ZEB2基因3′UTR区转染对人胃黏膜上皮细胞GES-1增殖、侵袭、迁移的影响 被引量：6

1

作者 李素丽 周芳 +4 位作者 张庆瑜 贾文亮 张安玲 韩磊 康春生 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第5期401-405,I0001,共6页

目的探讨E盒结合锌指蛋白(ZEB)2基因3′非翻译区(3′UTR)转染人胃黏膜上皮细胞GES-1后对其增殖、侵袭、迁移的影响。方法将人工合成的ZEB2 3′UTR质粒及miR-200b micmics采用脂质体Lipofectamine2000转染GES-1细胞。分别设对照组、突变... 目的探讨E盒结合锌指蛋白(ZEB)2基因3′非翻译区(3′UTR)转染人胃黏膜上皮细胞GES-1后对其增殖、侵袭、迁移的影响。方法将人工合成的ZEB2 3′UTR质粒及miR-200b micmics采用脂质体Lipofectamine2000转染GES-1细胞。分别设对照组、突变组和ZEB2 3′UTR组,qRT-PCR检测转染后miR-200a/b/c及ZEB1/ZEB2mRNA的表达。再设对照组、ZEB2 3′UTR组、ZEB2 3′UTR+无义序列组和ZEB2 3′UTR+miR-200b micmics组。West-ern blot检测转染后ZEB1/ZEB2、基质金属蛋白酶(MMP)-2/9、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达;Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;MTT法检测细胞增殖活性。结果与对照组及突变组相比,转染ZEB2 3′UTR组miR-200a/b/c的表达均下调,以miR-200b最为明显,ZEB1/ZEB2 mRNA及蛋白水平表达上调,其细胞迁移、侵袭、增殖活性均增强(P<0.05)。ZEB2 3′UTR+miR-200b micmics组较ZEB2 3′UTR组迁移、侵袭、增殖活性降低。结论ZEB2 3′UTR可能通过调控miR-200a/b/c的表达进而影响其对靶基因的转录后调控,增加细胞的侵袭、迁移能力,导致GES-1细胞的恶性转化倾向。 展开更多

关键词 3′非翻译区 转染 胃黏膜 上皮细胞 细胞增殖 肿瘤转移 E盒结合锌指蛋白

下载PDF 职称材料

Nfic基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-20a靶向关系的验证 被引量：3

2

作者 王珊 李晓霞 +1 位作者 周杰 王宝利 《天津医药》 CAS 2016年第9期1065-1068,共4页

目的构建核因子C(nuclear factor I-C,Nfic)基因3′非编码区(3′UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证micro RNA-20a(miR-20a)与其潜在靶基因Nfic的靶向关系。方法通过micro RNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-20a与Nfic... 目的构建核因子C(nuclear factor I-C,Nfic)基因3′非编码区(3′UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证micro RNA-20a(miR-20a)与其潜在靶基因Nfic的靶向关系。方法通过micro RNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-20a与Nfic基因3′UTR潜在的互补结合位点;PCR扩增出Nfic基因3′UTR序列,将此序列克隆至荧光素酶报告载体p MIR-Report Luciferase;将重组荧光素酶报告质粒与miR-20a mimics(实验组)或NCmimics(对照组)共同转染293-AD细胞,收集细胞后通过双荧光素酶报告系统检测2组细胞的荧光素酶活性,从而对Nfic与miR-20a的靶向调节关系进行鉴定。将miR-20a mimics和NC mimics分别转染骨髓基质细胞系ST2,裂解细胞提取蛋白后采用Western blotting检测NFIC蛋白的表达水平。结果构建的重组荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确。双荧光素酶报告基因检测显示,与对照组相比,miR-20a可以抑制Nfic 3′UTR报告基因载体的荧光素酶活性(P<0.05);Western blotting结果显示,与对照组相比,ST2细胞转染miR-20a mimics后NFIC蛋白表达水平明显下调。结论成功构建了Nfic基因3′UTR荧光素酶报告质粒,而miR-20a可以直接作用于Nfic基因3′UTR,抑制其荧光素酶活性。 展开更多

