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The 6-phosphogluconate Dehydrogenase Genes Are Responsive to Abiotic Stresses in Rice 被引量:8
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作者 Fu-Yun Hou Ji Huang Shan-Lin Yu Hong-Sheng Zhang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2007年第5期655-663,共9页
Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH, E.C. 1.1.1.49) and 6-phosphogluconate dehydrogenase (6PGDH, EC 1.1.1.44) are both key enzymes of the pentose phosphate pathway (PPP). The OsG6PDH1 and Os6PGDH1 genes enc... Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH, E.C. 1.1.1.49) and 6-phosphogluconate dehydrogenase (6PGDH, EC 1.1.1.44) are both key enzymes of the pentose phosphate pathway (PPP). The OsG6PDH1 and Os6PGDH1 genes encoding cytosolic G6PDH and cytosolic 6PGDH were Isolated from rice (Oryza sativa L.). We have shown that Os6PGDH1 gene was up-regulated by salt stress. Here we reported the isolation and characterization of Os6PGDH2 from rice, which encode the plastidic counterpart of 6PGDH. Genomic organization analysis indicated that OsG6PDH1 and OsG6PDH2 genes contain multiple introns, whereas two Os6PGDH1 and Os6PGDH2 genes have no introns in their translated regions. In a step towards understanding the functions of the pentose phosphate pathway in plants in response to various abiotic stresses, the expressions of four genes in the rice seedlings treated by drought, cold, high salinity and abscisic acid (ABA) were investigated. The results show that OsG6PDH1 and OsG6PDH2 are not markedly regulated by the abiotic stresses detected. However, the transcript levels of both Os6PGDH1 and Os6PGDH2 are up-regulated in rice seedlings under drought, cold, high salinity and ABA treatments. Meanwhile, the enzyme activities of G6PDH and 6PGDH in the rice seedlings treated by various abiotic stresses were Investigated. Like the mRNA expression patterns, G6PDH activity remains constant but the 6PGDH Increases steadily during the treatments. Taken together, we suggest that the pentose phosphate pathway may play an important role in rice responses to abiotic stresses and the second key enzyme of PPP, 6PGDH, may function as a regulator controlling the efficiency of the pathway under abiotic stresses. 展开更多
关键词 6-phosphogluconate dehydrogenase abiotic stresses glucose-6-phophate dehydrogenase Oryza sativa pentose phosphate pathway.
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利用EST数据库资源克隆家蚕Bombyx mori6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因 被引量:4
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作者 沈卫锋 牛宝龙 +1 位作者 翁宏飚 孟智启 《蚕桑通报》 2005年第1期14-19,共6页
