人乳头瘤病毒6b型病毒样颗粒免疫活性的研究 被引量：7

1

作者 刘跃华 刘晓松 IanH.Frazer 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期587-589,共3页

目的　了解人乳头瘤病毒 (HPV) 6b型病毒样颗粒 (VLP)的免疫活性及其诱导的保护性抗体对HPV11型VLP和牛乳头瘤病毒 1型 (BPV1)VLP的交叉免疫反应。方法　将HPV6b、HPV11和BPV1晚期基因L1的开放读码框架 (ORFs)分别重组到杆状病毒中 ,该... 目的　了解人乳头瘤病毒 (HPV) 6b型病毒样颗粒 (VLP)的免疫活性及其诱导的保护性抗体对HPV11型VLP和牛乳头瘤病毒 1型 (BPV1)VLP的交叉免疫反应。方法　将HPV6b、HPV11和BPV1晚期基因L1的开放读码框架 (ORFs)分别重组到杆状病毒中 ,该重组病毒在感染的昆虫细胞 (Sf 9细胞 )中表达 ,表达的L1蛋白可自行组装成HPV6b、HPV11和BPV1VLP。取 5 0 μg纯化的HPV6bVLP分别在第 0天和第 2 1天经肌肉免疫Balb/c鼠。第二次免疫后 1周及 3个月取血 ,检测血清抗HPV6bVLP、HPV11VLP和BPV1VLPIgG滴度 ;血凝集抑制试验检测HPV6bVLP免疫产生的抗血清是否能阻止HPV11VLP和BPV1VLP与鼠红细胞凝集。结果　免疫后 1周 ,应用ELISA方法检测抗HPV6bVLP、HPV11VLP和BPV 1VLP血清IgG滴度分别为 1∶6 4 0 0、1∶16 0 0和 1∶16 0 0。 3个月后 ,抗HPV6bVLP、HPV11VLP和BPV 1VLP血清IgG滴度分别为 1∶80 0、1∶4 0 0和 1∶10 0。血凝集抑制试验显示HPV6bVLP产生的抗血清能够阻止高度同源性的HPV6bVLP和HPV11VLP与鼠红细胞结合。结论　HPV6bVLP具有很强的免疫原性 ,免疫后产生的抗血清具有阻止HPV6bVLP和HPV11VLP与细胞结合的能力。HPV6b和 11型间确实存在交叉反应的中和表位 。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 6b型病毒样颗粒 免疫活性 血凝集抑制试验 抗体

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乳腺髓样癌、浸润性导管癌、小管癌和腺样囊性癌的超微结构对比分析

2

作者 李维才 李方智 +1 位作者 罗素元 周晓丽 《遵义医学院学报》 1991年第4期21-25,共5页

对临床上较为常见的乳腺髓样癌(medullary carcinoma,MC)、浸润性导管癌(infiltrating ductalcarcinoma,IDC)和较为少见的小管癌(tubular carcinoma,TC)、腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)的超微结构进行对比分析。发现:基板... 对临床上较为常见的乳腺髓样癌(medullary carcinoma,MC)、浸润性导管癌(infiltrating ductalcarcinoma,IDC)和较为少见的小管癌(tubular carcinoma,TC)、腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)的超微结构进行对比分析。发现:基板和肌上皮在浸润性导管癌及腺样囊性癌中明显可见,在另二型中似乎已消失;乳腺癌及其转移灶中均明显存在胞质内微囊(intracytoplasmic cyst,ICC),与良性病变有显著差异(P<0.01),认为它在良、恶性病变鉴别及原发部位不明转移灶的鉴别诊断中有一定价值。对四型乳腺癌的组织发生、基板和肌上皮存在与预后的关系、A型病毒样颗粒及蚓条小体出现的意义进行了讨论。 展开更多

关键词 乳腺癌 鉴別诊断 胞质内微囊 A型病毒样颗粒

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布鲁菌二联BCSP31-L7/L12-IL-2嵌合病毒样颗粒疫苗候选株的构建与鉴定 被引量：1

3

作者 邹映雪 黄天鸿 +6 位作者 冯嘉轩 丁佳欣 陈铭桦 陈凯楠 郭春红 张頔 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期865-871,共7页