关键词 微RNAS 3′非翻译区 miR-20a Nfic 骨髓基质细胞系 荧光素酶报告基因

下载PDF 职称材料

miR-429对乳腺癌细胞增殖的影响及其作用机制 被引量：3

3

作者 韩清昕 侯琳 +3 位作者 吴琍 陈凤婷 于超 纪涵青 《精准医学杂志》 2020年第4期334-338,共5页

目的探讨miR-429对乳腺癌细胞增殖的影响及其具体作用机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,根据转染成分不同将细胞分为转染mimics NC组(A组)、空白对照组(B组)、转染inhibitors组(C组)、转染inhibitors NC组(D组)和转染miR-429 m... 目的探讨miR-429对乳腺癌细胞增殖的影响及其具体作用机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,根据转染成分不同将细胞分为转染mimics NC组(A组)、空白对照组(B组)、转染inhibitors组(C组)、转染inhibitors NC组(D组)和转染miR-429 mimics组(E组),应用MTT法检测miR-429表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖活力的影响,通过Western blot方法检测miR-429对低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)表达的影响;采用microRNA靶基因预测软件TargetScan 7.1预测miR-429与LRP1潜在的互补结合位点;以pSI-Check2为工具载体构建h-LRP1-3UTR-wt及h-LRP1-3UTR-mu双荧光素酶报告基因质粒,根据转染成分不同将293T细胞分为转染h-LRP1-3UTR-mu与NC mimics组(F组)、转染h-LRP1-3UTR-mu与miR-429 mimics组(G组)、转染h-LRP1-3UTR-wt与NC mimics组(H组)、转染h-LRP1-3UTR-wt与miR-429 mimics组(I组),检测每组293T细胞中荧光素酶的活性,分析miR-429对LRP1的靶向调控作用。结果MTT实验结果示,在细胞培养的第2~4天,E组细胞的增殖活力明显低于B、C、D组(F=4.53~19.12,P<0.05);Western blot检测结果示,E组细胞LRP1蛋白表达量明显低于A、B、C、D组(F=6.26,P<0.05);TargetScan 7.1软件预测结果显示人miR-429与LRP1基因3′非翻译区(3′UTR)存在互补结合位点;荧光素酶活性检测结果显示,与H组相比I组细胞荧光素酶活性下调(t=39.78,P<0.01)。结论miR-429通过对LRP1的靶向调控作用来抑制乳腺癌细胞的增殖,其对LRP1的靶向调控机制是通过与LRP1基因3′UTR互补结合实现的。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 微RNAS 低密度脂蛋白受体相关蛋白-1 细胞增殖 荧光素酶类 3′非翻译区 体外研究

下载PDF 职称材料

汉族健康妊娠妇女HLA-G 3′UTR基因多态性及单倍型的分布特征

4

作者 白微 叶瑾 +2 位作者 奚经巧 林枝 蔡文品 《重庆医学》 CAS 2021年第2期229-233,共5页

目的分析人类白细胞抗原G 3′非翻译区(HLA-G 3′UTR)基因多态性及单倍型在本地区汉族正常妊娠妇女中的分布特点。方法选取该院2017年10月至2018年10月产前检查的汉族健康妊娠妇女168例,采集外周血标本,提取全血DNA,利用PCR法扩增HLA-G ... 目的分析人类白细胞抗原G 3′非翻译区(HLA-G 3′UTR)基因多态性及单倍型在本地区汉族正常妊娠妇女中的分布特点。方法选取该院2017年10月至2018年10月产前检查的汉族健康妊娠妇女168例,采集外周血标本,提取全血DNA,利用PCR法扩增HLA-G 3′UTR基因,Sanger测序法检测基因序列,并进行多态性位点基因分型。结果共检测到HLA-G 3′UTR基因8个多态性位点(14 bp ins/del、+3003C/T、+3010G/C、+3027C/A、+3035C/T、+3142C/G、+3187A/G、+3196C/G),均符合Hardy-Weinberg平衡检验(P>0.05)。等位基因以14 bp del、+3003T、+3010G、+3027C、+3035C、+3142C、+3187G、+3196C为主,基因型以14 bp del/del、+3003TT、+3010GC、+3027CC、+3035CC、+3142CG、+3187AG、+3196CC为主。连锁不平衡分析显示8个位点紧密连锁,UTR-1(DTG CCC GC)、UTR-3(DTC CCG AC)、UTR-7(ITC ATG AC)频率大于0.03,三者共占94.3%,其中UTR-1占55.0%。结论温州地区健康妊娠妇女HLA-G 3′UTR检测到8个多态性位点,且8个位点紧密连锁,构建的单倍型UTR-1(DTG CCC GC)是该地区妊娠妇女人群HLA-G 3′UTR主要的单倍型。 展开更多

