西黄丸调节MEKK1/SEK1通路抑制小鼠乳腺癌生长机制研究 被引量：14

1

作者 江一鸣 苏亮 +4 位作者 徐钰 李新叶 宋捷 翁文采 梁文波 《现代中药研究与实践》 CAS 2019年第1期24-29,共6页

目的研究西黄丸抑制4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长及其可能的发生机制。方法建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型,以西黄丸低、中、高剂量ig给药14 d,剥离肿瘤组织称重,TUNEL染色检测肿瘤细胞的凋亡,Real-time PCR法检测肿瘤组织中MEKK1和SEK1 mRN... 目的研究西黄丸抑制4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长及其可能的发生机制。方法建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型,以西黄丸低、中、高剂量ig给药14 d,剥离肿瘤组织称重,TUNEL染色检测肿瘤细胞的凋亡,Real-time PCR法检测肿瘤组织中MEKK1和SEK1 mRNA表达,免疫荧光染色法和Western Blot法检测肿瘤组织中MEKK1和SEK1蛋白表达。结果与阴性对照组比较,给药组肿瘤体积及质量随西黄丸剂量的升高而降低;TUNEL染色显示凋亡的肿瘤细胞增加;Real-time PCR显示肿瘤组织中MEKK1和SEK1 mRNA表达升高;免疫荧光染色和Western Blot显示肿瘤组织中MEKK1和SEK1蛋白表达水平上调;以上结果均与西黄丸呈剂量依赖性,P <0.05具有统计学差异。结论西黄丸可能通过促进4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤的生长,其机制可能与西黄丸上调4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织中MEKK1、SEK1 mRNA和蛋白表达有关。 展开更多

关键词 西黄丸 4T1小鼠乳腺癌细胞 MEKK1 SEK1 凋亡

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基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响 被引量：9

2

作者 陆慧敏 孙文熙 +1 位作者 霍晨星 陈宝艳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期75-81,共7页

目的:通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶,SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路的影响,探讨三七总皂苷抑制肿瘤... 目的:通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶,SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路的影响,探讨三七总皂苷抑制肿瘤的可能机制。方法:建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型,将48只造模成功的小鼠随机分为三七总皂苷低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1)和模型组,每组12只,三七总皂苷各剂量组腹腔注射剂量为10 mL·kg^-1,模型组给予相同剂量的生理盐水,连续给药28 d。给药结束后分离肿瘤组织、称质量、切片、匀浆等,采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1蛋白表达。结果:与模型组比较,三七总皂苷中、高剂量组的肿瘤质量明显下降(P<0.05);肿瘤细胞凋亡数量随三七总皂苷剂量的升高明显升高(P<0.05);三七总皂苷中、高剂量组肿瘤组织中MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型具有抑制作用,其作用机制可能与激活MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1信号通路有关。 展开更多

关键词 三七总皂苷 4T1小鼠乳腺癌细胞 促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶 SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路 凋亡

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西黄丸通过影响甘氨酸代谢抑制乳腺癌小鼠肿瘤生长的机制研究 被引量：8

3

作者 徐钰 宋捷 +5 位作者 项蓉蓉 江一鸣 任瑶 李新叶 苏亮 梁文波 《中医药导报》 2018年第11期16-20,共5页

目的:研究西黄丸对荷4T1乳腺癌小鼠甘氨酸代谢的影响,观察肿瘤生长情况,进而探讨药物抑瘤作用新途径。方法:建立4T1小鼠乳腺癌荷瘤模型,造模第2天西黄丸连续灌胃给药14 d,第15天眼球取血,剥离荷瘤组织进行称质量、切片、匀浆。采用HPLC... 目的:研究西黄丸对荷4T1乳腺癌小鼠甘氨酸代谢的影响,观察肿瘤生长情况,进而探讨药物抑瘤作用新途径。方法:建立4T1小鼠乳腺癌荷瘤模型,造模第2天西黄丸连续灌胃给药14 d,第15天眼球取血,剥离荷瘤组织进行称质量、切片、匀浆。采用HPLC-MS检测血浆中甘氨酸浓度;称质量法计算抑瘤率;TUNEL染色测肿瘤细胞凋亡;体外实验测甘氨酸对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响。结果:模型组血浆甘氨酸浓度明显低于正常组(P<0.05),西黄丸组血浆甘氨酸浓度明显高于模型组(P<0.01);西黄丸组抑瘤率为33.3%;TUNEL染色显示西黄丸组肿瘤细胞凋亡增加;含甘氨酸培养基较正常培养基肿瘤细胞增殖明显;早、晚期凋亡均减少。结论:西黄丸可通过抑制肿瘤细胞对甘氨酸的摄取,抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,进而抑制荷瘤生长。 展开更多

