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苯酚降解菌红球菌PNAN5菌株(Rhodococcussp.strain PNAN5)的分离鉴定、降解特性及其开环双加氧酶性质研究 被引量:62
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作者 沈锡辉 刘志培 +1 位作者 王保军 刘双江 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期482-486,共5页
分离到一株能以苯酚、苯甲酸、对甲酚、萘为唯一碳源和能源生长、具有同时降解单环和双环芳烃能力的细菌菌株,经生理生化、16SrRNA基因序列分析等鉴定为红球菌PNAN5菌株(Rhodococcussp.strainPNAN5).在实验条件下和在温度为20~40℃、pH... 分离到一株能以苯酚、苯甲酸、对甲酚、萘为唯一碳源和能源生长、具有同时降解单环和双环芳烃能力的细菌菌株,经生理生化、16SrRNA基因序列分析等鉴定为红球菌PNAN5菌株(Rhodococcussp.strainPNAN5).在实验条件下和在温度为20~40℃、pH7 0~9 0范围内菌株PNAN5降解苯酚的效率保持在80%~100%之间,苯酚浓度在2~10mmol·L-1范围内变化对降解效率没有明显的影响.该菌株通过邻苯二酚1,2 双加氧酶催化的开环途径降解芳烃,不同于已知的浑浊红球菌(R.opacus)是通过邻苯二酚2,3 双加氧酶催化芳烃降解.以细胞裂解液测定该酶的酶促反应动力学常数Km值为35 94μmol·L-1,Vmax为0 84μmol·L-1·min-1·mg-1. 展开更多
关键词 苯酚 PNAN5 菌株 红球菌属 邻苯二酚1 2-双加氧酶 细胞裂解液 污泥 污水处理工艺
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一株苯酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解 被引量:24
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作者 贺强礼 刘文斌 +3 位作者 杨海君 彭晓霞 关向杰 黄水娥 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期112-123,共12页
从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到一株能以苯酚为唯一碳源和能源生长的菌株YH8.基于形态特征、生理生化特性、BIOLOG细菌自动鉴定系统、16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析鉴定菌株YH8,鉴定菌株YH8为Acinetobacter guilloui... 从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到一株能以苯酚为唯一碳源和能源生长的菌株YH8.基于形态特征、生理生化特性、BIOLOG细菌自动鉴定系统、16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析鉴定菌株YH8,鉴定菌株YH8为Acinetobacter guillouiae.在苯酚浓度低于1200 mg·L-1,温度为26~34℃,pH为7.0~10.0时,菌株YH8培养60 h对苯酚的降解率达70%以上.运用单因素实验初步确定苯酚降解的最适外加碳源和氮源分别为山梨醇和NaNO3,最适温度为30℃,最适初始pH为9.0,最适接种量为5%.为了提高菌株YH8的降解率,首先利用Plackett-Burman实验设计评估并筛选出影响苯酚降解的3个关键因素为初始pH、苯酚浓度、山梨醇浓度.用最陡爬坡实验逼近以上3个因子的最大响应区域,采用Box-Behnken实验设计及响应面法分析,确定其最优降解条件为初始pH 9.26、苯酚浓度1163.63 mg·L-1、山梨醇浓度7.81%、接种量5%、NaNO3浓度2%、温度30℃、培养时间96 h,在此条件下苯酚降解率可达98.95%.苯酚降解酶活性及酶定域实验表明,菌株YH8相关降解酶为胞内酶,且苯酚可诱导苯酚羟化酶(LmPH)和邻苯二酚1,2-双加氧酶(C(12)O)的合成.通过降解酶特异性引物从菌株YH8扩增得到LmPH和C12O基因片段,经质粒检测和消除实验发现菌株YH8相关降解基因位于质粒上.此外,菌株YH8能耐受高浓度NaCl和多种重金属离子,对多种抗生素具有抗性. 展开更多
关键词 苯酚 ACINETOBACTER guillouiaeYH8 响应面法 GYRB 邻苯二酚1 2-双加氧酶 质粒
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一株苯胺降解菌的分离鉴定及其降解特性 被引量:16
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作者 张逸飞 顾挺 +1 位作者 王国祥 钟文辉 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期12-15,36,共5页
