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β-1,4-半乳糖基转移酶的研究进展 被引量:4
1
作者 沈爱国 丁斐 +1 位作者 顾晓松 顾建新 《交通医学》 2003年第1期1-4,共4页
β -1,4-半乳糖基转移酶在高尔基体上通过合成 β -1,4糖苷键进行重要的蛋白质糖链修饰作用。同时 β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ在细胞膜上 ,参与多种细胞的增殖、迁移、粘附等信号识别。随着许多编码蛋白具有 β -1,4-GalT活性的新基因被... β -1,4-半乳糖基转移酶在高尔基体上通过合成 β -1,4糖苷键进行重要的蛋白质糖链修饰作用。同时 β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ在细胞膜上 ,参与多种细胞的增殖、迁移、粘附等信号识别。随着许多编码蛋白具有 β -1,4-GalT活性的新基因被克隆出来 ,有关它们的结构、底物。 展开更多
关键词 Β-1 4-半乳糖基转移酶 进展 高尔 蛋白质糖链修饰 结构 生物活性 生物学功能
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茶树类黄酮3-ο-半乳糖基转移酶基因克隆及功能研究 被引量:3
2
作者 吴华玲 方开星 +2 位作者 潘亚燕 姜晓辉 操君喜 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2088-2097,共10页
糖基转移酶(UGT)是专门催化化合物糖基化反应的酶,能够有效提高类黄酮苷元化学稳定性并增加其水溶解度。为探究茶树中类黄酮糖基转移酶基因的功能,本研究以红叶2号紫芽茶品系紫色芽叶为材料,通过RACE技术,克隆了1个UGT基因。结果表明,UG... 糖基转移酶(UGT)是专门催化化合物糖基化反应的酶,能够有效提高类黄酮苷元化学稳定性并增加其水溶解度。为探究茶树中类黄酮糖基转移酶基因的功能,本研究以红叶2号紫芽茶品系紫色芽叶为材料,通过RACE技术,克隆了1个UGT基因。结果表明,UGT基因cDNA全长1 701 bp,包含一条大小为1 362 bp的CDS,编码454个氨基酸。该基因编码的蛋白与多个物种的类黄酮3-ο-半乳糖基转移酶(F3GalT)蛋白高度同源,且在其序列C端发现一段PSPG box特征序列,因此被命名为CsF3GalT。RT-qPCR结果表明,CsF3GalT基因在紫芽品种的表达水平均极显著高于绿芽品种,在同一紫芽品种紫叶中的表达水平也显著高于绿叶。对CsF3GalT基因构建原核表达载体,体外酶活试验表明CsF3GalT能够催化UDP-半乳糖与杨梅酮形成杨梅酮-3-ο-半乳糖,而不能催化UDP-葡萄糖和杨梅酮反应。CsF3GalT表达产物定位于细胞质、细胞膜和细胞核中。本研究为进一步阐明茶树UGTs的功能及其在花青素合成途径中的作用奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 茶树 半乳糖基转移酶 克隆 表达 功能
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急性感染影响IgA肾病患儿Cosmc甲基化状态评价 被引量:3
3
作者 周楠 沈颖 樊超男 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期782-783,共2页
IgA肾病是世界范围内尤其是亚洲地区常见的原发性肾小球疾病之一,其发病机制复杂。近年来核心1153半乳糖基转移酶伴侣蛋白(core1β3-Gal—T—specificmolecular。haperone。Cosmc)在IgA肾病中的致病机制开始受到关注。Cosmc是核心1β... IgA肾病是世界范围内尤其是亚洲地区常见的原发性肾小球疾病之一,其发病机制复杂。近年来核心1153半乳糖基转移酶伴侣蛋白(core1β3-Gal—T—specificmolecular。haperone。Cosmc)在IgA肾病中的致病机制开始受到关注。Cosmc是核心1β3半乳糖基转移酶发挥活性的关键,于2002年Ju等^[1]首次报道。 展开更多
关键词 IgA肾病 化状态 肾病患儿 急性感染 半乳糖基转移酶 原发性肾小球疾病 3-Gal 亚洲地区
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外周血B淋巴细胞β1,3半乳糖基转移酶及其伴侣蛋白核酸表达和IgA肾病的关系 被引量:3
4
作者 秦伟 杨立川 +2 位作者 谭淳予 张颖娟 樊均明 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期677-678,共2页
