RUNX2在宫颈鳞癌组织中的表达及其siRNA对Hela229细胞RUNX2表达及细胞增殖与凋亡的影响 被引量：6

1

作者 张威 郭文涛 +1 位作者 曾宪旭 班振英 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第6期718-722,共5页

目的:探讨RUNX2蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达情况及RUNX2 siRNA对宫颈鳞癌Hela229细胞RUNX2基因表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:应用免疫组化技术检测50例宫颈鳞癌、30例宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及30例正常宫颈黏膜组织中RUNX... 目的:探讨RUNX2蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达情况及RUNX2 siRNA对宫颈鳞癌Hela229细胞RUNX2基因表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:应用免疫组化技术检测50例宫颈鳞癌、30例宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及30例正常宫颈黏膜组织中RUNX2蛋白的表达情况,并分析宫颈鳞癌组织中RUNX2蛋白表达与临床病理特征的关系。设计合成RUNX2 siRNA,通过脂质体将其转染至Hela229细胞,同时设立空白对照(不转染)和阴性对照(转染非特异性siRNA)细胞组。转染24、48、72 h后,采用MTT法检测各组细胞增殖,计算增殖抑制率;转染72 h后,采用RT-PCR及Western blot技术检测细胞中RUNX2 mRNA及蛋白的表达,采用流式细胞术检测细胞凋亡。结果:宫颈鳞癌组织中RUNX2阳性表达率高于HSIL及正常宫颈组织(P<0.001);宫颈鳞癌组织中RUNX2蛋白的表达与肿瘤的临床分期有关(P=0.004)。与空白对照组和阴性对照组比较,RUNX2 siRNA组Hela229细胞增殖抑制率、RUNX2 mRNA及蛋白的表达均降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:RUNX2基因的高表达与宫颈鳞癌细胞的增殖关系密切。 展开更多

关键词 宫颈癌 HELA 229细胞 RUNX2 RNA干扰 增殖 凋亡

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黄芪成分F3新制剂对人CCL-229、K562癌细胞的抑制作用 被引量：16

2

作者 赵莲华 李清 +1 位作者 陈咏梅 曹利力 《实用癌症杂志》 2003年第3期242-244,共3页

目的　研究黄芪成分F3新制剂对人大肠癌CCL -2 2 9,人红白血病K5 62细胞株的抑制作用。方法　实验分为F3单药组、联合用药组、顺铂组 ,另设空白对照组。应用四氮甲唑蓝 (MTT )实验观察细胞的生存、增殖状态 ;应用细胞形态学、基因组DNA... 目的　研究黄芪成分F3新制剂对人大肠癌CCL -2 2 9,人红白血病K5 62细胞株的抑制作用。方法　实验分为F3单药组、联合用药组、顺铂组 ,另设空白对照组。应用四氮甲唑蓝 (MTT )实验观察细胞的生存、增殖状态 ;应用细胞形态学、基因组DNA电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡。结果　一定浓度范围内的黄芪成分F3新制剂直接用药和联合用药均具有明显的生长抑制作用 ,透射电镜下可见凋亡细胞 ;基因组DNA电泳出现“阶梯状”条带 ;流式细胞仪分析出现低于G1期DNA含量的亚二倍体Apoptosis凋亡峰。 结论　黄芪成分F3新制剂对大肠癌CCL -2 2 9及人红白血病K 5 展开更多

关键词 大肠癌 红白血病 黄芪成分F3 生长抑制作用 CCL-229细胞 K562细胞

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三叶青水提物体内、体外抗肿瘤作用的研究 被引量：25

3

作者 丁丽 纪其雄 +1 位作者 吕雯婷 王玉连 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1076-1078,共3页

目的考察三叶青水提物体内、体外抗肿瘤的作用。方法应用中药血清药理学方法,制备三叶青水提物的含药血清。采用MTT法观察不同质量浓度三叶青水提物及其含药血清对人宫颈癌细胞Hela229和人恶性黑色素瘤细胞A375细胞的体外抑制作用;以小... 目的考察三叶青水提物体内、体外抗肿瘤的作用。方法应用中药血清药理学方法,制备三叶青水提物的含药血清。采用MTT法观察不同质量浓度三叶青水提物及其含药血清对人宫颈癌细胞Hela229和人恶性黑色素瘤细胞A375细胞的体外抑制作用;以小鼠S180肉瘤为模型,观察三叶青水提物在体内对肿瘤生长的抑制作用。结果三叶青水提物对Hela229和A375细胞有增殖抑制作用,且呈现出剂量依赖性,IC50分别为45.60 g/L和38.35 g/L;三叶青水提物含药血清高、中、低(20,10,5 g/kg)剂量组也可抑制Hela229和A375细胞的体外增殖,IC50分别为41.82 g/L和248.60 g/L,呈现出剂量依赖性;三叶青水提物在体内对小鼠S180肉瘤的生长具有一定的抑制作用,高、中、低(24,12,6 g/kg)剂量组的抑瘤率分别为28.24%、41.56%和6.00%。结论三叶青水提物体内、体外均具有抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 三叶青 水提物 抗肿瘤 含药血清 HELA229细胞 A375细胞 S180