以果蝇6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconatedehydrogenase,6PGDH)基因cDNA序列为信息探针,对家蚕EST数据进行同源检索筛选,克隆到了家蚕6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的cD鄄NA序列,该基因全长2011bp。经RT-PCR克隆、序列分析验证,结果... 以果蝇6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconatedehydrogenase,6PGDH)基因cDNA序列为信息探针,对家蚕EST数据进行同源检索筛选,克隆到了家蚕6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的cD鄄NA序列,该基因全长2011bp。经RT-PCR克隆、序列分析验证,结果表明与电子克隆序列完全一致;该基因具有完整的开放阅读框(ORF),编码蛋白为483个氨基酸;通过与人、果蝇、家鼠、摇蚊、线虫的6PGDH蛋白序列比较,发现该基因具有高度的保守性。 展开更多
关键词 EST数据库 RT—PCR 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因 家蚕
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枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究 被引量:1
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作者 秦岭 刘克武 +4 位作者 莫宏春 江琰 国锦林 刘祝君 喻东 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期939-944,共6页
采用DEAE Sepharose离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B特异结合层析和SephadexG 200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6 磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化.纯化倍数为112.3倍,比活为1.46U/mg,回收率为8.2%.纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电... 采用DEAE Sepharose离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B特异结合层析和SephadexG 200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6 磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化.纯化倍数为112.3倍,比活为1.46U/mg,回收率为8.2%.纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一带.测得全酶相对分子质量为107kD,具有两个分子量相同的亚基,亚基相对分子质量为51kD.最适pH值为8.0,最适温度为30℃,对热不稳定.以6 磷酸葡萄糖酸和NADP+为底物,其Km值分别为Km1(NADP+)=19.8μmol/L和Km2(6 GPA)=22.6μmol/L.在5mmol/L~50mmol/L浓度范围内,Mg2+,Ca2+和Mn2+对酶有激活作用,Fe3+和Cu2+对酶有抑制作用,K+,Na+,Cl-,NO-3,SO-4对酶几乎没有影响.用PMSF,TNBS,NBS,DTT和BrAc对酶进行修饰,实验结果表明,丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸和组氨酸残基可能是该酶活性中心的功能基团. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 分离纯化 性质
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6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶在产油细菌浑浊红球菌PD630脂质积累中的作用 被引量:2
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作者 张冬冬 赵利娜 +2 位作者 昝新艺 唐鑫 宋元达 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期61-68,共8页
产油微生物脂质合成的过程已基本清晰:乙酰辅酶A和还原力NADPH在脂肪酸合酶(FAS)的作用下合成脂肪酸。产油微生物菌体内主要有苹果酸酶(ME)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)和异柠檬酸脱氢酶(ICDH)为其脂质... 产油微生物脂质合成的过程已基本清晰:乙酰辅酶A和还原力NADPH在脂肪酸合酶(FAS)的作用下合成脂肪酸。产油微生物菌体内主要有苹果酸酶(ME)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)和异柠檬酸脱氢酶(ICDH)为其脂质合成提供所需还原力NADPH。为了研究6PGDH在浑浊红球菌PD630(Rhodococcus opacus PD630)脂质积累中的作用,作者将编码氧化磷酸戊糖路径(oxPPP)中6PGDH的基因gnd在R. opacus PD630中过表达。结果表明,与对照菌株相比较,过表达gnd的重组菌株总脂肪酸含量提高了20%~30%,且6PGDH酶活力和gnd的转录水平也显著提高。由此可见,6PGDH在R. opacus PD630脂质合成中具有重要的作用,能为其提供所需的还原力NADPH,以促进其脂质的积累。 展开更多