IgA肾病(IgAN)是全球范围内最常见的肾小球疾病,近期发现IgA1分子糖基化异常可能是其关键发病机制。IgAN患者外周血B细胞β1,3半乳糖基转移酶(β1,3GT)活性较健康人显著下降。β1,3GT具有特殊的蛋白伴侣Cosmc(核心Ⅰβ3-半乳糖基... IgA肾病(IgAN)是全球范围内最常见的肾小球疾病,近期发现IgA1分子糖基化异常可能是其关键发病机制。IgAN患者外周血B细胞β1,3半乳糖基转移酶(β1,3GT)活性较健康人显著下降。β1,3GT具有特殊的蛋白伴侣Cosmc(核心Ⅰβ3-半乳糖基转移酶特异性分子伴侣)。本研究观察IgAN患者外周血B淋巴细胞核心β1,3GT基因C1GALT1和Cosmc表达水平,进一步了解其发病机制。 展开更多
关键词 半乳糖基转移酶 IGA肾病 分子伴侣 外周血 淋巴细胞β 核酸表达 蛋白 B淋巴细胞核
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癌基因ras对β-1,4-半乳糖基转移酶活性的调节 被引量:2
5
作者 徐沁 陈淳 +2 位作者 殷向雷 张颂文 顾建新 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期529-532,共4页
研究癌基因ras对细胞表面的 β 1,4 半乳糖基转移酶活性的调节 构建Ha ras表达载体并转染NIH 3T3细胞株 ,测定细胞表面和细胞内 β 1,4 半乳糖基转移酶活性和其mRNA的水平 结果发现ras使NIH 3T3细胞表面的 β 1,4 半乳糖基转移酶... 研究癌基因ras对细胞表面的 β 1,4 半乳糖基转移酶活性的调节 构建Ha ras表达载体并转染NIH 3T3细胞株 ,测定细胞表面和细胞内 β 1,4 半乳糖基转移酶活性和其mRNA的水平 结果发现ras使NIH 3T3细胞表面的 β 1,4 半乳糖基转移酶活性降低 ,而高尔基体内的活性不变 此外用Northern印迹检测后发现 ,ras不能改变细胞内 β 1,4 半乳糖基转移酶的mRNA水平 这说明癌基因ras能够调节细胞表面β 1,4 半乳糖基转移酶活性 。 展开更多
关键词 Β-1 4-半乳糖基转移酶 HA-RAS 活性调节
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奶牛β-1,4-半乳糖基转移酶基因在毕赤酵母GS115中的转化表达及发酵优化 被引量:1
6
作者 姚晶 吴正钧 任婧 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期1367-1372,共6页
采用电转化法将已构建好的表达载体pPIC9K-GT转化到毕赤酵母(Pichina pastoris)GS115中。通过对电转化条件进行优化,达到了理想的转化效率,得到了大量转化子,并通过表型筛选及PCR鉴定,筛选到阳性转化子。对重组的P.pastoris GS115-GT进... 采用电转化法将已构建好的表达载体pPIC9K-GT转化到毕赤酵母(Pichina pastoris)GS115中。通过对电转化条件进行优化,达到了理想的转化效率,得到了大量转化子,并通过表型筛选及PCR鉴定,筛选到阳性转化子。对重组的P.pastoris GS115-GT进行了诱导表达,用SDS-PAGE法检测到目的蛋白质条带,证明β-1,4-半乳糖基转移酶基因(GT)在P.pastoris GS115中能够表达;用苯酚红法测定了粗酶液的活性,其比酶活为16.40 U/ml。对工程菌的发酵条件进行了初步优化,在最佳工艺下的比酶活达到30.909 U/ml,比优化前提高了88.47%。 展开更多
关键词 Β-1 4-半乳糖基转移酶 电转化 诱导表达 发酵条件 优化
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N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化 被引量:1
7
作者 沈爱国 严美娟 +3 位作者 龚蕾蕾 关晓颖 程纯 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期220-224,共5页
