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鸭肝炎病毒基因组3′末端序列的克隆和分析 被引量:73
1
作者 丁春宇 张大丙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期312-319,共8页
用3′RACE和RT-PCR扩增并克隆鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)Ⅰ型毒株C80和Ⅰ型变异株E63的3′末端序列。分析结果显示,C80株和E63株基因组3′末端均包含1 359 nt的3D、终止密码子TGA、长314nt的3′UTR,而poly(A)尾分别含18... 用3′RACE和RT-PCR扩增并克隆鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)Ⅰ型毒株C80和Ⅰ型变异株E63的3′末端序列。分析结果显示,C80株和E63株基因组3′末端均包含1 359 nt的3D、终止密码子TGA、长314nt的3′UTR,而poly(A)尾分别含18个A和19个A。由2株DHV 3D核苷酸序列所推导的3D蛋白均含453个氨基酸,均包含KDELR、DxxxxD、GxxCSGxxxTxxxNS、YGDD和FLKR等小RNA病毒RNA聚合酶的特征基序,该结果进一步证实Ⅰ型DHV属于小RNA病毒科的成员。两株DHV与小RNA病毒科9个已知属之间3D蛋白的氨基酸序列同源性为16%-37%,介于属间3D蛋白的氨基酸序列同源性范围(18%-60%)之内;此外,Ⅰ型DHV的3′UTR在小RNA病毒科是最长的。用3D蛋白进行进化分析的结果表明,Ⅰ型DHV可能属于小RNA病毒科的一个独立的病毒属。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒 3D基因 3utr POLY(A) 3′RACE
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Small but influential:the role of microRNAs on gene regulatory network and 3′UTR evolution 被引量:14
2
作者 Rui Zhang Bing Su 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2009年第1期1-6,共6页
MicroRNAs (miRNAs) are endogenous -22 nucleotide noncoding RNAs that regulate the expression of complementary messenger RNAs (mRNAs). Thousands of miRNA genes have been found in diverse species, and many of them a... MicroRNAs (miRNAs) are endogenous -22 nucleotide noncoding RNAs that regulate the expression of complementary messenger RNAs (mRNAs). Thousands of miRNA genes have been found in diverse species, and many of them are highly conserved. With the miRNA roles identified in nearly all aspects of biological processes, evidence is mounting that miRNAs could represent a new layer of regulatory network, and their regulatory effect might be much more pervasive than previously suspected. Here we focus on the posttranscriptional level gene regulation of miRNAs in animals and review how the miRNAs act to sustain and shape up the expression profiles of specific cell types; how the miRNAs integrate into the existing gene regulatory networks; and how the miRNAs influence the evolution of 3'UTR of mammalian mRNAs. 展开更多
关键词 MIRNA gene expression regulatory network 3utr evolution
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单股正链RNA病毒基因组3′非编码区的高级结构与功能研究进展 被引量:6
3
作者 孙道春 伯晓晨 王升启 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期299-303,共5页
单股正链RNA病毒种类繁多 ,其宿主涉及人、动物、植物 ,对人畜健康和农业经济生产都有重大的影响 .病毒基因组 3′UTR内的序列形成茎环、假结、TLS等高级结构 ,既可以作为顺式元件 ,又可以结合蛋白质反式因子 ,对病毒的转录、复制、翻... 单股正链RNA病毒种类繁多 ,其宿主涉及人、动物、植物 ,对人畜健康和农业经济生产都有重大的影响 .病毒基因组 3′UTR内的序列形成茎环、假结、TLS等高级结构 ,既可以作为顺式元件 ,又可以结合蛋白质反式因子 ,对病毒的转录、复制、翻译都有调控作用 .简要介绍了单股正链RNA病毒代表种属的 3′UTR内高级结构与功能的研究方法、主要进展和存在的问题 . 展开更多
