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斑马鱼Dio3b基因敲除模型的构建
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作者 万月月 魏红英 +3 位作者 杨柳 郭翠翠 孙凤 宋怀东 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期790-794,共5页
目的 通过观察3型甲状腺激素脱碘酶（Dio3b）基因敲除的斑马鱼在心率、自主运动及胚胎发育等方面的变化,探讨斑马鱼Dio3b基因的生物学功能.方法 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除斑马鱼Dio3b基因,利用PCR和测序技术鉴定突变位点,确定Dio... 目的 通过观察3型甲状腺激素脱碘酶（Dio3b）基因敲除的斑马鱼在心率、自主运动及胚胎发育等方面的变化,探讨斑马鱼Dio3b基因的生物学功能.方法 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除斑马鱼Dio3b基因,利用PCR和测序技术鉴定突变位点,确定Dio3b-/-斑马鱼的建立;利用显微镜拍摄并记录Dio3b--和野生型胚胎在受精后48 h的心率变化;利用斑马鱼行为追踪系统观察Dio3b-/-和Dio3b＋/＋胚胎在胚胎出生后5~7 d的运动变化.结果 成功构建了携带8碱基缺失移码突变的斑马鱼Dio3b敲除的斑马鱼模型;在胚胎出生后48 h,Dio3b-/-胚胎的心率相较于野生型明显增加（P＜0.001）;在胚胎出生后5~7 d,Dio3b-/-幼鱼的自主运动明显加快（P＜0.05）.结论 敲除Dio3b基因的斑马鱼存在心率加快、自主运动增加,这类表型与临床甲状腺功能亢进患者相似,说明该模型可以作为局部组织中甲状腺功能亢进的疾病模型,用于研究胚胎期过量的甲状腺激素对发育的影响. 展开更多
关键词 斑马鱼 CRISPR-Cas9系统 3型甲状腺激素脱碘酶 甲状腺激素 心率
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