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检测日本血吸虫感染性钉螺PCR方法的建立
被引量：
21
1
作者
陈军虎
闻礼永
+3 位作者
张旭照
张剑锋
俞丽玲
洪林娣
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期204-207,共4页
目的建立灵敏、特异的检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。方法根据日本血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸(18S-rRNA)基因设计1对引物,建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。测定PCR产物的DNA序列,稀释血吸虫毛蚴DNA进行PCR方法的灵敏...
目的建立灵敏、特异的检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。方法根据日本血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸(18S-rRNA)基因设计1对引物,建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。测定PCR产物的DNA序列,稀释血吸虫毛蚴DNA进行PCR方法的灵敏性试验,扩增单尾尾蚴感染的钉螺DNA进行交叉反应试验,并根据不同稀释度的感染性钉螺DNA的扩增结果来验证PCR的群体检测效果。结果PCR扩增日本血吸虫感染性钉螺,得到了与靶DNA片段位置相同的产物,测序片段长度为469bp,与靶DNA相同且序列一致,并将序列登录GenBank(注册号:DQ442999)。扩增阴性钉螺无产物出现。灵敏性试验提示,PCR可检出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为40pg/μl;交叉反应试验显示,PCR方法不能扩增出单尾尾蚴感染钉螺的DNA;群体检测试验表明,PCR可检出感染性钉螺提取的DNA最高稀释度为1∶640。结论初步建立的检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法灵敏、特异且具有良好的群体检测效果。
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关键词
日本血吸虫
湖北钉螺
聚合酶链反应
18
S
小
亚基
单位
核
塘
体
核酸
基因
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职称材料
血吸虫种株间18S小亚基单位核糖体核酸基因的同源性及其PCR法检测单个尾蚴的敏感性
被引量：
5
2
作者
李洪军
梁幼生
+4 位作者
戴建荣
陶永辉
汪伟
曲国立
魏剑英
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2008年第6期418-422,共5页
目的探索日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株及曼氏血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸基因(18S-rRNA)序列的同源性及采用该基因建立PCR法检测水体中低密度血吸虫尾蚴的可能性。方法提取日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株及曼氏血吸虫基因组DNA,...
目的探索日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株及曼氏血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸基因(18S-rRNA)序列的同源性及采用该基因建立PCR法检测水体中低密度血吸虫尾蚴的可能性。方法提取日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株及曼氏血吸虫基因组DNA,采用PCR方法检测上述基因组中同一目的DNA片段,比较其同源性;分别以经沸水加热处理、氨水处理及NaOH、HCl、乙醇沉淀处理和未经处理的单个尾蚴标本为模板,采用PCR法扩增,比较对单个尾蚴的检出率。结果以日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株和曼氏血吸虫基因组DNA为模板,均能扩增出长度为469bp的DNA片段。经氨水处理和NaOH、HCl、乙醇沉淀法处理的单个尾蚴标本,PCR方法均能扩增到目的基因。在未经处理或沸水加热处理的单个尾蚴标本中,仅有50%标本能扩增到目的基因。结论血吸虫不同种株间18S-rRNA基因具有广泛同源性。经氨水处理或NaOH、HCl、乙醇沉淀法处理的标本,采用PCR法对低密度尾蚴的检出率高于未经处理或经沸水加热处理的标本。
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关键词
日本血吸虫
曼氏血吸虫
尾蚴
PCR
18
S
小
亚基
单位
核
糖
体
核酸
基因
敏感性
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职称材料
建立PCR方法检测日本血吸虫感染性钉螺
3
作者
陈军虎
闻礼永
+3 位作者
张旭照
张剑锋
俞丽玲
洪林娣
《浙江省医学科学院学报》
2006年第2期-,共5页
目的建立灵敏及特异的PCR方法检测日本血吸虫感染性钉螺。方法根据日本血吸虫18S-rRNA基因,设计1对引物,建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。测定PCR扩增产物的DNA序列,并进行PCR方法的灵敏性、交叉反应以及群体检测试验。结果PCR...