关键词 单股正链RNA病毒 二级结构 拟tRNA结构 基因组 3’非编码区
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拟南芥ANAC055基因突变体对高盐和渗透胁迫的响应 被引量:7
4
作者 任瑞 张喜凤 +3 位作者 胡文韬 钟丽梅 余潮 刘金龙 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期721-728,共8页
高盐和渗透等非生物胁迫是影响农作物产量和品质的重要因素,非生物胁迫发生时,植物通过体内各类转录因子启动胁迫应答反应,进而降低非生物胁迫对植物的损伤。本研究筛选出植物特异性转录因子ANAC055编码基因的纯合T-DNA插入突变体SALK_1... 高盐和渗透等非生物胁迫是影响农作物产量和品质的重要因素,非生物胁迫发生时,植物通过体内各类转录因子启动胁迫应答反应,进而降低非生物胁迫对植物的损伤。本研究筛选出植物特异性转录因子ANAC055编码基因的纯合T-DNA插入突变体SALK_152738,测序分析发现T-DNA插在ANAC055基因的3'UTR区域。实时荧光定量PCR结果表明叶中ANAC055基因表达量最高;与野生型相比,突变体叶、茎和花中ANAC055基因表达量分别下降了40%、50%和70%。高盐胁迫后,野生型和突变体叶中ANAC055基因表达量分别比对照上升了320%和55.4%;而渗透胁迫时,该基因叶中的表达量分别比对照下降了47.7%和56.3%;电子表达谱分析发现该基因根中的表达可受高盐和渗透等多种非生物胁迫的诱导表达。高盐和渗透胁迫时野生型和突变体幼根的生长均受到明显抑制,但高盐胁迫对突变体根生长的抑制作用比对野生型根生长的抑制作用更大。上述分析表明拟南芥ANAC055基因可受高盐和渗透等非生物胁迫的诱导表达,并且其在拟南芥幼根的生长发育过程中具有一定的作用,本研究有助于进一步明确其在非生物胁迫过程中的作用。 展开更多
关键词 拟南芥 ANAC055基因 3'utr SALK_152738 高盐 渗透
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ERK1/2信号通路基因3'UTR多态性与非小细胞肺癌的相关性
5
作者 洪超 向旭东 +6 位作者 李盈甫 曹杨 陈雪雅 李帅 邢安灏 林牧 马千里 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第3期7-17,共11页
目的探究4个ERK1/2信号通路的基因3'UTR区域的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(MAPK1基因中的rs9340,NRAS基因中的rs14804,KRAS基因中的rs712和rs7973450)与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC... 目的探究4个ERK1/2信号通路的基因3'UTR区域的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(MAPK1基因中的rs9340,NRAS基因中的rs14804,KRAS基因中的rs712和rs7973450)与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的相关性。方法纳入了478名NSCLC患者及480名健康对照者,利用TaqMan探针法对其进行基因分型检测,并分析上述4个SNP与NSCLC的相关性。结果rs9340位点的等位基因在对照组与非小细胞鳞状细胞癌组(squamous cell carcinoma,SCC)中分布频率的差异具有统计学意义(P=0.009),该结果表明rs9340位点的G等位基因可能是非小细胞肺鳞癌的保护性因素(OR=0.67,95%CI:0.50~0.91)。同时,在<50岁年龄组中,rs9340位点的等位基因在对照组和NSCLC组中的分布频率差异具有统计学意义(P=5.07×10^(-4)),该结果表明rs9340等位基因G可能是NSCLC的保护性因素(OR=0.46,95%CI:0.29~0.72)。结论MAPK1基因SNP位点rs9340可能与NSCLC的发生风险相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 ERK1/2信号通路 单核苷酸多态性 3'utr MAPK1
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LGALS3BP 3’UTR荧光素酶报告基因载体构建及鉴定 被引量:1
6
作者 刘翠华 邓林林 +8 位作者 赵方新 红梅 武建强 张烜 李奕君 温琪 郭冉 刘奕彤 马启豪 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期8-14,共7页