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miR-9对人脑胶质瘤LN229细胞增殖的影响 被引量：8

4

作者 杜鹏 努尔艾合麦提江·牙力昆 +2 位作者 张晶晶 徐敬轩 木依提 《中华实用诊断与治疗杂志》 2020年第3期258-260,共3页

目的探讨miR-9对人脑胶质瘤LN229细胞增殖的影响及可能机制。方法对数生长期人脑胶质瘤LN229细胞,随机分为miR-9抑制剂组(转染30 mg/L miR-9小干扰RNA质粒5μL)、空白对照组(转染空载质粒)、乳酸脱氢酶A(labeling recombinant lactate d... 目的探讨miR-9对人脑胶质瘤LN229细胞增殖的影响及可能机制。方法对数生长期人脑胶质瘤LN229细胞,随机分为miR-9抑制剂组(转染30 mg/L miR-9小干扰RNA质粒5μL)、空白对照组(转染空载质粒)、乳酸脱氢酶A(labeling recombinant lactate dehydrogenase A,LDHA)激动剂组(转染30 mg/L miR-9小干扰RNA质粒5μL及4 mg/L LDHA激动剂5μL)。转染后培养48 h,3组采用CCK-8法检测细胞增殖率;实时荧光定量PCR法检测miR-9 mRNA、LDHA mRNA相对表达量;氧化酶法测定葡萄糖消耗量;比色测定法测定乳糖产量。结果转染后培养48 h,miR-9抑制剂组、空白对照组、LDHA激动剂组细胞增殖率吸光度值(0.60±0.01、0.90±0.02、1.15±0.05)依次增高(P<0.05);miR-9 mRNA相对表达量在miR-9抑制剂组(0.52±0.01)、LDHA激动剂组(0.53±0.01)低于空白对照组(1.67±0.01)(P<0.05),miR-9抑制剂组与LDHA激动剂组比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-9抑制剂组、空白对照组、LDHA激动剂组LDHA mRNA相对表达量(0.64±0.01、0.87±0.01、2.77±0.01)、葡萄糖消耗量[(0.02±0.01)、(0.36±0.01)、(0.77±0.01)nmol/L]、乳糖产量[(43.02±4.01)、(73.02±3.11)、(1562.00±5.44)nmol/L]均依次增高(P<0.05)。结论miR-9通过促进LDHA表达,增强肿瘤细胞有氧糖酵解,促进人脑胶质瘤LN229细胞增殖。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 MIR-9 乳酸脱氢酶A 细胞增殖 有氧糖酵解 LN229细胞

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基于TGFβ1介导的上皮-间充质转化探讨重楼皂苷Ⅰ抑制胶质母细胞瘤侵袭、迁移的分子机制

5

作者 张乘源 石雅馨 +3 位作者 张东 程彦昊 吴秀杰 衡雪源 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1687-1697,共11页