关键词 孕妇 HLA抗原 3′非翻译区 多态性 单核苷酸 单倍型 温州 汉族

下载PDF 职称材料

HBA2基因非编码区罕见突变分子诊断及家系分析

5

作者 陈丽竹 严提珍 +4 位作者 黄钧 钟青燕 秦雪 唐宁 罗世强 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期940-944,共5页

目的:对1例不符合遗传规律的α-地中海贫血病例进行分子诊断及家系分析,探索新发现的罕见突变(HBA2:c.*12G>A)对临床表型的影响。方法:采集先证者及其家系成员的血液样本进行血常规检测,毛细管电泳法进行血红蛋白组分分析,常规技术(G... 目的:对1例不符合遗传规律的α-地中海贫血病例进行分子诊断及家系分析,探索新发现的罕见突变(HBA2:c.*12G>A)对临床表型的影响。方法:采集先证者及其家系成员的血液样本进行血常规检测,毛细管电泳法进行血红蛋白组分分析,常规技术(Gap-PCR、RDB-PCR)检测中国人群常见的α-及β-珠蛋白基因位点,Sanger测序法分析α-珠蛋白基因序列(HBA1、HBA2)。结果:通过分析先证者及其家系成员的检测结果,检出先证者基因型为-α^(3.7)/HBA2:c.*12G>A,其父亲为罕见α-珠蛋白基因HBA2:c.*12G>A杂合突变携带者。结论:本研究发现了一种未报道的罕见α-珠蛋白基因突变HBA2:c.*12G>A,其杂合突变携带者表现为静止型α-地中海贫血。 展开更多

关键词 Α-地中海贫血 基因突变 HBA2:c.*12G>A 3′非翻译区

下载PDF 职称材料

小RNA病毒基因组3′非编码区结构与功能研究进展 被引量：5

6

作者 娄慧 吕建亮 张永光 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期86-90,共5页

小RNA病毒属于单股正链RNA病毒,包括肠道病毒属、鼻病毒属、心脏病毒属、口疮病毒属和肝病毒属等几个主要的属。口蹄疫病毒(FMDV)、脊髓灰质炎病毒(PV)、丙型肝炎病毒(HCV)、脑心肌炎病毒(EMCV)是该科病毒的典型代表。小RNA基因组的末... 小RNA病毒属于单股正链RNA病毒,包括肠道病毒属、鼻病毒属、心脏病毒属、口疮病毒属和肝病毒属等几个主要的属。口蹄疫病毒(FMDV)、脊髓灰质炎病毒(PV)、丙型肝炎病毒(HCV)、脑心肌炎病毒(EMCV)是该科病毒的典型代表。小RNA基因组的末端具有非编码区(UTR),是病毒基因组复制的主要调控位点,3′非编码(3′UTR)区是复制酶的第一结合位点,其二级结构在病毒的翻译与复制过程中具有重要作用,该区是病毒复制酶识别并结合的位点,主要起始负链RNA的合成,3′UTR在病毒的翻译过程及感染性病毒粒子的形成过程中起着十分重要的作用。因此,研究小RNA基因组的3′端结构和功能可为确定复制与表达位点在非编码区的具体位置和主要特征,以及其他正链小RNA病毒基因组复制的研究奠定了理论基础。 展开更多

关键词 小RNA病毒 3′非编码区 结合位点 复制 转录 翻译

下载PDF 职称材料

牛let-7a与CC趋化因子受体7基因靶向关系的验证

7

作者 徐萍 申祥 +2 位作者 Fotina Hanna 王三虎 张晓建 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第6期820-826,共7页

为了验证小分子RNA let-7a与其预测靶基因CC趋化因子受体7(CCR7)之间的关系,采用生物信息学软件预测CCR7的3′非编码区(3′UTR)是否存在与let-7a的靶向结合位点;利用PCR扩增出包含靶向结合位点区域的CCR7-3′UTR,并构建其荧光素酶表达载... 为了验证小分子RNA let-7a与其预测靶基因CC趋化因子受体7(CCR7)之间的关系,采用生物信息学软件预测CCR7的3′非编码区(3′UTR)是否存在与let-7a的靶向结合位点;利用PCR扩增出包含靶向结合位点区域的CCR7-3′UTR,并构建其荧光素酶表达载体;将验证后的阳性重组子瞬时共转染人胚胎肾细胞293(293T),进行双荧光素酶报告基因检测;通过将合成的let-7a模拟物和let-7a抑制剂分别转染奶牛乳腺上皮细胞MAC-T,利用qRT-PCR和ELISA检测let-7a与CCR7基因mRNA和蛋白表达水平的变化,验证两者之间的靶向调控关系。菌液PCR和双酶切结果表明,成功构建了重组双荧光素酶报告质粒pMIR-REPORTTM-CCR7-3′UTR。双荧光素酶报告基因检测结果表明,let-7a与CCR7基因之间确实存在靶向调控关系。qRT-PCR和ELISA进一步证实了过表达let-7a能显著下调MAC-T细胞中CCR7基因mRNA和蛋白的表达量(P<0.05),两者存在负调控关系。本研究结果证实了let-7a与CCR7基因之间存在靶向调控关系,为进一步探究其分子机制提供参考。 展开更多

