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黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞CYP24A1,CYP27B1 mRNA和蛋白的影响 被引量：11
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作者 李倩 吴雍真 +5 位作者 管连城 高洁 李文 秦忠 陈云志 柴艺汇 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期49-55,共7页
目的:通过探讨不同浓度黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化过程中24-羟基化酶(CYP24A1),1α羟化酶(CYP27B1)mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其治疗原发性骨质疏松症作用机制。方法:将SD大鼠随机分为6组,正常组、模型组... 目的:通过探讨不同浓度黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化过程中24-羟基化酶(CYP24A1),1α羟化酶(CYP27B1)mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其治疗原发性骨质疏松症作用机制。方法:将SD大鼠随机分为6组,正常组、模型组、黄芪含药血清低、中、高质量分数组(20%,40%,60%),维生素D组。细胞增殖毒性检测(CCK-8)法检测不同浓度黄芪含药血清对衰老BMSCs成骨分化细胞存活率的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度黄芪含药血清对衰老BMSCs成骨分化细胞CYP24A1,CYP27B1 mRNA和蛋白的表达情况。结果:CCK-8法显示,与正常组比较,模型组BMSCs成骨分化细胞经D-半乳糖诱导后细胞增殖存活率显著降低(P<0.01);与模型组比较,黄芪含药血清中、高质量分数组及维生素D组均可在不同程度上提高衰老BMSCs成骨分化细胞增殖存活率(P<0.01);Real-time PCR和Western blot结果显示,与正常组比较,模型组CYP27B1 mRNA和蛋白相对表达量显著降低,CYP24A1 mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,黄芪高质量分数组均可升高CYP27B1 mRNA和蛋白相对表达量(P<0.01),降低CYP24A1 mRNA和蛋白相对表达量(P<0.01),呈质量分数依赖性。结论:不同浓度黄芪含药血清可治疗骨质疏松症,其机制可能与调节衰老骨髓间充质干细胞成骨分化过程中CYP24A1,CYP27B1 mRNA及蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 黄芪含药血清 骨质疏松 24-羟基化酶 1α羟化酶
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黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B,CYP24A mRNA及蛋白表达的影响 被引量：30
2
作者 柴艺汇 高洁 +5 位作者 田兴中 吴大梅 管连城 李静 李文 陈云志 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期147-151,共5页
目的：通过研究黄芪多糖对成骨细胞增殖及1α羟化酶（CYP27B）,24-羟基化酶（CYP24A）基因与蛋白表达情况的影响对其治疗骨质疏松症（OP）作用机制进行初步探讨。方法：以MC-3T3-E1成骨细胞为研究对象,实验分为5组,分别为正常组,维生素... 目的：通过研究黄芪多糖对成骨细胞增殖及1α羟化酶（CYP27B）,24-羟基化酶（CYP24A）基因与蛋白表达情况的影响对其治疗骨质疏松症（OP）作用机制进行初步探讨。方法：以MC-3T3-E1成骨细胞为研究对象,实验分为5组,分别为正常组,维生素D组（1×10-5mmol·L-1）,黄芪多糖高、中、低剂量组（10,1,0.1 mg·L（-1））。用噻唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的黄芪多糖在不同时间（24,36,48 h）对MC-3T3-E1成骨细胞增殖率的影响。实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B蛋白的表达情况。结果：MTT比色法显示黄芪多糖的质量浓度在0.1,1,10 mg·L（-1）时可以提高MC-3T3-E1成骨细胞的增殖率,且在48 h促增殖作用最佳。Real-time PCR,Western blot检测结果显示,与正常组比较,维生素D组MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B mRNA表达量、蛋白表达量有显著促进作用（P〈0.05）;与维生素D组比较,黄芪多糖在质量浓度为10,1,0.1 mg·L（-1）时对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A mRNA表达量、蛋白表达量有显著抑制作用（P〈0.05）。结论：黄芪多糖能够治疗骨质疏松症其机制与提高成骨细胞活性及调节MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA及蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 黄芪多糖 成骨细胞 24-羟基化酶(CYP24A) 1α羟化酶(CYP27B)
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