为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中... 为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在。以扩增的 c DNA片断标记探针 ,Northern blot分析β-1,4-Gal T- 、 、 m RNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的表达变化。结果表明 :通过 RT-PCR方法 ,检测到 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在 ;采用 Northern blot方法 ,发现β-1,4-Gal T- 、 、 在正常大鼠坐骨神经中有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化 ,但三种同功酶的表达变化各不相同。结论 :本实验发现 β-1,4-Gal T- 、 、 在坐骨神经有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。提示与 展开更多
关键词 大鼠 坐骨神经 RT-PCR Β-1 4-半乳糖基转移酶 表达 蛋白修饰
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皮肤肿瘤
8
《中国医学文摘(皮肤科学)》 2007年第6期389-393,共5页
关键词 皮肤肿瘤 病理性瘢痕组织 S期激相关蛋白-2 人端粒逆转录 bcl-2蛋白 细胞周期蛋白E 半乳糖基转移酶 结合蛋白-1
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胃肿瘤
9
《国外科技资料目录(医药卫生)》 1998年第7期140-144,共5页
9826722 确定人胃肠粘膜和癌中 Sd^2血型碳水化物结构的 N-乙酰基氨基半乳糖基转移酶 mRNA 之检测/Dohi T//Int JCancer.-1996,67(5).-626~631 津医情9826723 E 选择蛋白介导的胃肠肿瘤细胞结合中的α(1,3)岩藻酰转化酶表达/Wittig B M... 9826722 确定人胃肠粘膜和癌中 Sd^2血型碳水化物结构的 N-乙酰基氨基半乳糖基转移酶 mRNA 之检测/Dohi T//Int JCancer.-1996,67(5).-626~631 津医情9826723 E 选择蛋白介导的胃肠肿瘤细胞结合中的α(1,3)岩藻酰转化酶表达/Wittig B M//Int J Cancer.-1996,67(1).-80~85 展开更多
关键词 胃癌肝转移 癌化疗 胃肿瘤 化学疗法 早期胃癌 胃癌患者 胃肠肿瘤 生活质量 半乳糖基转移酶 幽门螺旋杆菌
全文增补中
β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究
10
作者 沈爱国 何江虹 +3 位作者 丁斐 朱敏 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期277-282,共6页
为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1... 为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在 展开更多
关键词 Β-1 4-半乳糖基转移酶 表达 亚细胞结构 定位 肝癌细胞
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α1,3半乳糖基转移酶新等位基因278C>T的鉴定 被引量:30
11
作者 许先国 洪小珍 +4 位作者 刘瑛 吴俊杰 马开荣 朱发明 严力行 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期631-634,共4页
目的研究中国汉族人群ABO血型系统中Bw变异型的分子遗传背景,发现并鉴定一个新的ABO等位基因。方法血型血清学方法鉴定1例ABO血型疑难样本,应用聚合酶链反应、逆转录-聚合酶链反应和DNA序列分析等方法对先证者ABO基因转录调控序列和全... 目的研究中国汉族人群ABO血型系统中Bw变异型的分子遗传背景,发现并鉴定一个新的ABO等位基因。方法血型血清学方法鉴定1例ABO血型疑难样本,应用聚合酶链反应、逆转录-聚合酶链反应和DNA序列分析等方法对先证者ABO基因转录调控序列和全编码序列进行突变筛选和检测。结果血清学和家系调查鉴定该样本为Bw表型,对gDNA和cDNA研究发现该样本存在第6外显子278C/T杂合,单倍体分析发现一种新的Bw等位基因,该等位基因与B101相比,差异仅在第6外显子的278C>T错义突变,导致多肽链P93L替换,该突变点位于以前报道的Bw等位基因功能域之外。结论在中国人群中发现一种新的导致Bw变异型的ABO等位基因。 展开更多
关键词 ABO变异型/亚型 α1 3半乳糖基转移酶 因突变 ABO血型系统
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两例ABO变异型Bw亚型的分子遗传学分析 被引量:13