关键词 牛 CC趋化因子受体7 3′非编码区 let-7a

下载PDF 职称材料

东北地区J亚群禽白血病病毒的分子生物学特性分析 被引量：2

8

作者 刘超男 高玉龙 +4 位作者 景龙 高宏雷 祁小乐 潘伟 王笑梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期915-921,共7页

为了解近两年在中国东北地区出现的J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的分子生物学特性,作者从东北地区不同养禽场先后分离鉴定12株ALV-J,并对其env基因、3′UTR和3′LTR区序列进行测定和比较分析。结果显示,12株ALV-J分别位于env基因遗传进化的... 为了解近两年在中国东北地区出现的J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的分子生物学特性,作者从东北地区不同养禽场先后分离鉴定12株ALV-J,并对其env基因、3′UTR和3′LTR区序列进行测定和比较分析。结果显示,12株ALV-J分别位于env基因遗传进化的3个不同分支(group),其中group2和group3中毒株在env基因分别出现大片段氨基酸缺失和与其他亚群毒株重组现象;12株ALV-J在3′UTR区仍存在较大差异,具有完整E组件的ALV-J占主导地位;12株ALV-J在3′LTR区的变异主要集中于U3区,但是位于U3区的C/EBP、CArGbox、Y box、PRE box和TATA box等转录调控元件却高度保守。以上结果表明,目前中国ALV-J的基因变异仍主要集中在env基因和3′UTR区,且env基因已出现缺失或重组等新的变异趋势,并可能是ALV-J流行范围扩大、组织嗜性和致肿瘤作用明显改变的重要遗传基础。 展开更多

关键词 东北地区 J亚群禽白血病病毒 3′非编码区 转录调控元件

下载PDF 职称材料

HLA-G基因3′非翻译区多态性与慢性丙型肝炎HCV病毒载量的相关性研究 被引量：2

9

作者 张力 周世航 +5 位作者 梁晓华 王霓 丁楠 邵林楠 夏悦昕 于卫建 《中国输血杂志》 CAS 2020年第9期886-889,共4页

目的探讨HLA-G基因3′非翻译区(UTR)多态性与慢性丙型肝炎病毒载量的相关性。方法收集2015年4月至12月于大连市第六人民医院诊治的慢性丙型肝炎患者标本共196例,采用PCR扩增及基因测序技术对慢性HCV感染患者的HLA-G基因3′UTR+296014 b... 目的探讨HLA-G基因3′非翻译区(UTR)多态性与慢性丙型肝炎病毒载量的相关性。方法收集2015年4月至12月于大连市第六人民医院诊治的慢性丙型肝炎患者标本共196例,采用PCR扩增及基因测序技术对慢性HCV感染患者的HLA-G基因3′UTR+296014 bp插入/缺失,+3003C/T,+3010C/G,+3027A/C,+3035C/T,+3142C/G,+3187A/G,+3196C/G等8个多态性位点进行检测,同时采用实时定量PCR方法测定患者血清HCV病毒载量。结果慢性HCV感染患者的HLA-G基因3′UTR+296014 bp插入/缺失、+3003C/T、+3027A/C、+3035C/T、+3187A/G、+3196C/G多态性位点的丙肝病毒载量的差异均无统计学意义(P>0.05)。+3010C/G、+3142C/G多态性位点的丙肝病毒载量的差异有统计学意义(P<0.05)。经Dunn′s多重检验进行两两比较,+3142位点基因型为C/G的患者血清HCV病毒载量要高于基因型GG(P<0.05))。结论 HLA-G基因3′UTR+3142位点基因多态性与慢性丙型肝炎HCV病毒载量有关。 展开更多

关键词 HLA-G 3′非翻译区 丙型肝炎 病毒载量

下载PDF 职称材料

胰岛素受体底物-1基因3′非翻译区的突变与中国人2型糖尿病的关系 被引量：1

10

作者 陈淑华 谷亚鹏 +1 位作者 曾卫民 宋惠萍 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期33-36,共4页