关键词 西黄丸 甘氨酸 代谢 4T1小鼠乳腺癌细胞

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猪传染性胃肠炎病毒S基因抗原位点片段的真核表达 被引量：1

4

作者 吕宁 彭树英 张涌 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2007年第4期26-28,共3页

为探讨利用转基因动物乳腺生物反应器生产基因疫苗的可行性,构建了以奶牛β-酪蛋白启动子为调控序列,增强型绿色荧光蛋白为报告基因的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因抗原位点区乳腺表达载体pEGBS。通过脂质体介导方法将其转染小鼠乳腺... 为探讨利用转基因动物乳腺生物反应器生产基因疫苗的可行性,构建了以奶牛β-酪蛋白启动子为调控序列,增强型绿色荧光蛋白为报告基因的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因抗原位点区乳腺表达载体pEGBS。通过脂质体介导方法将其转染小鼠乳腺癌细胞EMT6,在倒置荧光显微镜下可观察到明亮的绿色荧光分布于阳性细胞,并且RT-PCR检测结果显示,RT-PCR扩增产物与目的基因片段大小相符,证明其确实源于重组质粒转录后的mRNA。 展开更多

关键词 猪传染性胃肠炎病毒 S基因 乳腺表达载体 小鼠乳腺癌细胞

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不同接种量荧光素酶标记小鼠乳腺癌细胞4T1在小鼠体内生长及肺转移的比较 被引量：8

5

作者 李小颖 马元武 +1 位作者 张旭 张连峰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第1期14-17,I0003,共5页

目的采用活体成像技术比较四种剂量荧光素酶标记肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况,为光学标记肿瘤模型的药物筛选或机制研究提供参考资料。方法以荧光素酶作为报告基因导入小鼠乳腺癌细胞4T1中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细... 目的采用活体成像技术比较四种剂量荧光素酶标记肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况,为光学标记肿瘤模型的药物筛选或机制研究提供参考资料。方法以荧光素酶作为报告基因导入小鼠乳腺癌细胞4T1中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆并扩大培养。标记细胞稀释成1×107细胞/mL,2×107细胞/mL,5×107细胞/mL和1×108细胞/mL四种剂量,取0.1 mL接种于BALB/c小鼠右侧第二对乳腺脂肪垫内,制作小鼠原位乳腺癌模型,比较肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况。结果获得稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆,在致瘤性方面和亲代细胞无明显差别,四种剂量细胞接种BALB/c小鼠后,均有肿瘤生长,接种第28天时,四种剂量接种的原位移植瘤大小没有明显差别,但接种两个高剂量肿瘤细胞的小鼠组各有2只小鼠死亡;接种后31 d,发现四种剂量接种的原位移植瘤均发生不同程度的转移,随着观察天数的增加,转移程度逐渐严重,接种后42 d,小鼠陆续发生死亡。结论根据转移和死亡情况,确定接种1×106个细胞/只不仅肺转移明显,而且存活时间一般超过45 d,比高剂量接种存活时间长,为最佳肺转移剂量。 展开更多

关键词 4T1小鼠乳腺癌细胞株 荧光素酶 肺转移 肿瘤模型

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西黄丸调节JNK1/AP-1通路抑制荷4T1小鼠乳腺癌细胞生长 被引量：6

6

作者 苏亮 江一鸣 +4 位作者 李新叶 徐钰 宋捷 曾常茜 梁文波 《药物评价研究》 CAS 2018年第2期189-193,共5页

目的研究西黄丸抑制荷4T1小鼠乳腺癌肿瘤的生长及其可能机制。方法建立荷4T1小鼠乳腺癌模型,以低、中、高剂量(0.39、0.78、1.95 g/kg)ig给予西黄丸两周,分离肿瘤组织,称质量并计算抑瘤率;切片,TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量P... 目的研究西黄丸抑制荷4T1小鼠乳腺癌肿瘤的生长及其可能机制。方法建立荷4T1小鼠乳腺癌模型,以低、中、高剂量(0.39、0.78、1.95 g/kg)ig给予西黄丸两周,分离肿瘤组织,称质量并计算抑瘤率;切片,TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肿瘤组织JNK1、AP-1 mRNA表达;免疫荧光染色和Western Blotting检测肿瘤组织中JNK1、AP-1蛋白表达。结果与模型组比较,肿瘤质量随西黄丸剂量的升高显著下降;TUNEL荧光染色结果显示,肿瘤细胞凋亡数量随西黄丸剂量的升高显著升高;qRT-PCR结果显示,肿瘤组织中JNK1、AP-1 mRNA表达水平随西黄丸剂量的升高显著上调;免疫荧光染色和Western Blotting结果显示,肿瘤组织中JNK1、AP-1蛋白表达随西黄丸剂量的升高显著增加;且高、中、低剂量组差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论西黄丸显著抑制肿瘤生长,其作用机制与激活JNK1/AP-1信号通路促进肿瘤细胞凋亡相关。 展开更多

