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14-3-3 proteins—an update 被引量:33
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作者 Paulette MHAWECH 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第4期228-236,共9页
14-3-3 is a highly conserved acidic protein family, composed of seven isoforms in mammals. 14-3-3 protein caninteract with over 200 target proteins by phosphoserine-dependent and phosphoserine-independent manners. Lit... 14-3-3 is a highly conserved acidic protein family, composed of seven isoforms in mammals. 14-3-3 protein caninteract with over 200 target proteins by phosphoserine-dependent and phosphoserine-independent manners. Little isknown about the consequences of these interactions, and thus are the subjects of ongoing studies. 14-3-3 controls cellcycle, cell growth, differentiation, survival, apoptosis, migration and spreading. Recent studies have revealed newmechanisms and new functions of 14-3-3, giving us more insights on this fascinating and complex family of proteins.Of all the seven isoforms, 14-3-3σ seems to be directly involved in human cancer. 14-3-3σ itself is subject to regulationby p53 upon DNA damage and by epigenetic deregulation. Gene silencing of 14-3-3σ by CpG methylation has beenfound in many human cancer types. This suggests that therapy-targeting 14-3-3σ may be beneficial for future cancertreatment. 展开更多
关键词 14-3-3 function 14-3-3σ CpG methylation target therapy.
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日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3DNA免疫保护作用的观察 被引量:21
2
作者 刘庆中 沈继龙 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期230-232,共3页
目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 )重组信号蛋白 14 - 3- 3(rSj14 - 3- 3)DNA作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能。方法 碱裂解法大量制备rSj14 - 3- 3和rSjGSTDNA ,将两种DNA分别免疫BALB/c小鼠进行攻击感染实验。 结果 在尾蚴攻击感... 目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 )重组信号蛋白 14 - 3- 3(rSj14 - 3- 3)DNA作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能。方法 碱裂解法大量制备rSj14 - 3- 3和rSjGSTDNA ,将两种DNA分别免疫BALB/c小鼠进行攻击感染实验。 结果 在尾蚴攻击感染 6w后 ,剖杀小鼠计算各组的减虫率 ,rSj14 - 3- 3DNA组为 34 2 0 % ,rSj14 - 3- 3+rSjGSTDNA组为32 4 0 % ;减卵率为 (按以上组序 ) 5 0 74 %和 5 5 2 3%。结论 重组Sj14 - 3- 3DNA具有一定的抗血吸虫病潜能 ,有可能作为日本血吸虫病的候选疫苗 ,但未见Sj14 - 3- 3、SjGST两种重组DNA的协同作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组信号蛋白 1433 DNA 免疫保护作用
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日本血吸虫信号蛋白14-3-3在虫卵的定位及其免疫诊断价值初探 被引量:19
3
作者 王志成 徐元宏 +4 位作者 罗飞 李敏 郑美娟 罗庆礼 沈继龙 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第2期128-131,共4页