12
作者 章旭 李归冀 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期733-735,共3页
目的研究ABO变异型Bw亚型的分子生物学特性。方法通过标准血型血清学方法鉴定2例Bw亚型,采用聚合酶链反应一序列特异性(polymerasechainreactioIsequencespecificprimer,PCR-SsP)技术进行ABO基因分型,特异性扩增B基因第6~7外显子... 目的研究ABO变异型Bw亚型的分子生物学特性。方法通过标准血型血清学方法鉴定2例Bw亚型,采用聚合酶链反应一序列特异性(polymerasechainreactioIsequencespecificprimer,PCR-SsP)技术进行ABO基因分型,特异性扩增B基因第6~7外显子,PCR产物纯化后直接测序分析。结果血清学鉴定2例Bw亚型,PCR-SSP结果显示样本基因型为B/()2。B基因直接测序结果发现1例与B101序列比对第7外显子存在721C〉T突变,导致多肽链R241S替换;另1例与B101比对第6外显子存在278C〉T突变,导致多肽链P93L替换。结论发现Bw03、Bw12亚型各1例,其表达B抗原的强弱存在差异。 展开更多
关键词 ABO Bw亚型 a-1 3半乳糖基转移酶
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马铃薯Sgt1基因启动子的结构及功能分析 被引量:10
13
作者 魏桂民 张金文 +3 位作者 王蒂 张俊莲 陆艳梅 高宜峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期969-977,共9页
糖苷生物碱(steroidal glycoalkaloids,SGAs)是一类存在于茄科和某些百合科植物的重要次生代谢物,与植物的抗逆性和产品品质有密切关系.茄啶半乳糖基转移酶(solanidine galactosyltransferases,SGT1)是SGAs合成代谢途径的末端关键酶之一... 糖苷生物碱(steroidal glycoalkaloids,SGAs)是一类存在于茄科和某些百合科植物的重要次生代谢物,与植物的抗逆性和产品品质有密切关系.茄啶半乳糖基转移酶(solanidine galactosyltransferases,SGT1)是SGAs合成代谢途径的末端关键酶之一,研究其编码基因的启动子序列对于SGAs生物合成代谢调控有重要的作用和意义.研究采用染色体步移技术(Genome walking),首次克隆到马铃薯Sgt1基因起始密码子上游2 183 bp的启动子序列,已注册到GenBank(注册号:KC759163).构建该启动子驱动融合报告基因gfp::gus的植物双元表达载体p1304Sgt1p,转化野生型烟草获得Sgt1p::gfp::gus转基因植株,通过GUS组织化学染色分析Sgt1p::gfp::gus转基因植株中Sgt1p启动子的活性.结果表明,gus基因在转基因烟草的根、茎和叶中均表达,在叶中Sgt1p启动子的活性低于CaMV35S启动子,而在根和茎中二者基本相同;光诱导结果显示,光照处理明显增强了Sgt1p::gfp::gus转基因烟草叶片中Sgt1p启动子的活性,表明庄薯3号马铃薯Sgt1p启动子是一种光诱导型启动子. 展开更多
关键词 马铃薯 茄啶半乳糖基转移酶 启动子 报告 结构与功能
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α-1,3半乳糖基转移酶基因905A〉G突变的研究 被引量:9
14
作者 林凤秋 章旭 李剑平 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期82-84,共3页
目的探索ABO基因的α-1,3半乳糖基转移酶基因905A〉G突变对B抗原表达的影响。方法通过标准血型血清学方法鉴定3例B亚型,应用聚合酶链反应-序列特异性引物检测、ABO基因第6、7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO亚型基因分... 目的探索ABO基因的α-1,3半乳糖基转移酶基因905A〉G突变对B抗原表达的影响。方法通过标准血型血清学方法鉴定3例B亚型,应用聚合酶链反应-序列特异性引物检测、ABO基因第6、7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO亚型基因分型和序列分析。结果3例B亚型测序结果与B101序列比对第7外显子存在905A〉G突变,导致多肽链D302G替换。结论α-1,3半乳糖基转移酶基因nt905A〉G突变导致B抗原表达减弱。 展开更多
