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蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰对tau蛋白磷酸化修饰的影响 被引量:10
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作者 钱慰 刘飞 +2 位作者 朱俐 龚成新 金淑仪 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期623-628,共6页
蛋白质的O位N 乙酰葡萄糖胺 (O GlcNAc)糖基化修饰是一种新近发现的广泛存在于细胞核蛋白与细胞浆蛋白的蛋白质翻译后修饰 .其性质与经典的膜蛋白和分泌蛋白的糖基化修饰不同 ,而与蛋白质磷酸化修饰更相似 .O GlcNAc糖基化和磷酸化均修... 蛋白质的O位N 乙酰葡萄糖胺 (O GlcNAc)糖基化修饰是一种新近发现的广泛存在于细胞核蛋白与细胞浆蛋白的蛋白质翻译后修饰 .其性质与经典的膜蛋白和分泌蛋白的糖基化修饰不同 ,而与蛋白质磷酸化修饰更相似 .O GlcNAc糖基化和磷酸化均修饰tau蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基 ,通过改变O GlcNAc糖基化供体底物浓度以及其关键酶活性等方法 ,改变分化后成神经细胞样的PC12细胞中的蛋白质O GlcNAc糖基化修饰水平 ,然后用特异性识别不同位点磷酸化的tau蛋白抗体 ,进行蛋白质印迹分析来检测tau蛋白磷酸化水平的变化 .结果发现细胞内蛋白质O GlcNAc糖基化对tau蛋白磷酸化的影响 ,在不同的磷酸化位点其影响不同 .增加蛋白质O GlcNAc糖基化修饰导致tau蛋白大多数磷酸位点的磷酸化水平降低 ,反之亦然 .这些结果说明 ,tau磷酸化在大多数位点受到O GlcNAc糖基化修饰的负性调节 . 展开更多
关键词 蛋白质 糖基化修饰 TAU蛋白 磷酸化修饰
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蛋白质O-GlcNAc糖基化及其细胞生物学功能 被引量:6
2
作者 杨新颖 李静 耿美玉 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第5期682-686,共5页
糖基化是蛋白质翻译后修饰的一项重要内容,大多数蛋白质糖基化发生在细胞膜表面,且糖链结构复杂。而发生在细胞浆与细胞核内的、单个O-GlcNAc修饰的蛋白质糖基化现象,因其独特的细胞定位、糖链连接方式以及重要的生物学调控作用而日益... 糖基化是蛋白质翻译后修饰的一项重要内容,大多数蛋白质糖基化发生在细胞膜表面,且糖链结构复杂。而发生在细胞浆与细胞核内的、单个O-GlcNAc修饰的蛋白质糖基化现象,因其独特的细胞定位、糖链连接方式以及重要的生物学调控作用而日益成为糖生物学领域研究的热点。现对蛋白质O-GlcNAc修饰及其细胞生物学功能研究进展情况进行综述。 展开更多
关键词 O-GLCNAC O-磷酸化 ogt O-GLCNACASE 阴-阳学说
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O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达的抑制对tau蛋白磷酸化作用的影响 被引量:7
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作者 杨江勇 顾建兰 +2 位作者 施建华 刘飞 沈勤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期346-352,共7页
研究HEK293T细胞中O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达抑制对与AD密切相关的tau蛋白磷酸化与糖基化修饰的影响.以OGT基因为靶点设计三段siRNA(OGT-siRNA1~3),用脂质体的方法转染OGT-siRNA1~3进入HEK293T细胞,通过RT-PCR检测OGT-siRNA1~... 研究HEK293T细胞中O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达抑制对与AD密切相关的tau蛋白磷酸化与糖基化修饰的影响.以OGT基因为靶点设计三段siRNA(OGT-siRNA1~3),用脂质体的方法转染OGT-siRNA1~3进入HEK293T细胞,通过RT-PCR检测OGT-siRNA1~3对OGT mRNA的抑制.将pEGFP/OGT与OGT-siRNA1~3共转染HEK293T细胞,24h后在倒置荧光显微镜下观察各组GFP/OGT的表达,根据GFP/OGT的表达量来评价OGT-siRNA1~3对OGT基因表达的抑制率.将筛选出的具有最佳沉默效果的OGT-siRNA与质粒pCI/tau441共转染HEK293T细胞,48h后Western blot检测tau蛋白糖基化与磷酸化修饰的变化.OGT-siRNA3在100nmol/L的终浓度时对OGT基因的抑制效率最高.与Mock组相比,对OGT基因mRNA及蛋白质水平的抑制率分别可达80.0%与51.3%左右.OGT基因表达的下调使tau蛋白糖基化水平下降,而磷酸化水平增高,证实tau蛋白的糖基化负调节其磷酸化,葡萄糖摄入减少或代谢降低可能在AD的发生发展中起关键作用. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 TAU蛋白 O-GlcNAc糖基转移酶 RNA干扰
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壳寡糖通过p38MAPK糖基化修饰抑制TNF-α诱导的EA.hy926细胞IL-6、IL-8的表达 被引量:4
4