目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在虫卵内的定位和重组Sj14-3-3(rSj14-3-3)的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42 d的兔肝脏中分离虫卵,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sj14-3-3基因在虫卵期的转录水平;兔肝组织... 目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在虫卵内的定位和重组Sj14-3-3(rSj14-3-3)的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42 d的兔肝脏中分离虫卵,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sj14-3-3基因在虫卵期的转录水平;兔肝组织石蜡切片免疫组化染色,观察内源性Sj14-3-3在虫卵内的分布和表达丰度。利用纯化的rSj14-3-3和可溶性虫卵抗原(SEA),采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从日本血吸虫成熟虫卵中检出760 bp左右的基因片断;免疫组化显示Sj14-3-3主要分布在虫卵内毛蚴的体壁和两边的侧腺。检测急性、慢性患者和正常人血清抗rSj14-3-3抗原的抗体阳性率分别为91.0%、78.9%、0.0%;上述标本中抗SEA抗体的阳性率分别为97.4%、88.9%和2.5%。结论用ELISA检测抗SEA抗体和rSj14-3-3抗体诊断血吸虫病具有高度的特异性和敏感性,而Sj14-3-3在成熟虫卵阶段高表达,可能是SEA的主要组分,具有实用价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 虫卵 14-3-3 定位 免疫诊断
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多房棘球绦虫pBCG-Em14-3-3重组质粒的构建及其在BCG中的表达 被引量:15
4
作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1111-1114,共4页
目的构建多房棘球绦虫重组质粒pBCG-Em14-3-3,并转化BCG进行表达。方法超声粉碎泡球蚴组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增Em14-3-3抗原编码基因;将该扩增产物定向克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG,构建重组质粒pBCG-Em14-3-3;电穿孔... 目的构建多房棘球绦虫重组质粒pBCG-Em14-3-3,并转化BCG进行表达。方法超声粉碎泡球蚴组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增Em14-3-3抗原编码基因;将该扩增产物定向克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG,构建重组质粒pBCG-Em14-3-3;电穿孔法转化BCG,构建多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3。免疫印迹分析pBCG-Em14-3-3的表达产物。结果RT-PCR成功扩增出779bp的Em14-3-3抗原编码基因;双酶切证实Em14-3-3抗原编码基因成功插入pBCG中;PCR证实rBCG-Em14-3-3构建成功;免疫印迹分析发现pBCG-Em14-3-3的表达产物在相对分子质量(Mr)约为27×103处有明显的目的蛋白表达条带,且能被活动性泡球蚴病鼠血清特异识别。结论成功构建了多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 重组pBCG-Em 1433 BCG 构建 表达效率
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日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3疫苗免疫保护性的观察 被引量:11
5
作者 刘庆中 沈继龙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期257-260,共4页
目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 )重组信号蛋白 14 3 3 (rSj14 3 3 )作为血吸虫病疫苗分子的潜能 ,并探讨rSj14 3 3、rSjGST两种重组蛋白作为疫苗的协同作用及结核杆菌低分子量耐热多肽 (Mtb)激活的γδ T细胞在抗血吸虫病中... 目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 )重组信号蛋白 14 3 3 (rSj14 3 3 )作为血吸虫病疫苗分子的潜能 ,并探讨rSj14 3 3、rSjGST两种重组蛋白作为疫苗的协同作用及结核杆菌低分子量耐热多肽 (Mtb)激活的γδ T细胞在抗血吸虫病中的作用。 方法 用SDS PAGE、电洗脱和透析的方法制备rSj14 3 3和rSjGST抗原 ,将两种抗原 (分别用福氏佐剂和Mtb为佐剂 )分别免疫BALB/c小鼠后 ,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染 6wk后 ,剖杀小鼠计算各组的减虫率。 结果 各组的减虫率为rSj14 3 3 +福氏佐剂组 3 2 .2 0 % ,rSj14 3 3 +rSjGST +福氏佐剂组 3 1.10 % ,rSj14 3 3 +Mtb佐剂组 2 7.96% ,rSj14 3 3 +rSjGST +Mtb佐剂组 2 6.0 0 % ,rSjGST +Mtb佐剂组 2 7.10 % ;各组的减卵率分别为 (按以上组序 ) 5 0 .40 %、5 3 .3 0 %、5 1.10 %、5 8.60 %和 5 1.3 0 %。 结论 rSj14 3 3具有一定的抗血吸虫潜能 ,有可能成为抗日本血吸虫疫苗 ,但未见rSj14 3 3和rSjGST的协同作用 ;Mtb激活扩增的γδ T细胞在抗血吸虫免疫中的效果与福氏佐剂产生的免疫作用类似。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组信号蛋白 14-3-3 疫苗 免疫保护性 观察 协同作用 γδ-T细胞