为研究苯胺污染的生物控制,通过驯化培养,从南京化工厂污水处理厂的活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌——菌株AN4。生理生化试验鉴定菌株AN4为金黄杆菌属(Chryseobacterium sp.)。菌株AN4利用苯胺生长和降解苯胺的最适温度为30℃、pH... 为研究苯胺污染的生物控制,通过驯化培养,从南京化工厂污水处理厂的活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌——菌株AN4。生理生化试验鉴定菌株AN4为金黄杆菌属(Chryseobacterium sp.)。菌株AN4利用苯胺生长和降解苯胺的最适温度为30℃、pH为7.0,它可在苯胺质量浓度低于3000mg/L的无机盐固体培养基上生长。菌株AN4除可降解苯胺外,还可以苯酚、苯甲酸、硝基苯、甲苯、萘、氯苯、二甲苯作为唯一碳源生长,蛋白胨可加速其对苯胺的代谢。代谢机制研究证实,菌株AN4在邻苯二酚1,2-双加氧酶作用下经邻位裂解途径降解苯胺。 展开更多
关键词 苯胺 代谢 邻苯二酚1 2-双加氧酶 金黄杆菌属
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苯酚降解菌株GXY-1分离鉴定、降解及其粗酶特性研究 被引量:14
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作者 周集体 关晓燕 +3 位作者 曲媛媛 李昂 苟敏 艾芳芳 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期340-345,共6页
从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株GXY-1.通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株GXY-1属于布鲁氏杆菌属(Brucella sp.).实验结果表明,菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感,其降解... 从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株GXY-1.通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株GXY-1属于布鲁氏杆菌属(Brucella sp.).实验结果表明,菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感,其降解苯酚的最佳条件为温度30℃,pH7.0.在最佳条件下,GXY-1对600mg/L苯酚的降解率在60h时达99%以上.同时GXY-1还可以利用苯胺、萘、氯苯等芳香化合物为唯一碳源生长.测定了降解途径中相关酶的活性,表明菌株GXY-1是通过邻苯二酚1,2双加氧酶催化开环来降解苯酚.该菌株粗酶的最适反应pH为7.8,最适反应温度为40℃. 展开更多
关键词 苯酚 生物降解 布鲁氏杆菌 邻苯二酚1 2双加氧酶
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1株对叔丁基邻苯二酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解 被引量:12
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作者 贺强礼 刘文斌 +3 位作者 杨海君 彭晓霞 关向杰 黄水娥 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期2695-2706,共12页
从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到1株能以对叔丁基邻苯二酚(p-tert-Butylcatechol,TBC)为唯一碳源和能源生长的菌株YH1.经形态特征、生理生化、BIOLOG细菌自动鉴定系统和16S r DNA序列分析,鉴定菌株YH1为皱纹假单胞菌(Pseu... 从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到1株能以对叔丁基邻苯二酚(p-tert-Butylcatechol,TBC)为唯一碳源和能源生长的菌株YH1.经形态特征、生理生化、BIOLOG细菌自动鉴定系统和16S r DNA序列分析,鉴定菌株YH1为皱纹假单胞菌(Pseudomonas corrugate).在温度为24~36℃,p H为7.0~10.0的条件下,菌株YH1可使浓度低于500 mg·L-1的TBC降解率达到82%以上.运用单因素实验初步确定TBC降解的最适外加碳源和氮源分别为蔗糖和胰蛋白胨,最适温度为30℃,最适初始p H为7.0,最适接种量为2%.为了提高降解率,首先利用Plackett-Burman实验设计评估并筛选出影响TBC降解的3个关键因素:蔗糖、胰蛋白胨、初始p H.用最陡爬坡实验逼近以上3个因子的最大响应区域,采用Box-Behnken实验设计及响应面法分析,确定其最优降解条件为蔗糖浓度3%(ρ)、胰蛋白胨浓度1.44%(ρ)、TBC浓度400 mg·L-1、初始p H值8.12、接种量2.97%(φ)、温度30℃、培养时间96 h,在此条件下TBC降解率可达98.21%.TBC降解酶活性及酶定域实验表明,菌株YH1相关降解酶为胞内酶,且TBC可诱导邻苯二酚1,2双加氧酶(C12O)的合成.通过降解酶特异性引物从菌株YH1扩增得到C12O基因片段,经质粒检测和消除实验发现菌株YH1相关降解基因位于质粒上.此外,菌株YH1能耐受高浓度Na Cl和多种重金属离子,对多种抗生素具有抗性.研究结果为有效处理复杂工业废水提供了理论基础. 展开更多