目的构建LGALS3BP(lectin,galactoside-binding,soluble,3 binding protein,LGALS3BP)基因3’非编码区(3’-untranslated region,3’UTR)的野生型及突变型荧光素酶报告基因重组载体并进行鉴定,以备进一步研究miRNA对LGALS3BP基因的调控... 目的构建LGALS3BP(lectin,galactoside-binding,soluble,3 binding protein,LGALS3BP)基因3’非编码区(3’-untranslated region,3’UTR)的野生型及突变型荧光素酶报告基因重组载体并进行鉴定,以备进一步研究miRNA对LGALS3BP基因的调控。方法Targetscan软件预测LGALS3BP 3’UTR上的miRNA结合位点;以人肝癌细胞系SMMC-7721基因组DNA为模板,进行PCR扩增,获得野生型LGALS3BP基因3’UTR片段,经双酶切将目的片段定向插入报告基因载体pGL3-Control中,将克隆好的重组载体转化大肠埃希菌DH5α感受态细胞进行扩增,采用菌落PCR及测序监定重组子。设计位点突变型LGALS3BP 3’UTR扩增引物,以构建的野生型LGALS3BP 3’UTR重组质粒为模板,采用重叠PCR及定点突变PCR技术进行扩增分别构建单独位点及双位点突变型重组荧光素酶报告基因载体。结果野生型LGALS3BP 3’UTR重组质粒经菌落PCR鉴定,可见871 bp的目的基因片段,大小与预期相符;测序结果表明,插入序列与LGALS3BP 3’UTR序列完全一致且插入方向正确。Targetscan软件预测到LGALS3BP 3’UTR区有两个感兴趣的miRNA结合位点。突变型LGALS3BP 3’UTR重组质粒测序鉴定结果表明,单独位点及双位点突变型重组质粒中均成功引入结合位点突变。结论成功构建LGALS3BP的3’UTR野生型(pGL3-LGAL-W-3’UTR)、两个单独位点突变型(pGL3-LGAL-M1-3’UTR和pGL3-LGAL-M2-3’UTR)及双位点突变型(pGL3-LGAL-M-3’UTR)重组荧光素酶报告基因载体,为后续研究miRNA对LGALS3BP基因的调控奠定基础。 展开更多
关键词 LGALS3BP 3utr 报告基因载体构建 定点突变
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鸡IGFBP2基因3′UTR区1196C>A单核苷酸多态性的功能性鉴定及分析 被引量:6
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作者 于莹莹 乔书培 +5 位作者 孙婴宁 宋鹤 张潇飞 闫晓红 李辉 王宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1163-1172,共10页
鸡IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR)1196C>A单核苷酸多态性(SNP)与鸡的腹脂重和腹脂率显著相关.生物信息学分析显示,该SNP恰好位于gga-mi R-456-3p的一个潜在靶基因结合位点处,提示IGFBP2基因可能是gga-mi R-456-3p的一个靶基因,且该SN... 鸡IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR)1196C>A单核苷酸多态性(SNP)与鸡的腹脂重和腹脂率显著相关.生物信息学分析显示,该SNP恰好位于gga-mi R-456-3p的一个潜在靶基因结合位点处,提示IGFBP2基因可能是gga-mi R-456-3p的一个靶基因,且该SNP位点可能影响gga-mi R-456-3p对IGFBP2基因表达的调控作用.为鉴定SNP 1196C>A是否为功能性SNP,本研究分别构建了包含该SNP位点C或A等位基因的双荧光素酶报告基因载体,比较分析这两个等位基因在鸡胚成纤维细胞系(DF1)和鸡前脂肪细胞中对报告基因活性和表达的影响;利用mi RNA mimics和inhibitor分析gga-mi R-456-3p对不同等位基因报告基因活性以及内源性IGFBP2表达的影响.结果发现,在DF1细胞和鸡前脂肪细胞中,A等位基因的报告基因活性和表达均显著高于C等位基因(P<0.05);gga-mi R-456-3p仅影响C等位基因的报告基因活性和表达,而对A等位基因的报告基因活性没有明显影响;gga-mi R-456-3p调控细胞内源性IGFBP2基因的m RNA和蛋白质表达.本研究证实IGFBP2基因是gga-mi R-456-3p的靶基因,其3′UTR区SNP 1196C>A是一个功能性SNP,它影响gga-mi R-456-3p对鸡IGFBP2基因的表达调控作用.本研究结果对于鸡的分子辅助选择育种及IGFBP2基因在脂肪沉积中调控机制的阐明具有重要意义. 展开更多
关键词 IGFBP2基因 单核苷酸多态性 3′非编码区 gga-mi R-456-3p
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家兔BMP7基因3′UTR的克隆及序列分析 被引量:5
8
作者 赵巧辉 陈其新 +2 位作者 李明 石晓卫 刘孟洲 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第2期11-14,共4页
【目的】研究家兔BMP7基因3′非翻译区(3′UTR)序列的结构及功能特点。【方法】以家兔肾脏组织为材料,应用3′RACE技术对家兔BMP7基因3′UTR序列进行扩增,并与GenBank中登陆的其他哺乳动物相应序列进行比较分析。【结果】成功克隆了家兔... 【目的】研究家兔BMP7基因3′非翻译区(3′UTR)序列的结构及功能特点。【方法】以家兔肾脏组织为材料,应用3′RACE技术对家兔BMP7基因3′UTR序列进行扩增,并与GenBank中登陆的其他哺乳动物相应序列进行比较分析。【结果】成功克隆了家兔BMP7基因的3′UTR(GenBank号:EU004072);在3′UTR序列末端存在2个切割与胞质多聚腺苷化特异因子(CPSF)结合位点(AAUAAA)和1个11 bp的poly(A)。家兔BMP7基因3′UTR序列与小鼠、人、牛和猪的一致性分别为41.45%,50.30%,47.84%和57.91%,相对不保守。【结论】家兔BMP7基因3′UTR结构特点可能与其基因功能有关。 展开更多
关键词 家兔 哺乳动物 骨形态形成蛋白7 3utr 生物信息学分析