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14-3-3蛋白的研究进展 被引量:11
6
作者 潘伟男 陈锋 +1 位作者 封芬 陈临溪 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2007年第3期262-265,共4页
14-3-3是一个在真核生物中广泛表达的酸性蛋白家族,主要以同源/异源二聚体形式存在,通过磷酸化丝/苏氨酸作用与靶蛋白或靶蛋白的2个结构域结合。7种不同亚型的高度保守的14-3-3蛋白与人类细胞中多种不同的信号通路有密切的关系。14-3-3... 14-3-3是一个在真核生物中广泛表达的酸性蛋白家族,主要以同源/异源二聚体形式存在,通过磷酸化丝/苏氨酸作用与靶蛋白或靶蛋白的2个结构域结合。7种不同亚型的高度保守的14-3-3蛋白与人类细胞中多种不同的信号通路有密切的关系。14-3-3通过调节靶蛋白间的相互作用在信号转导途径中发挥调控作用。 展开更多
关键词 14-3-3 二聚体 蛋白磷酸化 蛋白质相互作用 信号转导
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镇肝熄风汤对帕金森病模型小鼠神经行为学及黑质14-3-3、酪氢酸羟化酶表达的影响 被引量:11
7
作者 兴桂华 王晓丽 +3 位作者 丛欢 邹宇 李丽波 董妙先 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期190-193,共4页
目的:观察镇肝熄风汤对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine MPTP)诱导的C57BL/6小鼠帕金森病模型自主活动的影响及其可能机制。方法:连续灌胃14 d给予不同剂量的镇肝熄风汤(12.5,25,50 g... 目的:观察镇肝熄风汤对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine MPTP)诱导的C57BL/6小鼠帕金森病模型自主活动的影响及其可能机制。方法:连续灌胃14 d给予不同剂量的镇肝熄风汤(12.5,25,50 g·kg-1)和司来吉兰(10 mg·kg-1)预处理,于给药第11天开始连续4 d C57BL/6小鼠皮下注射MPTP(30 mg·kg-1)制备帕金森病小鼠模型。通过自主活动实验观察动物行为学表现,采用实时定量RT-PCR法检测多功能蛋白14-3-3和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)mRNA表达,Western blot方法检测多功能蛋白14-3-3,TH蛋白表达。结果:与模型组比较,镇肝熄风汤可显著增强帕金森病小鼠自主活动能力(均P<0.05),上调多功能蛋白14-3-3和TH mRNA和蛋白表达(均P<0.05)。结论:镇肝熄风汤具有抗实验性帕金森病的作用,其机制可能与上调多功能蛋白14-3-3和TH的mRNA和蛋白表达有关。 展开更多
关键词 帕金森病 镇肝熄风汤 1433 酪氨酸羟化酶
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日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3的纯化及抗体制备 被引量:8
8
作者 李锋 胡敏 沈继龙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期221-223,共3页
目的 制备日本血吸虫(中国大陆株)信号蛋白Sj14-3-3的多克隆抗体与单克隆抗体。方法 将合Sj14-3-3重组蛋白的凝胶条带冻干磨粉,免疫家兔,制备抗Sj14-3-3多克隆抗血请;用电洗脱纯化的Sj14-3-3免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术制备抗Sj14-3-3... 目的 制备日本血吸虫(中国大陆株)信号蛋白Sj14-3-3的多克隆抗体与单克隆抗体。方法 将合Sj14-3-3重组蛋白的凝胶条带冻干磨粉,免疫家兔,制备抗Sj14-3-3多克隆抗血请;用电洗脱纯化的Sj14-3-3免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术制备抗Sj14-3-3单克隆抗体。测定所得抗体效价及特异性鉴定。结果 获得大量纯化的表达产物;制备的多克隆抗血清双扩效价达1:8~1:64。获得1株能稳定分泌抗Sj14-3-3单抗的杂交瘤细胞株4D9,单抗亚类为IgG1。此株单抗能与重组Sj14-3-3蛋白发生特异性反应。结论 获得了高度敏感、特异的抗Sj14-3-3多克隆抗血清及稳定分泌抗Sj14-3-3单抗的杂交瘤细胞。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组信号蛋白 14-3-3 纯化 抗体 制备
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苜蓿14-3-3基因家族的鉴定与进化和特征分析 被引量:9