目的 :研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因 3′非翻译区的突变与中国 2型糖尿病的关系。方法 :采用PCR SSCP技术扫描 12 0例中国 2型糖尿病患者和 12 0例正常对照的IRS 1基因 3′非翻译区序列 ,所有SSCP变异的样品进行DNA测序分析。结果 ... 目的 :研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因 3′非翻译区的突变与中国 2型糖尿病的关系。方法 :采用PCR SSCP技术扫描 12 0例中国 2型糖尿病患者和 12 0例正常对照的IRS 1基因 3′非翻译区序列 ,所有SSCP变异的样品进行DNA测序分析。结果 :SSCP分析存在假阳性结果。测序未发现有基因突变。结论 :IRS 1基因 3′非翻译区的突变不是引起中国人 展开更多

关键词 基因 突变 胰岛素受体底物-1 3′非翻译区 2型糖尿病

下载PDF 职称材料

猪VEGFA 3′UTR生物信息学分析及其与miR-361-5p的靶向验证 被引量：1

11

作者 高晓梦 张金璧 李齐发 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第8期1-6,共6页

为了扩增并分析猪卵泡颗粒细胞中血管内皮生长因子A(VEGFA)基因3编码区(3′UTR)序列、构建VEGFA 3′UTR荧光素酶报告质粒以及利用双荧光素酶报告基因验证miR-361-5p与VEGFA 3′UTR的靶向关系,试验通过RT-PCR扩增VEGFA 3′UTR,并用生物... 为了扩增并分析猪卵泡颗粒细胞中血管内皮生长因子A(VEGFA)基因3编码区(3′UTR)序列、构建VEGFA 3′UTR荧光素酶报告质粒以及利用双荧光素酶报告基因验证miR-361-5p与VEGFA 3′UTR的靶向关系,试验通过RT-PCR扩增VEGFA 3′UTR,并用生物信息学方法分析预测其保守性及潜在的互作miRNA,最后将扩增的VEGFA 3′UTR序列克隆至荧光素酶报告载体中,与miR-361-5p mimics(试验组)或NC mimics(对照组)共同转染293细胞,通过双荧光素酶报告系统检测两组细胞的荧光素酶活性,从而鉴定miR-361-5p与VEGFA 3′UTR的靶向关系。结果表明:在猪卵泡颗粒细胞中成功扩增了VEGFA基因3′UTR序列,其在哺乳动物中保守性较高,有多个潜在miRNA结合位点;成功构建了VEGFA基因3′UTR荧光素酶报告质粒,证明了miR-361-5p可以直接作用于VEGFA基因3′UTR,抑制其荧光素酶活性。 展开更多

关键词 猪 VEGFA MICRORNAS miR-361-5p 3′非翻译区 双荧光素酶报告载体

原文传递

PD-1和CTLA-4 3′UTR基因交互作用在HBV感染中的作用

12

作者 张国妤 齐晓霞 +1 位作者 陆宏伟 卢乐 《西部医学》 2022年第9期1306-1311,共6页

目的探讨慢性HBV感染者PD-1和CTLA-43′UTR的基因多态性分布,以及二者之间的交互作用。方法通过病例对照研究方法,PCR-RFLP技术检测慢性HBV感染者433例,健康对照者208例,PD-1 rs10204525和CTLA-4 rs3087243的基因型分布频率,采用χ^(2)... 目的探讨慢性HBV感染者PD-1和CTLA-43′UTR的基因多态性分布,以及二者之间的交互作用。方法通过病例对照研究方法,PCR-RFLP技术检测慢性HBV感染者433例,健康对照者208例,PD-1 rs10204525和CTLA-4 rs3087243的基因型分布频率,采用χ^(2)检验分析HBV感染组与健康对照组的基因型频率、等位基因频率、基因间的交互作用、与疾病严重程度的关系。结果PD-1 rs10204525:与GG基因型相比,慢性HBV感染组的AA基因型频率明显高于健康对照组(P=0.019,OR=2.231,95%CI=1.127~4.418),A等位基因频率明显高于健康对照组(P=0.033,OR=1.334,95%CI=1.024~1.739)。CTLA-4 rs3087243:与AA基因型相比,慢性HBV感染组的GG基因型频率明显高于健康对照组(P=0.016,OR=2.196,95%CI=1.145~4.214),G等位基因频率明显高于健康对照组(P=0.040,OR=1.320,95%CI=1.012~1.723)。PD-1和CTLA-4的基因型交互后,在HBV感染组和健康对照组中的差异、与疾病严重程度、与肝癌的关系均有统计学意义。结论PD-1 rs10204525的AA基因型和A等位基因可能是慢性HBV感染的危险因素,CTLA-4 rs3087243的GG基因型和G等位基因可能是慢性HBV感染的危险因素。联合基因型可增加慢性HBV感染的危险因素。CTLA-4 rs3087243的GG基因型和G等位基因可能与HCC感染相关。 展开更多

