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枸橼酸咖啡因对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞增生与凋亡及长期学习能力的影响 被引量:10
1
作者 徐发林 王彩红 +2 位作者 张彦华 郭佳佳 程慧清 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期368-372,共5页
目的研究枸橼酸咖啡因(CC)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经细胞增生与凋亡及长期学习记忆能力的影响。方法 7日龄SD新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组、CC组,每组16只;HIBD组及CC组经左颈总动脉结扎并缺氧制作HIBD模型,CC组在H... 目的研究枸橼酸咖啡因(CC)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经细胞增生与凋亡及长期学习记忆能力的影响。方法 7日龄SD新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组、CC组,每组16只;HIBD组及CC组经左颈总动脉结扎并缺氧制作HIBD模型,CC组在HI前、HI后0 min、24 h、48 h、72 h给予CC 20 mg/kg腹腔注射,假手术组和HIBD组分别在同一时间点给予等量生理盐水腹腔注射;同时从生后10日龄起腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记新生细胞,剂量50 mg/kg,每12 h 1次,共5次。12日龄时每组随机选取8只大鼠处死,免疫组织化学染色检测海马齿状回颗粒下层5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)和海马CA1区活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(活化Caspase-3)的表达情况,TUNEL法测定海马CA1区神经细胞凋亡情况,其余各组大鼠28日龄时行Y迷宫学习和记忆能力测试。结果三组新生大鼠脑组织中均可见Brd U阳性细胞,差异有统计学意义(F=101.38,P<0.01);HIBD组、CC组Brd U阳性细胞数均较假手术组增多,差异有统计学意义(P<0.05)。三组新生大鼠海马CA1区均可见活化Caspase-3阳性细胞,差异有统计学意义(F=379.77,P<0.01);CC组活化Caspase-3阳性细胞较HIBD组显著减少,但仍多于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组新生大鼠海马CA1区中均可见TUNEL阳性细胞,差异有统计学意义(F=505.92,P<0.01),以HIBD组最多,假手术组最少,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Y迷宫实验结果,各组大鼠达标所需训练总次数的差异有统计学意义(F=32.05,P<0.01),以HIBD组所需训练次数最多。24 h后正确反应率在三组间的差异也有统计学意义(F=24.99,P<0.01),以HIBD组大鼠正确反应率最低。结论枸橼酸咖啡因可以改善HIBD大鼠长期学习记忆力,其机制可能与通过减少缺氧缺血后神经细胞的凋亡有关。 展开更多
关键词 枸橼酸咖啡因 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 大鼠 cleaved caspase-3
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Proliferation and Differentiation of Duct Epithelial Cells after Partial Pancreatectomy in Rats 被引量:3
2
作者 刘涛 王春友 +2 位作者 万赤丹 熊炯炘 周峰 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2006年第5期567-569,共3页
The proliferation and differentiation of pancreatic duct epithelial cells in remnant pancreas during regeneration after partial pancreatectomy in rats were studied, and the source of pancreatic stem cells was characte... The proliferation and differentiation of pancreatic duct epithelial cells in remnant pancreas during regeneration after partial pancreatectomy in rats were studied, and the source of pancreatic stem cells was characterized. Partial (90 %) pancreatectomy was performed on 4- to 5-week-old Sprague-Dawley rats, and different duct epithelial cells and acinar cells were detected by immunohistrochemical stain method and scored using 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) labeling index (LI) at various time points after partial pancreatectomy. It was found that at 24 h after partial pancreatectomy proliferation started in the main, large and small duct cells, and persisted in small duct cells to day 5. There was significant difference between the experimental group and the control group (P〈0.001). Acinar cells positive for BrdU were greatly increased and reached the peak LI on day 5. The destroyed lobular architecture almost totally recovered on day 7, and the newly islet cells appeared around the pancreatic ducts. These results suggest that regeneration after partial pancreatectomy is involved in proliferation and differentiation of pancreatic stem cells, and pancreatic stem cells may locate in the pancreatic ductules. 展开更多