目的采用生物信息学与实验验证探究重楼皂苷I调控上皮-间充质转化(EMT)抑制胶质母细胞瘤(GBM)侵袭、迁移的作用机制。方法通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库筛选胶质母细胞瘤的差异表达基因(DEGs)并进行富集分析,探究其发病相关的作用机... 目的采用生物信息学与实验验证探究重楼皂苷I调控上皮-间充质转化(EMT)抑制胶质母细胞瘤(GBM)侵袭、迁移的作用机制。方法通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库筛选胶质母细胞瘤的差异表达基因(DEGs)并进行富集分析,探究其发病相关的作用机制。将预测得到的重楼皂苷I靶点与疾病的DEGs取交集,构建蛋白互作网络,筛选药物发挥治疗作用的关键靶点进行富集分析并通过分子对接进行验证,以明确重楼皂苷I治疗胶质母细胞瘤的潜在分子机制。基于以上生物信息学结果,进行体外实验验证。以不同浓度的重楼皂苷I分别干预人胶质母细胞瘤细胞系LN229和U251后,细胞增殖与细胞毒性检测法(CCK-8)检测细胞活性;Transwell实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Immunoblotting法检测转化生长因子β1(TGFβ1)、钙黏蛋白1(CDH1)、钙黏蛋白2(CDH2)、波形蛋白(VIM)的蛋白表达水平。通过基因表达谱交互分析数据库(GEPIA)分析胶质母细胞瘤与正常组织中CDH2、TGFβ1、VIM的表达差异,预测其对患者生存情况的影响。结果基于生物信息学蛋白互作分析,筛选出CDH1、CDH2和TGFβ1等7个关键靶点,富集分析发现与EMT生物过程及TGFβ信号通路关系密切。不同浓度的重楼皂苷I分别干预LN229与U251后细胞活性明显降低(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,重楼皂苷I可明显抑制LN229和U251细胞的侵袭(P<0.01)及迁移能力(P<0.05,P<0.01),下调TGFβ1、CDH2、VIM蛋白并上调CDH1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),呈剂量依赖效应(P<0.01)。GEPIA分析发现胶质母细胞瘤组织中CDH2、TGFβ1和VIM表达水平明显高于正常组织(P<0.05),其中TGFβ1和VIM的高表达可能是影响患者无病生存期的关键因素(P<0.05)。结论重楼皂苷I可通过TGFβ1介导的EMT进程,抑制LN229与U251细胞的侵袭与迁移能力,为临床精准治疗和中药小分子开发提供了新的研究方向与证据支持。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 重楼皂苷I 转化生长因子β1 上皮-间充质转化 LN229细胞 U251细胞 细胞侵袭 迁移 生物信息学

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Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的研究 被引量：5

6

作者 孙磊 刘雨清 +4 位作者 李小龙 刘菲 张丽娜 李洪利 张宝刚 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期551-554,共4页

目的:探讨Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测90例胶质瘤组织中ARK5及Gab2表达。采用小RNA干扰转染LN-229细胞株,Western Blot检测瞬时转染后ARK5及Gab2表达。体外侵袭实验检测转染后侵袭能力变化及... 目的:探讨Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测90例胶质瘤组织中ARK5及Gab2表达。采用小RNA干扰转染LN-229细胞株,Western Blot检测瞬时转染后ARK5及Gab2表达。体外侵袭实验检测转染后侵袭能力变化及Western Blot检测Gab2下降后Akt和ARK5的磷酸化。结果:胶质瘤组织中ARK5和Gab2免疫组织化学阳性结果呈正相关且在高级别胶质瘤(WHO分级为Ⅲ、Ⅳ级)中表达明显高于低级别胶质瘤(WHO分级为Ⅰ、Ⅱ级)。转染ARK5、Gab2、ARK5-Gab2及SCR质粒的LN-229细胞分别称siARK5/LN-229、siGab2/LN-229、siARK5-siGab2/LN-229和SCR/LN-229。其中siARK5干扰效率为70%,siGab2的干扰效率为75%。转染后,与SCR/LN-229相比,siARK5/LN-229中ARK5表达降低,siGab2/LN-229中Gab2表达降低,siARK5-siGab2/LN-229中ARK5和Gab2表达均降低。siARK5/LN-229和siGab2/LN-229侵袭并穿透Matrigel膜基质的细胞数均比对照组少(P<0.01),且siARK5-siGab2/LN-229细胞数减少更显著(P<0.01)。在IGF-1刺激下,siGab2/LN-229中Akt和ARK5的磷酸化减弱。结论:应用小RNA干扰技术降低ARK5或Gab2表达使LN-229细胞侵袭转移能力降低,同时Gab2表达降低抑制ARK5和Akt磷酸化,提示Gab2-Akt-ARK5通路参与胶质瘤细胞的侵袭。 展开更多

关键词 胶质瘤 ARK5 Gab2 LN-229细胞 小RNA干扰 侵袭

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萘醌类化合物抗肿瘤作用研究进展 被引量：4

7

作者 辛国松 曲中原 +2 位作者 邹翔 李钧 季宇彬 《中国药理通讯》 2010年第2期36-37,共2页

近年来，萘醌类化合物抗肿瘤作用备受国内外学者关注。本文通过查阅近期国内外文献，对萘醌类化合物的抗肿瘤作用进行综述。根据母体结构不同萘醌类化合物分为萘茜类（5，8-二羟基-1，4-萘醌）、1，4-萘醌类和1，2-萘醌类。萘茜类以紫... 近年来，萘醌类化合物抗肿瘤作用备受国内外学者关注。本文通过查阅近期国内外文献，对萘醌类化合物的抗肿瘤作用进行综述。根据母体结构不同萘醌类化合物分为萘茜类（5，8-二羟基-1，4-萘醌）、1，4-萘醌类和1，2-萘醌类。萘茜类以紫草素为代表。紫草素对人食道癌Ega109细胞、人胃癌SGC-7901细胞和人大肠癌CCL-229细胞等多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用，并诱导细胞凋亡，其机制可能是通过抑制Topo-I介导的。 展开更多