9
作者 李菲 何小红 +2 位作者 张习敏 龚记熠 乙引 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期5238-5243,共6页
蛋白质磷酸化是所有真核生物中都存在的重要信号传导机制,在生命过程的多个基础性环节,包括细胞分裂、分化、凋亡等,都起着中心的调控作用。14-3-3蛋白是在所有真核生物中都存在的,识别和调控磷酸化蛋白质活性,在磷酸化信号传导网络中... 蛋白质磷酸化是所有真核生物中都存在的重要信号传导机制,在生命过程的多个基础性环节,包括细胞分裂、分化、凋亡等,都起着中心的调控作用。14-3-3蛋白是在所有真核生物中都存在的,识别和调控磷酸化蛋白质活性,在磷酸化信号传导网络中是一个基础性的中心蛋白。我们筛选鉴定了蒺藜苜蓿全基因组中和天蓝苜蓿叶片转录组中的14-3-3基因,并对这些基因的结构、染色体定位、进化和在蒺藜苜蓿各个器官及不同胁迫处理下的表达情况进行分析,推测各个基因可能的功能。从蒺藜苜蓿的基因组,鉴定出11个14-3-3基因,这些基因在大豆中均存在直系同源基因。其中10个基因有基因芯片的表达证据。从天蓝苜蓿的叶片转录组中,筛选鉴定出6个14-3-3基因。蒺藜苜蓿14-3-3基因在各个组织和器官中特异性的表达,并可响应外界生物和非生物胁迫。本研究为进一步阐明蒺藜苜蓿中14-3-3基因铺平了道路,指明了方向。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 14-3-3 系统进化 抗逆
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14-3-3参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径研究(英文) 被引量:8
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作者 潘伟男 李峰 +7 位作者 毛小环 秦旭平 邓水秀 封芬 陈锋 李兰芳 廖端芳 陈临溪 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1153-1161,共9页
本室以前已经报道了G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽,apelin-13,通过激活ERK1/2促进大鼠血管平滑肌细胞增殖.本文研究14-3-3信号蛋白是否参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径,探讨apelin/APJ系统的细胞信号转导机... 本室以前已经报道了G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽,apelin-13,通过激活ERK1/2促进大鼠血管平滑肌细胞增殖.本文研究14-3-3信号蛋白是否参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径,探讨apelin/APJ系统的细胞信号转导机制.组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs;Western blotting方法检测14-3-3、pRaf-1、Raf-1、pERK1/2、ERK1/2、cyclinD1、cyclinE的表达;MTT方法观察14-3-3抑制剂Difopein对VSMCs的增殖作用;免疫共沉淀方法检测14-3-3和Raf-1蛋白复合物的形成.Western blotting方法结果显示,apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)浓度依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,以2μmol/L最为明显;2μmol/L apelin-13时间依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,在4 h增加最为显著;14-3-3蛋白抑制剂Difopein明显抑制apelin-13诱导的Raf-1磷酸化、ERK1/2磷酸化、cyclinD1及cyclinE表达;免疫共沉淀方法发现apelin-13诱导14-3-3与Raf-1结合增加,而Difopein明显抑制两者结合;MTT法显示Difopein明显抑制apelin-13诱导的血管平滑肌细胞增殖.上述结果表明,Apelin-13通过14-3-3/Raf-1复合物-ERK1/2信号转导通路促进大鼠血管平滑肌细胞增殖. 展开更多
关键词 APELIN APJ 14-3-3 血管平滑肌细胞 ERK1/2 RAF-1
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禾谷炭疽菌14-3-3蛋白生物信息学分析 被引量:8
11
作者 韩长志 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第3期109-114,118,共7页
禾谷炭疽菌侵染玉米、小麦等粮食作物而引起的炭疽病,给各国农业生产造成了巨大经济损失.14-3-3蛋白普遍存在于真核生物,参与植物众多生理生化过程.本研究基于酿酒酵母中2个典型14-3-3蛋白序列,利用Blastp以及关键词对炭疽菌属蛋白质数... 禾谷炭疽菌侵染玉米、小麦等粮食作物而引起的炭疽病,给各国农业生产造成了巨大经济损失.14-3-3蛋白普遍存在于真核生物,参与植物众多生理生化过程.本研究基于酿酒酵母中2个典型14-3-3蛋白序列,利用Blastp以及关键词对炭疽菌属蛋白质数据库进行比对、搜索,以及通过SMART保守结构域分析,明确该菌存在2个典型的14-3-3蛋白;同时,通过对上述蛋白进行二级结构、疏水性、信号肽,跨膜结构域以及亚细胞定位等生物信息学分析.该研究为深入开展禾谷炭疽菌14-3-3蛋白功能研究打下坚实的理论基础. 展开更多