关键词 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 脂质生物合成 NADPH 产油微生物 浑浊红球菌PD630
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家蚕微孢子虫6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因Nb6PGDH的克隆及表达特征分析 被引量:2
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作者 彭祥然 齐静茹 +4 位作者 尚瑞沙 张志林 陈红丽 张轶岭 沈中元 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期698-704,共7页
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6PGDH)是戊糖磷酸途径的限速酶,参与生物体内递氢体NADPH的产生。通过检索微孢子虫数据库获得家蚕微孢子虫6PGDH基因序列,以家蚕微孢子虫镇江株基因组为模板,设计特异性引物成... 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6PGDH)是戊糖磷酸途径的限速酶,参与生物体内递氢体NADPH的产生。通过检索微孢子虫数据库获得家蚕微孢子虫6PGDH基因序列,以家蚕微孢子虫镇江株基因组为模板,设计特异性引物成功克隆了该基因,命名为Nb6PGDH,并对该基因进行序列特征和表达特征分析,为了解6PGDH基因在微孢子虫生长发育过程中的功能提供有用信息。克隆得到的序列全长1 374 bp,包含一个完整的ORF,编码457个氨基酸;与Gen Bank数据库中家蚕微孢子虫6PGDH基因长度相同,相似度为99. 42%,其中8个碱基存在差异,编码的3个氨基酸发生改变。生物信息学分析表明Nb6PGDH蛋白没有信号肽,无跨膜结构域,分子质量为51. 8 k D,等电点5. 83,存在38个磷酸化位点和2个N-糖基化位点。实时荧光定量PCR分析结果表明,家蚕微孢子虫感染家蚕后2~168 h,中肠组织中Nb6PGDH基因都有所表达,且表达水平在生长发育过程中发生变化,说明Nb6PGDH基因在家蚕微孢子虫增殖发育过程中具有一定的生理功能。 展开更多
关键词 磷酸戊糖途径 家蚕微孢子虫 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 QRT-PCR
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6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶对肺癌细胞增殖及铁死亡的影响 被引量:1
6
作者 邓婉君 熊慧华 晁腾飞 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期647-653,共7页
目的探讨6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)对肺癌细胞增殖及铁死亡影响,分析6PGD在肺癌中的生物学功能。方法蛋白质印迹法检测6PGD在人肺癌细胞(PC9、H1975、A549、H1299、H460)和人正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中的表达。选取肺癌A549和H... 目的探讨6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)对肺癌细胞增殖及铁死亡影响,分析6PGD在肺癌中的生物学功能。方法蛋白质印迹法检测6PGD在人肺癌细胞(PC9、H1975、A549、H1299、H460)和人正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中的表达。选取肺癌A549和H460细胞进行慢病毒转染以敲低6PGD的表达,分别获得A549 sh-NC、A549 sh-6PGD、H460 sh-NC和H460 sh-6PGD组。采用不同浓度(0、20、40和60μmol/L)6PGD活性抑制剂大黄素甲醚分别处理肺癌细胞。采用铁死亡抑制剂ferrostatin-1处理A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD细胞,分别获得A549 sh-6PGD-ferrostatin-1和H460 sh-6PGD-ferrostatin-1组。CCK8法检测细胞增殖能力。流式细胞术检测细胞内脂质过氧化物及活性氧水平,蛋白质印迹法检测细胞内GPX4及SLC7A11水平,组间比较采用t检验。结果6PGD在肺癌细胞PC9、H1975、A549、H1299和H460的表达量均高于正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B,t值分别为33.2、16.7、33.5、9.2和34.9,均P<0.05。慢病毒转染后,A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和H460 sh-6PGD组(0.46±0.02)的细胞活力较A549 sh-NC(1.00±0.00)和H460 sh-NC组(1.00±0.00)均降低,t值分别为20.5和56.1,均P<0.001。采用不同浓度(0、20、40和60μmol/L)大黄素甲醚抑制6PGD的功能,结果显示,A549和H460的细胞活力均降低。A549 sh-6PGD-ferrostatin-1(0.74±0.05)和H460 sh-6PGD-ferrostatin-1组(0.78±0.03)的细胞活力较A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和H460 sh-6PGD组(0.46±0.02)均增加,t值分别为31.6和14.3,均P<0.05。