关键词 萘醌类化合物 抗肿瘤作用 人胃癌SGC-7901细胞 CCL-229细胞 诱导细胞凋亡 肿瘤细胞 人食道癌 抑制作用

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Cyclopamine对LN229细胞Nurr1基因表达的影响 被引量：4

8

作者 王迪 陈艳 +3 位作者 刘菲菲 冷水龙 龙大宏 洪乐鹏 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第5期539-542,共4页

目的探讨环巴胺(Cyclopamine)对恶性胶质瘤细胞株LN229帕金森相关基因Nurr1表达的影响。方法在脂多糖(LPS)刺激LN229细胞的条件下,运用实时定量PCR检测SHH通路基因PTCH、Gli1及Nurr1基因mRNA含量,Western Blotting检测LPS对LN229细胞Nu... 目的探讨环巴胺(Cyclopamine)对恶性胶质瘤细胞株LN229帕金森相关基因Nurr1表达的影响。方法在脂多糖(LPS)刺激LN229细胞的条件下,运用实时定量PCR检测SHH通路基因PTCH、Gli1及Nurr1基因mRNA含量,Western Blotting检测LPS对LN229细胞Nurr1蛋白表达的影响。进一步在Cyclopamine阻断Sonic Hedgehog(SHH)信号通路的条件下,实时定量PCR及Western Blotting检测Nurr1的mRNA含量及其蛋白的表达及下游炎症因子IL-1βmRNA的含量。结果 LPS刺激下LN229细胞SHH通路相关基因mRNA,及Nurr1 mRNA升高,Western Blot结果进一步证明LPS可以促进Nurr1蛋白表达。Cyclopamine阻断组与对照组比较,在转录水平和翻译水平明显促进了Nurr1基因表达升高,及下游炎症因子IL-1βmRNA的含量。结论 Cyclopamine对LN229细胞Nurr1表达的影响可能与帕金森发病过程中胶质细胞的活化有关。 展开更多

关键词 CYCLOPAMINE LN229细胞 NURR1

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siRNA沉默钙蛋白酶1对人脑胶质瘤细胞LN229增殖及侵袭的影响 被引量：2

9

作者 唐树军 胡峻华 +2 位作者 施登超 宁威海 吴科 《解剖学研究》 CAS 2023年第6期518-522,共5页

目的 探讨siRNA沉默钙蛋白酶1(CAPN1)对人脑胶质瘤细胞LN229增殖及侵袭的影响。方法 取人脑胶质瘤细胞LN229于37℃水浴中解冻后制备单细胞悬液,接种于细胞培养板中,融合度至90%左右,将siRNA系列、CAPN1 siRNA序列分别转染细胞,分为实验... 目的 探讨siRNA沉默钙蛋白酶1(CAPN1)对人脑胶质瘤细胞LN229增殖及侵袭的影响。方法 取人脑胶质瘤细胞LN229于37℃水浴中解冻后制备单细胞悬液,接种于细胞培养板中,融合度至90%左右,将siRNA系列、CAPN1 siRNA序列分别转染细胞,分为实验组(CAPN1 siRNA)与siRNA组,以未转染的细胞作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定LN229细胞中CAPN1 mRNA表达;采用MTT法测定LN229细胞增殖情况;采用Transwell小室测定LN229细胞侵袭及迁移情况;采用Western blot测定LN229细胞Bax、Bcl-2和CAPN1蛋白表达。结果 与对照组和siRNA组比较,实验组CAPN1 mRNA表达明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞增殖率明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞侵袭率明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞迁移数目明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞Bax蛋白表达灰度值明显升高,而Bcl-2和CAPN1蛋白表达灰度值明显降低(P<0.05)。而对照组和siRNA组CAPN1 mRNA表达、LN229细胞增殖率、LN229细胞侵袭率、LN229细胞迁移数目、Bax、Bcl-2和CAPN1蛋白表达灰度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 siRNA沉默CAPN1可抑制人脑胶质瘤细胞LN229增殖,抑制脑胶质瘤细胞侵袭和迁移,上调Bax表达及下调Bcl-2和CAPN1蛋白表达。 展开更多

关键词 钙蛋白酶1 人脑胶质瘤 SIRNA 增殖 侵袭 LN229细胞

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RNAi干扰脑胶质瘤CEP55表达对胶质瘤细胞LN229功能影响的相关性研究 被引量：3