关键词 对叔丁基邻苯二酚(TBC) PSEUDOMONAS corrugate YH1 响应面法 邻苯二酚1
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萘降解细菌的分离及其降解和转座基因的分子检测 被引量:5
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作者 蔡宝立 丁蕊 +3 位作者 任河山 雷虹 严冰 赵化冰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1-6,共6页
用富集培养法,从工业废水和活性污泥中分离到9个高效降解萘的细菌菌株(ND7~ND15).对菌株ND7、ND8、ND9和ND10所进行的16SrDNA序列分析表明,它们都属于假单胞菌属(Pseudomonas).PCR实验结果表明,上述4个菌株都含有蔡降解基因na... 用富集培养法,从工业废水和活性污泥中分离到9个高效降解萘的细菌菌株(ND7~ND15).对菌株ND7、ND8、ND9和ND10所进行的16SrDNA序列分析表明,它们都属于假单胞菌属(Pseudomonas).PCR实验结果表明,上述4个菌株都含有蔡降解基因nahAc、nahG、nahH和catA,ND7和ND8菌株还含有萘降解基因nahU.DNA杂交实验结果表明,上述9个萘降解菌株都含有转座酶基因tnpA1和解体酶基因tnpR.这些结果表明,萘降解细菌的降解基因和转座基因具有高度的保守性.酶学实验证明,ND7、ND8、ND9和ND10菌株都具有儿茶酚1,2-双加氧酶活力和儿萘酚2,3-双加氧酶活力,但在不同菌株中这两种酶的比活力有明显不同. 展开更多
关键词 假单胞菌 萘降解基因 转座酶基因tnpAl 解体酶基因tnpR 儿茶酚1 2-双加氧酶 儿茶酚2 3-双加氧酶
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降解1,2,4-三氯苯的硝基还原假单胞菌J5-1的分离鉴定和邻苯二酚1,2-双加氧酶基因的克隆 被引量:7
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作者 宋蕾 王慧 +2 位作者 姜健 高静思 施汉昌 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1878-1881,共4页
从受氯苯污染的土壤中分离到1株以1,2,4-三氯苯为唯一碳源生长的细菌,命名为J5-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No.EF107515)序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens).当1,2,4... 从受氯苯污染的土壤中分离到1株以1,2,4-三氯苯为唯一碳源生长的细菌,命名为J5-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No.EF107515)序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens).当1,2,4-三氯苯初始浓度为400 mg/L时,J5-1对其最大降解率接近90%;当1,2,4-三氯苯浓度初始为20 mg/L时,降解效果最好.J5-1对1,2,4-TCB的降解服从一级反应动力学.从J5-1的基因组DNA中克隆到CC12O的全长序列. 展开更多
关键词 硝基还原假单胞菌J5-1 1 2 4-三氯苯 生物降解 降解动力学 氯代邻苯二酚1 2-双加氧酶
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苯胺降解菌的分离鉴定及其降解特性研究 被引量:7
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作者 王薇 张逸飞 +1 位作者 顾挺 钟文辉 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期964-969,共6页
通过驯化培养,从活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌,命名为菌株AN5。对该菌株进行了鉴定及降解特性研究。结果表明,分离菌株呈革兰氏染色阳性,细胞为球状或短杆状,菌落颜色呈橙红色。菌株AN5除可降解苯胺外,还可以苯酚、苯甲酸、萘为... 通过驯化培养,从活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌,命名为菌株AN5。对该菌株进行了鉴定及降解特性研究。结果表明,分离菌株呈革兰氏染色阳性,细胞为球状或短杆状,菌落颜色呈橙红色。菌株AN5除可降解苯胺外,还可以苯酚、苯甲酸、萘为惟一碳源生长。它的部分长度16SrDNA序列分析表明,分离菌株AN5与嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans)的16SrDNA序列具有99%相似性。实验采用PAUP4.0软件包最大似然法对该菌株与相关菌进行系统发生分析。菌株AN5耐受苯胺的最高浓度可达5000mg·L-1。投加蛋白胨可以加速菌株对苯胺的降解。代谢机理研究证实,菌株AN5在邻苯二酚-1,2-双加氧酶作用下经邻位裂解途径降解苯胺。 展开更多