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喉癌中microRNA-24对S100A8基因3′非翻译区的作用 被引量:5
9
作者 郭艳 尚超 +1 位作者 钟鸣 富伟能 《解剖科学进展》 CAS 2011年第3期280-283,286,共5页
目的分析喉癌中S100A8基因3'UTR与其靶向miRNA的调控作用。方法构建S100A8基因3′UTR野生型和突变型荧光素酶载体,应用MiRanda和RNA22软件预测S100A8基因3'UTR靶向miRNA,共转构建的荧光素酶载体和靶miRNA前体于喉癌Hep2细胞中,... 目的分析喉癌中S100A8基因3'UTR与其靶向miRNA的调控作用。方法构建S100A8基因3′UTR野生型和突变型荧光素酶载体,应用MiRanda和RNA22软件预测S100A8基因3'UTR靶向miRNA,共转构建的荧光素酶载体和靶miRNA前体于喉癌Hep2细胞中,双荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性。结果成功构建了S100A8基因3'UTR荧光素酶载体,在S100A83'UTR第3bp位置预测到一个miR-24结合位点,与转染controlmiR组和突变型载体组相比,miR-24前体能明显降低野生型载体的荧光素酶活性(P<0.05)。结论 miR-24靶向负性调控S100A8基因3'UTR活性。 展开更多
关键词 喉癌 S100A8 3utr MIRNA
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大麦黄矮病毒GPV株系基因组末端序列的克隆和分析 被引量:1
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作者 张文蔚 成卓敏 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第1期102-107,共6页
利用5′RACE、3′RACE和RT-PCR完成了大麦黄矮病毒GPV株系5′和3′末端序列的克隆和分析。分析结果显示,GPV株系5′末端长302 nt,包含起始密码子ATG和长100 nt的5′UTR。与马铃薯卷叶病毒属其他病毒比较,5′UTR的长度差异大且不保守。3... 利用5′RACE、3′RACE和RT-PCR完成了大麦黄矮病毒GPV株系5′和3′末端序列的克隆和分析。分析结果显示,GPV株系5′末端长302 nt,包含起始密码子ATG和长100 nt的5′UTR。与马铃薯卷叶病毒属其他病毒比较,5′UTR的长度差异大且不保守。3′末端长328 nt,包含终止密码子TGA和长93 nt的3′UTR。比RPV3′UTR短74 nt,同源性为40%,但末端较为保守,与RPV3′UTR末端序列同源性达84.34%。 展开更多
关键词 大麦黄矮病毒GPV株系 5′RACE 3′RACE 5′utr 3utr
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沙棘耐盐基因HrNHX1的克隆及3'UTR序列分析 被引量:3
11
作者 郭长奎 罗淑萍 +1 位作者 沙依拉 于静 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1031-1035,共5页
以沙棘(Hippophae rhamnoides L.)叶片为材料,用改良SDS法提取总RNA,反转录合成第一链cDNA作为模板,根据已公布NHX1家族同源序列保守区设计简并引物,扩增出沙棘中HrNHX1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification of c... 以沙棘(Hippophae rhamnoides L.)叶片为材料,用改良SDS法提取总RNA,反转录合成第一链cDNA作为模板,根据已公布NHX1家族同源序列保守区设计简并引物,扩增出沙棘中HrNHX1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA end,RACE)方法,从沙棘中克隆到HrNHX13'cDNA序列。该序列(GenBank登录号:EU718492)长度为1373bp,与已知NHX1序列同源性最大为80%,其编码区1094bp,编码364个氨基酸,3'非翻译区(3'-untranslated region,3'UTR)长度为239 bp。3'UTR序列分析显示沙棘的3'UTR与陆地棉、葡萄柚和小盐芥的同源性分别为43.97%、45.63%和40.64%,明显低于编码区的同源性。结果表明,NHX1基因编码区具有较高的保守性,3'UTR序列的同源性较低,显示了非编码区在环境适应中的重要性,并为进一步研究沙棘对生境的适应分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 沙棘 3'RACE 3'utr HrNHX1基因 耐盐
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Sox2基因3'非翻译区保守元件对基因表达的调控作用 被引量:4
12
作者 马莉 孔清华 +2 位作者 赵树华 魏云虎 毛炳宇 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期633-638,共6页