作者 杨同宁 江跃全 +6 位作者 杨火梅 李佳佳 杨竹 曹纬国 朱冰 唐云乔 于超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期252-257,共6页
目的探讨壳寡糖对血管内皮细胞损伤的保护机制。方法以EA.hy926血管内皮细胞为研究对象,通过TNF-α刺激,建立高表达IL-6、IL-8的内皮细胞损伤模型。以RT-PCR和ELISA方法分别从mRNA和蛋白水平检测壳寡糖对IL-6、IL-8表达的影响。采用West... 目的探讨壳寡糖对血管内皮细胞损伤的保护机制。方法以EA.hy926血管内皮细胞为研究对象,通过TNF-α刺激,建立高表达IL-6、IL-8的内皮细胞损伤模型。以RT-PCR和ELISA方法分别从mRNA和蛋白水平检测壳寡糖对IL-6、IL-8表达的影响。采用Western blot方法检测壳寡糖对p38MAPK信号通路及糖基转移酶(OGT)表达的影响。分析验证p38MAPK信号通路抑制剂和葡萄糖氨对TNF-α诱导的IL-6、IL-8表达的影响。结果成功建立了TNF-α诱导的高表达IL-6、IL-8的血管内皮细胞损伤模型。壳寡糖可从mRNA转录和蛋白翻译水平抑制IL-6、IL-8的表达。初步揭示壳寡糖对TNF-α诱导血管内皮细胞表达IL-6、IL-8的抑制作用可能是通过p38的磷酸化和O-连接糖基化相互作用来完成的。结论壳寡糖可通过OGT调控TNF-α诱导的EA.hy926细胞IL-6、IL-8的表达,保护血管内皮细胞,减少炎症损伤。 展开更多
关键词 壳寡糖 TNF-Α ogt IL-6 IL-8 EA.hy926 糖基化 磷酸化
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O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基化修饰在神经退行性疾病中的研究进展
5
作者 余婷 刘海军 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期370-376,共7页
O连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化是一种由O-键连接的乙酰氨基葡萄糖和胞内蛋白上的丝氨酸/苏氨酸残基形成的蛋白质翻译后修饰。O-GlcNAc糖基化修饰在脑内普遍存在,其与转录、翻译和蛋白稳态等关系密切。O-GlcNAc糖基化修饰参与多... O连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化是一种由O-键连接的乙酰氨基葡萄糖和胞内蛋白上的丝氨酸/苏氨酸残基形成的蛋白质翻译后修饰。O-GlcNAc糖基化修饰在脑内普遍存在,其与转录、翻译和蛋白稳态等关系密切。O-GlcNAc糖基化修饰参与多种神经系统变性疾病的发生发展,但其调控机制尚不清楚。现就O-GlcNAc糖基化修饰与神经系统退行性病变的关系作一综述。 展开更多
关键词 O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基化 神经退行性变 O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶 O连接N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶 糖基化修饰
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OGT Mediated Histone H2B S112 Glc NAcylation Regulates DNA Damage Response 被引量:3
6
作者 Panfei Wang Changmin Peng +5 位作者 Xia Liu Hailong Liu Yali Chen Li Zheng Baolin Han Huadong Pei 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2015年第9期467-475,共9页
O-GlcNAcylation is an important post-translational modification and has been implicated in many fundamental cellular processes. Recent studies showed that O-linked N-acetylglucosamine (GlcNAc) transferase (OGT) me... O-GlcNAcylation is an important post-translational modification and has been implicated in many fundamental cellular processes. Recent studies showed that O-linked N-acetylglucosamine (GlcNAc) transferase (OGT) mediated O-GlcNAcylation of histone H2B Ser 112 (H2B S 112 GlcNAcylation) plays an important role in gene transcription. However, the role of this histone modification in DNA damage response has not been studied yet. In this study, we found that OGT and OGT mediated H2B S112 GlcNAcylation are involved in DNA damage response for maintaining genomic stability and are required