关键词 苯胺降解菌 红球菌属 系统发生分析 邻苯二酚-1 2-双加氧酶
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Burkholderia sp.IDO3对粪臭素的响应及下游代谢基因
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作者 李玉洁 张佳鑫 +1 位作者 王彩红 马桥 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期579-585,共7页
粪臭素是一种具有强烈粪臭味的氮杂环芳烃污染物,广泛存在于动物肠道、粪便、垃圾填埋场和海洋等环境介质中,较为稳定且难以降解.以Burkholderia sp.IDO3为研究对象,系统研究菌株在粪臭素压力下的生理生化响应,并利用RT-qPCR和异源表达... 粪臭素是一种具有强烈粪臭味的氮杂环芳烃污染物,广泛存在于动物肠道、粪便、垃圾填埋场和海洋等环境介质中,较为稳定且难以降解.以Burkholderia sp.IDO3为研究对象,系统研究菌株在粪臭素压力下的生理生化响应,并利用RT-qPCR和异源表达技术探究下游降解功能基因.结果显示,粪臭素对Burkholderia sp.IDO3最小抑制浓度为1.5mmol/L;粪臭素促进菌膜形成和提高菌株表面疏水性,且呈剂量依赖性.氧化应激实验表明粪臭素提高Burkholderia sp.IDO3的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,抑制菌株脂质过氧化(丙二醛)以及还原型谷胱甘肽含量.结合前期组学分析推测邻苯二酚1,2-双加氧酶基因(DCN14_04105)可能为下游代谢关键基因,RT-qPCR实验表明该基因在粪臭素压力下上调3.70倍.将该基因在大肠杆菌中表达并获得纯酶,结果表明该酶最适pH为8.5,最适温度为30℃,Zn^(2+)、Co^(2+)、Cd^(2+)、Se4+、Sn^(2+)、Ca^(2+)对其具有抑制作用,Km值为25.98μmol/L,kcat值为10.70 s-1.本研究表明粪臭素影响了Burkholderia sp.IDO3菌株的生理生化性能,菌株代谢粪臭素中心代谢途径为邻苯二酚1,2-双加氧酶途径.该结果可为粪臭素的高效降解提供新的微生物资源,也为粪臭素的功能研究提供参考.(图7表1参30) 展开更多
关键词 粪臭素 伯克霍尔德菌 功能响应 生物降解 邻苯二酚1 2-双加氧酶
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粪便微生物宏基因组来源的热稳定性邻苯二酚1,2-双加氧酶异源表达及酶学性质 被引量:5
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作者 邓梦 杨正凤 +10 位作者 黄遵锡 戴利铭 沈骥冬 李俊俊 唐湘华 慕跃林 周峻沛 丁俊美 韩楠玉 吴倩 许波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1947-1957,共11页
【目的】克隆倭蜂猴粪便微生物宏基因组的邻苯二酚1,2-双加氧酶基因cat PLCgl,并对该酶进行异源表达及酶学特性研究。【方法】利用宏基因组高通量测序技术获得cat PLCgl,并对其氨基酸序列进行分析。将cat PLCgl重组到载体p EASY-E2中并... 【目的】克隆倭蜂猴粪便微生物宏基因组的邻苯二酚1,2-双加氧酶基因cat PLCgl,并对该酶进行异源表达及酶学特性研究。【方法】利用宏基因组高通量测序技术获得cat PLCgl,并对其氨基酸序列进行分析。将cat PLCgl重组到载体p EASY-E2中并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,研究其酶学性质。【结果】cat PLCgl全长852 bp,G+C含量48%,编码283个氨基酸,理论分子量为33.56 k D。重组Cat PLCgl酶学性质分析显示最适作用p H为7.0,其中在p H 7.0–10.0范围内处理1 h后,酶活剩余90%以上;最适作用温度为40°C,在25°C和40°C条件下稳定性较好,耐受210 h酶活性几乎不变。重组酶在最适条件下的动力学参数K_m、V_(max)和k_(cat)分别为24.9μmol/L、8.3 mmol/(min·g)和13.7 s^(-1);Fe^(2+)、Hg^(2+)、Cu^(2+)、Triton X-100、SDS、Ag+强烈抑制该酶活性,而其它金属离子及有机试剂影响较小。【结论】从倭蜂猴粪便微生物宏基因组中克隆得到邻苯二酚1,2-双加氧酶基因cat PLCgl,并对重组Cat PLCgl酶学性质进行研究,该酶具有较好的热稳定性和耐碱性,在降解环境中的邻苯二酚和生产顺,顺-己二烯二酸方面具有应用潜力。 展开更多
关键词 邻苯二酚1 2-双加氧酶 粪便微生物宏基因组 异源表达 热稳定性
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恶臭假单胞菌ND6菌株catA基因的克隆和表达及其儿茶酚裂解途径探讨 被引量:3
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作者 赵化冰 陈威 蔡宝立 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期387-391,共5页