10

作者 于震男 罗正祥 +6 位作者 赵鹏来 王瀚轩 杨纶先 章文斌 邹元杰 石磊 张岩松 《临床神经外科杂志》 CAS 2017年第2期86-90,共5页

目的探讨中心体相关蛋白55(CEP55)在胶质瘤组织及正常脑组织中的表达差异,以及通过RNAi技术敲低CEP55表达对胶质瘤细胞系LN229功能的影响。方法收集南京医科大学附属脑科医院25例胶质瘤手术标本及10例正常脑组织标本,采用实时荧光定量PC... 目的探讨中心体相关蛋白55(CEP55)在胶质瘤组织及正常脑组织中的表达差异,以及通过RNAi技术敲低CEP55表达对胶质瘤细胞系LN229功能的影响。方法收集南京医科大学附属脑科医院25例胶质瘤手术标本及10例正常脑组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测35例样本中CEP55的表达水平。通过siRNA敲低LN229细胞系中CEP55的表达后,采用细胞计数、划痕及Transwell实验检测其对细胞增殖、迁移及侵袭功能的影响。结果 CEP55在脑胶质瘤组织中的表达量明显高于正常脑组织。干扰CEP55的表达后,胶质瘤细胞LN229的功能明显降低。结论 CEP55在胶质瘤中高表达,并参与影响了胶质瘤细胞系LN229的增殖、迁移、侵袭功能。CEP55今后可能成为胶质瘤治疗的新靶点。 展开更多

关键词 中心体相关蛋白55 胶质瘤 LN229细胞 迁移 侵袭

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多柔比星叶酸隐形脂质体对HeLa229荷瘤裸鼠的抑瘤作用 被引量：3

11

作者 刘敏 潘俊 +2 位作者 姚明 周光兴 陆伟跃 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期97-101,共5页

考察多柔比星(1)叶酸隐形脂质体对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用。以pH梯度法分别制备了多柔比星叶酸隐形脂质体(1-FSL)和普通脂质体。比较两者在荷瘤裸鼠瘤旁给药后对瘤体动态变化趋势、瘤体组织病理学差异和瘤体中肿瘤细胞内DNA质量的... 考察多柔比星(1)叶酸隐形脂质体对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用。以pH梯度法分别制备了多柔比星叶酸隐形脂质体(1-FSL)和普通脂质体。比较两者在荷瘤裸鼠瘤旁给药后对瘤体动态变化趋势、瘤体组织病理学差异和瘤体中肿瘤细胞内DNA质量的影响等。结果表明,1-FSL对荷瘤裸鼠具有显著的抑瘤效果,1-FSL抑瘤率略高于普通脂质体,但两者抑瘤特性明显有别。 展开更多

关键词 叶酸隐形脂质体 多柔比星 HELA229细胞 体内抑瘤作用

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海星皂苷CN-3激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路诱导胶质瘤细胞焦亡的作用 被引量：2

12

作者 杜洋 邱鹏程 +5 位作者 王媛媛 郑淑娴 孙光强 陆云阳 薛玉叶 汤海峰 《环球中医药》 CAS 2022年第11期2022-2029,共8页

目的 研究海星皂苷面包海星3(Culcita novaeguineae-3,CN-3)诱导胶质瘤U251和LN229细胞焦亡的作用。方法 将胶质瘤U251和LN229细胞分别设置为空白对照组及CN-3低、高剂量组(3μM、6μM)。(1)细胞增殖测定(cell counting kit-8,CCK-8)法... 目的 研究海星皂苷面包海星3(Culcita novaeguineae-3,CN-3)诱导胶质瘤U251和LN229细胞焦亡的作用。方法 将胶质瘤U251和LN229细胞分别设置为空白对照组及CN-3低、高剂量组(3μM、6μM)。(1)细胞增殖测定(cell counting kit-8,CCK-8)法检测面包海星3(CN-3)抑制胶质瘤U251和LN229细胞增殖的给药剂量,分析CN-3对胶质瘤细胞的抑制率。(2)通过透射电镜比较空白对照组及CN-3低剂量组(3μM),观察CN-3诱导胶质瘤细胞膜形态学改变。(3)流式细胞术检测各组胶质瘤细胞焦亡细胞(Annexin V+/PI+表示焦亡细胞)比例、早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-表示早期凋亡细胞)比例。(4)蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)检测各组中CN-3诱导胶质瘤U251与LN229细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3)、剪切型胱天蛋白酶-1(Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Cleaved Caspase-1)、剪切型gasdermin D蛋白N端(Cleaved N-terminal-gasdermin D, Cleaved N-terminal-GSDMD)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果 CN-3呈剂量依赖性抑制U251和LN229细胞增殖;给药后胶质瘤细胞形态改变,局部出现气泡状凸起,细胞膜失去完整性,出现多个孔隙;流式检测表明CN-3可诱导胶质瘤细胞焦亡;与空白对照组相比,CN-3上调胶质瘤U251和LN229细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、Cleaved N-terminal-GSDMD、IL-1β的表达。结论 CN-3通过激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路诱导胶质瘤U251和LN229细胞焦亡。 展开更多