for resistance to many DNA-damaging and replication stress- inducing agents. OGT mediated H2B Sl12 GlcNAcylation increased locally upon the induction of double-strand breaks (DSBs), and depletion of OGT or overexpression of H2B S 112A mutant impaired homologous recombination (HR) and nonhomologous end-joining (NHEJ). Mechanistically, H2B Sl12 GlcNAcylation could bind Nijmegen breakage syndrome 1 (NBS1) and regulate NBS1 foci for- mation. Taken together, our results demonstrate a new function of histone O-GlcNAcylation in DNA damage response (DDR). 展开更多
关键词 ogt H2B S112 GlcNAcylation DNA damage response NBSI
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O-GlcNAc糖基化修饰在神经发育和神经系统疾病中的作用 被引量:2
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作者 张金羽 董晓雪 李学坤 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2022年第12期1785-1795,共11页
O-连接乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化转移酶Ogt催化的O-GlcNAc糖基化修饰是一种重要的翻译后修饰形式.O-GlcNAc糖基化修饰通过调控蛋白质的功能而参与了多种生物学过程,并与多种疾病密切相关.O-GlcNAc修饰广泛存在于神经系统中,并在发育... O-连接乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化转移酶Ogt催化的O-GlcNAc糖基化修饰是一种重要的翻译后修饰形式.O-GlcNAc糖基化修饰通过调控蛋白质的功能而参与了多种生物学过程,并与多种疾病密切相关.O-GlcNAc修饰广泛存在于神经系统中,并在发育和衰老过程中表现出动态变化.既往研究表明,O-GlcNAc修饰对胚胎和成体神经发生,神经元的成熟、存活、突触发育和小鼠的认知能力等都发挥重要的调控作用.在多种神经发育和退行性疾病中,许多关键蛋白的O-GlcNAc修饰水平表现出显著改变.本文综述了O-GlcNAc糖基化修饰在神经发育和神经系统疾病中作用和分子机制的研究进展. 展开更多
关键词 ogt O-GLCNAC 神经发生 神经发育 神经退行 神经系统疾病
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Novel N-hit single event transient mitigation technique via open guard transistor in 65 nm bulk CMOS process 被引量:5
8
作者 HUANG PengCheng CHEN ShuMing +1 位作者 CHEN JianJun LIU BiWei 《Science China(Technological Sciences)》 SCIE EI CAS 2013年第2期271-279,共9页
In this paper,we proposed a new n-channel MOS single event transient(SET) mitigation technique,which is called the open guard transistor(OGT) technique.This hardening scheme is compared with several classical n-channe... In this paper,we proposed a new n-channel MOS single event transient(SET) mitigation technique,which is called the open guard transistor(OGT) technique.This hardening scheme is compared with several classical n-channel MOS hardening structures through 3-D TCAD simulations.The results show that this scheme presents about 35% improvements over the unhardened scheme for mitigating the SET pulse,and its upgrade,the 2-fringe scheme,takes on even more than 50% improvements over the unhardened one.This makes significant sense for the semi-conductor device reliability. 展开更多
关键词 single event transient (SET) open guard transistor ogt charge collection hardening efficiency.