恶臭假单胞菌ND6菌株的萘降解质粒pND6-1中编码儿茶酚1,2-双加氧酶的catA基因在大肠杆菌中进行了克隆和表达,并研究表达产物的酶学性质。结果表明:酶的Km为0.019μmol/L,Vmax为1.434μmol/(min.mg);具有很好的耐热性,在50℃保温45min后... 恶臭假单胞菌ND6菌株的萘降解质粒pND6-1中编码儿茶酚1,2-双加氧酶的catA基因在大肠杆菌中进行了克隆和表达,并研究表达产物的酶学性质。结果表明:酶的Km为0.019μmol/L,Vmax为1.434μmol/(min.mg);具有很好的耐热性,在50℃保温45min后仍能够保留酶活力的93.7%;Fe2+对酶活性有显著的促进作用,其比活力是对照反应的292%;酶对4-氯儿茶酚的催化活性非常低,属于Ⅰ型儿茶酚1,2-双加氧酶。以萘为底物生长时,ND6菌株的细胞提取液中既存在催化邻位裂解途径的儿茶酚1,2-双加氧酶活性,也存在催化间位裂解途径的儿茶酚2,3-双加氧酶活性。以苯甲酸、对羟基苯甲酸和苯乙酸为唯一碳源生长时,ND6菌株细胞提取液的儿茶酚1,2-双加氧酶活性远远大于儿茶酚2,3-双加氧酶活性。表明ND6菌株既能通过儿茶酚间位裂解途径降解萘,也能通过儿茶酚邻位裂解途径降解萘,而以苯甲酸、对羟基苯甲酸和苯乙酸为诱导物时只利用儿茶酚邻位裂解途径。 展开更多
关键词 恶臭假单胞菌ND6 儿茶酚1 2-双加氧酶 catA 儿茶酚邻位裂解途径
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倭蜂猴粪便微生物苯酚羟化酶和邻苯二酚1,2-双加氧酶基因多样性研究 被引量:4
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作者 熊彩云 许波 +7 位作者 戴利铭 李俊俊 唐湘华 慕跃林 杨云娟 周峻沛 丁俊美 黄遵锡 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2189-2197,共9页
【目的】分析倭蜂猴粪便微生物中苯酚羟化酶(Phenol hydroxylase,PH)和邻苯二酚1,2-双加氧酶(Catechol 1,2-dioxygenase,C12O)的基因多样性。【方法】利用简并引物,以倭蜂猴粪便微生物宏基因组DNA为模板,通过PCR扩增,分别构建PH和C12O... 【目的】分析倭蜂猴粪便微生物中苯酚羟化酶(Phenol hydroxylase,PH)和邻苯二酚1,2-双加氧酶(Catechol 1,2-dioxygenase,C12O)的基因多样性。【方法】利用简并引物,以倭蜂猴粪便微生物宏基因组DNA为模板,通过PCR扩增,分别构建PH和C12O基因克隆文库,并对克隆进行测序分析。【结果】倭蜂猴粪便微生物来源的PH和C12O基因序列经BLAST比对分析,与Gen Bank中相应酶的序列一致性分别介于92%-100%和87%-100%。系统进化树分析表明PH基因序列与Neisseria、Burkholderia、Alcaligenes、Acinetobacter 4个属来源的PH序列相关;C12O基因序列全部与Acinetobacter来源的C12O序列相关。序列比对结果表明PH序列具有Lm PH(Largest subunit of multicomponent PH)中高保守的两个DEXRH结构域;C12O序列具有能被Ag+和Hg2+抑制的位点(半胱氨酸)。【结论】倭蜂猴粪便微生物来源的PH为多组分PH,其降解苯酚的中间产物邻苯二酚可以被C12O通过邻位开环途径裂解。 展开更多
关键词 倭蜂猴 粪便微生物 苯酚羟化酶 邻苯二酚1 2-双加氧酶 多样性
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红球菌PB-1对高浓度苯酚及苯系物的降解研究 被引量:4
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作者 马馨月 魏思洁 +3 位作者 柯檀 叶超然 陶越 陈兰洲 《安全与环境工程》 CAS 北大核心 2020年第2期85-91,共7页
苯酚及一些苯系物是有机合成工业废水中常见的污染物,也是生物处理的难点。从某焦化厂污泥中分离得到一株苯酚高效降解菌,根据生理生化试验和16S rDNA测序,鉴定为红球菌,命名为PB-1,对其降解苯酚的条件进行优化以及该菌株降解底物广谱... 苯酚及一些苯系物是有机合成工业废水中常见的污染物,也是生物处理的难点。从某焦化厂污泥中分离得到一株苯酚高效降解菌,根据生理生化试验和16S rDNA测序,鉴定为红球菌,命名为PB-1,对其降解苯酚的条件进行优化以及该菌株降解底物广谱性进行研究。结果表明:该菌株降解苯酚的最适温度为30~35℃,最适pH值为9.0;当菌体浓度OD600为0.3时,24 h可完全降解1000 mg/L的苯酚;该菌株可耐受2000 mg/L浓度的苯酚,对苯酚72 h的降解率为35.76%;此外,该菌株可适应300 mg/L浓度的喹啉,对1500 mg/L苯胺72 h的降解率达到68.06%;该菌株对苯酚和苯胺的降解均通过邻苯二酚1,2-双加氧酶催化的邻位途径,底物降解彻底,环境友好。红球菌PB-1可降解高浓度苯酚、苯胺,且耐受难降解喹啉类杂环芳香物质,在成分复杂的工业废水处理中具有十分广阔的应用前景。 展开更多
关键词 红球菌PB-1 高浓度苯酚 苯胺 喹啉 邻苯二酚1 2-双加氧酶 微生物修复技术