关键词 慢性HBV感染 3′非翻译区 基因多态性 程序性细胞死亡分子-1 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4

下载PDF 职称材料

A型塞尼卡病毒3′非编码区潜在吻环基序突变对微型基因组蛋白表达的影响

13

作者 刘拂晓 王宁 +6 位作者 赵地 李静 孟海蓝 李紫薇 于永乐 董雅琴 尼博 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2022年第2期90-95,共6页

A型塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA),可导致猪的口吻部、口腔黏膜、蹄冠部出现水疱样病变,其临床症状与其他水疱型疫病所导致的症状难以区分。该病毒属于小RNA病毒科(Picornaviridae)、塞尼卡病毒属(Senecavirus)成员,其基因组含有5′非... A型塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA),可导致猪的口吻部、口腔黏膜、蹄冠部出现水疱样病变,其临床症状与其他水疱型疫病所导致的症状难以区分。该病毒属于小RNA病毒科(Picornaviridae)、塞尼卡病毒属(Senecavirus)成员,其基因组含有5′非编码区(5′untranslated region,5′UTR)、多聚蛋白的开放阅读框及3′非编码区(3′untranslated region,3′UTR)。过去有报道预测该病毒的3′UTR含有一个三碱基配对的潜在RNA吻环结构,但未被试验证实。构建了7个不同吻环基序突变的SVA微型基因组,将其分别与另一荧光报告质粒共转染细胞后,进行双荧光素酶报告分析。结果证明潜在吻环结构的破坏未能干扰5′UTR启动蛋白的表达。 展开更多

关键词 A型塞尼卡病毒 3′非编码区 吻环 微型基因组 双荧光素酶报告分析

下载PDF 职称材料

3′端非翻译区对重组人肝细胞生成素表达不均一性的影响

14

作者 王清明 刑桂春 +3 位作者 陈吉中 范国才 陈惠鹏 贺福初 《生物技术通讯》 CAS 2001年第3期167-170,共4页

在工程菌pBV hHPO DH5α中表达的人肝细胞生成素 (hHPO)以两种分子形式存在 ,经分析可能是由于表达质粒中hHPO基因的终止密码子TAG的通读造成的。表达载体经改构后 ,去掉质粒中hHPO基因终止密码子后的非翻译区 ,采用TAA作终止密码子 。

关键词 人肝细胞生成素 终止密码子 3′端非翻译区 通读 基因表达 不均一性 hHPO

下载PDF 职称材料

可变多聚腺苷酸化与肿瘤

15

作者 田路松 赵晓航 《生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第3期232-240,共9页

可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)是真核细胞mRNA成熟过程中针对前体mRNA 3′端的一种加工修饰方式,是重要的转录后调控机制。APA通过调控3′非翻译区(3′UTR)长度而影响mRNA稳定性、翻译效率和定位。内含子多聚腺... 可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)是真核细胞mRNA成熟过程中针对前体mRNA 3′端的一种加工修饰方式,是重要的转录后调控机制。APA通过调控3′非翻译区(3′UTR)长度而影响mRNA稳定性、翻译效率和定位。内含子多聚腺苷酸化(intronic polyadenylation, IPA)通过形成丢失重要结构域的截短型蛋白实现对靶基因的调控,参与形成肿瘤新抗原。APA具有肿瘤特异性,有可能用于肿瘤分子分型和靶向治疗。现对APA的形成过程和分类、高通量发现APA的测序和分析技术进展,以及APA对肿瘤发生发展的影响进行综述。 展开更多