布鲁菌病的传统疫苗存在接种后干扰血清学诊断及可能出现毒力返强等缺点,严重干扰疫病监测,影响疫病净化。因此,本研究基于新城疫病毒样颗粒(ND virus like particles,ND VLPs)载体平台,利用昆虫杆状病毒表达系统和GPI锚定策略,以免疫... 布鲁菌病的传统疫苗存在接种后干扰血清学诊断及可能出现毒力返强等缺点,严重干扰疫病监测,影响疫病净化。因此,本研究基于新城疫病毒样颗粒(ND virus like particles,ND VLPs)载体平台,利用昆虫杆状病毒表达系统和GPI锚定策略,以免疫增强因子IL-2、高保守性的保护性抗原蛋白L7/L12(来源猪种S2株)和羊种BCSP31蛋白(来源羊种M5株)为靶点,构建绿色、安全的布鲁菌二联嵌合型病毒样颗粒新型疫苗候选株(BCSP31-L7/L12-IL-2 cVLPs)。PCR及免疫荧光结果表明成功构建了表达IL-2和L7/L12蛋白的重组杆状病毒,Western blot结果显示该cVLPs各组分蛋白正确表达,透射电镜观察可见表面展示纤突结构、大小约为100 nm的粒子,表明布鲁菌二联嵌合型病毒样颗粒BCSP31-L7/L12-IL-2 cVLPs构建成功。 展开更多

关键词 布鲁菌 新城疫病毒样颗粒载体 二联嵌合型病毒样颗粒疫苗 L7/L12蛋白 bCSP31蛋白

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嵌合型病毒样颗粒疫苗的研究进展及药学研发思路 被引量：2

4

作者 凌媛 李敏 《中国药业》 CAS 2021年第6期96-96,I0001-I0006,共7页

目的了解嵌合型病毒样颗粒(c VLP)疫苗在防治疾病等方面的研究进展,并探讨其药学研发思路。方法介绍常用病毒样颗粒(VLP)载体,总结cVLP疫苗在防治肿瘤和慢性疾病方面的应用,并从c VLP疫苗的构建与设计、VLP载体与免疫表位的连接方式、... 目的了解嵌合型病毒样颗粒(c VLP)疫苗在防治疾病等方面的研究进展,并探讨其药学研发思路。方法介绍常用病毒样颗粒(VLP)载体,总结cVLP疫苗在防治肿瘤和慢性疾病方面的应用,并从c VLP疫苗的构建与设计、VLP载体与免疫表位的连接方式、结构确证研究三方面开展c VLP疫苗的药学研究。结果与结论 cVLP作为改良型VLP,除构建自我组装VLP针对同源病毒的疫苗外,将VLP作为递呈载体还可呈现除载体外的其他病毒或肿瘤相关抗原表位,实现对多种病毒或肿瘤抗原的共同免疫。且c VLP作为一种技术平台,还可在预防病毒及治疗肿瘤和过敏性疾病中发挥重要作用。 展开更多

关键词 病毒样颗粒 嵌合型病毒样颗粒 疫苗 进展

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不同浓度重组登革病毒1型病毒样颗粒免疫效果的评价 被引量：3

5

作者 汤云霞 麦瓂莹 +2 位作者 苏丹虹 卓超 袁竹青 《热带医学杂志》 CAS 2014年第7期842-845,863,共5页

目的评价毕赤酵母表达的登革病毒1型(DENV-1)病毒样颗粒(VLPs)不同浓度条件下的免疫效果,为登革多价疫苗的研究奠定基础。方法采用毕赤酵母系统构建两种DENV-1 VLPs(即DENV-1 prME-VLPs和DENV-1CprME-VLPs),鉴定、纯化后比较其表达量,... 目的评价毕赤酵母表达的登革病毒1型(DENV-1)病毒样颗粒(VLPs)不同浓度条件下的免疫效果,为登革多价疫苗的研究奠定基础。方法采用毕赤酵母系统构建两种DENV-1 VLPs(即DENV-1 prME-VLPs和DENV-1CprME-VLPs),鉴定、纯化后比较其表达量,选择表达量高的VLPs以不同剂量免疫BALB/c小鼠(试验组分别注射经弗氏佐剂乳化的VLPs 10、25、50μg;对照组分别注射PBS和弗氏佐剂)。通过间接ELISA及中和试验测定免疫小鼠血清特异性抗体效价和中和抗体效价;用VLPs体外刺激免疫小鼠的脾淋巴细胞,MTT法测定其增殖指数;ELISPOT检测IL-4、IFN-γ及TNF-α的抗原特异性淋巴细胞数量。结果以电镜下观察到成功表达的直径约为30nm、形态无明显差异的两种VLPs。两种表达体系中,以DENV-1 prME-VLPs表达量较高。经较高表达量的VLPs免疫小鼠后发现,初次免疫后1周,即可检测到针对DENV-1的抗体,随着时间延长,抗体效价逐渐上升,5周达峰值;其中,VLPs 25μg剂量组与50μg剂量组特异性抗体效价及中和抗体效价均显著高于PBS组、佐剂对照组及VLPs 10μg剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。VLPs 25μg剂量组与50μg剂量组免疫后的小鼠淋巴细胞增殖指数及其分泌IL-4、IFN-γ及TNF-α抗原特异性淋巴细胞数目,均显著高于对照组及VLPs 10μg剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论毕赤酵母表达的DENV-1 VLPs免疫剂量为25μg时即可诱导高效价的中和抗体和显著的细胞免疫效应。 展开更多