关键词 禾谷炭疽菌 14-33 信号肽 二级结构 亚细胞定位
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14-3-3 λ protein interacts with ADF1 to regulate actin cytoskeleton dynamics in Arabidopsis 被引量:8
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作者 ZHAO ShuangShuang ZHAO YanXiu GUO Yan 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2015年第11期1142-1150,共9页
Actin cytoskeleton dynamics is critical for variety of cellular events including cell elongation, division and morphogenesis, and is tightly regulated by numerous groups of actin binding proteins. However it is not we... Actin cytoskeleton dynamics is critical for variety of cellular events including cell elongation, division and morphogenesis, and is tightly regulated by numerous groups of actin binding proteins. However it is not well understood how these actin binding proteins are modulated in a physiological condition by their interaction proteins. In this study, we describe that Arabidopsis 14-3-3 λ protein interacted with actin depolymerizing factor 1(ADF1) in plant to regulate F-actin stability and dynamics. Loss of 14-3-3 λin Arabidopsis resulted in longer etiolated hypocotyls in dark and changed actin cytoskeleton architecture in hypocotyl cells. Overexpression of ADF1 repressed 14-3-3 λ mutant hypocotyl elongation and actin dynamic phenotype. In addition, the phosphorylation level of ADF1 was increased and the subcellular localization of ADF1 was altered in 14-3-3 λ mutant. Consistent with these observations, the actin filaments were more stable in 14-3-3 λ mutant. Our results indicate that 14-3-3 λ protein mediates F-actin dynamics possibly through inhibiting ADF1 phosphorylation in vivo. 展开更多
关键词 ARABIDOPSIS 14-3-3 ADF PHOSPHORYLATION actin cytoskeleton dynamics
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火把梨14-3-3基因的克隆与序列分析 被引量:6
13
作者 王光勇 刘迪秋 +3 位作者 李旻 饶健 孙兵召 丁元明 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期55-61,共7页
依据火把梨(Pyrus pyrifolia Nakai)14-3-3蛋白的EST序列设计基因特异引物,采用快速扩增cDNA末端技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE),从云南火把梨中克隆一个新的14-3-3基因(Pp14-3-3)的全长cDNA序列。Pp14-3-3全长cDNA为1 10... 依据火把梨(Pyrus pyrifolia Nakai)14-3-3蛋白的EST序列设计基因特异引物,采用快速扩增cDNA末端技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE),从云南火把梨中克隆一个新的14-3-3基因(Pp14-3-3)的全长cDNA序列。Pp14-3-3全长cDNA为1 107 bp,具有84 bp 5'非编码区(Untranslated Regions,UTR)、786 bp开放读码框(Openreading frame,ORF),以及237 bp 3'UTR,编码含261个氨基酸的蛋白质。Pp14-3-3与其他物种14-3-3蛋白在中间功能区域高度保守,包含典型的14-3-3结构域。与已知植物14-3-3s家族成员间的氨基酸序列进行聚类分析,将Pp14-3-3聚为非ε大类14-3-3。Pp14-3-3在火把梨接受光照和没有光照的果皮以及幼嫩叶片中大量表达,且表达量稳定。对Pp14-3-3的基因克隆以及表达特性进行了分析,为后期深入研究该新基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 火把梨 RACE RT-PCR 14-3-3