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苯酚降解菌DF51的分离鉴定、降解特性及其固定化的研究 被引量:4
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作者 张谨华 李鹏丽 +2 位作者 王婧人 李彩虹 杨秀清 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第24期410-415,共6页
为了研究焦化废水污染土样中微生物的降解性能,作者特地从太原市郊焦化厂附近的污染土样中采样,以便从中加氧酶催化开环,表明菌株DF51兼有混浊红球菌(Rhodoccocus opacus R7)和红球菌PNAN5(Rhodoccocus sp.strain DF51)降解苯酚的途径... 为了研究焦化废水污染土样中微生物的降解性能,作者特地从太原市郊焦化厂附近的污染土样中采样,以便从中加氧酶催化开环,表明菌株DF51兼有混浊红球菌(Rhodoccocus opacus R7)和红球菌PNAN5(Rhodoccocus sp.strain DF51)降解苯酚的途径。菌株DF51固定化试验表明,该菌的固定化细胞具有降解苯酚的潜在应用价值。 展开更多
关键词 苯酚 红球菌DF51 降解 邻苯二酚1 2-双加氧酶 固定化细胞
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产胞外邻苯二酚1,2-双加氧酶的菌种筛选和发酵条件的研究 被引量:4
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作者 李钦 李丽 +1 位作者 寇秀芬 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期39-44,共6页
从112株细菌中筛选出两株产胞外邻苯二酚1,2-双加氧酶的假单胞菌(Pseudomonas p.)。进行了该菌产酶的发酵条件试验。产酶的最适温度为30℃,最适起始pH为6.8—7.0。葡萄糖、麦芽糖和甘油对产酶有明显的抑制作用,苯甲酸钠对产酶有促进作... 从112株细菌中筛选出两株产胞外邻苯二酚1,2-双加氧酶的假单胞菌(Pseudomonas p.)。进行了该菌产酶的发酵条件试验。产酶的最适温度为30℃,最适起始pH为6.8—7.0。葡萄糖、麦芽糖和甘油对产酶有明显的抑制作用,苯甲酸钠对产酶有促进作用。氨态氮对菌体生长和产酶是必需的。琥珀酸钠是酶形成的有效诱导物。采用0.15%苯甲酸钠培养基(pH6.8—7.0),于30℃振荡培养72h,每毫升发酵液酶活力可达10单位。 展开更多
关键词 双加氧酶 菌种筛选 发酵条件
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石油烃降解菌对邻苯二酚、苯甲酸钠降解特性的研究 被引量:2
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作者 刘娜 刘志敏 宋东辉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期156-164,共9页
邻苯二酚和苯甲酸是苯类化合物代谢过程中两种常见的中间产物,也是工业废水中常见的环境污染物。为了高效去除苯类污染物,考察了高效降解石油中芳香烃组分的菌株 Acinetobacter sp. Tust-DM21 对邻苯二酚和苯甲酸钠的降解,并通过邻苯二... 邻苯二酚和苯甲酸是苯类化合物代谢过程中两种常见的中间产物,也是工业废水中常见的环境污染物。为了高效去除苯类污染物,考察了高效降解石油中芳香烃组分的菌株 Acinetobacter sp. Tust-DM21 对邻苯二酚和苯甲酸钠的降解,并通过邻苯二酚 1, 2-双加氧酶(C12O)的粗酶特性和苯甲酸 1, 2-双加氧酶的酶活初步研究其代谢过程。在不含碳源无机盐培养基中,菌株 Tust-DM21 能够分别以邻苯二酚和苯甲酸钠为唯一碳源进行生长。通过改变接菌量、底物浓度、pH、温度等方面对该菌降解这两类苯类物质的特性进行研究,对 C12O 的最适 pH、温度和动力学参数以及苯甲酸 1, 2-双加氧酶的酶活进行分析。菌株对邻苯二酚的最大耐受浓度为 700 mg/L,菌株降解 600 mg/L 邻苯二酚的最佳条件为:接菌量 5%、pH6.0、温度 35℃,降解率达 92%以上。菌株可耐受 4 500 mg/L 苯甲酸钠,降解浓度为 1 500 mg/L 苯甲酸钠的最佳条件为:接菌量 3%、pH8.0、温度 35℃,降解率达 95%以上。C12O 的最适 pH 为 8.0,温度 35℃,其动力学参数为 Km=25.68 μmol/L,Vmax=0.131 mol/(mL min);苯甲酸 1, 2-双加氧酶的酶活为 3.53 U。该菌对邻苯二酚、苯甲酸钠有良好的降解效果,具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 邻苯二酚 苯甲酸钠 微生物降解 邻苯二酚1 2-双加氧酶 苯甲酸1 2-双加氧酶
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三氯卡班降解菌株Sphingomonas sp.YL-JM2C中多个邻苯二酚双加氧酶的功能 被引量:1
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作者 李朔 许楹 周宁一 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1513-1524,共12页