关键词 登革病毒1型病毒样颗粒 中和抗体 抗原特异性淋巴细胞

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新城疫与H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒的构建与鉴定 被引量：2

6

作者 李红丽 闫巍文 +4 位作者 王红宝 郭雪丽 张晋强 王志宇 王毅 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第17期122-125,共4页

为了构建新城疫与H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒（cVLP）,试验以目前流行的基因Ⅶ型新城疫病毒和H9N2亚型禽流感病毒为研究对象,通过昆虫杆状病毒表达系统构建了3种重组杆状病毒,分别为rBV-M、rBV-HN及r BV-FHA,并以适当比例感染悬浮... 为了构建新城疫与H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒（cVLP）,试验以目前流行的基因Ⅶ型新城疫病毒和H9N2亚型禽流感病毒为研究对象,通过昆虫杆状病毒表达系统构建了3种重组杆状病毒,分别为rBV-M、rBV-HN及r BV-FHA,并以适当比例感染悬浮昆虫Sf9细胞,经蔗糖密度梯度纯化后获得嵌合型病毒样颗粒,同时采用新城疫和H9亚型禽流感标准阳性血清对嵌合型病毒样颗粒进行血凝和血凝抑制试验。结果表明：嵌合型病毒样颗粒以新城疫病毒M蛋白作为颗粒骨架,插入了新城疫病毒HN蛋白和经F蛋白胞内域融合的禽流感病毒HA蛋白,在电镜下观察纯化的嵌合型病毒样颗粒具有完整的囊膜结构及纤突,该颗粒具有结合两种阳性血清的能力。说明试验成功构建了包含有新城疫病毒M蛋白、HN蛋白和H9亚型禽流感病毒HA蛋白的嵌合型病毒样颗粒,并且保留了良好的生物学活性。 展开更多

关键词 基因Ⅶ型新城疫病毒 H9N2亚型禽流感 嵌合型病毒样颗粒 构建 鉴定

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人乳头瘤病毒的致癌机理及其疫苗的临床试验研究 被引量：1

7

作者 范江涛 陈心秋 田厚文 《国外医学（病毒学分册）》 2005年第5期133-136,共4页

高危型人乳头瘤病毒(HPV)是引起宫颈癌的重要原因。诸多类型的HPV疫苗已经进入临床试验。在预防性疫苗中,嵌合型病毒样颗粒(cVLP)取得了不错的效果;在治疗性疫苗中,人们尝试了多肽疫苗,蛋白疫苗,DNA疫苗,病毒载体疫苗和联合免疫等方式,... 高危型人乳头瘤病毒(HPV)是引起宫颈癌的重要原因。诸多类型的HPV疫苗已经进入临床试验。在预防性疫苗中,嵌合型病毒样颗粒(cVLP)取得了不错的效果;在治疗性疫苗中,人们尝试了多肽疫苗,蛋白疫苗,DNA疫苗,病毒载体疫苗和联合免疫等方式,可以检测到所诱发的特异性免疫反应,但临床效果并不满意。无论预防性疫苗还是治疗性疫苗都面临着许多挑战。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 疫苗 临床试验 高危型人乳头瘤病毒 临床试验研究 预防性疫苗 致癌机理 嵌合型病毒样颗粒 特异性免疫反应 治疗性疫苗 病毒载体疫苗 HPV疫苗