关键词 ABO α-1 3半乳糖基转移酶 突变
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人参多糖对大鼠关节软骨细胞糖胺聚糖合成的影响及其机制 被引量:6
15
作者 李景 《中国药师》 CAS 2017年第4期647-652,共6页
目的:探讨人参多糖(GPS)对大鼠关节软骨细胞糖胺聚糖(GAG)合成的影响及其作用机制。方法:分离原代大鼠关节软骨细胞进行传代培养并加入白介素-1β造模,分别将2,10,50μg·ml^(-1)的人参多糖作用于该软骨细胞48 h。检测细胞增殖、GA... 目的:探讨人参多糖(GPS)对大鼠关节软骨细胞糖胺聚糖(GAG)合成的影响及其作用机制。方法:分离原代大鼠关节软骨细胞进行传代培养并加入白介素-1β造模,分别将2,10,50μg·ml^(-1)的人参多糖作用于该软骨细胞48 h。检测细胞增殖、GAG含量和GAG合成酶木糖基转移酶-Ⅰ(Xyl T-Ⅰ)、半乳糖基转移酶-Ⅰ(Gal T-Ⅰ)、半乳糖基转移酶-Ⅱ(Gal T-Ⅱ)和葡萄糖醛酸转移酶-Ⅰ(Glc AT-Ⅰ)mRNA的含量和基质降解酶基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、聚集蛋白聚糖酶-1(aggrecanase-1)和聚集蛋白聚糖酶-2(aggrecanase-2)mRNA的含量。结果:各浓度人参多糖对大鼠关节软骨细胞增殖无显著影响(P>0.05);10、50μg·ml^(-1)GPS组软骨细胞GAG含量显著高于模型对照组(P<0.01);10μg·ml^(-1)GPS可增加Xyl T-ⅠmRNA的表达(P<0.05),50μg·ml^(-1)GPS可增加Xyl T-Ⅰ、Gal T-I和Gal T-Ⅱ的mRNA表达(P<0.05或P<0.01);IL-1β可显著增加软骨细胞蛋白多糖降解酶MMP-3、aggrecanase-1和aggrecanase-2的mRNA表达(P<0.05或P<0.01),GPS对蛋白多糖降解酶表达无抑制作用。结论:GPS可促进IL-1β下调的大鼠软骨细胞GAG合成,其机制可能与促进GAG合成酶表达增加而不是抑制基质降解酶表达有关。 展开更多
关键词 人参多糖 骨关节炎 糖胺聚糖 木糖基转移酶-Ⅰ 半乳糖基转移酶-Ⅰ 半乳糖基转移酶-Ⅱ 葡萄糖醛酸转移酶-Ⅰ
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异种肝移植的历史与发展 被引量:7
16
作者 陶开山 李霄 窦科峰 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第2期85-88,共4页
异种移植是解决同种供体器官短缺的重要途径。以α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)小型猪为供体、非人灵长类动物为受体的心脏和肾移植,最长存活达945 d和136 d,但肝移植尚无长期存活报道。国内外研究表明,免疫排斥和凝血调节障碍仍... 异种移植是解决同种供体器官短缺的重要途径。以α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)小型猪为供体、非人灵长类动物为受体的心脏和肾移植,最长存活达945 d和136 d,但肝移植尚无长期存活报道。国内外研究表明,免疫排斥和凝血调节障碍仍是阻碍移植肝和受体长期存活的主要原因。本文总结异种肝移植的发展历程,分析目前存在的问题,为未来的临床异种移植研究提供参考。 展开更多
关键词 异种移植 肝脏 因修饰 非人灵长类动物 α-1 3-半乳糖基转移酶
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α1,3-D-半乳糖基转移酶基因425C→T突变导致B3亚型分析 被引量:7
17
作者 崔文燕 王钰菁 +2 位作者 邹纬 王学锋 蔡晓红 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2018年第5期655-658,共4页
目的:探讨B3亚型及其家系成员的血型血清学特点及分子机制。方法:对B3亚型及其家系成员进行ABO血型血清学定型,血浆α1,3-D-半乳糖基转移酶活性测定,ABO基因第6、7外显子及其侧翼序列的PCR扩增,基因测序和克隆分析。结果:先证者血型血... 目的:探讨B3亚型及其家系成员的血型血清学特点及分子机制。方法:对B3亚型及其家系成员进行ABO血型血清学定型,血浆α1,3-D-半乳糖基转移酶活性测定,ABO基因第6、7外显子及其侧翼序列的PCR扩增,基因测序和克隆分析。结果:先证者血型血清学鉴定ABO血型为B3亚型,血浆中α1,3-D-半乳糖基转移酶活性<1,该家系中2份标本ABO基因序列与标准序列相比,在第7外显子存在c.425C→T的杂合突变,致α1,3-D-半乳糖基转移酶的第142位氨基酸由甲硫氨酸替换为苏氨酸,先证者ABO基因型为B305/O102,且能在家系中稳定遗传。结论:基因位点突变425C→T是导致B3亚型的分子遗传基础,DNA测序能够阐述ABO血型亚型的分子机制及其稳定遗传特性。 展开更多