【目的】研究Sphingomonas sp.YL-JM2C菌株的生长特性,确定以三氯卡班作为碳源的生长情况。挖掘菌株YL-JM2C潜在的邻苯二酚1,2-双加氧酶及邻苯二酚2,3-双加氧酶基因,在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源表达邻苯二酚双加氧酶基因并研究... 【目的】研究Sphingomonas sp.YL-JM2C菌株的生长特性,确定以三氯卡班作为碳源的生长情况。挖掘菌株YL-JM2C潜在的邻苯二酚1,2-双加氧酶及邻苯二酚2,3-双加氧酶基因,在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源表达邻苯二酚双加氧酶基因并研究其酶学性质。【方法】优化S.sp.YL-JM2C菌株以三氯卡班作为碳源时的培养条件,并利用全自动生长曲线测定仪测定菌株生长情况,绘制生长曲线。通过生物信息学方法挖掘潜在的邻苯二酚双加氧酶基因,并分别在Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达,通过AKTA快速纯化系统纯化蛋白,分别以邻苯二酚、3-和4-氯邻苯二酚为底物检测重组蛋白的酶学特性。【结果】菌株在pH为7.0-7.5时生长最优。在以浓度为4-8 mg/L的三氯卡班做为底物时,菌株适宜生长。当R2A培养基仅含有0.01%酵母提取物和无机盐时,加入终浓度为4 mg/L的三氯卡班可促进菌株生长。挖掘到6个潜在的邻苯二酚双加氧酶基因stcA1、stcA2、stcA3、stcE1、stcE2和stcE3,表达并通过粗酶液分析证明其中5个基因stcA1、stcA2、stcA3、stcE1和stcE2编码的酶均具有邻苯二酚双加氧酶和氯邻苯二酚双加氧酶的活性;纯化酶的底物范围研究揭示了StcA1、StcA2和StcA3均属于Ⅱ型邻苯二酚1,2-双加氧酶,StcE1和StcE2为两个新型邻苯二酚2,3-双加氧酶;它们酶动力学分析研究证明了5个酶对邻苯二酚的亲和力和催化效率最高,4-氯邻苯二酚次之。【结论】在同一菌株中发现了5个具有功能的邻苯二酚双加氧酶基因,stcA1、stcA2和stcA3编码的酶均属于Ⅱ型邻苯二酚1,2-双加氧酶,stcE1和stcE2为两个新型邻苯二酚2,3-双加氧酶编码基因。5个酶均具有催化邻苯二酚和氯邻苯二酚开环反应的功能,这为更好地理解微生物基因组内代谢邻苯二酚及其衍生物氯代邻苯二酚基因的多样性奠定了基础。 展开更多
关键词 鞘氨醇单胞菌YL-JM2C 三氯卡班 邻苯二酚 3-氯邻苯二酚 4-氯邻苯二酚 邻苯二酚1 2-双加氧酶 邻苯二酚2 3-双加氧酶
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邻苯二酚1,2-双加氧酶的结构、功能及同工酶现象研究进展 被引量:3
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作者 赵化冰 覃琨 +4 位作者 谭之磊 李华英 李德金 郭锦 刘芳 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2419-2425,共7页
邻苯二酚是芳香族化合物多条生物降解途径中共有的一种重要的中间产物,根据开环方式的不同,可分为邻位降解途径和间位降解途径,其中邻位降解途径中的关键酶是邻苯二酚1,2-双加氧酶。本文主要综述了邻苯二酚1,2-双加氧酶的结构、酶学性质... 邻苯二酚是芳香族化合物多条生物降解途径中共有的一种重要的中间产物,根据开环方式的不同,可分为邻位降解途径和间位降解途径,其中邻位降解途径中的关键酶是邻苯二酚1,2-双加氧酶。本文主要综述了邻苯二酚1,2-双加氧酶的结构、酶学性质,以及它在芳香烃降解菌中存在的同工酶现象及其功能研究进展。 展开更多
关键词 邻苯二酚1 2-双加氧酶 结构 酶学性质 同工酶
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Phenol Biodegradation by <i>Corynebacterium glutamicum</i>Encapsulated in Electrospun Fibers 被引量:1
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作者 Alon Nardi Ron Avrahami +2 位作者 Eyal Zussman J. Stefan Rokem Charles L. Greenblatt 《Journal of Environmental Protection》 2012年第2期164-168,共5页