关键词 西黄丸 荷4T1小鼠乳腺癌细胞 JNK1 AP-1 凋亡

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三株荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞在小鼠体内生长及转移的比较 被引量：3

7

作者 李小颖 马元武 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第4期1-4,I0001-I0002,共6页

目的采用活体成像技术比较三株荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞在小鼠体内生长及转移情况,为研究肿瘤转移提供理想的动物模型以及活体分析方法。方法以荧光素酶(luciferase,Luc)作为报告基因导入小鼠乳腺癌细胞4T1、66c14和4TO7中,经G418... 目的采用活体成像技术比较三株荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞在小鼠体内生长及转移情况,为研究肿瘤转移提供理想的动物模型以及活体分析方法。方法以荧光素酶(luciferase,Luc)作为报告基因导入小鼠乳腺癌细胞4T1、66c14和4TO7中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆并扩大培养。标记细胞稀释成1×107cells/mL,取0.1 mL进行乳腺原位及尾静脉接种BALB/c小鼠,制作小鼠乳腺原位和尾静脉移植瘤模型,比较三株细胞在小鼠体内生长及转移情况。结果获得稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆,将Luc标记的4T1、66c14、4TO7细胞对BALB/c小鼠乳腺原位接种后7 d,均有肿瘤生长,接种后28 d,4T1细胞乳腺原位移植瘤最大,66c14细胞瘤体次之,4TO7细胞瘤体最小;接种后35 d,三株细胞乳腺原位移植瘤大小较一致,但4T1和66c14原位移植瘤均发生转移,其中4T1细胞较66c14细胞转移严重,而4TO7细胞未见转移;接种后42 d,三株细胞乳腺原位移植瘤大小无明显差别,而4T1和66c14细胞随天数的增加,移植瘤转移程度逐渐严重,4T1较66c14细胞转移更严重,呈广泛性转移,4TO7细胞仍未见转移。将Luc标记的4T1、66c14、4TO7细胞对BALB/c小鼠尾静脉接种后7 d,小动物活体成像发现小鼠肺部均能检测到荧光,其中4T1细胞接种的小鼠肺部荧光信号最强,且小鼠陆续死亡;4TO7细胞接种小鼠肺部荧光信号次之;66c14细胞接种小鼠肺部荧光信号最弱。尾静脉接种后14 d,4TO7和66c14细胞随着观察天数的增加,转移程度逐渐严重,4TO7细胞接种小鼠肺部荧光信号较66c14细胞强且小鼠陆续死亡。结论乳腺原位自发转移模型较尾静脉转移模型更真实反应了肿瘤细胞在体的转移特性,且能完整地呈现肿瘤转移的全过程,可作为研究肿瘤转移的最理想模型。 展开更多

关键词 4T1小鼠乳腺癌细胞株 4TO7小鼠乳腺癌细胞株 66c14小鼠乳腺癌细胞株 荧光素酶 乳腺癌肿瘤模型

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紫苏子油纳米乳诱导小鼠乳腺癌细胞EMT-6凋亡试验 被引量：3

8

作者 吴旭锦 朱小甫 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1522-1525,共4页

采用滴定法制备紫苏子油纳米乳,用激光粒度测定仪分析其粒径,并进行其对体外培养的小鼠乳腺癌细胞EMT-6的凋亡诱导试验。结果显示,制备的紫苏子油纳米乳外观澄明,平均粒径为（50.3±1.1）nm。与紫苏子油软胶囊相比,质量浓度为100~80... 采用滴定法制备紫苏子油纳米乳,用激光粒度测定仪分析其粒径,并进行其对体外培养的小鼠乳腺癌细胞EMT-6的凋亡诱导试验。结果显示,制备的紫苏子油纳米乳外观澄明,平均粒径为（50.3±1.1）nm。与紫苏子油软胶囊相比,质量浓度为100~800 mg/L时的紫苏子油纳米乳较紫苏子油软胶囊对EMT-6细胞的诱导凋亡作用均强,差异显著（P〈0.05）。透射电镜下,EMT-6细胞染色质边集,胞质内出现空泡,形成凋亡小体。800 mg/L剂量紫苏子油纳米乳处理EMT-6细胞48 h后,凝胶电泳可见明显的＂阶梯状＂DNA条带,为180~200 bp整数倍递增分布,表明紫苏子油纳米乳具有明显的诱导EMT-6细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 紫苏子油 纳米乳 凋亡 小鼠乳腺癌细胞EMT-6

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嗜热菌β-糖苷酶基因乳腺特异性表达载体鉴定 被引量：1

9

作者 杜威 刘羿羿 +4 位作者 王申元 张东 白宏伟 王凌云 周欢敏 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第5期83-86,共4页