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O-GlcNAc修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响 被引量:1
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作者 王腾飞 冯志强 +7 位作者 孙雅雯 赵善江 郝海生 邹惠影 杜卫华 赵学明 朱化彬 庞云渭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期3856-3865,共10页
旨在探究O-β-N-乙酰葡糖胺(O-linked beta-N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响。本研究以牛卵母细胞为研究对象,检测O-GlcNAc转移酶(O-GlcNAc transferase,OGT)、O-GlcNAc糖苷酶(O-GlcNAcase,OGA)及... 旨在探究O-β-N-乙酰葡糖胺(O-linked beta-N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响。本研究以牛卵母细胞为研究对象,检测O-GlcNAc转移酶(O-GlcNAc transferase,OGT)、O-GlcNAc糖苷酶(O-GlcNAcase,OGA)及O-GlcNAc蛋白在牛体外成熟卵母细胞中的分布;将卵丘-卵母细胞复合体分别在添加4 mmol·L^(-1) OGT抑制剂BADGP和100μmol·L^(-1) OGA抑制剂PUGNAc的体外成熟液中进行体外成熟,将未添加组作为对照组,分别统计各组卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育率,并采用荧光定量PCR和Western blot检测O-GlcNAc蛋白、OGT、OGA、GFAT和TXNIP的mRNA和蛋白表达。结果表明,OGT和O-GlcNAc蛋白共定位于牛体外成熟卵母细胞的细胞质和细胞核中,而OGA和O-GlcNAc蛋白共定位于体外成熟卵母细胞的细胞质中,且相对集中在卵母细胞的皮质区。与对照组相比,BADGP处理组和PUGNAc处理组卵母细胞第一极体排出率((52.8±5.1)%&(60.9±1.9)%vs.(70.8±5.4)%)和体外受精囊胚发育率((9.6±4.9)%&(10.0±5.8)%vs.(21.5±4.3)%)均显著降低(P<0.05)。BADGP处理显著降低了OGT的表达,使卵母细胞的O-GlcNAc修饰水平发生下调,OGA的表达降低;而在PUGNAc处理组中,卵母细胞OGA的表达显著下调,O-GlcNAc修饰水平升高,OGT的蛋白表达显著减少;抑制OGT显著上调己糖胺生物合成途径关键限速酶GFAT mRNA的表达,而抑制OGA则显著下调GFAT mRNA的表达;此外,O-GlcNAc修饰水平改变显著上调了葡萄糖调控关键因子TXNIP的表达。研究结果表明,O-GlcNAc修饰水平改变会降低牛卵母细胞体外成熟及发育能力,卵母细胞通过反馈调节OGT、OGA、GFAT以及TXNIP的表达,应对O-GlcNAc修饰水平的波动。 展开更多
关键词 卵母细胞 O-GlcNAc修饰 ogt OGA
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OGT在食管癌中的表达及其与临床预后的关系 被引量:1
10
作者 马震川 马跃峰 +3 位作者 孔冉冉 孙良璋 乔哲 李少民 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第9期826-829,共4页
目的探讨O-GIc NAc转移酶(O-Gic NAc transferase,OGT)在食管癌组织中的表达情况及其与预后的关系。方法收集66例食管癌组织标本及其对应癌旁组织标本,利用免疫组化法测定OGT蛋白的表达,并与患者的临床资料相结合。比较OGT表达与年龄、... 目的探讨O-GIc NAc转移酶(O-Gic NAc transferase,OGT)在食管癌组织中的表达情况及其与预后的关系。方法收集66例食管癌组织标本及其对应癌旁组织标本,利用免疫组化法测定OGT蛋白的表达,并与患者的临床资料相结合。比较OGT表达与年龄、性别、淋巴结转移、肿瘤分化和TNM分期之间的关系,并结合随访资料分析OGT表达和临床预后的关系。结果 66个肿瘤标本中,51例(77.27%)阳性表达,15例(22.73%)阴性表达。癌旁正常组织中OGT阳性表达率为21.21%(14/66)。OGT的表达还与TNM分期、病理分化相关(P<0.001),与年龄、性别和淋巴结转移无关(P>0.05)。OGT阳性表达和阴性表达食管癌患者的3年生存率分别为43.7%和64.2%,两者比较差异有统计学意义(P=0.003)。结论OGT可能被用作预测食管癌预后的良好指标。 展开更多
关键词 食管癌 ogt 预后