In Northern Israel, olive mills discharge liquid waste causing contamination of subterranean aquifers with phenol, rendering them albeit temporarily, unfit for both drinking and irrigation. The impact of groundwater p... In Northern Israel, olive mills discharge liquid waste causing contamination of subterranean aquifers with phenol, rendering them albeit temporarily, unfit for both drinking and irrigation. The impact of groundwater pollution due to phenol spillage can be extensive. We developed a model system for the biodegradation of phenol-contaminated wastewater by the bacterium Corynebacterium glutamicum. Experiments consisting of suspended cultures demonstrated the native ability of this organism to utilize phenol for its metabolic pathways enabling degradation, at levels of nearly 100 ppm within 24 hours. With the use of bioinformatic data, a complete degradation pathway was constructed. Quantitative Real Time PCR analysis of the first two enzymes in this pathway revealed very distinct expression patterns and two different regulation mechanisms were postulated. Additionally, an electrospinning core-shell system was used to assemble electrospun microtubes containing bacteria on porous metallic carriers. We used these carriers as a new immobilization technique and demonstrated their significant phenol degrading capacity in a batch bioreactor configuration. This system demonstrates the feasibility of constructing a water treatment system for the management of phenol-contaminated water. 展开更多
关键词 PHENOL Biodegradation ENCAPSULATED Bacteria Electrospinning Microtubes PHENOL 2-Monooxygenase Catechol 1 2-dioxygenase OLIVE MILL WASTE Treatment OLIVE MILL WASTE OMW
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氯代邻苯二酚1,2-双加氧酶基因的克隆及其定量表达 被引量:2
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作者 宋蕾 王慧 施汉昌 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期606-609,共4页
从1,2,4-三氯苯降解菌铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)J5-2的总DNA中,利用PCR方法克隆到氯代邻苯二酚1,2-双加氧酶基因,命名为tcbC(J5-2)(GenBank登录号EF111021).分析tcbC(J5-2)基因的氨基酸序列后发现,该基因不同于已见报道的1,... 从1,2,4-三氯苯降解菌铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)J5-2的总DNA中,利用PCR方法克隆到氯代邻苯二酚1,2-双加氧酶基因,命名为tcbC(J5-2)(GenBank登录号EF111021).分析tcbC(J5-2)基因的氨基酸序列后发现,该基因不同于已见报道的1,2,4-三氯苯降解菌Pseudomonas sp.P51中的氯代邻苯二酚1,2-双加氧酶基因tcbC(P51),与其同源性仅为95%.tcbC(J5-2)基因在48、52和73这3个关键位置的氨基酸分别为Leu(亮氨酸)、Ala(丙氨酸)和Ile(异亮氨酸),而tcbC(P51)基因分别为Val(缬氨酸)、Ala(丙氨酸)和Met(蛋氨酸).利用实时荧光定量反转录-PCR(real-time reverse transcription-PCR)方法,考察了菌株J5-2在分别以1,2-二氯苯、1,3-二氯苯和1,2,4-三氯苯为唯一碳源时tcbC(J5-2)基因的定量表达.结果表明,1,2,4-三氯苯对tcbC基因的诱导作用更强. 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 氯代邻苯二酚1 2-双加氧酶 1 2 4-三氯苯 实时荧光定量反转录-PCR
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