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巢式PCR早期检测实验大鼠卡氏肺孢子虫 被引量：2
1
作者 张小娟 杨芳芳 +3 位作者 欧阳颐 王鸽 黎学铭 林睿 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2011年第1期10-13,共4页
目的探讨ITS1-5．8S rRNA—ITS2巢式PCR法检测大鼠卡氏肺孢子虫的敏感性及早期检测的评估。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫，大鼠分为7组，6组实验组和1组对照组，每组10只，实验组采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感... 目的探讨ITS1-5．8S rRNA—ITS2巢式PCR法检测大鼠卡氏肺孢子虫的敏感性及早期检测的评估。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫，大鼠分为7组，6组实验组和1组对照组，每组10只，实验组采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫，对照组则不予激素处理。自诱导开始第3周至第8周每周收集1组实验组大鼠肺组织（1ungtissue，LT）和支气管肺泡灌洗液（bronchoal veolar lavage fluid，BALF）标本，采用ITSl-5．8SrRNA—ITS2巢式PCR法扩增卡氏肺孢子虫ITSI-5．8SrRNA—ITS2，同时采用六亚甲基四胺银（GMS）染色镜检法对第3周到第8周的大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测，并将两种方法进行比较以评估巢式PCR技术的敏感性。结果采用ITSI-5，8SrRNA—ITS2巢式PCR法对实验感染卡氏肺孢子虫的大鼠¨和BALF进行检测，卡氏肺孢子虫DNA阳性率依次为第3周20％（2／10）、0（0／10），第4周70％（7／10）、10％（1／10），第5周90％（9／10）、30％（3／10），第6周90％（9／10）、80％（8／10），第7周100％（10／10）、80％（8／10），第8周63％（5／8）、63％（5／8）。而GMS染色镜检法仅于第5周开始检出卡氏肺孢子虫包囊，第6、7周包囊数最多。实验组大鼠诱导后的前4周无明显卡氏肺孢子虫肺炎体征，第5周后症状趋于明显。结论ITSI-5．8SrRNA-ITS2巢式PCR法敏感性高，可在第3周后和无症状阶段实验大鼠中检出卡氏肺孢子虫，并且比镜检法早两周。 展开更多
关键词 卡氏肺孢子虫 内转录间隔区 5.8S核糖体rna 巢式PCR 早期检测
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以ITS1－5.8SrDNA－ITS2序列为标记的肺孢子菌分子系统发育研究 被引量：4
2
作者 李自慧 冯宪敏 +3 位作者 卢思奇 张帆 王凤云 黄松 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2008年第4期377-385,共9页
为了阐明肺孢子菌的系统发育及种内分类状况,本实验对源于大鼠、长爪沙鼠和人的肺孢子菌5.8S核糖体RNA(rRNA)基因和rRNA内转录间隔区(the internal transcribed spacer,ITS)序列进行了扩增、克隆和序列测定.分析了6种肺孢子菌的属内进... 为了阐明肺孢子菌的系统发育及种内分类状况,本实验对源于大鼠、长爪沙鼠和人的肺孢子菌5.8S核糖体RNA(rRNA)基因和rRNA内转录间隔区(the internal transcribed spacer,ITS)序列进行了扩增、克隆和序列测定.分析了6种肺孢子菌的属内进化距离并与外囊菌属和酵母菌属比较.研究结果表明,肺孢子菌属含有包括长爪沙鼠源肺孢子菌在内的多个菌种.构建的系统发育树也表明,人和猴来源的肺孢子菌聚成1组,4种鼠源肺孢子菌聚成另1组,而4种鼠源肺孢子菌中,大鼠源肺孢子菌Pneumocystis wakefieldiae与小鼠源肺孢子菌P.murina及另一大鼠源肺孢子菌P.carinii亲缘关系最近,与长爪沙鼠源肺孢子菌关系最远。 展开更多
关键词 肺孢子菌 系统发育 5.8S核糖体rna基因 内转录间隔区
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长爪沙鼠源肺孢子虫ITS1-5.8S rDNA-ITS2序列测定及分析 被引量：1
3
作者 李自慧 冯宪敏 +3 位作者 卢思奇 张帆 王凤云 黄松 《首都医科大学学报》 CAS 2006年第1期135-136,共2页
关键词 长爪沙鼠 肺孢子虫 5.8S核糖体rna基因(5.8S rDNA) 内转录间隔区(ITS)
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长爪沙鼠和新西兰白兔源肺孢子虫ITS1-5.8S rDNA-ITS2序列的测定与分析
4
作者 李自慧 卢思奇 +3 位作者 冯宪敏 张帆 王凤云 黄松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期975-977,共3页
目的测定长爪沙鼠及新西兰白兔源肺孢子虫的ITS1-5.8S rDNA-ITS2序列,并与大鼠源肺孢子虫的相应序列进行比较分析。方法用地塞米松免疫抑制法诱导长爪沙鼠和新西兰白兔感染肺孢子虫;制作肺印片进行瑞-姬氏复合染色,通过镜检初步了解感... 目的测定长爪沙鼠及新西兰白兔源肺孢子虫的ITS1-5.8S rDNA-ITS2序列,并与大鼠源肺孢子虫的相应序列进行比较分析。方法用地塞米松免疫抑制法诱导长爪沙鼠和新西兰白兔感染肺孢子虫;制作肺印片进行瑞-姬氏复合染色,通过镜检初步了解感染情况;提取肺孢子虫总DNA,设计合成引物进行PCR扩增;纯化扩增产物后克隆测序;与登录Gen-Bank的大鼠源肺孢子虫相关序列进行比较分析。结果长爪沙鼠源肺孢子虫的ITS1、5.8S rDNA和ITS2基因序列长分别为158、157和172bp,新西兰白兔源肺孢子虫的相应序列分别为129、158和178bp。结论本实验测得的长爪沙鼠及新西兰白兔源肺孢子虫的ITS1-5.8S rDNA-ITS2序列以往未曾报道,此结果为肺孢子虫的遗传学研究提供了新的资料。 展开更多
关键词 肺孢子虫 内转录间隔区(ITS) 5.8S核糖体rna基因(5.8S rDNA)
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免疫抑制沙鼠源肺孢子菌的分类地位
5
作者 冯宪敏 魏超君 +2 位作者 Rodney D.Adam 李自慧 卢思奇 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第11期1055-1062,共8页
肺孢子菌能够感染多种哺乳动物的肺脏,并在免疫受抑制的个体引起肺孢子菌肺炎.研究表明,肺孢子菌分离株在系统进化树上分为两大枝,二者所含菌株分别来源于灵长类和啮齿类.基于宿主特异性以及DNA序列和形态学差异,每一分枝内的菌株又可... 肺孢子菌能够感染多种哺乳动物的肺脏,并在免疫受抑制的个体引起肺孢子菌肺炎.研究表明,肺孢子菌分离株在系统进化树上分为两大枝,二者所含菌株分别来源于灵长类和啮齿类.基于宿主特异性以及DNA序列和形态学差异,每一分枝内的菌株又可分为不同的种.本研究采用地塞米松免疫抑制法,导致沙鼠(28/35)肺组织感染.对18S,5.8SrRNA和rRNA内转录间隔区基因序列,以及线粒体核糖体大亚基基因的部分序列分析表明,本实验沙鼠源肺孢子菌与啮齿类动物来源的同属一枝,但明显区别于其他啮齿类动物来源的菌株,应考虑是一个独立的菌种. 展开更多
关键词 肺孢子菌 长爪沙鼠 5.8S核糖体rna基因 rrna基因内转录间隔区 线粒体核糖体大亚基 18S核糖体rna基因
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