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冠心病血小板功能蛋白与证侯相关性研究 被引量:11
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作者 李雪峰 蒋跃绒 +2 位作者 吴彩凤 陈可冀 殷惠军 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2009年第6期326-331,共6页
目的研究冠心病血瘀证、非血瘀证与血小板功能蛋白相关性。方法纳入冠心病血瘀证组22例、冠心病非血瘀证组22例,采集血浆分离血小板,提取血小板蛋白,用荧光差异显示二维凝胶电泳筛选差异功能蛋白,基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱对... 目的研究冠心病血瘀证、非血瘀证与血小板功能蛋白相关性。方法纳入冠心病血瘀证组22例、冠心病非血瘀证组22例,采集血浆分离血小板,提取血小板蛋白,用荧光差异显示二维凝胶电泳筛选差异功能蛋白,基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱对血小板差异功能蛋白进行鉴定。对鉴定成功差异蛋白,Western-Blotting进一步验证。结果筛选,并质谱成功鉴定10个差异蛋白点。冠心病血瘀证组比对照组,血小板功能蛋白有2个:cDNA FLJ53327、cDNA FLJ43573fis表达增多;有8个:Isoform 2 of Integrin alpha-IIb、FGG50kDa protein、A26C1B ANKRD26-like、Actin-cyto-plasmic1、Actin-cytoplasmic 2、cDNA FLJ52842、Fibrinogen beta chain、Keratin type I表达减少。Fibrino-genβ成功验证。结论冠心病不同证侯与血小板功能蛋白表达水平明显相关,部分血小板功能蛋白可能是冠心病不同证侯的物质基础之一。 展开更多
关键词 冠心病血瘀证 冠心病非血瘀证 血小板差异功能蛋白 2-ddige MALDI-TOF-TOF
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2D-DIGE蛋白质组技术体系及其在植物研究中的应用 被引量:7
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作者 甄艳 许淑萍 +1 位作者 赵振洲 施季森 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第2期405-412,共8页
蛋白质组技术是植物基因功能鉴定和分析的强有力工具。经典的双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术,但差异蛋白质组分析使其具有更大的挑战性,因此在蛋白质水平的基因表达的定量分析研究需要更高灵敏度和更宽动力线性范围的技术。双向... 蛋白质组技术是植物基因功能鉴定和分析的强有力工具。经典的双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术,但差异蛋白质组分析使其具有更大的挑战性,因此在蛋白质水平的基因表达的定量分析研究需要更高灵敏度和更宽动力线性范围的技术。双向差异凝胶电泳(two dimension difference gel electrophoresis,2D-DIGE)是一种新出现的荧光标记的定量蛋白质组学技术,比经典的2-DE具有更高的动力学范围和灵敏性。该方法通过引入内标使得多个样品在一块胶上分离,进而减少了实验条件不一致引起的误差。2D-DIGE结合质谱、生物信息学及高可信度的统计分析使得成功地定量、鉴定植物蛋白质成为可能。本文综述了2D-DIGE蛋白质组学的基本原理,实验方法,2D-DIGE蛋白质组的优缺点和可能解决的方法,以及该技术体系在植物研究中的应用。 展开更多
关键词 2-ddige 蛋白质组技术体系 植物
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大黄虫超微粉剂对肝纤维化大鼠肝组织蛋白表达的影响
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作者 华何与 吕志平 +2 位作者 孙学刚 刘强 刘莉 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第16期222-227,共6页
目的:利用荧光差异凝胶电泳技术(2D DIGE)研究大黄虫超微粉剂对大鼠肝纤维化组织蛋白表达的影响。方法:采用超微粉碎技术对大黄虫丸原药材进行剂型改进,用猪血清复制大鼠免疫性肝纤维化模型。实验动物分为正常组、模型组、给药组。... 目的:利用荧光差异凝胶电泳技术(2D DIGE)研究大黄虫超微粉剂对大鼠肝纤维化组织蛋白表达的影响。方法:采用超微粉碎技术对大黄虫丸原药材进行剂型改进,用猪血清复制大鼠免疫性肝纤维化模型。实验动物分为正常组、模型组、给药组。正常组ip等渗生理盐水0.5 mL,其余组ip猪血清0.5 mL,每周2次,连续12周。药物组于造模之日起ig给予大黄庶虫虫超微粉水溶液(剂量0.27 g.kg-1),正常组与模型组ig等容积生理盐水,每天1次,连续12周。第12周末处死大鼠,取血与肝组织。检测指标包括肝组织病理学变化:HE染色与Masson染色观察肝纤维化程度;血清纤维化指标:透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCIII)、Ⅳ型胶原(IV-C);血清肝功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)。同时利用2D DIGE和质谱分析技术比较模型组与给药组大鼠肝组织蛋白表达量的差异,用免疫印迹法及免疫组化法对差异蛋白进行验证。结果:模型组肝组织假小叶形成,肝组织胶原纤维含量与血清ALT,AST及HA,LN,PCⅢ,IV-C指标显著高于正常组(P<0.01)。给药组肝脏无假小叶形成,肝组织胶原纤维含量与血清ALT,AST及HA,LN,PCⅢ,IV-C指标显著低于模型组(P<0.01)。2D DIGE结果显示有58个表达量差异大于2倍的蛋白质点,初步鉴定了12个,并验证了Regucalcin,ERp57,CAⅢ蛋白在各组大鼠肝组织的表达,与2D DIGE结果一致。结论:大黄虫超微粉剂能显著降低大鼠肝组织纤维化程度、降低血清纤维化及肝功能指标,提示其对实验性免疫性肝纤维化有较好防治作用;它能调节大鼠肝纤维化组织Regucalcin,ERp57,CAⅢ蛋白表达量,这些蛋白可能通过细胞钙稳态失调、过氧化应激、炎症反应、免疫反应、纤维组织癌变等机制参与肝纤维化的病理过程。 展开更多
关键词 大黄虫超微粉 免疫性肝纤维化 荧光差异凝胶电泳 药物蛋白质组学
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