铁死亡抑制剂可降低大黄素甲醚对A549和H460的细胞毒性。A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的脂质过氧化物水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均增加,t值分别为14.1和63.0,均P<0.001。A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的活性氧水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均增加。蛋白质印迹法结果显示,A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的SLC7A11及GPX4蛋白表达水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均降低。结论6PGD促进肺癌细胞增殖,且通过减少活性氧水� 展开更多
关键词 肺癌 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4 脂质过氧化
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苹果6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶Md6PGDH6基因的功能鉴定 被引量:1
7
作者 朱小平 孙美红 +4 位作者 安建平 路静 齐晨辉 由春香 郝玉金 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1453-1462,共10页
【目的】探究苹果6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶Md6PGDH6基因的性质及其生物学功能。【方法】利用PCR技术得到MDP0000235230(Md6PGDH6)基因的全长,进行相关生物信息学分析,利用qRT-PCR技术研究其时空表达模式,利用农杆菌介导的转化方法获得Md6PG... 【目的】探究苹果6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶Md6PGDH6基因的性质及其生物学功能。【方法】利用PCR技术得到MDP0000235230(Md6PGDH6)基因的全长,进行相关生物信息学分析,利用qRT-PCR技术研究其时空表达模式,利用农杆菌介导的转化方法获得Md6PGDH6转基因‘王林’愈伤组织,以及异源表达Md6PGDH6基因的拟南芥和烟草。【结果】MDP0000235230基因与拟南芥AT4G29120.1(At6PGDH6)归为一类,将MDP0000235230命名为Md6PGDH6基因。Md6PGDH6基因包含一个942 bp开放阅读框。在线网站预测发现,Md6PGDH6蛋白整体表现为亲水性。启动子分析发现,其含有分生组织、激素响应、环境因子和非生物胁迫响应顺式作用元件。Md6PGDH6基因在茎、果皮、果肉和种子中表达量较高,在根、叶和花中表达量较低。Md6PGDH6基因促进‘王林’愈伤组织、拟南芥和烟草的生长。【结论】Md6PGDH6在果肉中表达量较高,Md6PGDH6基因有助于‘王林’愈伤组织的生长。 展开更多
关键词 苹果 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 功能鉴定
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三河马6-磷酸葡萄糖脱氢酶及葡萄糖磷酸异构酶的多态性
8
作者 王振山 郭永新 李建成 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2001年第2期7-9,共3页
采用淀粉凝胶电脉及琼脂覆盖技术对三河马血液红细胞 6 -磷酸葡萄糖脱氢酶和葡萄糖磷酸异构入酶的电泳变异进行了检测。在 6 -磷酸葡萄糖脱氢酶位点发现 3个表现型 ,即FF、FS和SS ,在葡萄糖磷酸异构酶位点共发现 2个表现型 ,即Ⅱ ,FI。... 采用淀粉凝胶电脉及琼脂覆盖技术对三河马血液红细胞 6 -磷酸葡萄糖脱氢酶和葡萄糖磷酸异构入酶的电泳变异进行了检测。在 6 -磷酸葡萄糖脱氢酶位点发现 3个表现型 ,即FF、FS和SS ,在葡萄糖磷酸异构酶位点共发现 2个表现型 ,即Ⅱ ,FI。等位基因频率直接通过表型计算得出 :PGDF 为为 0 840 ,PGDS 为 0 16 0 ,而GPIF 为 0 140 ,GPII 为0 86 0。父权否定概率在 6 -PGD和GPI位点分别为 0 116 3和 0 10 5 9。 展开更多
关键词 三河马 琼脂覆盖技术 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 葡萄糖磷酸异构酶 多态性 生化遗传标记
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曼氏裂头蚴6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的基因克隆、蛋白表达及转录水平分析
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作者 郝润莲 刘锦腾 +5 位作者 王大勇 林于今 王妹妹 左世亮 王亚妹 梁培 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期963-969,共7页