关键词 PANCREAS stem cells REGENERATION 5-bromo-2'-deoxyuridine RATS
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BrdU标记骨髓间充质干细胞的研究 被引量:3
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作者 张本斯 李庄 +1 位作者 杨新文 洪永华 《大理学院学报(综合版)》 CAS 2007年第2期23-26,共4页
目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-21-deoxyuridine,BrdU)标记骨髓间充质干细胞(Mes-enchymal stem cells.MSCs)的可行性。方法:分离培养骨髓MSCs,经BrdU标记不同时间,免疫细胞化学鉴定。结果:MSCs的CD44、CD54免疫细胞化学染色阳... 目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-21-deoxyuridine,BrdU)标记骨髓间充质干细胞(Mes-enchymal stem cells.MSCs)的可行性。方法:分离培养骨髓MSCs,经BrdU标记不同时间,免疫细胞化学鉴定。结果:MSCs的CD44、CD54免疫细胞化学染色阳性率达90%以上。BrdU标记的阳性细胞率随标记时间延长而逐渐增高,标记72h阳性率达85%以上。结论:以10μmol/L的BrdU标记骨髓MSCs的最佳时间是72h。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 5-溴脱氧尿嘧啶核苷
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Nanomolar concentration of alpha-synuclein enhances dopaminergic neuronal survival via Akt pathway 被引量:2
4
作者 Ji-Young Kim Beom Seok Jeon +1 位作者 Han-Joon Kim Tae-Beom Ahn 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第35期3269-3274,共6页
Although alpha-synuclein is generally thought to have a pathological role in Parkinson's disease, accumulative evidence exists that alpha-synuclein has a neuroprotective effect. The aim of this study was to evaluate ... Although alpha-synuclein is generally thought to have a pathological role in Parkinson's disease, accumulative evidence exists that alpha-synuclein has a neuroprotective effect. The aim of this study was to evaluate the effect of extracellular alpha-synuclein on dopaminergic cell survival. We assessed cell viability using the 3-(4,5-dimethyt-thiazol-2-yt)-2,5-diphenyltertazolium bromide (MTT) assay both in undifferentiated SH-SY5Y (SHSY) cells and neuronally-differentiated SH-SY5Y (ndSHSY) cells after 24 hour treatment with monomeric alpha-synuclein at various concentrations (0 [control], 50, 100 nmol/L, 1 IJmol/L). To determine whether cell viability assessed by MTT assay was affected by cell proliferation, 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) incorporation assay was per- formed. Level of both Akt and phosphorylated Akt was measured using western blot method in ndSHSY cells with or without 24 hour alpha-synuclein treatment. Cell viability was increased in ndSHSY cells at the nanomolar concentration of alpha-synuclein, but not in SHSY cells. Proportion of BrdU-positive ndSHSY cells was decreased in alpha-synuclein-treated group compared with control group. Level of phosphorylated Akt in alpha-synuclein-treated group was higher compared with the control group. Our study shows that extracellular alpha-synuclein at nanomolar concentra- tion benefits dopaminergic cell survival via Akt pathway. 展开更多
关键词 neural regeneration ALPHA-SYNUCLEIN neuronal survival nanomolar extracellular phosphorylatedAkt SH-SY5Y cell neuronal differentiation proliferation DOPAMINERGIC 5-bromo-2'-deoxyuridine grants-supported paper NEUROREGENERATION