关键词 可变多聚腺苷酸化 3′非翻译区 肿瘤新抗原 多聚腺苷酸化信号位点测序

原文传递

法洛四联症与NOTCH1和JAG1基因3′非编码区变异的相关性研究

16

作者 杨小芳 崔芬芬 +4 位作者 李元敏 周文君 党国琴 胡源 路宁 《重庆医学》 CAS 2021年第10期1715-1720,共6页

目的探讨法洛四联症(TOF)与NOTCH1和JAG1基因3′非编码区(3′UTR)变异的相关性,为TOF患者临床诊断提供遗传依据。方法采用民族-病例-对照的研究方法,收集20例汉族TOF患者及14例回族TOF患者,并分别以20名汉族及20名回族健康体检者为对照... 目的探讨法洛四联症(TOF)与NOTCH1和JAG1基因3′非编码区(3′UTR)变异的相关性,为TOF患者临床诊断提供遗传依据。方法采用民族-病例-对照的研究方法,收集20例汉族TOF患者及14例回族TOF患者,并分别以20名汉族及20名回族健康体检者为对照组,筛选出TOF患者在两个民族人群中,NOTCH1和JAG1基因3′UTR存在的变异。通过PCR技术,结合DNA序列测序,测定、验证、确定样本人群中这些变异位点;进一步运用TargetScan、PicTar和microRNA.org等软件对变异位点可能结合miRNA进行分析,推测其和TOF发生、发展的相关性。结果检测出TOF患者NOTCH1基因3′UTR存在3个单核苷酸多态性(SNP),JAG1基因3′UTR存在6个SNP位点。9个SNP位点在4组对象中的分布频数存在差异,但差异无统计学意义(P>0.05)。其中JAG1基因3′UTR rs542746042位点在汉族对照组与汉族病例组之间的分布,差异有统计学意义(P<0.05)。预测结果显示,JAG1基因3′UTR有差异的SNP位点(486delT)可与miRNA结合。结论NOTCH1和JAG1基因3′UTR的核苷酸变异可能与TOF的发生相关。 展开更多

关键词 法洛四联症 NOTCH1基因 JAG1基因 3′非编码区 单核苷酸多态性

下载PDF 职称材料

3′非翻译区靶向人工微小RNA对PRRSV在猪肺巨噬细胞中复制的抑制作用（英文）

17

作者 包利平 朱立 +1 位作者 张鑫宇 孙怀昌 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期964-973,共10页

【目的】研究重组腺病毒(rAd)传送的3′非翻译区(UTR)靶向amiR3UTR对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪肺巨噬细胞(PAM)中复制的抑制作用。【方法】用表达amiR3UTR或对照amiRcon的腺病毒载体转染AAV-293细胞,获得rAd-amiR3UTR-GFP和rAd... 【目的】研究重组腺病毒(rAd)传送的3′非翻译区(UTR)靶向amiR3UTR对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪肺巨噬细胞(PAM)中复制的抑制作用。【方法】用表达amiR3UTR或对照amiRcon的腺病毒载体转染AAV-293细胞,获得rAd-amiR3UTR-GFP和rAd-amiRcon-GFP,用定量RT-PCR检测amiR3UTR在rAd转导细胞中的表达,用定量RT-PCR、Western blotting和病毒滴定检测amiR3UTR对PRRSV复制的抑制作用。【结果】原代PAM及其细胞系3D4/163均能被rAd-amiR3UTR-GFP转导,但前者转导效率很低;rAd-amiR3UTR-GFP转导细胞能有效表达amiR3UTR,且表达具有剂量和时间依赖性;rAd表达的amiR3UTR能显著抑制不同毒株PRRSV在PAM细胞中的复制,且抑制作用具有剂量依赖性。【结论】amiR3UTR能抑制不同毒株PRRSV在PAM中的复制,其rAd有望作为抗PRRSV新策略进行深入研究。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 3′非翻译区 人工微小RNA 重组腺病毒 抗病毒作用

原文传递

瘦素基因3′非翻译区对基因表达的调控作用

18

作者 毛金媛 李英慧 +2 位作者 单忠艳 滕卫平 赵彦艳 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第17期1-3,共3页

目的探讨人类瘦素(hLEP)基因3′非翻译区(3′-UTR)对基因表达的影响,为调控瘦素(LEP)的表达提供分子生物学依据。方法应用生物信息学软件预测hLEP基因3′-UTR中潜在的miRNA结合位点;通过基因重组构建含有hLEP基因3′-UTR的荧光素酶报告... 目的探讨人类瘦素(hLEP)基因3′非翻译区(3′-UTR)对基因表达的影响,为调控瘦素(LEP)的表达提供分子生物学依据。方法应用生物信息学软件预测hLEP基因3′-UTR中潜在的miRNA结合位点;通过基因重组构建含有hLEP基因3′-UTR的荧光素酶报告载体pGL3-LEP,在人肝癌HepG2细胞中通过瞬时转染法观察报告基因的表达变化,并应用化学发光法检测荧光素酶的活性。结果预测到hLEP基因3′-UTR中含有miR-296的结合位点,通过过表达miR-296观察到含有hLEP 3′-UTR的报告基因表达被抑制,与阴性对照组比较,miR-296使含有hLEP基因3′-UTR片段的报告载体pGL3-LEP荧光素酶的活性下降50%(P<0.05),其荧光素酶活性显著高于不含有该片段的对照载体(P<0.05)。结论 hLEP基因3′-UTR参与了LEP的表达调控。 展开更多