关键词 ABO血型 B3亚型 因突变 α1 3-D-半乳糖基转移酶
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丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎小鼠肾组织中Cosmc和AOPP表达的影响及其治疗作用 被引量:7
18
作者 杨云 马喜兴 +4 位作者 王大虎 张环环 马耀辉 任翠敏 刘强 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期867-871,I0007,共6页
目的:探讨丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎小鼠肾组织中半乳糖基转移酶伴侣蛋白(Cosmc)、晚期氧化蛋白终末产物(AOPP)表达及胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路蛋白水平的影响,阐明丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎的治疗机制... 目的:探讨丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎小鼠肾组织中半乳糖基转移酶伴侣蛋白(Cosmc)、晚期氧化蛋白终末产物(AOPP)表达及胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路蛋白水平的影响,阐明丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎的治疗机制。方法: 38只小鼠随机分为对照组、模型组(建立过敏性紫癜肾炎模型)和丹参酮ⅡA组(建立过敏性紫癜肾炎模型+丹参酮ⅡA治疗),其中2只小鼠用于验证造模是否成功,其余每组12只。测定各组小鼠尿红细胞计数和尿蛋白水平,采用过碘酸希夫反应(PAS)染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠肾组织中AOPP蛋白水平,采用Western blotting法测定小鼠肾组织中ERK和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达水平。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组小鼠肾组织中ERK、p-ERK和Cosmc mRNA表达水平。结果:对照组小鼠肾小球基底膜无增生,无肾小球硬化;模型组小鼠肾小球基底膜增生明显,可见炎症细胞浸润,出现肾小球硬化;丹参酮ⅡA组小鼠肾小球基底膜增生和炎症浸润不明显,少量炎症细胞浸润。与对照组比较,模型组和丹参酮ⅡA组小鼠尿红细胞计数、24 h尿蛋白水平及肾组织中AOPP蛋白水平和p-ERK mRNA表达水平升高(P<0.05或 P<0.01),Cosmc mRNA表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,丹参酮ⅡA组小鼠尿红细胞计数、24 h尿蛋白水平及肾组织中AOPP蛋白水平和p-ERK蛋白表达水平降低(P<0.05或 P<0.01),Cosmc mRNA表达水平升高(P<0.01)。模型组小鼠肾组织中Cosmc mRNA表达水平与AOPP蛋白水平及p-ERK蛋白表达水平呈负相关关系(r=-0.573,P<0.01;r=-0.602,P<0.01),AOPP蛋白水平与p-ERK蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.614,P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA可能通过降低肾组织Cosmc水平、升高肾组织中AOPP水平以及激活ERK/MAPK信号通路对过敏性紫癜肾炎小鼠发挥治疗作用。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 过敏性紫癜肾炎 小鼠 肾组织 半乳糖基转移酶伴侣蛋白 晚期氧化蛋白终末产物 胞外信号调节激 丝裂原活化蛋白激
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IgA肾病患者外周血B淋巴细胞β1,3半乳糖基转移酶及其分子伴侣mRNA的表达 被引量:5