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模拟失重后大鼠海马齿状回神经发生的实验研究 被引量:1
5
作者 郑丽娟 刘立 +1 位作者 张婷 吕伯昌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期287-291,共5页
观察模拟失重对大鼠海马齿状回神经发生的影响,为进一步阐明模拟失重对成年大鼠海马齿状回神经发生影响的规律及其相关生物学机制提供基本的实验依据。采用尾部悬吊法建立大鼠模拟失重模型,通过5-溴-2’-脱氧尿苷(5-bromo-2’-de-oxyuri... 观察模拟失重对大鼠海马齿状回神经发生的影响,为进一步阐明模拟失重对成年大鼠海马齿状回神经发生影响的规律及其相关生物学机制提供基本的实验依据。采用尾部悬吊法建立大鼠模拟失重模型,通过5-溴-2’-脱氧尿苷(5-bromo-2’-de-oxyuridine,BrdU)标记分裂细胞、微管相关蛋白(doublecortin,DCX)标记神经干细胞、神经元核蛋白(NeuN)标记神经元及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)标记神经胶质细胞的单、双重免疫组织化学染色方法比较尾部悬吊后7、14、28d模拟失重组大鼠与相应时间对照组大鼠之间海马齿状回神经前体细胞增殖、迁移和分化的情况。结果显示:模拟失重后7、14d尾部悬吊法模拟失重大鼠齿状回的BrdU免疫阳性细胞数目较相应对照组明显减少(P<0.01),而模拟失重后28d时两组大鼠齿状回BrdU免疫阳性细胞数目无显著差异(P>0.05)。本研究结果提示,模拟失重可抑制海马齿状回神经发生的水平。 展开更多
关键词 模拟失重 神经发生 5-溴-2’-脱氧尿苷 海马齿状回 大鼠
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小鼠局部淋巴结实验方法检测化学物致敏性
6
作者 张宏伟 景欣月 《中国病毒病杂志》 CAS 2005年第2期35-37,共3页
目的探讨小鼠局部淋巴结免疫化学方法作为豚鼠致敏性实验方法的替代方法。方法采用5-溴-2′-脱氧尿苷结合的小鼠局部淋巴结细胞免疫化学方法和豚鼠局部封闭涂皮试验(Buehler test)分别检测2,4-二硝基氯代苯和凡士林的致敏性。结果小鼠... 目的探讨小鼠局部淋巴结免疫化学方法作为豚鼠致敏性实验方法的替代方法。方法采用5-溴-2′-脱氧尿苷结合的小鼠局部淋巴结细胞免疫化学方法和豚鼠局部封闭涂皮试验(Buehler test)分别检测2,4-二硝基氯代苯和凡士林的致敏性。结果小鼠局部淋巴结免疫化学方法在评价化学物致敏性方面比豚鼠局部封闭涂皮试验法简单、实用,可检测的化学物浓度较低。结论小鼠局部淋巴结免疫化学方法可替代豚鼠致敏性实验方法用于评价化学物的致敏性。 展开更多
关键词 小鼠局部淋巴结 豚鼠局部封闭涂皮试验 5-溴-2′-脱氧尿苷 致敏性
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豚鼠前庭椭圆囊器官在庆大霉素损伤后离体培养的细胞增殖
7
作者 孟曦曦 郑少鹏 +2 位作者 刘鋌 王元身 赵春礼 《中华耳科学杂志》 CSCD 2003年第2期1-4,共4页
目的 在离体状态下对豚鼠前庭椭圆囊器官进行培养,观察庆大霉素损伤毛细胞后细胞的增殖情况。方法采用白色健康豚鼠36只,体重300-450克,随机分为4组:(1)正常对照组;(2)正常加BrdU(5-溴基脱氧尿核苷BrdU)组;(3)庆大霉素组;(4)庆大霉素加B... 目的 在离体状态下对豚鼠前庭椭圆囊器官进行培养,观察庆大霉素损伤毛细胞后细胞的增殖情况。方法采用白色健康豚鼠36只,体重300-450克,随机分为4组:(1)正常对照组;(2)正常加BrdU(5-溴基脱氧尿核苷BrdU)组;(3)庆大霉素组;(4)庆大霉素加BrdU组。应用体外组织培养、5—溴基脱氧尿核苷(BrdU,3μg/ml)掺入及免疫组织化学染色和Epon树酯包埋半薄切片等方法,在不同时间(2、3、5、15天)光镜观察庆大霉素(2.0mM)损伤后毛细胞及支持细胞增殖情况。结果 用庆大霉素48小时后,可见到椭圆囊感觉上皮中的毛细胞溶解破坏。加入BrdU继续培养,BrdU免疫组织化学染色显示了第5和15天被BrdU标记的阳性细胞核,阳性细胞核多位于椭圆囊感觉上皮中基底层,从细胞的形态和分布位置上看为支持细胞;感觉上皮的表层,也可观察到BrdU反应阳性的上皮细胞,细胞核较圆,形态和位置类似毛细胞。结论 提示损伤后的椭圆囊感觉上皮支持细胞可以进行细胞的有丝分裂,支持细胞可能是修复毛细胞的前体细胞。 展开更多
关键词 椭圆囊 增殖细胞 体外 庆大霉素 5-溴基脱氧尿核苷(5-bromo-2'-deoxyuridine BrdU)
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甘草黄酮的抗抑郁作用及对海马脑区神经再生的保护作用 被引量:51
8
作者 樊紫周 赵伟鸿 +6 位作者 果嘉 程瑞凤 赵金英 杨卫东 王英华 李巍 彭晓东 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1612-1617,共6页
观察宁夏地区栽培甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)中获得的甘草总黄酮提取部位(licorice flavonoids,LF)对大鼠慢性不可预见性应激抑郁模型(chronic unpredicted stress model of depression,CUS)的干预作用及对模型造成的海马齿状... 观察宁夏地区栽培甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)中获得的甘草总黄酮提取部位(licorice flavonoids,LF)对大鼠慢性不可预见性应激抑郁模型(chronic unpredicted stress model of depression,CUS)的干预作用及对模型造成的海马齿状回(dentate gyrus,DG)颗粒细胞层下区(subgranular zone,SGZ)神经再生(neurogenesis)能力损害的保护作用,研究LF抗抑郁作用及可能的机制。通过对大鼠实施9种不同的刺激建立慢性应激抑郁模型,造模28天的同时采用不同剂量的LF(300、100和30 mg.kg-1)连续干预。采用旷场实验(open field test,OFT)、强迫游泳实验(forced swimming test,FST)和悬尾实验(tail suspension test,TST)判断LF的抗抑郁作用,放免法测定血清皮质酮含量,共聚焦显微镜对海马齿状回SGZ中5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5'-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)标记的新生祖细胞(progenitor)进行分析、计数。与模型组相比,LF能够增加旷场实验中抑郁模型大鼠的直立次数、穿格数及减少粪便粒数;减少强迫游泳实验和悬尾实验中抑郁模型大鼠的不动时间;300 mg.kg-1剂量LF能降低血清皮质酮水平,同时恢复大鼠海马齿状回SGZ中BrdU标记的新生祖细胞数量。结果提示,甘草总黄酮提取部位对慢性不可预测应激引起的大鼠抑郁行为具有良好的抗抑郁药理活性,并且在较大剂量下能对应激引起的海马神经再生损害起到保护作用。 展开更多