关键词 瘦素 3′非翻译区 miR-296 基因表达调控

下载PDF 职称材料

DNA双链断裂修复基因3′UTR的多态性与汉族人年龄相关性白内障的关系

19

作者 张沐 姚勇 +12 位作者 梁从凯 杨梅 朱蓉嵘 康丽华 王惠芬 陈佳 刘必红 戚应祥 傅东红 张俊芳 殷丽 施健 管怀进 《江苏医药》 CAS 2015年第20期2381-2384,共4页

目的探讨DNA双链断裂修复基因3′非翻译区(3′UTR)的单核苷酸多态性(SNP)与汉族人年龄相关性白内障(ARC)的关系。方法提取无锡滨湖区和盐城阜宁县ARC患者(ARC组,789例)及正常人(对照组,789例)的全血基因组DNA;采用Taqman荧光探针和实时... 目的探讨DNA双链断裂修复基因3′非翻译区(3′UTR)的单核苷酸多态性(SNP)与汉族人年龄相关性白内障(ARC)的关系。方法提取无锡滨湖区和盐城阜宁县ARC患者(ARC组,789例)及正常人(对照组,789例)的全血基因组DNA;采用Taqman荧光探针和实时荧光定量PCR法分析4个双链断裂修复基因3′UTR的4个SNP位点的基因型,比较各位点在两组之间的分布差异并计算相对危险度(OR)。结果 XRCC5-rs1051685与ARC、皮质性和混合性ARC密切相关(OR=1.61、2.12和1.89,P<0.01),RAD52-rs1051669与ARC、皮质性和核性ARC密切相关(OR=0.72、0.69和0.71,P<0.05)。结论 XRCC5、RAD52基因3′UTR的多态性在汉族人ARC的发生、发展中起重要作用,不同亚型的ARC可能具有特异性的危险因素和致病机制。 展开更多

关键词 年龄相关性白内障 DNA双链断裂修复基因 3′非翻译区 单核苷酸多态性

原文传递

XIAP基因3′非翻译区荧光素酶报告载体的构建及活性分析

20

作者 董宁 葛高霞 +2 位作者 张炜明 朱伟 徐华国 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第9期1098-1099,1102,共3页

目的构建重组X连锁凋亡抑制蛋白质(XIAP)基因3′非翻译区(3′UTR)荧光素酶报告载体,分析可能调控XIAP基因表达的微RNA(miRNA)。方法采用聚合酶链反应(PCR)从人cDNA中扩增XIAP-3′UTR序列,插入荧光素酶报告载体pGL3-Ctrl,获得重组载体pGL... 目的构建重组X连锁凋亡抑制蛋白质(XIAP)基因3′非翻译区(3′UTR)荧光素酶报告载体,分析可能调控XIAP基因表达的微RNA(miRNA)。方法采用聚合酶链反应(PCR)从人cDNA中扩增XIAP-3′UTR序列,插入荧光素酶报告载体pGL3-Ctrl,获得重组载体pGL3-Ctrl/XIAP;采用Target Scan 6.2软件预测可能与XIAP-3′UTR结合的miRNA;将pGL3-Ctrl/XIAP重组质粒和miRNA共转染A549细胞,测定XIAP-3′UTR荧光素酶的活性。结果酶切及核酸测序证实,成功构建了XIAP-3′UTR序列的荧光素酶报告重组子;miRNA靶位点的预测显示,XIAP基因可能是miR-200b、miR-200c和miR-429的作用靶标;与miRNA mimic ctrl组比较,miR-200b、miR-200c和miR-429能明显降低pGL3-Ctrl/XIAP的荧光素酶活性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了XIAP-3′UTR荧光素酶报告载体,且miR-200b、miR-200c和miR-429可显著降低其荧光素酶的活性。 展开更多

关键词 X连锁凋亡抑制蛋白质 3′非翻译区 微小RNAS 荧光素酶类 细菌 载体

下载PDF 职称材料