目的建立灵敏及特异的PCR方法检测日本血吸虫感染性钉螺。方法根据日本血吸虫18S-rRNA基因,设计1对引物,建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。测定PCR扩增产物的DNA序列,并进行PCR方法的灵敏性、交叉反应以及群体检测试验。结果PCR扩增日本血吸虫感染性钉螺,得到了与靶DNA位置相同的产物,测序长度为469bp,与靶DNA相同且序列一致,并将序列登陆Genbank,注册号:DQ442999。扩增阴性钉螺无产物出现。灵敏性试验提示,PCR方法可以检测出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为40pg/μl;交叉反应试验显示,该方法不能扩增出被单尾尾蚴感染的钉螺DNA;群体检测试验表明,PCR方法可以检测出被感染钉螺提取DNA的最高稀释度为1:640。结论初步建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法,灵敏、特异且具有良好的群体检测效果。
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关键词
日本血吸虫
湖北钉螺
聚合酶链反应
18
S
小
亚基
单位
核
糖
体
核酸
基因
原文传递
题名
检测日本血吸虫感染性钉螺PCR方法的建立
被引量：
21
1
作者
陈军虎
闻礼永
张旭照
张剑锋
俞丽玲
洪林娣
机构
浙江省医学科学院寄生虫病研究所
浙江大学肿瘤研究所
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期204-207,共4页
基金
浙江省医药卫生科学研究基金(No.2004B001)~~
文摘
目的建立灵敏、特异的检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。方法根据日本血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸(18S-rRNA)基因设计1对引物,建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。测定PCR产物的DNA序列,稀释血吸虫毛蚴DNA进行PCR方法的灵敏性试验,扩增单尾尾蚴感染的钉螺DNA进行交叉反应试验,并根据不同稀释度的感染性钉螺DNA的扩增结果来验证PCR的群体检测效果。结果PCR扩增日本血吸虫感染性钉螺,得到了与靶DNA片段位置相同的产物,测序片段长度为469bp,与靶DNA相同且序列一致,并将序列登录GenBank(注册号:DQ442999)。扩增阴性钉螺无产物出现。灵敏性试验提示,PCR可检出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为40pg/μl;交叉反应试验显示,PCR方法不能扩增出单尾尾蚴感染钉螺的DNA;群体检测试验表明,PCR可检出感染性钉螺提取的DNA最高稀释度为1∶640。结论初步建立的检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法灵敏、特异且具有良好的群体检测效果。
关键词
日本血吸虫
湖北钉螺
聚合酶链反应
18
S
小
亚基
单位
核
塘
体
核酸
基因
Keywords
Schistosoma japonicum
Oncomelania hupensis
PCR
18
S-rRNA gene
分类号
R383.241 [医药卫生—医学寄生虫学]
R446.61 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
血吸虫种株间18S小亚基单位核糖体核酸基因的同源性及其PCR法检测单个尾蚴的敏感性
被引量：
5
2
作者
李洪军
梁幼生
戴建荣
陶永辉
汪伟
曲国立
魏剑英
机构
江苏省血吸虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫分子生物学重点实验室、江苏省寄生虫病学重点学科
出处
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2008年第6期418-422,共5页
基金
江苏省医学领军人才项目
文摘
目的探索日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株及曼氏血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸基因(18S-rRNA)序列的同源性及采用该基因建立PCR法检测水体中低密度血吸虫尾蚴的可能性。方法提取日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株及曼氏血吸虫基因组DNA,采用PCR方法检测上述基因组中同一目的DNA片段,比较其同源性;分别以经沸水加热处理、氨水处理及NaOH、HCl、乙醇沉淀处理和未经处理的单个尾蚴标本为模板,采用PCR法扩增,比较对单个尾蚴的检出率。结果以日本血吸虫中国大陆株、菲律宾株和曼氏血吸虫基因组DNA为模板,均能扩增出长度为469bp的DNA片段。经氨水处理和NaOH、HCl、乙醇沉淀法处理的单个尾蚴标本,PCR方法均能扩增到目的基因。在未经处理或沸水加热处理的单个尾蚴标本中,仅有50%标本能扩增到目的基因。结论血吸虫不同种株间18S-rRNA基因具有广泛同源性。经氨水处理或NaOH、HCl、乙醇沉淀法处理的标本,采用PCR法对低密度尾蚴的检出率高于未经处理或经沸水加热处理的标本。
关键词
日本血吸虫
曼氏血吸虫
尾蚴
PCR
18
S
小
亚基
单位
核
糖
体
核酸
基因
敏感性
Keywords
Schistosoma japonicum
Schistosoma mansoni
Cercaria
PCR
18
S small subunit ribosomal RNA（
18
S-rRNA） gene
Sensitivity
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
建立PCR方法检测日本血吸虫感染性钉螺
3
作者
陈军虎
闻礼永
张旭照
张剑锋
俞丽玲
洪林娣
机构
浙江省医学科学院寄生虫病研究所世界卫生组织蠕虫病研究合作中心 浙江大学肿瘤研究所
出处
《浙江省医学科学院学报》
2006年第2期-,共5页
基金
浙江省医药卫生科学研究基金(2004B001)
文摘
目的建立灵敏及特异的PCR方法检测日本血吸虫感染性钉螺。方法根据日本血吸虫18S-rRNA基因,设计1对引物,建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。测定PCR扩增产物的DNA序列,并进行PCR方法的灵敏性、交叉反应以及群体检测试验。结果PCR扩增日本血吸虫感染性钉螺,得到了与靶DNA位置相同的产物,测序长度为469bp,与靶DNA相同且序列一致,并将序列登陆Genbank,注册号:DQ442999。扩增阴性钉螺无产物出现。灵敏性试验提示,PCR方法可以检测出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为40pg/μl;交叉反应试验显示,该方法不能扩增出被单尾尾蚴感染的钉螺DNA;群体检测试验表明,PCR方法可以检测出被感染钉螺提取DNA的最高稀释度为1:640。结论初步建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法,灵敏、特异且具有良好的群体检测效果。
关键词
日本血吸虫
湖北钉螺
聚合酶链反应
18
S
小
亚基
单位
核
糖
体
核酸
基因
Keywords
Schistosoma japonicum
Oncomelania hupensis
PCR
18
S-rRNA gene
分类号
R [医药卫生]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
检测日本血吸虫感染性钉螺PCR方法的建立
陈军虎
闻礼永
张旭照
张剑锋
俞丽玲
洪林娣
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
21
下载PDF
职称材料
2
血吸虫种株间18S小亚基单位核糖体核酸基因的同源性及其PCR法检测单个尾蚴的敏感性
李洪军
梁幼生
戴建荣
陶永辉
汪伟
曲国立
魏剑英
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2008
5
下载PDF
职称材料
3
建立PCR方法检测日本血吸虫感染性钉螺
陈军虎
闻礼永
张旭照
张剑锋
俞丽玲
洪林娣
《浙江省医学科学院学报》
2006
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