关键词 甘草 黄酮 抑郁症 应激 神经再生 5-溴脱氧尿嘧啶核苷
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强制运动促进成年大鼠海马齿状回神经发生并提高学习能力(英文) 被引量:18
9
作者 徐卫平 单立冬 +6 位作者 龚珊 陈琳 张跃进 印其章 HISAMITSU Tadashi 蒋星红 郭试瑜 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期415-420,共6页
为了探讨强制运动对成年大鼠海马齿状回(dentategyrus,DG)神经发生的影响,强制大鼠在马达驱动的转轮中跑步,用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记增殖细胞,巢蛋白(neuroepthelialstemcellprotein,nestin)标记神经干细胞... 为了探讨强制运动对成年大鼠海马齿状回(dentategyrus,DG)神经发生的影响,强制大鼠在马达驱动的转轮中跑步,用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记增殖细胞,巢蛋白(neuroepthelialstemcellprotein,nestin)标记神经干细胞/前体细胞,然后用免疫细胞化学技术检测大鼠DG中BrdU及nestin阳性细胞。为了解强制运动后DG增殖细胞的功能意义,采用Y-迷宫检测大鼠的学习能力。结果表明,强制运动组DG中BrdU及nestin阳性细胞数均明显多于对照组(P<0.05);强制运动对DG神经发生的效应有强度依赖性。Y-迷宫检测结果显示,强制运动能明显改善大鼠的学习能力。结果提示,在转轮中进行强制跑步能促进成年大鼠DG的神经发生,并改善学习能力。 展开更多
关键词 海马 神经发生 齿状回 跑步 5-溴-2-脱氧尿苷 免疫组织化学 迷宫学习 大鼠
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Effects of Repetitive Transcranial Magnetic Stimulation on Astrocytes Proliferation and nNOS Expression in Neuropathic Pain Rats 被引量:10
10
作者 Lu YANG Sai-hua WANG +3 位作者 Yan HU Yan-fang SUI Tao PENG Tie-cheng GUO 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2018年第3期482-490,共9页
This study investigated the effects of different frequencies of repetitive transcranial magnetic stimulation (rTMS) on chronic neuropathic pain in rats. The behavior of rats with experimental chronic neuropathic pai... This study investigated the effects of different frequencies of repetitive transcranial magnetic stimulation (rTMS) on chronic neuropathic pain in rats. The behavior of rats with experimental chronic neuropathic pain was observed, and the expression of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) in the ipsilateral dorsal root ganglions (DRGs) and the activation and proliferation of astrocytes in the ipsilateral spinal dorsal horn were detected. Thirty-two male Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups: sham-operated group, sham-rTMS group, 1 Hz group and 20 Hz group (8 rats in each group). Chronic constriction nerve injury induced by sciatic nerve ligation was made to establish the models of the chronic neuropathic pain in rats except those in the sham-operated group. Then we applied different frequencies of rTMS to the primary motor cortex (M1) contralateral to the pain side once daily for 10 consecutive days. Pain behavior scores were observed before and after treatment. Western blot analysis was used to detect the expression of nNOS in ipsilateral L4-6 DRGs. Double immunofluorescent labeling for glial fibrillary acidic protein (GFAP) and 5-bromo-2- deoxyuridine (BrdU) was employed to observe the activation and proliferation of astrocytes in the ipsilateral L4-6 spinal dorsal horn. After rTMS treatment, the spontaneous pain behavior scores were significantly lower in the 20 Hz group than those in