关键词 胶质瘤 海星皂苷 海星皂苷面包海星3 细胞焦亡 U251细胞 LN229细胞

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aFGF和genistein对大肠癌细胞株CCL229 PKC及ERK活性的影响 被引量：2

13

作者 尚海 张颐 单吉贤 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第9期1389-1391,共3页

目的:观察aFGF及TPK抑制剂genistein对大肠癌细胞株CCL229细胞内PKC及ERK活性的影响,探讨其信号传导途径.方法:以不同浓度的aFGF(0.15 mg/L,0.30 mg/L,0.60mg/L,1.20 mg/L)和genistein(6.00mg/L,12.00mg/L,24.00mg/L,48.00mg/L)诱导CCL... 目的:观察aFGF及TPK抑制剂genistein对大肠癌细胞株CCL229细胞内PKC及ERK活性的影响,探讨其信号传导途径.方法:以不同浓度的aFGF(0.15 mg/L,0.30 mg/L,0.60mg/L,1.20 mg/L)和genistein(6.00mg/L,12.00mg/L,24.00mg/L,48.00mg/L)诱导CCL229细胞,利用[γ-^(32)P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定PKC及ERK活性.结果:随着aFGF浓度的增加,PKC及ERK活性随之升高,与aFGF浓度呈显著正相关(P<0.05).当aFGF浓度为1.20mg/L时,PKC(胞质),PKC(胞膜)和ERK活性分别为对照组的2.60,2.79,1.77倍.genistein抑制细胞内PKC及ERK活性,且与 genistein 浓度呈剂量依赖效应(P<0.05).当genistein浓度为48.00mg/L时,PKC(胞质),PKC(胞膜)和ERK活性分别为对照组的0.41,0.36,0.50倍.genistein对aFGF诱导的PKC及ERK活性抑制更显著.结论:大肠癌细胞株CCL229中aFGF受体具有TPK活性,TPK激活后促进蛋白质和酶磷酸化,导致PKC和ERK活性升高,进一步证明PKC及ERK确是TPK的下游信号分子. 展开更多

关键词 AFGF GENISTEIN 大肠癌 CCL229细胞株 PKC ERK 细胞增生 有丝分裂

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NUSAP1在脑胶质瘤中的表达以及对胶质瘤细胞LN229功能的影响 被引量：2

14

作者 徐拓野 于震男 +3 位作者 赵鹏来 罗正祥 杨纶先 张岩松 《临床神经外科杂志》 CAS 2016年第2期122-126,共5页

目的探讨核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)在脑胶质瘤样本的高表达,以及沉默NUSAP1对胶质瘤细胞系LN229细胞功能的影响。方法收集南京医科大学附属脑科医院30例胶质瘤手术标本以及10例癫痫病灶手术样本,采用荧光实时定量(qRT-PCR)和Western ... 目的探讨核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)在脑胶质瘤样本的高表达,以及沉默NUSAP1对胶质瘤细胞系LN229细胞功能的影响。方法收集南京医科大学附属脑科医院30例胶质瘤手术标本以及10例癫痫病灶手术样本,采用荧光实时定量(qRT-PCR)和Western blot技术检测40例样本中NUSAP1的表达情况,用lentivirus和siRNA干扰LN229细胞系中NUSAP1表达后,采用CCK-8法、流式细胞仪法检测其对细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。结果 NUSAP1在胶质瘤组表达量明显高于癫痫组(对照)。NUSAP1表达被干扰后。脑胶质细胞LN229功能降低。结论 NUSAP1在脑胶质瘤中高表达,干扰其在LN229细胞株表达后,LN229增殖能力下降,细胞G2/M期停滞。提示NUSAP1可能成为一个新的胶质瘤治疗靶点。 展开更多

关键词 NUSAP1 脑胶质瘤 LN229细胞

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HeLa细胞系中核转录因子-κB与Bcl-2的表达 被引量：2

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作者 田卫红 田芳 +2 位作者 许培荣 刘红涛 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期74-77,共4页