转录因子Sox2是脊椎动物早期发育中最早表达的神经系统特异性基因之一,同时在干细胞的维持中也起着关键作用。通过生物信息学分析,作者发现在脊椎动物Sox2mRNA3'非翻译区中存在4段非常保守的富含AU的区域。将这些片段按照不同的组... 转录因子Sox2是脊椎动物早期发育中最早表达的神经系统特异性基因之一,同时在干细胞的维持中也起着关键作用。通过生物信息学分析,作者发现在脊椎动物Sox2mRNA3'非翻译区中存在4段非常保守的富含AU的区域。将这些片段按照不同的组合克隆到GFP和荧光素酶两种报告基因载体中,在非洲爪蟾胚胎和培养细胞中检测了这些片段对报告基因表达的影响。结果显示,Sox2的3'UTR可影响报告基因的表达水平,特别是其中的保守片段2可显著提高报告基因的表达水平,表明Sox23'非翻译区有可能参与Sox2表达的转录后调控。 展开更多
关键词 SOX2 3’非翻译区 转录后调控 非洲爪蟾
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Molecular cloning and characterization of a putative proline dehydrogenase gene in the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata 被引量:3
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作者 Pin-Jun Wan Dong Lu +4 位作者 Wen-Chao Guo Tursun Ahmat Lu Yang Li-Li Mu Guo-Qing Li 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期147-158,共12页
Leptinotarsa decemlineata adults exhibit a season-dependent activity. In spring, post-diapause beetles often fly a long distance from overwintering sites to potato fields. In summer and autumn, the flight ability is s... Leptinotarsa decemlineata adults exhibit a season-dependent activity. In spring, post-diapause beetles often fly a long distance from overwintering sites to potato fields. In summer and autumn, the flight ability is sharply reduced. Proline is the main energy substrate ofL. decemlineata during flight and proline dehydrogenase (ProDH) catalyzes the first step in proline catabolism. Here we identified a putative LdProDHgene; it had three cDNA isoforms which shared the same 5'UTR and coding region, but differed in the lengths of 3'UTRs (515, 1 092 and 1 242 bp for isoforms-1, -2 and -3, respectively). LdProDH encoded a 616 amino acid protein that showed high sequence similarity to ProDH-like proteins from other insect species. LdProDHwas expressed in the third and fourth instars larvae and adults, but not in pupae. Dietary ingestion of bacterially expressed LdProDH- dsRNA by adults significantly decreased its messenger RNA (mRNA) level, and caused an elevation of free proline content in the hemolymph. Further observation revealed that three canonical polyadenylation signals (AATAAA) were tandemly located in the 3'UTR of isoform-3. The first, second and third polyadenylation sites gave rise to isoforms-1, -2 and -3, respectively. Analysis of the genomic DNA uncovered that the three isoforms resulted from alternative polyadenylation. The mRNA level of isoform-1, which expressed at low levels in pre-diapause adults, became abundant in post-diapause beetles. It is indicated that the LdProDH expression is fine-tuned through 3'UTR to control proline catabolism for the season-dependent activity ofL. decemlineata adults. 展开更多
关键词 alternative polyadenylation ISOFORM RNA interference temporal expres-sion 3~utr