the sham-rTMS group (P〈0.05). Moreover, the brush-evoked pain behavior scores were significantly lower in the 20 Hz group than those in the sham-rTMS and 1 Hz group (P〈0.05), suggesting that the spontaneous pain and brush-evoked pain in the 20 Hz group were significantly alleviated. Western blot analysis revealed that the expression of nNOS in ipsilateral L4-6 DRGs was significantly decreased in the 20 Hz group as compared with the sham-rTMS group and the 1 Hz group (P〈0.01) after rTMS treatment. Double immunofluorescence suggested that the expression of GFAP a 展开更多
关键词 neuropathic pain repetitive transcranial magnetic stimulation neuronal nitric oxide synthase ASTROCYTE glial fibrillary acidic protein 5-bromo-2-deoxyuridine
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大鼠胰腺导管干细胞增殖的动态观察 被引量:9
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作者 李兵 许评 +1 位作者 苏红 宋春芳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期325-326,共2页
目的 用 5 溴 2’脱氧脲嘧啶核苷 (BrdU)标记法观察大鼠胰腺导管中成体干细胞的增殖变化情况 ,探索其变化规律。方法 自鼠尾静脉注入链脲菌素 (STZ)造成大鼠胰岛 β细胞损伤后 ,于注射后第 1、2、3、6、9天分别取 3只大鼠处死 ,处死... 目的 用 5 溴 2’脱氧脲嘧啶核苷 (BrdU)标记法观察大鼠胰腺导管中成体干细胞的增殖变化情况 ,探索其变化规律。方法 自鼠尾静脉注入链脲菌素 (STZ)造成大鼠胰岛 β细胞损伤后 ,于注射后第 1、2、3、6、9天分别取 3只大鼠处死 ,处死前 12h ,腹腔注入 5 溴 2’脱氧脲嘧啶核苷 (BrdU)标记胰腺导管上皮细胞中s期细胞 ,用免疫组织化学法观察胰腺导管上皮中干细胞的增殖变化。结果 注入链脲菌素后 ,大鼠的导管上皮细胞显著增殖 (P <0 .0 0 1) ,于 48h迅速达到高峰 ,分类导管中主导管、中导管、小导管于 48h达到高峰 ,共同导管于 72h达到高峰。结论 胰岛 β细胞的损伤可以激活胰腺导管中的干细胞 ,于损伤后 48h细胞增殖最为活跃。 展开更多
关键词 大鼠 胰腺导管 干细胞 增殖 动态观察 5-溴-2’脱氧脲嘧啶核苷
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促红细胞生成素对缺氧缺血性脑损伤新生Wistar大鼠海马GFAP和BrdU表达的影响 被引量:8
12
作者 王旭芹 曹云涛 段淼 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期65-68,共4页
目的探讨外源性促红细胞生长素(EPO)对新生Wistar大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和海马DG区5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)表达的影响。方法48只7日龄新生Wistar大鼠随机分为HIBD模型组、EPO实验组,另设假... 目的探讨外源性促红细胞生长素(EPO)对新生Wistar大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和海马DG区5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)表达的影响。方法48只7日龄新生Wistar大鼠随机分为HIBD模型组、EPO实验组,另设假手术组24只;通过结扎右侧颈总动脉、并吸入8%O2加92%N2低氧混合气体2h制作HIBD模型;免疫组织化学法检测并比较三组新生鼠制模术后14d、21d、28d海马CA1区GFAP表达、以及DG区BrdU阳性细胞数的变化。结果术后14d、21d,三组新生Wistar大鼠海马CA1区GFAP以及DG区BrdU阳性细胞数的差异均有统计学意义(P<0.01),均以EPO实验组最多,HIBD模型组其次,假手术组最少;术后28d,三组间GFAP表达以及DG区BrdU阳性细胞数比较均无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠不同时间(术后14d、21d、28d)之间比较,CA1区GFAP以及DG区BrdU阳性细胞表达的差异均有统计学意义(P<0.01),均以术后14d表达最多,21d表达次之,28d表达最少。结论早期给予外源性EPO治疗可促进新生鼠HIBD后海马CA1区GFAP表达增多,DG区BrdU阳性细胞增加,表明EPO可促进受损神经细胞增殖、再生;EPO在新生鼠缺氧缺血性脑损伤中发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷 胶质纤维酸性蛋白 缺氧缺血性脑损伤 新生鼠
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外源性胰岛素样生长因子-1对老年小鼠认知功能的影响 被引量:7
13
作者 吴连连 袁红花 朱孝荣 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期22-26,共5页