目的:分析宫颈鳞癌HeLa229细胞中核转录因子(NF-κB)的激活状态及其与抗凋亡基因Bcl-2表达的相关性。方法:采用免疫细胞化学法和Western Blot法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中NF-κB亚单位p50和p65及其下游调控基因Bcl-2的蛋白表达,RT-PCR... 目的:分析宫颈鳞癌HeLa229细胞中核转录因子(NF-κB)的激活状态及其与抗凋亡基因Bcl-2表达的相关性。方法:采用免疫细胞化学法和Western Blot法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中NF-κB亚单位p50和p65及其下游调控基因Bcl-2的蛋白表达,RT-PCR法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中p50和p65 mRNA的表达。EMSA法检测HeLa229细胞核中NF-κB与DNA的结合活性。结果:宫颈鳞癌HeLa229细胞质中NF-κB的亚单位p50和p65均有表达,p50/p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。RT-PCR结果表明,p50和p65的mRNA在细胞质中也存在表达,并且在HeLa229细胞中也检测到Bcl-2蛋白的表达。结论:在宫颈鳞癌HeLa229细胞中存在有NF-κB及其下游基因Bcl-2的表达,提示激活的NF-κB信号通路可能在宫颈鳞癌发生发展及抗凋亡中起重要作用。 展开更多

关键词 HeLa229细胞株 核转录因子-ΚB BCL-2

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肺炎衣原体感染检查方法的进展 被引量：1

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作者 施毅 《南京部队医药》 1995年第6期67-70,共4页

肺炎衣原体是80年代发现的一种新的人类急性呼吸道感染致病原。近年来,对它的检查方法有了很大的进展。本文就分离培养技术、血清微量免疫荧光抗体检测、直接免疫荧光试验、酶免疫试验、核酸探针和多聚酶链反应等技术作一综述。 肺炎衣... 肺炎衣原体是80年代发现的一种新的人类急性呼吸道感染致病原。近年来,对它的检查方法有了很大的进展。本文就分离培养技术、血清微量免疫荧光抗体检测、直接免疫荧光试验、酶免疫试验、核酸探针和多聚酶链反应等技术作一综述。 肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)是近年来发现的一种新的人类急性呼吸道感染的重要致病原,它广泛分布于世界各地。 展开更多

关键词 肺炎衣原体感染 chla 衣原体属 检查方法 HELA229细胞 鹦鹉热衣原体 Chla HL细胞 种特异性 MOMP基因

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沙眼衣原体感染细胞抗凋亡及Bim的表达 被引量：1

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作者 杨志英 欧录明 +2 位作者 方会龙 陈福春 余平 《中国民康医学》 2008年第7期615-617,622,共4页

目的:研究沙眼衣原体(D血清型)感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达及抵抗凋亡的情况。方法:Western-blot检测沙眼衣原体感染和未感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达水平。凋亡诱导剂etoposide作用Hela229细胞后,琼脂糖凝胶电泳检测DNA Lad... 目的:研究沙眼衣原体(D血清型)感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达及抵抗凋亡的情况。方法:Western-blot检测沙眼衣原体感染和未感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达水平。凋亡诱导剂etoposide作用Hela229细胞后,琼脂糖凝胶电泳检测DNA Ladder带;流式细胞仪检测凋亡率。结果:Hela229细胞在未感染沙眼衣原体时可检测到Bim的表达;在感染24小时、48小时后均未检测到Bim的表达。经etoposide作用后,未感染的Hela229细胞检测到DNALadder带;流式细胞仪检测的凋亡率为90.64%。感染24小时的Hela229细胞,未检测到DNA Ladder带;凋亡率为11.50%,与未感染的Hela229细胞诱导后的凋亡率比较有统计学意义(P<0.05)。结论:沙眼衣原体感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达下降;并能抵抗etoposide诱导的细胞凋亡。 展开更多

关键词 沙眼衣原体(D血清型) HELA229细胞 BIM 细胞凋亡

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索拉菲尼对人神经胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

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作者 魏亮 张军峰 孟喜君 《解剖科学进展》 2016年第2期172-175,共4页

