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实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠早期视神经的病理学改变及轴索损伤的研究 被引量:3
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作者 张荣伟 陈蕾 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期604-608,共5页
目的 观察实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠早期视神经的病理学动态变化及髓鞘轴索损伤的动态过程,为进一步有效干预性治疗提供理论依据.方法 实验研究.MOG多肽免疫C57BL/6小鼠构建EAE模型;通过形态学观察正常对照组及EAE组小鼠视... 目的 观察实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠早期视神经的病理学动态变化及髓鞘轴索损伤的动态过程,为进一步有效干预性治疗提供理论依据.方法 实验研究.MOG多肽免疫C57BL/6小鼠构建EAE模型;通过形态学观察正常对照组及EAE组小鼠视神经免疫后7、11、15、19 d的病理学变化;免疫组化方法检测正常对照组及EAE组小鼠视神经上述时点正常髓鞘蛋白2、3-环核苷3磷酸二酯酶(CNPase)及轴索损害的标志物β淀粉样前体蛋白(β-APP)蛋白的动态表达.两组间比较采用独立样本的t检验进行显著性检验.结果 EAE组小鼠视神经免疫后7、11、15、19 d分别出现了逐渐加重的炎症反应;正常髓鞘蛋白CNPase的表达分别为34.35±3.72、21.40±1.75、18.10±1.35、10.88±1.00从免疫后11 d起,与正常对照组比较,差异有统计学意义(t=3.16,4.04,5.83,P〈0.05);轴索损害的标志物β-APP蛋白的表达量分别为82.15 ±12.35、110.00±12.14、150.95±10.87、182.73 ±9.15与正常对照组比较,差异均有统计学意义(t=2.46,3.71,5.21,7.11;P〈0.05).结论 EAE小鼠视神经在不同发病阶段出现不同程度的炎症反应;其轴索损害不完全依赖于脱髓鞘事件. 展开更多
关键词 脑脊髓炎 自身免疫性 实验性 视神经 淀粉样Β蛋白前体 2' 3'-环核苷酸磷酸二酯酶类脑脊髓炎 自身免疫性 实验性 视神经 淀粉样Β蛋白前体 2' 3'-环核苷酸磷酸二酯酶类脑脊髓炎 自身免疫性 实验性 视神经 淀粉样Β蛋白前体 2' 3'-环核苷酸磷酸二酯酶类
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CNPase在新生大鼠视网膜发育过程中的表达
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作者 唐茂丹 陈伟伟 +3 位作者 查皓 袁云 李娟娟 吴春云 《昆明医科大学学报》 CAS 2013年第4期16-19,共4页
目的研究CNPase在正常新生大鼠视网膜细胞动态发育过程中表达的变化.方法随机将15只正常新出生大鼠分为生后天数(P)1、3、5、7、14 d 5个组(P1,P3,P5,P7,P14,每组n=3),经心腔灌注固定后摘取眼球进行冰冻切片;应用免疫组织化学方法检测CN... 目的研究CNPase在正常新生大鼠视网膜细胞动态发育过程中表达的变化.方法随机将15只正常新出生大鼠分为生后天数(P)1、3、5、7、14 d 5个组(P1,P3,P5,P7,P14,每组n=3),经心腔灌注固定后摘取眼球进行冰冻切片;应用免疫组织化学方法检测CNPase在新生大鼠视网膜细胞中表达的变化.结果与P3,P5,P7,P14相比,P1组视网膜CNPase阳性细胞数量增多,贯穿于视网膜外成神经细胞层.与P1相比,P3、P5和P7组CNPase阳性细胞数量减少并向神经节细胞层靠近,而且呈现递减的趋势.P14组CNPase阳性细胞消失,视网膜分层结构初步形成.结论 CNPase短暂表达于新生大鼠视网膜细胞,提示其可能帮助诱导发育中的视网膜神经节细胞分化,促进视网膜发育. 展开更多
关键词 新生鼠 CNPase 视网膜发育
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CNP2线粒体定位信号以及磷酸酯酶活性对抑制HIV-1 Gag蛋白组装作用的影响
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作者 梁顺涛 戴国瑞 +2 位作者 李蕊 蒋栋 曾辉 《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》 CAS 2016年第3期380-384,共5页
目的研究CNP2在线粒体上的定位以及磷酸酯酶活性是否参与抑制HIV-1病毒颗粒组装。方法采用RT-PCR扩增野生型CNP2编码区,插入到真核表达载体pc DNA5,构建融合蛋白FlagCNP2的表达质粒pc DNA5-Flag-CNP2。应用融合PCR诱导突变法构建CNP1及C... 目的研究CNP2在线粒体上的定位以及磷酸酯酶活性是否参与抑制HIV-1病毒颗粒组装。方法采用RT-PCR扩增野生型CNP2编码区,插入到真核表达载体pc DNA5,构建融合蛋白FlagCNP2的表达质粒pc DNA5-Flag-CNP2。应用融合PCR诱导突变法构建CNP1及CNP2突变表达载体。CNP表达载体分别与HIV-1假病毒包装质粒p LP1、p LP2、p LP/VSVG、p Lenti6-EGFP共同瞬时转染293T细胞。集落形成实验检测上清病毒滴度,Western blot检测细胞中Gag蛋白p55、p24以及细胞培养上清中p24的表达情况。结果与对照组比较,CNP2、CNP1、CNP2-S9/22A可以显著抑制细胞中病毒的释放,培养上清中病毒滴度显著降低(滴度分别为5.66、4.20、5.75、6.63 Log10IU/ml,NC组为7.65 Log10 IU/ml;t=58.23、17.24、12.77、6.131,P=0.0035、0.0066、0.0004、0.0039)。CNP1抑制HIV-1病毒颗粒组装作用更强,Western blot检测培养上清中病毒蛋白完全p24消失。磷酸酯酶结构域(2HM)突变后CNP2抑制HIV-1病毒颗粒组装的作用显著降低。结论 CNP2抑制HIV-1病毒颗粒组装需要磷酸酯酶结构域(2HM)的参与,CNP2的线粒体定位信号可能会影响其抑制HIV病毒颗粒组装的作用。 展开更多
关键词 2 3’-环核苷酸磷酸二酯酶 HIV-1病毒颗粒组装 线粒体定位信号 磷酸二酯酶活性.
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