基因组感染性克隆为模板,用PCR法扩增目的基因ns1和7.5kugene,以pET-28a为表达载体,构建重组表达质粒pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,转化E.coliBL21(DE3),获得重组工程菌株。经IPTG诱导培养6h后,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物。结果成功构建了pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,IPTG诱导能获得较高的目的蛋白。结论人细小病毒B19的非结构基因能在大肠埃希菌中获得成功的表达,为蛋白的纯化和抗体制备奠定基础。
关键词
人细小病毒B19
NS1
7.5
ku
基因
克隆与表达
Keywords
Human parvovirus B19
ns1
7.5
ku
gene
cloning and expression
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5ku蛋白基因的克隆与表达
董衍明
冯志鸿
王也
张楠
王媛
徐鹏
李毅
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2010
0
原文传递
已选择
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