目的分析曼氏迭宫绦虫中6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(Sm 6PGDH)的潜在的生物学特征和获得纯化蛋白。方法通过NCBI和ExPASy网站中在线软件,预测Sm 6PGDH基因序列的生物信息学特征。通过PCR技术扩增得到Sm 6PGDH的全长序列和构建pET-28a(+)-Sm 6... 目的分析曼氏迭宫绦虫中6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(Sm 6PGDH)的潜在的生物学特征和获得纯化蛋白。方法通过NCBI和ExPASy网站中在线软件,预测Sm 6PGDH基因序列的生物信息学特征。通过PCR技术扩增得到Sm 6PGDH的全长序列和构建pET-28a(+)-Sm 6PGDH重组质粒,利用双酶切和测序手段鉴定重组质粒。利用western blot鉴定重组蛋白和定量PCR分析在不同浓度葡萄糖培养的裂头蚴体内的转录水平。结果Sm 6PGDH蛋白由491个氨基酸组成,理论相对分子质量约为53.84 kDa。该蛋白分子中无信号肽。Sm 6PGDH序列与绦虫、人的同源基因一致性分别为75%和65%以上。Sm 6PGDH氨基酸序列中具有39个磷酸化位点、1个O-糖基化位点和9个B细胞线性表位。通过原核蛋白表达,成功得到可溶性的融合蛋白,并且在不同浓度葡萄糖培养的裂头蚴体内Sm 6PGDH的转录水平升高。结论构建了Sm 6PGDH重组质粒并获得纯化蛋白,为在裂头蚴的糖代谢的规律研究中提供了物质保障。 展开更多
关键词 曼氏裂头蚴 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 生物信息学分析 药物靶标
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G6PD缺乏症基因型检测诊断与酶学诊断在应用中的比较分析 被引量:15
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作者 侯家兴 黄志浩 谢意文 《临床和实验医学杂志》 2017年第14期1410-1413,共4页
目的比较分析葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症利用基因型检测诊断与酶学诊断在临床中的应用效果。方法通过G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)比值法和多重SNa Pshot基因诊断技术对2014年6月至2015年9月进行常规检查的200例患者的静脉血... 目的比较分析葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症利用基因型检测诊断与酶学诊断在临床中的应用效果。方法通过G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)比值法和多重SNa Pshot基因诊断技术对2014年6月至2015年9月进行常规检查的200例患者的静脉血标本进行G6PD缺乏症酶学诊断和基因型诊断,分析各自的检出情况。结果酶学诊断阳性率为4.5%。基因诊断突变率为22.0%,以c.[1311C>T(;)1365-13T>C]同义突变最常见(72.72%),错义突变率为5.35%。女性基因发生错义突变的比率明显低于男性,差异具有统计学意义(P<0.05)。另外,同性别的比较中,基因发生错义突变的几率明显低于另外两种突变类型,差异统计学意义(P<0.05)。多重SNa Pshot法基因分型结果均与DNA直接测序分析的结果完全一致。比值法无法检出同义突变,且漏检一例错义突变杂合子,其筛查错义突变的灵敏度和特异度分别是88.89%和100.00%。结论在G6PD缺乏症基因型检测中,G6PD/6PGD比值法虽可较有效地筛查错义突变但不能检出同义突变和全部的女性杂合子,而多重SNaPshot基因分型方法可有效检出多种G6PD基因突变类型。 展开更多
关键词 G6PD缺乏症 基因检测 酶学诊断 应用分析
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G6PD缺乏症酶学诊断与多重SNaPshot基因诊断的比较 被引量:5
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作者 范玉君 尹彪 +3 位作者 朱元昌 曾勇 马珍珍 吴彤华 《中国热带医学》 CAS 2015年第1期4-7,共4页
目的了解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症酶学诊断与基因诊断检出情况,并对这两种方法学进行分析比较。方法通过G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydro-genase,6PGD)比值法和多重SN... 目的了解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症酶学诊断与基因诊断检出情况,并对这两种方法学进行分析比较。方法通过G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydro-genase,6PGD)比值法和多重SNa Pshot基因诊断技术对168例血样进行G6PD缺乏症酶学诊断和基因型诊断,分析各自的检出情况,比较比值法和多重SNa Pshot法的结果,并以测序结果为金标准对两种方法进行方法学评价。结果酶学诊断阳性率为4.76%。基因诊断突变率为22.02%,以c.[1311C>T(;)1365-13T>C]同义突变最常见(72.97%),错义突变率为5.35%。错义突变标本的G6PD/6PGD比值较同义突变及未检出突变低,差异有统计学意义(P<0.05);而同义突变与未检出突变间G6PD/6PGD比值无统计学差异(P>0.05)。多重SNa Pshot法基因分型结果均与DNA直接测序分析的结果完全一致。比值法无法检出同义突变,且漏检一例错义突变杂合子,其筛查错义突变的灵敏度和特异度分别是88.89%和100.00%。结论 G6PD/6PGD比值法虽可较有效地筛查错义突变但不能检出同义突变和全部的女性杂合子,而多重SNaPshot基因分型方法可有效检出多种G6PD基因突变类型。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 多重SNaPshot技术 基因诊断
