免疫印迹显示,抗牛精子sp18族膜蛋白的单克隆抗体(sp18单抗)与小鼠精子14,18,22,30和60 ku 5条带有较弱的抗原信号,同时,sp18单抗也能结合鸡卵溶菌酶。间接免疫荧光证实小鼠精子头后部存在sp18抗原。获能2h的小鼠精子与0.182 mg/mL的s...免疫印迹显示,抗牛精子sp18族膜蛋白的单克隆抗体(sp18单抗)与小鼠精子14,18,22,30和60 ku 5条带有较弱的抗原信号,同时,sp18单抗也能结合鸡卵溶菌酶。间接免疫荧光证实小鼠精子头后部存在sp18抗原。获能2h的小鼠精子与0.182 mg/mL的sp18单抗共孵育15~20min后进行体外受精,结果发现,单抗组的受精率(77.1%)与血清对照组(79.2%)和空白对照组(80.3%)间无显著差异(p>0.05)。继续培养受精卵发现,3组胚胎发育至2-细胞期的比率分别为100%,100%和97.9%(p>0.05);发育至4-细胞期的比率分别为0,64.1%和64.3%,即单抗组胚胎的发育被完全阻断在2-细胞期(p<0.001)。0.5%链霉蛋白酶消化除去阻断胚胎的透明带后,间接荧光定位发现,2个胚胎细胞表面均存在sp18抗原。0.182mg/mL的sp18单抗与体内受精的胚胎共培养时,胚胎发育至2-细胞期(95.2%vs 92.9%)和4-细胞期(70.5 % vs 77.9%)的比例与对照组无显著差异(p>0.05)。结果表明,小鼠精子sp18族膜蛋白在受精时掺入卵母细胞质膜系统,成为胚胎细胞表面具有功能的质膜成分,与突破胚胎发育的2-细胞期阻断现象有关。展开更多
文摘免疫印迹显示,抗牛精子sp18族膜蛋白的单克隆抗体(sp18单抗)与小鼠精子14,18,22,30和60 ku 5条带有较弱的抗原信号,同时,sp18单抗也能结合鸡卵溶菌酶。间接免疫荧光证实小鼠精子头后部存在sp18抗原。获能2h的小鼠精子与0.182 mg/mL的sp18单抗共孵育15~20min后进行体外受精,结果发现,单抗组的受精率(77.1%)与血清对照组(79.2%)和空白对照组(80.3%)间无显著差异(p>0.05)。继续培养受精卵发现,3组胚胎发育至2-细胞期的比率分别为100%,100%和97.9%(p>0.05);发育至4-细胞期的比率分别为0,64.1%和64.3%,即单抗组胚胎的发育被完全阻断在2-细胞期(p<0.001)。0.5%链霉蛋白酶消化除去阻断胚胎的透明带后,间接荧光定位发现,2个胚胎细胞表面均存在sp18抗原。0.182mg/mL的sp18单抗与体内受精的胚胎共培养时,胚胎发育至2-细胞期(95.2%vs 92.9%)和4-细胞期(70.5 % vs 77.9%)的比例与对照组无显著差异(p>0.05)。结果表明,小鼠精子sp18族膜蛋白在受精时掺入卵母细胞质膜系统,成为胚胎细胞表面具有功能的质膜成分,与突破胚胎发育的2-细胞期阻断现象有关。