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刺激隐核虫LAMP检测方法的建立
被引量:
7
1
作者
王国良
周旻曦
徐益军
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期574-577,共4页
为提高大黄鱼刺激隐核虫病的病原体检出率,本研究针对刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)18S-ITS2基因序列设计4条LAMP引物,在内外引物浓度比2∶1~6∶1、Mg2+浓度2 mmol/L、反应温度61℃~66℃、反应时间60 min的优化条件下,扩增产物...
为提高大黄鱼刺激隐核虫病的病原体检出率,本研究针对刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)18S-ITS2基因序列设计4条LAMP引物,在内外引物浓度比2∶1~6∶1、Mg2+浓度2 mmol/L、反应温度61℃~66℃、反应时间60 min的优化条件下,扩增产物经电泳后呈现特异性的LAMP梯形条带。本研究建立的LAMP方法具有高灵敏度(10-7ng/μL DNA浓度),比常规PCR方法高100倍。将该方法应用于采集自不同地域的虫体样本、病鱼和水样以及不同组织样品的检测,结果在13份样品中有10份检出阳性,并显示该方法既能够检测发病鱼,也能够检出已感染但未发病的鱼。实验表明,该方法是一种能够快速、简易、特异、敏感地检测海水鱼类刺激隐核虫病的病原学检测方法。
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关键词
刺激隐核虫
18
S-
its
2
基因序列
环介导恒温
基因
扩增检测法
下载PDF
职称材料
题名
刺激隐核虫LAMP检测方法的建立
被引量:
7
1
作者
王国良
周旻曦
徐益军
机构
宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期574-577,共4页
基金
长江学者和创新团队发展计划(IRT0734)
农业部公益性行业科研专项(200903029)
文摘
为提高大黄鱼刺激隐核虫病的病原体检出率,本研究针对刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)18S-ITS2基因序列设计4条LAMP引物,在内外引物浓度比2∶1~6∶1、Mg2+浓度2 mmol/L、反应温度61℃~66℃、反应时间60 min的优化条件下,扩增产物经电泳后呈现特异性的LAMP梯形条带。本研究建立的LAMP方法具有高灵敏度(10-7ng/μL DNA浓度),比常规PCR方法高100倍。将该方法应用于采集自不同地域的虫体样本、病鱼和水样以及不同组织样品的检测,结果在13份样品中有10份检出阳性,并显示该方法既能够检测发病鱼,也能够检出已感染但未发病的鱼。实验表明,该方法是一种能够快速、简易、特异、敏感地检测海水鱼类刺激隐核虫病的病原学检测方法。
关键词
刺激隐核虫
18
S-
its
2
基因序列
环介导恒温
基因
扩增检测法
Keywords
Cryptocaryon irritans
18
S-
its
2
gene
LAMP method
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
刺激隐核虫LAMP检测方法的建立
王国良
周旻曦
徐益军
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
7
下载PDF
职称材料
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