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Clinical implication of 14-3-3 epsilon expression in gastric cancer 被引量:6
14
作者 Mariana Ferreira Leal Danielle Queiroz Calcagno +4 位作者 Smia Demachki Paulo Pimentel Assumpo Roger Chammas Rommel Rodríguez Burbano Marília de Arruda Cardoso Smith 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2012年第13期1531-1537,共7页
AIM:To evaluate for the first time the protein and mRNA expression of 14-3-3εin gastric carcinogenesis.METHODS:14-3-3εprotein expression was determined by western blotting,and mRNA expression was examined by real-ti... AIM:To evaluate for the first time the protein and mRNA expression of 14-3-3εin gastric carcinogenesis.METHODS:14-3-3εprotein expression was determined by western blotting,and mRNA expression was examined by real-time quantitative RT-PCR in gastric tumors and their matched non-neoplastic gastric tissue samples.RESULTS:Authors observed a significant reduction of 14-3-3εprotein expression in gastric cancer(GC)samples compared to their matched non-neoplastic tissue.Reduced levels of 14-3-3εwere also associated with diffuse-type GC and early-onset of this pathology.Our data suggest that reduced 14-3-3εmay have a role in gastric carcinogenesis process.CONCLUSION:Our results reveal that the reduced 14-3-3εexpression in GC and investigation of 14-3-3ε interaction partners may help to elucidate the carcino-genesis process. 展开更多
关键词 Gastric cancer 14-3-3 epsilon YWHAE GENEEXPRESSION Protein expression
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杏仁核注射红藻氨酸诱导的边缘叶发作癫痫大鼠海马Bad去磷酸化和Bcl-2表达上调 被引量:4
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作者 李天富 吕传真 +4 位作者 夏作理 牛敬忠 杨明峰 罗玉敏 洪震 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期310-318,共9页
应用红藻氨酸(kainicacid,KA)诱导的大鼠边缘叶发作癫痫模型,检测Bad(Bcl-2-associateddeathprotein)、14-3-3、磷酸化Bad、Bcl-XL和Bcl-2在癫痫大鼠海马神经元的表达。单侧杏仁核内注射KA诱导癫痫发作,持续记录脑电和局部脑血流(region... 应用红藻氨酸(kainicacid,KA)诱导的大鼠边缘叶发作癫痫模型,检测Bad(Bcl-2-associateddeathprotein)、14-3-3、磷酸化Bad、Bcl-XL和Bcl-2在癫痫大鼠海马神经元的表达。单侧杏仁核内注射KA诱导癫痫发作,持续记录脑电和局部脑血流(regionalcerebralbloodflow,r-CBF),发作1h后静脉注射30mg/kg安定终止发作,然后分别用cresylviolet染色和TUNEL染色观察海马神经元存活和凋亡的变化;用免疫荧光、Westernblot和免疫沉淀检测海马Bad、14-3-3、磷酸化Bad、Bcl-XL和Bcl-2的表达。结果表明,发作终止8h时出现TUNEL阳性细胞,24h时达高峰;发作诱导Bad去磷酸化,去磷酸化的Bad与分子伴侣蛋白14-3-3解离,然后Bad与Bcl-XL结合;磷酸化Bad表达减少而Bcl-2表达增加;发作前后r-CBF无明显变化。以上结果提示,癫痫发作诱导Bad的去磷酸化和Bcl-2表达上调,Bad的去磷酸化可能具有损伤作用,而Bcl-2的表达上调则对癫痫神经元损伤具有保护作用,但与脑缺血无关。 展开更多