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Fine-tuning brassinosteroid biosynthesis via 3′UTR-dependent decay of CPD mRNA modulates wood formation in Populus
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作者 Dian Wang Xiaoning Hao +8 位作者 Li Xu Mengyan Zhao Congpeng Wang Xihao Yu Yingzhen Kong Mengzhu Lu Gongke Zhou Guohua Chai Xianfeng Tang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2023年第8期1852-1858,共7页
Brassinosteroids(BRs)are plant hormones that regulate wood formation in trees.Currently,little is known about the post-transcriptional regulation of BR synthesis.Here,we show that during wood formation,fine-tuning BR ... Brassinosteroids(BRs)are plant hormones that regulate wood formation in trees.Currently,little is known about the post-transcriptional regulation of BR synthesis.Here,we show that during wood formation,fine-tuning BR synthesis requires 3′UTR-dependent decay of Populus CONSTITUTIVE PHOTOMORPHOGENIC DWARF 1(PdCPD1).Overexpression of PdCPD1 or its 3′UTR fragment resulted in a significant increase of BR levels and inhibited secondary growth.In contrast,transgenic poplars repressing PdCPD13′UTR expression displayed moderate levels of BR and promoted wood formation.We show that the Populus GLYCINE-RICH RNA-BINDING PROTEIN1(PdGRP1)directly binds to a GU-rich element in 3′UTR of Pd CPD1,leading to its mRNA decay.We thus provide a post-transcriptional mechanism underlying BRs synthesis during wood formation,which may be useful for genetic manipulation of wood biomass in trees. 展开更多
关键词 Brassinsteroids biosynthesis CPD POPULUS RNABINDING PROTEIN 3'utr regulation
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伊比利亚猪和大白猪睾丸3'UTR组的比较分析
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作者 牟巧 杨雨薇 +2 位作者 陈璐 杜志强 杨彩侠 《湖南畜牧兽医》 2023年第5期23-29,共7页
真核生物信使RNA(message RNA,mRNA)的3'端非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)在转录后水平调控转录本的稳定性、运输、亚细胞定位和翻译等。3'UTR序列的变异,可引起基因的异常表达,导致疾病发生。转录组测序(RNA-s... 真核生物信使RNA(message RNA,mRNA)的3'端非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)在转录后水平调控转录本的稳定性、运输、亚细胞定位和翻译等。3'UTR序列的变异,可引起基因的异常表达,导致疾病发生。转录组测序(RNA-seq)极大地促进了对基因序列的理解,但缺乏对mRNA 3'UTR进行系统全面的分析。利用公开发表的伊比利亚猪和大白猪睾丸组织RNA-seq数据,通过DaPars软件分析了3'UTR有差异的mRNA并对其参与的信号通路进行了富集,对长度和测序短序列丰度差异大的mRNA 3'UTR进行了可视化分析,对显著差异mRNA 3'UTR中存在的胞质polyA成分(Cytoplasmic polyadenylation element,CPE)、polyA信号(polyadenylation signal,PAS)和microRNA结合位点的位置、个数和种类进行了预测分析。这些分析结果为进一步研究基于3'UTR的转录后基因表达调控提供了有价值的信息。 展开更多
关键词 RNA-SEQ MRNA 3'utr 转录后调控
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奶牛OLR1 3'UTR A223C多态的生物学信息分析 被引量:3