目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对老年小鼠认知功能的影响机制。方法给予老年C57/BL6小鼠侧脑室注射IGF-1,Western blot检测胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)蛋白的表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)荧光染色标记海马齿状回增殖的细胞... 目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对老年小鼠认知功能的影响机制。方法给予老年C57/BL6小鼠侧脑室注射IGF-1,Western blot检测胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)蛋白的表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)荧光染色标记海马齿状回增殖的细胞,尼氏染色标记海马齿状回神经元,用Morris水迷宫实验和跳台实验评定老年小鼠学习记忆能力。结果 Western blot检测显示,IGF-1组老年小鼠海马中IGF-1R表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Brd U染色结果显示,IGF-1组海马Brd U阳性细胞数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。尼氏染色结果显示,IGF-1组神经元细胞数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。水迷宫实验结果显示,经过训练后,IGF-1组老年小鼠的逃避潜伏期短于对照组,穿过平台的次数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。跳台实验结果显示,与对照组比较,IGF-1组老年小鼠的基础错误次数减少,而潜伏期延长(P<0.05)。结论老年小鼠注射IGF-1后,其认知功能有一定改善,IGF-1可以提高老年小鼠认知功能。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 老年鼠 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 水迷宫 认知功能
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意大利蜜蜂工蜂脂肪体胚后发育过程中细胞的增殖和凋亡 被引量:5
14
作者 李兆英 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1252-1257,共6页
脂肪体是昆虫体内物质贮备和中间代谢的重要组织。本研究通过显微形态观察、BrdU免疫组织化学和原位末端转移酶标记(TUNEL)细胞凋亡检测技术,对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂脂肪体胚后发育过程中细胞的增殖和凋亡特点进行了... 脂肪体是昆虫体内物质贮备和中间代谢的重要组织。本研究通过显微形态观察、BrdU免疫组织化学和原位末端转移酶标记(TUNEL)细胞凋亡检测技术,对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂脂肪体胚后发育过程中细胞的增殖和凋亡特点进行了比较研究。结果表明:意大利蜜蜂工蜂脂肪体细胞数量的快速增加集中在幼虫发育前期(1-3龄),而细胞的凋亡则集中在蛹发育早期的2-3 d(预蛹-2日龄蛹)时间之内。在变态发育中,工蜂幼虫脂肪体凋亡降解后重新组建形成成虫的脂肪体。本研究为昆虫脂肪体的功能研究以及昆虫组织细胞自噬和凋亡的机制研究提供一定的证据。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 脂肪体 免疫组织化学 增殖 凋亡 5-溴-2-脱氧脲嘧啶 原位末端转移酶标记
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促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷表达的影响 被引量:4
15
作者 段淼 曹云涛 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期2337-2339,共3页
目的探讨促红细胞生成素(EPO)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马颗粒下带(SGZ)5-溴-2-脱氧尿嘧啶(Brd U)表达的影响。方法选择7日龄新生Wistar大鼠制备新生鼠HIBD动物模型,按照体重将新生鼠随机分为假手术组、HIBD模型组、EPO实验组... 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马颗粒下带(SGZ)5-溴-2-脱氧尿嘧啶(Brd U)表达的影响。方法选择7日龄新生Wistar大鼠制备新生鼠HIBD动物模型,按照体重将新生鼠随机分为假手术组、HIBD模型组、EPO实验组(EPO 5 U·g-1·d-1×14 d)。在术后第14天、第21天、第28天,动态检测海马SGZ区Brd U阳性细胞数。结果海马SGZ区Brd U阳性细胞表达:3组新生大鼠在术后第14至28天,Brd U阳性细胞数随着新生鼠日龄增加而明显减少(P<0.01);在术后第14天、第21天、第28天,3组新生大鼠的海马SGZ区Brd U阳性细胞数以EPO实验组最多,其次为HIBD模型组,假手术组最少。在术后第21天,假手术组、HIBD模型组、EPO实验组的海马SGZ区Brd U阳性细胞数分别为8.08±1.62,25.71±4.18,32.21±8.63。在术后第14天、第21天,3组间两两比较差异有统计学意义(P<0.01);术后第28天,实验组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生鼠HIBD早期给予EPO干预治疗对新生鼠缺氧缺血性脑损伤可能有神经保护作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 促红细胞生成素 5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷
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兔骨髓间充质干细胞的分离、体外培养、鉴定和体外标记 被引量:4
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作者 朱峰 胡贞贞 +1 位作者 郭光华 王红梅 《南通大学学报(医学版)》 2010年第3期157-160,163,F0003,共6页