本研究目的在于对实验室优化构建的嗜热菌β-糖苷酶基因乳腺特异性表达载体PLOX-LacS的功能进行鉴定,检测目的基因能否正常表达。实验通过脂质体介导方法将载体质粒转染小鼠的乳腺癌细胞,筛选获得的阳性细胞通过PCR和RT-PCR的方法进行... 本研究目的在于对实验室优化构建的嗜热菌β-糖苷酶基因乳腺特异性表达载体PLOX-LacS的功能进行鉴定,检测目的基因能否正常表达。实验通过脂质体介导方法将载体质粒转染小鼠的乳腺癌细胞,筛选获得的阳性细胞通过PCR和RT-PCR的方法进行嗜热菌β-糖苷酶基因的整合检测和表达检测。基因整合PCR鉴定结果表明小鼠乳腺癌细胞基因组中整合有嗜热菌糖苷酶基因,目的片段大小为1203bp;RT-PCR表达鉴定结果显示,目的片段大小与预期相同,说明诱导后的小鼠乳腺癌细胞表达了完整的嗜热菌β-糖苷酶基因。实验表明该载体能够使目的基因整合在乳腺细胞基因组中并特异性表达。为后期生产转基因奶牛提供实验材料。 展开更多

关键词 乳腺特异性表达载体 嗜热菌β-糖苷酶 小鼠乳腺癌细胞 表达鉴定

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IL-17体内外抗肿瘤作用及其机制研究 被引量：10

10

作者 杨丽娟 赵莎 +2 位作者 张海谱 姚智燕 单保恩 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期764-769,775,共7页

目的研究IL-17体内外抗肿瘤作用及其机制,为IL-17基因疫苗进入临床提供实验依据。方法建立稳定转染小鼠IL-17全长基因的小鼠乳腺癌细胞(4T1/IL-17)及相应的对照细胞(4T1/pcDNA3.1、4T1),MTS法检测3种细胞的体外增殖情况;流式法检测3种... 目的研究IL-17体内外抗肿瘤作用及其机制,为IL-17基因疫苗进入临床提供实验依据。方法建立稳定转染小鼠IL-17全长基因的小鼠乳腺癌细胞(4T1/IL-17)及相应的对照细胞(4T1/pcDNA3.1、4T1),MTS法检测3种细胞的体外增殖情况;流式法检测3种细胞表面MHCI、MHCⅡ、LFA-1分子表达的变化及3种细胞的凋亡情况。建立荷瘤动物模型,观察3种细胞移植瘤在小鼠体内成瘤性、生长情况及小鼠生存期的变化。接种肿瘤细胞6周后分别检测3组小鼠脾细胞CTL杀伤活性、脾细胞增殖情况。用ELISA法检测小鼠脾细胞经刺激后产生IFN-γ、IL-12的情况;流式细胞技术检测4T1/IL-17细胞接种于小鼠体内的细胞凋亡情况及肿瘤组织细胞表面MHCI、MHCⅡ、LFA-1等分子表达的变化。结果转染IL-17基因后在体外对4T1/IL-17、4T1/pcDNA3.1和4T1细胞的增殖;MHCI、MHCⅡ、LFA-1分子表达;细胞凋亡无影响。将4T1/IL-17细胞接种小鼠体内后,荷瘤小鼠的肿瘤生长速度、体积均明显小于4T1/pcDNA3.1细胞组及4T1细胞组,生存时间也明显延长(P<0.05);肿瘤细胞凋亡率明显增高(P<0.05);细胞表面MHCI、MHCⅡ、LFA-1分子表达水平显著性增高(P<0.01);CTL杀伤活性及对ConA刺激的细胞增殖反应性均明显升高(P<0.01);可产生高水平的IFN-γ、IL-12,有显著性差异(P<0.01)。结论 IL-17在体外未显示抗肿瘤作用,IL-17在小鼠体内具有明显的抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用与促进肿瘤细胞细胞凋亡及增强机体免疫应答有关。 展开更多

关键词 IL-17 小鼠乳腺癌细胞株4T1 基因转染 抗肿瘤作用

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脱氢脱甲基斑蝥酸银配聚物体内外抗肿瘤活性研究

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作者 李森朋 谭学杰 +1 位作者 赵云雪 张岫美 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1774-1775,共2页

金属配合物具有不同药理活性，用于多种疾病的治疗。铂类是乳腺癌化疗方案中的常用药物。然而，铂类药物的毒副反应和癌细胞耐药是临床应用的主要障碍，因此，亟需研发新型抗癌药物。

关键词 脱氢脱甲基斑蝥酸银配聚物 乳腺癌 小鼠乳腺癌细胞4T1 谷胱甘肽 活性氧 抗肿瘤活性

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