关键词 红藻氨酸 癫痫 海马 凋亡 BAD 14-3-3 磷酸化Bad Bcl-XL BCL-2
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鲻鱼鳃组织14-3-3a、NKCCla、Apo-14和Na^+-K^+-ATPaseβ基因表达对盐度变化的响应 被引量:5
16
作者 蒋玫 李磊 +2 位作者 沈新强 吴庆元 牛俊翔 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期2429-2435,共7页
探讨了鲻鱼(Mugil cephalus)鳃组织14-3-3a、NKCCla、Apo-14和Na+-K+-ATPaseβ基因对盐度变化的响应表达特性。结果表明:不同盐度处理组对14-3-3a、NKCC1a、Apo-14和Na+-K+-ATPaseβ等4种基因mRNA的表达量与对照组(盐度20)间存在一定的... 探讨了鲻鱼(Mugil cephalus)鳃组织14-3-3a、NKCCla、Apo-14和Na+-K+-ATPaseβ基因对盐度变化的响应表达特性。结果表明:不同盐度处理组对14-3-3a、NKCC1a、Apo-14和Na+-K+-ATPaseβ等4种基因mRNA的表达量与对照组(盐度20)间存在一定的差异性,且各类基因与盐度适应相关性的差异性也较为显著;其中Na+-K+-ATPaseβ和NKCC1a在低盐环境下被显著诱导,表达量上升明显(P<0.01),而14-3-3a与Apo-14在低盐环境下表达量均有明显的下调(P<0.05);不同盐度处理组与对照组表达量的差异、各基因表达量与盐度的回归关系以及4种基因生物整合标志物响应值的不同,表明Na+-K+-ATPaseβ和NKCC1a相对于14-3-3a和Apo-14更能赋予生物在受到低盐度应激刺激后,产生渗透调节机制,提高生物抵抗环境的胁迫能力;可考虑Na+-K+-ATPaseβ和NKCC1a适宜作为鱼类鳃组织在低盐环境胁迫下调控渗透基因的潜在分子生物标志物。 展开更多
关键词 鲻鱼 14-3-3a NKCCla Apo-14 Na+-K+-ATPaseβ 基因表达
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滋养细胞分泌14-3-3 τ蛋白对子宫内膜基质细胞表达整合素α_vβ_3蛋白的影响 被引量:5
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作者 程琰 胡蓉 +1 位作者 马开东 李笑天 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期505-509,共5页
目的探讨滋养细胞分泌14-3-3τ蛋白对子宫内膜基质细胞容受性分子整合素αvβ3表达的影响。方法RNA干扰技术下调人绒癌滋养细胞株Be Wo细胞14-3-3τ蛋白的表达。Western blot法检测Be Wo细胞及培养液中14-3-3τ蛋白的表达。建立14-3-3... 目的探讨滋养细胞分泌14-3-3τ蛋白对子宫内膜基质细胞容受性分子整合素αvβ3表达的影响。方法RNA干扰技术下调人绒癌滋养细胞株Be Wo细胞14-3-3τ蛋白的表达。Western blot法检测Be Wo细胞及培养液中14-3-3τ蛋白的表达。建立14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞与人子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESC)的共培养体系,Western blot法检测共培养体系培养液中14-3-3τ蛋白的表达,以及ESC容受性分子整合素αvβ3的表达变化。结果与si RNA阴性对照组相比,特异性si RNA显著下调Be Wo细胞和培养液中14-3-3τ蛋白的表达(P<0.05)。共培养体系中,与si RNA阴性对照组相比,与14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞共培养的ESC整合素αvβ3的表达显著上调(P<0.05),提示ESC容受性增加。与单独培养的ESC相比,培养液中添加14-3-3τ重组蛋白的ESC培养24 h后整合素αvβ3的表达显著下调(P<0.05),提示ESC容受性降低。结论14-3-3τ蛋白可以被滋养细胞分泌至细胞外,并可能发挥调控ESC容受性的作用,但其作用机制仍需进一步研究。 展开更多
关键词 14-33 ι蛋白 αvβ3细胞 子宫内膜基质细胞 容受性 共培养
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Accumulation of Carbohydrate and Regulation of 14-3-3 Protein on Sucrose Phosphate Synthase(SPS) Activity in Two Tomato Species 被引量:5
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作者 WANG Li CUI Na +2 位作者 ZHAO Xiao-cui FAN Hai-yan LI Tian-lai 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期358-364,共7页