目的:探讨分离、体外培养、鉴定及体外标记兔骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stemcells,MSCs)的方法,为进一步的实验研究打下基础。方法:选择健康幼龄新西兰大耳白兔,于双侧髂后上嵴及胫骨上端内侧部行骨髓穿刺提取... 目的:探讨分离、体外培养、鉴定及体外标记兔骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stemcells,MSCs)的方法,为进一步的实验研究打下基础。方法:选择健康幼龄新西兰大耳白兔,于双侧髂后上嵴及胫骨上端内侧部行骨髓穿刺提取骨髓。采用全骨髓培养法(直接贴壁法)分离培养MSCs,对第2、3、4、5、6代MSCs应用MTT法测定生长曲线,分析MSCs的生长规律。对MSCs进行形态学观察,通过流式细胞术对CD34、CD44、CD45、CD105这4种MSCs表面抗原进行鉴定,证明所培养的细胞为MSCs。采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxyuridine,BrdU)体外标记兔MSCs,检测其标记阳性率。结果:全骨髓培养法培养的原代MSCs接种4天后可以被观察到,形态均匀成梭形,生长增殖迅速,符合MSCs生长的特性,7~8d MSCs融合接近80%,传代培养生长良好。MSCs生长曲线呈S型,由生长曲线分析可知,MSCs在培养第4~8d为高速生长期,MSCs在第3~5代生长最为旺盛。经流式细胞术鉴定,CD34(-)、CD45(-)、CD44(+)、CD105(+),证明所培养的细胞为较纯的MSCs。BrdU体外标记兔MSCs的阳性率达到85%~90%。结论:应用本实验方法,可以分离、纯化培养兔骨髓间充质干细胞且操作简便,效率高,经济实用。所培养的MSCs体外生长稳定、增殖速度快、贴壁率高、可连续传代,可用于MSCs功能及应用的进一步研究。应用BrdU体外标记兔MSCs是安全可靠的。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 全骨髓培养法 细胞培养 流式细胞术 5-溴脱氧尿嘧啶核苷
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Roles of paroxetine and corticosterone on adult mammalian ciliary body cell proliferation 被引量:2
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作者 WANG Hua LAU Benson WM +6 位作者 YAU Suk-yu LI Suk-yee LEUNG Nelson WANG Ning-li TANG Siu-wa LEE Tatia MC SO Kwok-fai 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2010年第10期1305-1310,共6页
Background The neurogenesis in retina of adult mammals is generally abolished, and this renders the retina lack of regenerative capacity. Despite this, there is a small population of nestin-positive cells in the cilia... Background The neurogenesis in retina of adult mammals is generally abolished, and this renders the retina lack of regenerative capacity. Despite this, there is a small population of nestin-positive cells in the ciliary epithelium which retains neurogenic potential. The present study aimed at investigating the effect of two drugs, corticosterone and paroxetine, on the cell proliferation of the ciliary body. Methods Adult Sprague-Dawley rats were given vehicle, corticosterone, paroxetine, or both corticosterone and paroxetine treatment for 14 days. Cell proliferation in the ciliary body was quantified using 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) immunohistochemistry. Co-labelling of BrdU and stem cell marker was used to phenotype the BrdU immunoreactive cells. Results Corticosterone treatment suppressed while paroxetine treatment increased the cell proliferation of the ciliary body. Co-labelling with cell markers revealed that the BrdU positive cells also showed nestin expression but not glial fJbrillary acidic protein (GFAP). Conclusions The results illustrate that proliferation of retinal progenitor cells situated in ciliary body are subjected to regulation by selective serotonin reuptake Jnhibitors (SSRI) and corticosteroJd, which is similar to our previous findings in neurogenic regions in central nervous system (CNS). Paroxetine treatment could reverse the suppressive effect of corticosterone on ciliary body cell proliferation. This provides information for future investigation of retinal stem cell biology and potential treatment of retinal degenerative diseases. 展开更多
关键词 PAROXETINE 5-bromo-2-deoxyuridine CORTICOSTERONE ciliary body cell proliferation NEUROGENESIS
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BrdU标记人脐带间充质干细胞及对细胞生物学行为影响的体外研究 被引量:3
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作者 高黎 祝华 +3 位作者 张荣 王莉佳 邹琳 符州 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1617-1621,共5页