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作者 蔡勇 蒋小云 +4 位作者 陈述枚 孙良忠 莫樱 张巧玲 史成军 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期1254-1256,共3页
目的探讨IgA肾病患者外周血B淋巴细胞β1,3半乳糖基转移酶(β1,3GT)mRNA和其分子伴侣(Cosmc)mRNA表达水平与IgA肾病临床及病理的关系。方法 2006年5月-2007年2月在中山大学附属第一医院肾活检确诊为IgA肾病的23例患儿(IgA肾病组),按照... 目的探讨IgA肾病患者外周血B淋巴细胞β1,3半乳糖基转移酶(β1,3GT)mRNA和其分子伴侣(Cosmc)mRNA表达水平与IgA肾病临床及病理的关系。方法 2006年5月-2007年2月在中山大学附属第一医院肾活检确诊为IgA肾病的23例患儿(IgA肾病组),按照病理分级分为Ⅰ级+Ⅱ级组(n=6)、Ⅲ级组(n=6)和Ⅳ级+Ⅴ级组(n=11)。同期本院非IgA肾病患儿10例为非IgA肾病组,本院体检健康儿童23例为健康对照组。3组儿童年龄、性别比较差异均无统计学意义。分离3组儿童外周血B淋巴细胞,提取RNA,应用实时荧光定量反转录-PCR检测外周血B淋巴细胞β1,3GT mRNA、Cosmc mRNA表达水平。结果 IgA肾病患儿外周血B淋巴细胞β1,3GTmRNA表达水平(0.88±0.17)与健康对照组(0.79±0.20)和非IgA肾病组儿童(0.84±0.21)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。IgA肾病患儿外周血B淋巴细胞Cosmc mRNA表达水平(0.82±0.20)低于健康对照组(0.99±0.32)和非IgA肾病(1.03±0.25)(P<0.05)。IgA肾病患儿24h尿蛋白水平与外周血B淋巴细胞β1,3GT mRNA、Cosmc mRNA表达水平均呈负相关(Pa<0.05)。Ⅰ级+Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级+Ⅴ级组IgA肾病患儿外周血B淋巴细胞β1,3GT mRNA、Cosmc mRNA表达水平无统计学差异(Pa>0.05)。结论 IgA肾病患者外周血B淋巴细胞Cosmc mRNA表达水平降低,与临床表现密切相关。外周血B淋巴细胞Cosmc mRNA表达水平降低可能与IgA肾病的发病有关。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 免疫球蛋白A β1 3半乳糖基转移酶 β1 3半乳糖基转移酶分子伴侣
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ABO亚型分析及基因测序研究方法的建立 被引量:6
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作者 王鹤 章旭 《临床血液学杂志(输血与检验)》 CAS 2017年第2期254-257,共4页
目的:建立一种ABO血型基因的测序检测方法,对ABO血型的基因突变位点进行分析,并对ABO亚型进行准确分型。方法:采用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,选取特异性引物对ABO基因的第6、7外显子及第6内含子进行扩增,并用PCR直接测序方法对... 目的:建立一种ABO血型基因的测序检测方法,对ABO血型的基因突变位点进行分析,并对ABO亚型进行准确分型。方法:采用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,选取特异性引物对ABO基因的第6、7外显子及第6内含子进行扩增,并用PCR直接测序方法对该序列进行分析,在此基础之上,用该方法对经血清学鉴定为亚型的样本进行检测。结果:建立的PCR产物直接测序方法,能够准确的对ABO基因的第6、7外显子序列进行分析,并通过此方法鉴定了1例B亚型,其基因型为B/O杂合,其中α-1,3半乳糖基转移酶基因在第7外显子上发生第721位C>T突变,导致了多肽链Arg241Trp的替换。结论:建立了一种ABO血型基因产物的PCR直接测序方法,并对ABO亚型进行了分析,为以后血型鉴定及其亚型分子机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 ABO血型 PCR产物直接测序 PCR-SSP Bw亚型 α-1 3半乳糖基转移酶
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