目的探究索拉菲尼对人脑神经胶质瘤LN229细胞增殖和凋亡的影响,为临床应用提供一定的理论基础。方法体外培养LN229细胞,用CCK8法检测LN229细胞增殖、TUNEL法检测LN229细胞凋亡,Western blot技术检测Cyclin D1、caspase-3、p-ERK1/2、ERK... 目的探究索拉菲尼对人脑神经胶质瘤LN229细胞增殖和凋亡的影响,为临床应用提供一定的理论基础。方法体外培养LN229细胞,用CCK8法检测LN229细胞增殖、TUNEL法检测LN229细胞凋亡,Western blot技术检测Cyclin D1、caspase-3、p-ERK1/2、ERK1/2表达。结果索拉菲尼可以明显降低人脑神经胶质瘤LN229细胞活力,降低Cyclin D1和pro-caspase-3表达水平,提高TUNEL阳性率,抑制ERK1/2磷酸化。结论索拉菲尼抑制LN229细胞增殖可能与调节MAPK信号通路相关。 展开更多

关键词 索拉菲尼 人脑神经胶质瘤LN229细胞 CYCLIN D1 ERK1/2

原文传递

反义核酸对人大肠癌CCL229细胞侵袭力的抑制作用 被引量：2

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作者 金英姬 宋今丹 《实验生物学报》 CSCD 2000年第1期21-26,共6页

为观察反义寡核苷酸(asODN)对培养的高侵袭性人大肠癌CCL229细胞侵袭性的抑制作用,针对尿激酶型纤溶酶原激活物受体(re-ceptor of uPAR)mRNA的翻译起始区,合成了一段反义寡核苷酸(asODN),用脂质体将其导入培养的CCL229细胞中,通过逆转录... 为观察反义寡核苷酸(asODN)对培养的高侵袭性人大肠癌CCL229细胞侵袭性的抑制作用,针对尿激酶型纤溶酶原激活物受体(re-ceptor of uPAR)mRNA的翻译起始区,合成了一段反义寡核苷酸(asODN),用脂质体将其导入培养的CCL229细胞中,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术、羊膜侵袭试验测定uPAR mRNA水平、细胞表面uPAR抗原表达及细胞侵袭力的变化,并在扫描电镜下观察细胞的形态改变。结果为:(1)RT-PCR检测asODNs组uPAR/β-actin比值为0.44±0.02,与对照组(0.81±0.01)相比,显著降低(P<0.05);(2)流式细胞术检测asODNs组癌细胞表面与uPA结合的受体和总受体的平均荧光指数分别为0.20±0.07、0.59±0.09,与对照组(分别为0.72±0.12、2.21±0.36)比较,明显下降(P<0.01,P<0.05);(3)体外侵袭试验结果,asODN组在48h和72h后穿过羊膜的细胞数分别为12±2、20±3,与对照组(分别为25±4、44±5)相比,明显减少;(4)扫描电镜观察表明细胞经asODNs作用后,表面伪足和针状突起明显减少。以上各指标在随机序列寡核苷酸(rODN)组和对照组相比,无明显变化。CCL229细胞表面uPAR的表达与癌细胞的侵袭力密切相关,asODNs能有效抑制CCL229细胞uPAR基因的表达,从而抑制相关的蛋白质合成,降低其侵袭性,实验结果在癌症的基因治疗上将具有一定意义。 展开更多

关键词 反义核酸 CCL229细胞 肿瘤侵袭 抑制作用 UPAR

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克霉唑诱导人结肠癌细胞CCL229凋亡的实验研究 被引量：1

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作者 赵欣 宋今丹 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第6期630-635,共6页

背景与目的:国外有研究表明克霉唑可通过持续耗竭细胞内钙库来抑制肿瘤细胞生长。本研究旨在研究克霉唑诱导人结肠癌细胞凋亡的作用。方法:将不同浓度的克霉唑作用于体外培养的人结肠癌CCL229细胞。利用荧光显微镜、电子显微镜观察细胞... 背景与目的:国外有研究表明克霉唑可通过持续耗竭细胞内钙库来抑制肿瘤细胞生长。本研究旨在研究克霉唑诱导人结肠癌细胞凋亡的作用。方法:将不同浓度的克霉唑作用于体外培养的人结肠癌CCL229细胞。利用荧光显微镜、电子显微镜观察细胞的形态变化,流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体比例,并利用TUNEL法进行凋亡的分子生物学检测。结果:25～35μmol/L的克霉唑均可诱导CCL229细胞凋亡,其诱导作用表现为时间和剂量依赖性。荧光显微镜及电镜下观察到凋亡小体形成等典型的形态学改变。DNA直方图上显示亚二倍体峰,亚二倍体比例随剂量及时间的增加而增加。相应地,G1期细胞比例下降。TUNEL法观察到棕褐色着染的凋亡阳性细胞。结论:克霉唑对人结肠癌细胞系CCL229有明显的凋亡诱导作用,并且能特异地诱导G1期细胞凋亡。 展开更多

关键词 克霉唑 诱导 结肠癌 细胞凋亡 细胞周期 CCL229细胞

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