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作者 张传生 耿立英 +3 位作者 尹春光 曹顶国 刘铮铸 付志新 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第1期75-77,共3页
[目的]探索氧化型低密度脂蛋白受体OLR1 3'UTR A223C多态与奶牛乳脂率高低紧密关联的分子机制。[方法]用miRanda(1.0)软件装载牛microRNA数据库,预测OLR1 3'UTR潜在的microRNA。[结果]共预测16个microRNA靶标,OLR1 3'UTR A2... [目的]探索氧化型低密度脂蛋白受体OLR1 3'UTR A223C多态与奶牛乳脂率高低紧密关联的分子机制。[方法]用miRanda(1.0)软件装载牛microRNA数据库,预测OLR1 3'UTR潜在的microRNA。[结果]共预测16个microRNA靶标,OLR1 3'UTR A223C突变定位于bta-miR-370靶标种子序列的互补区。[结论]由于OLR1 3'UTR A→C突变导致bta-miR-370靶标的消失,为OLR1 3'UTR A223C多态与奶牛乳脂率高低紧密关联的分子机制深入研究提供依据。 展开更多
关键词 OLR1 3'utr mir-370 生物信息 MICRORNA
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miR-4295在鼻咽癌细胞增殖中的作用 被引量:3
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作者 钟文 肖烈钢 +2 位作者 易瑶 钟海林 谢栋 《热带医学杂志》 CAS 2019年第11期1343-1347,共5页
目的探讨miR-4295在鼻咽癌细胞发生发展及增殖过程中的作用及相关的分子机制。方法通过脂质体转染miR-4295 mimic,inhibitor及其NC到鼻咽癌细胞株6-10B,CNE2。分别应用MTT实验、软琼脂集落形成实验检测miR-4295对鼻咽癌细胞增殖能力的影... 目的探讨miR-4295在鼻咽癌细胞发生发展及增殖过程中的作用及相关的分子机制。方法通过脂质体转染miR-4295 mimic,inhibitor及其NC到鼻咽癌细胞株6-10B,CNE2。分别应用MTT实验、软琼脂集落形成实验检测miR-4295对鼻咽癌细胞增殖能力的影响;WB和QPCR方法检测miR-4295、细胞周期素D1(CyclinD1)、p21cip1、Rb、pRb在细胞中蛋白及mRNA的表达水平。通过Targetscan分析预测miR-4295与SOX9的3’UTR的结合情况,采用双荧光素酶报告实验检测miR-4295与SOX9的结合情况,同时采用WB检测细胞株中SOX9的表达。结果MTT、软琼脂集落形成实验均显示过表达miR-4295后鼻咽癌细胞增殖能力明显增强,细胞生长速率高于NC组,细胞集落形成个数多于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05);而miR-4295沉默后鼻咽癌细胞增殖能力明显降低,与NC-in组相比,差异有统计学意义(P<0.05);WB及QPCR结果显示:过表达miR-4295后,细胞周期蛋白CyclinD1表达升高而细胞周期抑制因子p21cip1下调;通过Targetscan预测发现miR-4295靶向结合SOX9的3’UTR,荧光素酶活性检测结果发现miR-4295过表达后荧光素酶活性明显低于NC组及突变组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-4295可通过抑制SOX9蛋白翻译从而促进鼻咽癌细胞增殖能力,并调节细胞周期相关蛋白,在鼻咽癌发生发展中扮演重要的角色。 展开更多
关键词 miR-4295 鼻咽癌 细胞增殖 3utr SOX9
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Race法扩增4株鸭肝炎病毒3′末端序列及其克隆分析 被引量:2
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作者 邵泽香 韦强 +3 位作者 崔言顺 鲍国连 刘燕 季权安 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期225-229,共5页
利用3’RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒(DHV)(ZYM株、Z05株、Z07株和Z10株)的基因组的3’末端真实序列,包括部分非结构蛋白(3D)基因以及紧接着3D基因下游的3’端非编码区(untranslated region,UTR)和poly(A)尾巴。测序... 利用3’RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒(DHV)(ZYM株、Z05株、Z07株和Z10株)的基因组的3’末端真实序列,包括部分非结构蛋白(3D)基因以及紧接着3D基因下游的3’端非编码区(untranslated region,UTR)和poly(A)尾巴。测序结果表明,扩增的特异性片段长度为597nt(不包括polyA尾巴)。各毒株3’UTR均为315nt,位于终止密码子TGA之后,比对分析结果表明各毒株间的同源性较高;4株DHV 3’末端核苷酸序列(不包括polyA尾巴)之间的同源性为96.3%~100%,而与参考毒株之间的同源性为93.5%~99.7%。在系统发生进化树上,各毒株亲缘关系较近。 展开更多
关键词 3’RACE 鸭病毒性肝炎病毒 序列比对分析 3’端非编码区 POLY(A)