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新城疫-H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒免疫效果分析 被引量：1

8

作者 李红丽 闫巍文 +4 位作者 王红宝 郭雪丽 张伟业 刘源 王志宇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第12期133-136,共4页

为了测定新城疫-H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒(ND-H9N2 VLPs)作为疫苗候选株的免疫效果,试验将ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂制成ND-H9N2 VLPs疫苗,测定ND-H9N2 VLPs疫苗的最小免疫剂量及一次超剂量接种的安全性。选取7日龄非免疫雏鸡30只... 为了测定新城疫-H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒(ND-H9N2 VLPs)作为疫苗候选株的免疫效果,试验将ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂制成ND-H9N2 VLPs疫苗,测定ND-H9N2 VLPs疫苗的最小免疫剂量及一次超剂量接种的安全性。选取7日龄非免疫雏鸡30只,随机分为3组,每组10只。第1组为ND-H9N2 VLPs联合佐剂免疫组,以350μL/只的剂量进行皮下注射免疫;第2组为商品疫苗组[鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(La Sota株+F株)]依照商品说明书进行免疫;第3组为阴性对照组,以相同方式注射同等剂量的生理盐水;初免两周后,以同等剂量和免疫方式进行加强免疫,加强免疫3周后,所有鸡用新城疫强毒TY-1株和H9N2亚型禽流感病毒SX-1株进行滴鼻、点眼攻毒,每周定时进行鸡翅下静脉采血,分离血清,用血凝抑制试验测定每只鸡的抗体效价,攻毒后连续14 d每天定时观察各组鸡群的临床症状,统计死亡数,计算免疫保护率。结果表明:ND-H9N2 VLPs疫苗的最小免疫剂量为30μg蛋白/只,用此疫苗以5倍剂量进行免疫,免疫鸡未出现新城疫、禽流感临床症状,表明此疫苗安全性良好。ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂免疫组与商品疫苗组比,两组鸡在临床症状和存活率上表现一致,在抵抗当前流行毒株的感染时,都能够提供100%保护作用;两组鸡免疫后新城疫和H9亚型禽流感抗体效价都是在第5周达到峰值,之后缓慢下降,但是ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂疫苗免疫组鸡的血清抗体效价与商品疫苗比要相对高些。说明本试验研制的ND-H9N2 VLPs作为疫苗候选株具有很大的防控优势。 展开更多

关键词 新城疫病毒 H9N2亚型禽流感病毒 嵌合型病毒样颗粒 安全性 免疫效果 血清抗体

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嵌合型口蹄疫病毒样颗粒构建、表达及鉴定 被引量：1

9

作者 刘绒欢 郭慧琛 +3 位作者 杜平 董虎 郭梦楠 孙世琪 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1305-1313,共9页

为提高口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdiseasevirus,FMDV)病毒样颗粒(Virus-likeparticles,VLPs)的特异性识别和递呈,为靶向疫苗研究奠定基础,利用反向PCR技术,将卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)第257–264位氨基酸(Amino acids,aa)的短肽嵌入FMDV... 为提高口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdiseasevirus,FMDV)病毒样颗粒(Virus-likeparticles,VLPs)的特异性识别和递呈,为靶向疫苗研究奠定基础,利用反向PCR技术,将卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)第257–264位氨基酸(Amino acids,aa)的短肽嵌入FMDV结构蛋白VP3第171–172位aa或第173–174位aa,通过大肠杆菌表达FMDV结构蛋白VP0、VP1和嵌合型VP3,体外组装得到嵌合OVA257-264肽的病毒样颗粒(VLPOVA)。用动态光散射、透射电镜检测VLPOVA大小和形态,免疫印迹、酶联免疫吸附试验和激光共聚焦显微镜检测短肽的嵌入情况。结果显示在VP3的第173–174位aa嵌入OVA,不影响蛋白表达和VLPs的组装且OVA位于VLPOVA的表面,VLPOVA粒径比VLPs稍大。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 嵌合型病毒样颗粒 OVA257-264 VP3

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复制型埃博拉病毒样颗粒的表达和鉴定

10

作者 车彬 金聪 +6 位作者 张硕 李川 张全福 梁米芳 李德新 崔宗强 王世文 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期325-330,共6页