To explore the differences of carbohydrate metabolism in two tomato species and discuss the possible regulation of 14-3-3 proteins on the sucrose phosphate synthase (SPS) activity, we determined the contents of solu... To explore the differences of carbohydrate metabolism in two tomato species and discuss the possible regulation of 14-3-3 proteins on the sucrose phosphate synthase (SPS) activity, we determined the contents of soluble sugar and starch through high performance liquid chromatography (HPLC). The activities of sugar-metabolizing enzymes were assayed in desalted extract, and the relative expression levels of related genes in sugar metabolism were determined though real-time RT-PCR. The results indicated that glucose and fructose were mainly accumulated during the maturation of the fruit because of the high acid invertase (AI) and neutral invertase (NI) in Micro-Tom (Solanum lycopersicum) fruit, while in Solanum chmielewskii fruit, SPS which went along with the change of sucrose content led to the rapid sucrose increase during the fruit ripening. TFT1 and TFT10, belonging to 14-3-3 protein in tomato, were likely to down-regulated SPS activity during young and intumescence period. 展开更多
关键词 MICRO-TOM Solanum chmielewskii carbohydrate accumulation 14-3-3 proteins fruit development
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芜菁Br14-3-3的克隆及其在非生物胁迫下的表达分析 被引量:5
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作者 王若男 李菊 +1 位作者 苗鸿钰 闫海芳 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1301-1311,共11页
克隆了‘津田芜菁’(Brassica rapa subsp.rapifera‘Tsuda’)通用调节因子14-3-3基因cDNA序列,命名为Br14-3-3(GenBank登录号为MK896872)。该基因全长1113 bp,开放阅读框全长774 bp,编码含有257个氨基酸的多肽。荧光定量PCR分析Br14-3-... 克隆了‘津田芜菁’(Brassica rapa subsp.rapifera‘Tsuda’)通用调节因子14-3-3基因cDNA序列,命名为Br14-3-3(GenBank登录号为MK896872)。该基因全长1113 bp,开放阅读框全长774 bp,编码含有257个氨基酸的多肽。荧光定量PCR分析Br14-3-3在‘津田芜菁’不同组织中及其在温度、脱水、渗透、ABA和无机盐等非生物胁迫下幼苗中的表达,结果表明该基因在‘津田芜菁’的花中表达量最高,幼苗中次之;低温抑制了Br14-3-3的表达,其他非生物胁迫可诱导该基因表达,暗示Br14-3-3在非生物胁迫应答中发挥功能。 展开更多
关键词 津田芜菁 14-3-3 基因克隆 胁迫 表达
原文传递
菠菜14-3-3蛋白基因的克隆及硝酸盐胁迫下的表达分析 被引量:4
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作者 赵秀玲 徐慧妮 +4 位作者 郭传龙 崔道雷 王琳 陈丽梅 李昆志 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期450-457,共8页
利用RT-PCR和RACE技术,从菠菜中首次获得了14-3-3蛋白基因的全长cDNA序列(GenBank登录号JX952165),命名为So14-3-3。该基因全长1 166bp,开放阅读框801bp,编码266个氨基酸。序列比对发现So14-3-3蛋白与其他植物14-3-3蛋白氨基酸序列一致... 利用RT-PCR和RACE技术,从菠菜中首次获得了14-3-3蛋白基因的全长cDNA序列(GenBank登录号JX952165),命名为So14-3-3。该基因全长1 166bp,开放阅读框801bp,编码266个氨基酸。序列比对发现So14-3-3蛋白与其他植物14-3-3蛋白氨基酸序列一致性高达77.6%~84.7%。半定量RT-PCR表明,随NO3-胁迫处理时间的延长和浓度的增加,菠菜根和叶中So14-3-3基因的表达增强。实验构建了pGEX4T-So14-3-3原核表达载体,并通过IPTG诱导后获得分子量约为56kD的蛋白。进一步的蛋白质印迹检测结果表明,随着NO3-处理时间的延长和浓度的增加,So14-3-3蛋白表达也增加。该实验结果为进一步研究So14-3-3蛋白功能提供了基本的实验基础。 展开更多
关键词 菠菜 14-3-3 基因克隆 原核表达 硝酸盐胁迫
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