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大鼠细胞外信号调节激酶1基因3'非编码区双荧光素酶报告载体的构建及rno-miR-15b-5p对其活性的影响
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作者 罗汉将 徐云峰 +2 位作者 李晓晓 杨予涛 徐志卿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第2期166-172,共7页
目的以大鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)基因3'非编码区(UTR)为研究对象,构建含有ERK1基因3'UTR区的野生型以及突变型重组双荧光素酶报告载体,通过分析双荧光素酶报告载体的活性,明确rno-miR-15b-5p对报告载体的调节作用。方法采... 目的以大鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)基因3'非编码区(UTR)为研究对象,构建含有ERK1基因3'UTR区的野生型以及突变型重组双荧光素酶报告载体,通过分析双荧光素酶报告载体的活性,明确rno-miR-15b-5p对报告载体的调节作用。方法采用miRNeasy Mini Kit提取大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的总RNA,以PC12细胞的c DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)将ERK1基因3'UTR克隆到pmiR-RB-Report^(TM) vector中。利用重叠延伸PCR,将ERK1基因3'UTR中的rno-miR-15b-5p潜在的靶序列TGCTGCT分别突变成CGAACGT和GTACACG,并将突变的ERK1基因3'UTR克隆到pmiR-RB-Report^(TM) vector中。结果成功构建了包含ERK1基因3'UTR区的野生型报告载体pmiR-ERK1 3'UTR和突变型报告载体pmiR-ERK1-mut 3'UTR。利用荧光素酶活性检测系统,发现rno-miR-15b-5p mimic可以降低野生型报告载体的活性(P<0.001),但不影响突变型报告载体的活性。结论成功构建ERK1基因3'UTR区野生型和突变型双荧光素酶报告载体,初步证明ERK1基因3'UTR区是rno-miR-15b-5p的结合靶点。 展开更多
关键词 rno-miR-15b-5p 细胞外信号调节激酶1 重叠延伸聚合酶链式反应 pmiR-ERK1 3'utr pmiR-ERK1-mut 3'utr 荧光素酶活性检测
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MiRNA-24、miRNA-34a和miRNA-375抑制小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中Neurod1/BETA2的蛋白表达 被引量:3
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作者 张许 朱云霞 韩晓 《医学分子生物学杂志》 CAS 2015年第4期197-201,共5页
目的在小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中分析miRNA-24、miRNA-34a和miRNA-375对Neurod1/BETA2的表达调控以及作用方式。方法设计并合成针对小鼠Neurod1基因3’非翻译区(3’untranslated region,3’UTR)序列的引物,克隆于pMIR-REPORT^TM... 目的在小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中分析miRNA-24、miRNA-34a和miRNA-375对Neurod1/BETA2的表达调控以及作用方式。方法设计并合成针对小鼠Neurod1基因3’非翻译区(3’untranslated region,3’UTR)序列的引物,克隆于pMIR-REPORT^TM荧光素酶报告基因载体中;用miranda软件预测可能调控Neurod1表达的miRNAs,挑选在B细胞中有相关功能研究的miRNAs并委托公司合成pre—miRNAs;脂质体法转染至MIN6细胞中。荧光素酶报告基因技术分析这些miRNA对Neurod1的作用;定量RT.PCR分析Neurod1的mRNA水平;Western印迹检测Neurod1的蛋白表达水平;GSIS检测干扰Neurod1后MIN6细胞的功能。结果成功制备小鼠Neurod1基因的3’UTR荧光素酶报告基因载体;选取了预测在Neurod1的3’UTR有互补结合位点的3个miRNAs(miRNA-24、miR-34a和miR.375),并挑选一个没有互补结合位点的miRNA(miR-29a)作为阴性对照;在MIN6细胞中过表达pre-miRNA-24、pre-miR-34a和pre-miR-375能够抑制Neurod1基因3’UTR荧光素酶报告基因的活性,而过表达阴性对照miRNA-29a则不能抑制其活性;pre—miRNA-24、pre-miR-34a和pre-miR-375还可以不同程度抑制Neumd1的蛋白表达;在MIN6细胞中干扰Neurod1蛋白表达能够降低细胞的GSIS功能。结论miRNA-24、miR-34a和miR-375能够抑制小鼠胰岛B细胞系MIN6细胞中Neurod1的蛋白表达。 展开更多
关键词 miRNA-24 miRNA-34a miRNA-375 Neurod1 3’非翻译区 胰岛Β细胞
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