为了研究埃博拉病毒的生物学特性及其与宿主的相互作用,构建无致病基因的复制型埃博拉病毒样颗粒(Transcription and replication competent virus-like particles,trVLPs)成为在BSL-2实验室中进行研究的理想途径。本研究目的是表达和... 为了研究埃博拉病毒的生物学特性及其与宿主的相互作用,构建无致病基因的复制型埃博拉病毒样颗粒(Transcription and replication competent virus-like particles,trVLPs)成为在BSL-2实验室中进行研究的理想途径。本研究目的是表达和鉴定复制型埃博拉病毒样颗粒(trVLPs)。本研究利用埃博拉病毒7个蛋白的基因组片段(VP40、VP24、GP、VP35、VP30、L、NP)和一个报告基因片段重组构建了表达质粒,瞬时转染293T细胞,通过荧光素酶检测系统测定报告基因的表达活性确定了复制型埃博拉病毒样颗粒(trVLPs)的成功表达。进一步通过超离转染细胞的上清纯化得到病毒样颗粒(trVLPs),在透射电子显微镜下观察到了典型的丝状结构。对病毒样颗粒进行荧光标记并感染Vero细胞,在荧光显微镜下观察到细胞中出现点状和丝状的荧光信号。复制型埃博拉病毒样颗粒的成功表达为进一步研究埃博拉病毒的生物学特性以及与宿主相互作用机制提供了基础。 展开更多

关键词 埃博拉病毒 复制型病毒样颗粒 透射电子显微镜 荧光标记

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滴鼻接种HPV16 L1-E7 DNA初始引发及HPV16 L1 VLP强化免疫可增强小鼠黏膜和细胞免疫

11

作者 栾怡 于修平 +3 位作者 赵蔚明 于瑾 杨宁 唐伟 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第11期1196-1200,共5页

目的探讨HPV16 L1-E7 DNA疫苗初始引发及HPV16L1病毒样颗粒(VLP)强化接种小鼠诱发免疫反应的效应,为进一步用于HPV16相关恶性肿瘤的防治提供实验依据。方法以HPV16 L1-E7嵌合蛋白、HPV16 L1 VLP以及HPV16 L1-E7 DNA单独或联合滴鼻免疫雌... 目的探讨HPV16 L1-E7 DNA疫苗初始引发及HPV16L1病毒样颗粒(VLP)强化接种小鼠诱发免疫反应的效应,为进一步用于HPV16相关恶性肿瘤的防治提供实验依据。方法以HPV16 L1-E7嵌合蛋白、HPV16 L1 VLP以及HPV16 L1-E7 DNA单独或联合滴鼻免疫雌性BALB/c小鼠,连续使用3周。免疫后采血及收集阴道分泌物,检测特异性抗体。在末次免疫2周后,取小鼠脾细胞,用HPV 16 L1-E7蛋白刺激,检测T细胞增殖反应及IFN-γ水平。结果HPV16 L1-E7嵌合蛋白滴鼻接种可诱导小鼠产生血清HPV16 L1特异性IgG,强化免疫后抗体水平明显增高(P<0.01);阴道局部产生HPV16 L1特异性IgA;在HPV16 L1-E7抗原刺激下,脾细胞上清液中IFN-γ水平升高。HPV16 L1-E7 DNA疫苗初始引发和HPV16 L1蛋白加强免疫可增高阴道分泌液中HPV16 L1特异性IgA水平,增高脾淋巴细胞中特异性T细胞产生IFN-γ的水平。结论嵌合病毒样颗粒HPV16 L1-E7和HPV16 L1-E7 DNA疫苗初始引发及HPV16 L1蛋白强化滴鼻接种适用于预防HPV原发性黏膜感染和治疗HPV16相关肿瘤。 展开更多

关键词 乳头瘤病毒 人 嵌合型病毒样颗粒 动物实验 DNA初始引发

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HPV16 L1-E7c嵌合基因的重组杆状病毒在昆虫细胞中表达及免疫小鼠的效应研究

12

作者 栾怡 于修平 +3 位作者 卞继峰 赵蔚明 周亚滨 于谨 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期390-390,共1页

关键词 昆虫细胞表达 HPV16 重组杆状病毒 效应研究 免疫小鼠 嵌合基因 嵌合型病毒样颗粒 人乳头瘤病毒疫苗 体液免疫应答 疫苗接种

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