目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U)标记人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)的方法及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响。方法:将h UC-MSCs分离培养并进行细胞表面标... 目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U)标记人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)的方法及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响。方法:将h UC-MSCs分离培养并进行细胞表面标志物及多向分化潜能鉴定,取第5代细胞以终浓度分别为10、15、20、25μmol/L Brd U进行标记,采用空白Brd U作为对照组,分别培养24、48、72 h及96 h后,台盼蓝排斥实验检测细胞活力;MTT法检测细胞增殖能力;Annexin V-FITC检测细胞存活率及凋亡率,免疫组化法检测各组标记率。结果:台盼蓝排斥实验检测细胞活力都在96%以上,实验组与对照组比较均无统计学意义(不同浓度组间比较P=0.89,各时间点比较P=0.61,时间与不同浓度的交互作用P=0.89)。MTT结果显示Brd U对细胞增殖无抑制(P>0.05)。不同浓度标记组间细胞增殖率及凋亡率的差异(增殖率F=12.02,P<0.001,凋亡率F=6.14,P=0.009)。结论:Brd U标记h UC-MSCs是安全可靠的,Brd U标记h UC-MSCs的最佳剂量和时间为20μmol/L、72 h,适于h UC-MSCs在临床前实验研究的体内示踪。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 增殖 凋亡
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去铁胺对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后海马CA1区BrdU和GFAP表达的影响 被引量:3
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作者 陈群嫦 曹云涛 诸葛小寅 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期2077-2080,共4页
目的研究去铁胺(DFO)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区5-溴脱氧尿嘧啶(Brd U)和胶原纤维酸性蛋白(GFAP)表达变化的影响。方法通过结扎并剪断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉,吸入8%O_2+92%N_21 h制备新生鼠HIBD模型。随机将H... 目的研究去铁胺(DFO)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区5-溴脱氧尿嘧啶(Brd U)和胶原纤维酸性蛋白(GFAP)表达变化的影响。方法通过结扎并剪断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉,吸入8%O_2+92%N_21 h制备新生鼠HIBD模型。随机将HIBD鼠分为模型组和实验组,同时设置假手术组;实验组于脑缺氧缺血后立即腹腔注射DFO 0.2 mg·g^(-1)·d^(-1),然后分别于24,48 h各注射1次;模型组于相同时间点给予同体积0.9%Na Cl腹腔注射;假手术组不注射。以间接免疫荧光组织化学方法检测各组大鼠给药后第4天海马CA1区Brd U阳性细胞数和GFAP表达变化,光镜下观察脑组织病理改变。结果 3组新生Wistar大鼠脑组织病理改变:假手术组无异常病理改变;模型组海马CA1区细胞层次减少,排列紊乱,出现胶质细胞增生,大量神经细胞核固缩、碎裂;实验组大鼠脑病理改变较模型组减轻。3组新生鼠海马CA1区5-溴脱氧尿嘧啶(Brd U)阳性细胞数比较:给药后第4天,假手术组、模型组和实验组Brd U阳性细胞数分别为14.50±11.14、35.63±15.79和51.63±17.79,与假手术组比较,模型组差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,实验组差异有统计学意义(P<0.05)。3组新生鼠海马CA1区胶原纤维酸性蛋白表达:给药后第4天,假手术组、模型组和实验组积分光密度值分别为0.16±0.46×10^(-2),0.20±0.65×10^(-2),0.28±0.74×10^(-2),与假手术组比较,模型组差异有统计学意义(P<0.001);与模型组比较,实验组差异有统计学意义(P<0.001)。结论 DFO可减轻新生Wistar大鼠HIBD后脑组织病理损害,促进海马CA1区Brd U、GFAP表达增加,提示DFO早期干预可促进新生Wistar大鼠HIBD后受损神经细胞的再生。 展开更多
关键词 去铁胺 缺氧缺血性脑损伤 5-溴脱氧尿嘧啶 胶质纤维酸性蛋白 新生鼠
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bMSC对肾小管上皮细胞的保护作用及其作用机制 被引量:2
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作者 仙淑丽 刘英莉 +1 位作者 方均燕 张薇 《中华全科医学》 2013年第11期1666-1668,F0003,共4页
目的探讨骨髓间充质干细胞(bMSC)移植对大鼠UUO模型肾小管上皮细胞超微结构的改善作用及其可能的作用机制。方法体外分离培养雄性Wistar大鼠bMSC,体外Brdu标记,将Brdu-bMSC注入同种大鼠体内。45只受体大鼠随机分为3组:假手术对照组(SH组... 目的探讨骨髓间充质干细胞(bMSC)移植对大鼠UUO模型肾小管上皮细胞超微结构的改善作用及其可能的作用机制。方法体外分离培养雄性Wistar大鼠bMSC,体外Brdu标记,将Brdu-bMSC注入同种大鼠体内。45只受体大鼠随机分为3组:假手术对照组(SH组,n=15)、Brdu-bMSC+UUO组(BM组,n=15)、生理盐水+UUO组(NS组,n=15)。分别在3 d、7 d和14 d处死大鼠,取下肾脏组织,电镜观察肾小管上皮细胞微结构变化。采用免疫组织化学方法检测Brdu阳性bMSC。结果电镜下,随着结扎时间延长肾小管上皮细胞微结构破坏逐渐加重,术后3 d、7 d BMSC组肾小管上皮细胞超微结构明显改善;未在大鼠肾脏组织中发现Brdu阳性细胞。结论 bMSC移植可短期内改善肾小管上皮细胞超微结构,对肾小管间质病变起到保护作用,其作用机制可能是通过旁分泌作用。 展开更多
关键词 5-Brdu 骨髓间充质干细胞 单侧输尿管结扎 超微结构
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