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正响应盐胁迫的甘蔗6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因的克隆 被引量:3
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作者 杨玉婷 李国印 +2 位作者 苏亚春 郭晋隆 许莉萍 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第2期156-164,共9页
从甘蔗中克隆获得1个6PGDH基因的cDNA序列,记为Sc6PGDH(登录号:KF921299).该基因序列含有1个1467 bp的完整开放阅读框,推导编码488个氨基酸残基.生物信息学分析可知,Sc6PGDH基因编码的蛋白分子质量为53.6561 ku,为酸性稳定的亲水蛋白,... 从甘蔗中克隆获得1个6PGDH基因的cDNA序列,记为Sc6PGDH(登录号:KF921299).该基因序列含有1个1467 bp的完整开放阅读框,推导编码488个氨基酸残基.生物信息学分析可知,Sc6PGDH基因编码的蛋白分子质量为53.6561 ku,为酸性稳定的亲水蛋白,含有信号肽,可能定位于内质网膜上,具有该类蛋白典型的保守结构域6PGD,且与分离自谷子、玉米和水稻的6-磷酸葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列同源性分别高达96.11%、95.70%和93.24%,表明该基因在进化过程中比较保守.原核生物生长试验结果显示,甘蔗Sc6PGDH基因的表达蛋白可以显著增强大肠杆菌Rosetta菌株的耐盐性,推测该基因可能参与了生物体对盐胁迫的应答过程. 展开更多
关键词 甘蔗 6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因 生物信息学分析 原核生物生长试验 盐胁迫
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二氢硫辛酰转乙酰基酶通过乙酰化磷酸葡糖酸脱氢酶促进核酸合成 被引量:3
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作者 孙明明 乔亚亚 +2 位作者 李垒垒 山长亮 张帅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期339-346,共8页
丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDC)是位于线粒体内的多酶复合物,催化丙酮酸不可逆地氧化脱羧转为乙酰辅酶A,二氢硫辛酰转乙酰基酶(dihydrolipoyl acetyltransferase,DLAT)是PDC的1个亚基。PDC在细胞线粒体呼吸中... 丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDC)是位于线粒体内的多酶复合物,催化丙酮酸不可逆地氧化脱羧转为乙酰辅酶A,二氢硫辛酰转乙酰基酶(dihydrolipoyl acetyltransferase,DLAT)是PDC的1个亚基。PDC在细胞线粒体呼吸中发挥关键作用。但是DLAT在核酸合成中的作用仍不清楚。在本研究中,首先利用GEO数据库、Oncomine数据库和人类蛋白质图谱数据库分析发现,DLAT在肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P=0.0002),并且高表达DLAT的病人有较短的生存期(HR=1.47,logrank P=4e-09)。因此推测,DLAT在肿瘤生长中发挥关键作用。进而本文构建了敲低DLAT的肺癌细胞系,并用免疫印迹结果验证了DLAT敲低效果。进一步的研究发现,敲低DLAT将降低戊糖磷酸途径第3个酶磷酸葡糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6PGD)的乙酰化水平,进而降低6PGD酶活性,从而导致核酸合成受阻(P<0.01),最终抑制肺癌细胞增殖(P<0.01)。机制研究发现,DLAT通过乙酰化6PGD而使其酶活性增强,进而提高核酸合成,从而达到促进肺癌细胞增殖的作用。综上所述,本研究为DLAT作为潜在的靶点,为药物开发和临床肺癌的治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 线粒体 二氢硫辛酰转乙酰基酶 磷酸葡糖酸脱氢酶 戊糖磷酸途径
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应用改良TAIL-PCR克隆黄瓜6PGDH基因上游序列 被引量:2
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作者 魏跃 陈啸寅 +1 位作者 王全智 陈劲枫 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期900-904,共5页
运用改良的热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)对黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(6-phosphogluconate dehydrogenasegene,6PGDH)的上游序列进行了克隆。与最初的TAIL-PCR相比较,主要改进之处有:(1)根据Primer ... 运用改良的热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)对黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(6-phosphogluconate dehydrogenasegene,6PGDH)的上游序列进行了克隆。与最初的TAIL-PCR相比较,主要改进之处有:(1)根据Primer 5.0软件计算结果从随机RAPD引物库中筛选出合适的上游引物,低严谨和高严谨反应中的退火温度也分别进行了调整;(2)将热不对称交替反应继续应用到第3轮PCR扩增反应中以提高特异目的条带和减少非目的条带。经过3轮PCR扩增反应最终获得位于黄瓜6PGDH起始密码子ATG上游长度为517 bp新序列。试验结果表明,应用改良TAIL-PCR能快速、有效地克隆与已知区域相邻的序列。 展开更多
关键词 热不对称交错PCR 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 黄瓜 上游序列
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四氯化碳致大鼠肝损伤时脱氢酶活性的变化
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作者 姚晓丹 顾淑珍 +4 位作者 金成河 杜国忠 赵宝昌 欧阳启楣 林钧材 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 1990年第5期282-283,共2页
本文从脂质过氧化角度,探讨CCl_4致大鼠肝损伤时葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGAD)的活性变化。实验结果表明:G-6-PD 活性染毒后12小时降低,24小时回升,48小时继续升高;而6-PGAD 活性染毒后12小时上升,24小时... 本文从脂质过氧化角度,探讨CCl_4致大鼠肝损伤时葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGAD)的活性变化。实验结果表明:G-6-PD 活性染毒后12小时降低,24小时回升,48小时继续升高;而6-PGAD 活性染毒后12小时上升,24小时继续升高,48小时恢复正常。经分析认为:肝中毒肘这二种酶活性的变化与CCl_4引起脂质过氧化的损伤机理是吻合的,这两种酶活性与氧化还原循环的受阻和调节密切相关。 展开更多
关键词 四氯化碳 肝损伤 脱氢酶活性
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畲族Gc、PGM1、AcP_1、6-ΡGD、ADA和AK1的遗传多态性 被引量:2
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作者 卓孝福 郭永建 +3 位作者 戴庚孙 尹学念 徐玖瑾 杜若甫 《人类学学报》 CSCD 北大核心 1997年第4期262-270,共9页
对畲族血浆组特异性成分(Gc)、红细胞磷酸葡萄糖变位酶1(PGM1)、酸性磷酸酶(AcP1)、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGD)、腺苷脱氨酶(ADA)、腺苷酸激酶(AK1)的遗传多态性进行了研究。Gc与PGM1是用... 对畲族血浆组特异性成分(Gc)、红细胞磷酸葡萄糖变位酶1(PGM1)、酸性磷酸酶(AcP1)、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGD)、腺苷脱氨酶(ADA)、腺苷酸激酶(AK1)的遗传多态性进行了研究。Gc与PGM1是用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦分析的,AcP1、6-PGD、ADA及AK1是用淀粉凝胶电泳分析的。各基因座的基因频率分别为Gc*1F0.4722、Gc*1S0.2421、Gc*20.2738;PGM1*1A0.5357、PGM1*1B0.1627、PGM1*2A0.1587、PGM1*2B0.1429;AcP*1A0.1825、AcP1*B0.8175;6-PGD*A0.9683、6-PGD*B0.0278;ADA*10.9881、ADA*20.0119;AK1*11.0000。畲族Gc、PGM1、AcP1、6-PGD和ADA基因为多态,而AK1基因为单态。发现1例带有6-PGD*R和3例带有Gc*1A2变异等位基因的个体,其中Gc*1A2基因频率为0.0119,达到多态水平。 展开更多
关键词 人类遗传学 遗传多态性 畲族 组特异性成分 酶类
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山丹马6-磷酸葡萄糖脱氢酶及葡萄糖磷酸异构酶的多态性研究 被引量:1
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作者 郭永新 张劳 高曙光 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期12-14,共3页
用淀粉凝胶电泳及琼脂覆盖技术对山丹马的血液红细胞6磷酸葡萄糖脱氢酶和葡萄糖磷酸异构酶的电泳变异进行了测定。在6磷酸葡萄糖脱氢酶座位发现了3种表现型,即FF,FD和FS,其频率分别为0.958,0.021和0.021。在葡萄糖磷酸异构酶座位发现了... 用淀粉凝胶电泳及琼脂覆盖技术对山丹马的血液红细胞6磷酸葡萄糖脱氢酶和葡萄糖磷酸异构酶的电泳变异进行了测定。在6磷酸葡萄糖脱氢酶座位发现了3种表现型,即FF,FD和FS,其频率分别为0.958,0.021和0.021。在葡萄糖磷酸异构酶座位发现了两种表现型,即II和FI,其频率分别为0.771和0.229。等位基因频率直接通过表型计算出:PGDF为0.979,PGDD为0.0104,PGDS为0.0104;GPIF为0.1146,GPII为0.8854。亲子关系排除概率在6PGD和GPI座位点分别为0.1009和0.0912。两座位的个体识别概率分别为0.081和0.353。 展开更多
关键词 畜牧、兽医科学基础学科 琼脂覆盖技术 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 葡萄糖磷酸异构酶 多态性 山丹马
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