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O-糖基转移酶介导的O-糖基化在卵巢癌细胞迁移过程中的作用及其机制研究 被引量:1
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作者 晋凤珍 于超 杨竹 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期476-485,共10页
探讨O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)介导的O-GlcNAc糖基化在卵巢癌细胞迁移过程中的作用及其分子机制。采用RNAi基因干扰技术,干扰OGT基因的表达,构建低表达O-GlcNAc糖基化的卵巢癌HO-8910PM细胞模型;采用O-GlcNAc糖苷酶(OGA)抑制剂PUGNAc或Th... 探讨O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)介导的O-GlcNAc糖基化在卵巢癌细胞迁移过程中的作用及其分子机制。采用RNAi基因干扰技术,干扰OGT基因的表达,构建低表达O-GlcNAc糖基化的卵巢癌HO-8910PM细胞模型;采用O-GlcNAc糖苷酶(OGA)抑制剂PUGNAc或Thiamet G诱导,构建高表达O-GlcNAc糖基化的卵巢癌OVCAR3细胞模型;通过qPCR和Western blot法验证细胞模型的有效性;通过体外细胞迁移实验观察O-GlcNAc糖基化对卵巢癌细胞迁移的影响;并通过qPCR法进一步检测不同的细胞模型中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9的表达。结果显示,在HO-8910PM细胞中,干扰OGT基因的表达,可以降低MMP-2和MMP-9的mRNA水平,抑制HO-8910PM细胞的迁移。综上,OGT介导的O-GlcNAc糖基化可以通过调节MMP-2和MMP-9的表达参与调控卵巢癌细胞的迁移。 展开更多
关键词 ogt OVCAR3 HO-8910PM 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9
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OGT多克隆抗体的制备及特异性分析 被引量:1
12
作者 张迪 张瑜 +4 位作者 陈丹阳 陈博雅 修玉宗 于文功 顾玉超 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第3期414-418,共5页
目的:为了探讨O-GlcNAc糖基转移酶OGT的生理和病理作用,需制备能高效特异性检测OGT的抗体。方法:在NCBI数据库中,查找人源OGT基因序列,根据OGT的结构特点,选取OGT的C末端催化结构域中的一段多肽序列(464-949位点氨基酸)做抗原。首先,构... 目的:为了探讨O-GlcNAc糖基转移酶OGT的生理和病理作用,需制备能高效特异性检测OGT的抗体。方法:在NCBI数据库中,查找人源OGT基因序列,根据OGT的结构特点,选取OGT的C末端催化结构域中的一段多肽序列(464-949位点氨基酸)做抗原。首先,构建OGT的C末端催化结构域(464-949位点氨基酸)的重组表达载体pET30-a-OGT-C,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达融合His标签的OGT-C蛋白,Ni+珠亲和层析法纯化提取OGT-C蛋白。再以OGT-C重组蛋白作为抗原,免疫Wistar大鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA法检测OGT抗体的效价,Western blotting鉴定抗体特异性。结果:多抗效价达1:80000;在免疫印迹实验中,此多抗可以高效的检测重组抗原,并可以特异性识别培养细胞内源表达的ncOGT和mOGT这2种OGT亚型。结论:实验结果表明,获得高效价、高特异性的OGT多克隆抗体,在OGT的生物学研究中可以用于检测ncOGT和mOGT的表达。 展开更多
关键词 ogt 多克隆抗体 ELISA WESTERN BLOTTING
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O-GlcNAc修饰研究进展
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作者 刘华东 陈永湘 +1 位作者 赵玉芬 李艳梅 《中国科技论文在线》 CAS 2007年第8期543-549,共7页
O-GlcNAc糖基化修饰作为一种特殊的蛋白质翻译后修饰形式,动态调节细胞信号传导途径中很多酶的功能,与磷酸修饰有"阴阳调节"关系,正在成为研究的热点。本文综述了近年来O-GlcNAc糖基化修饰酶及其供体底物的研究进展。
关键词 化学生物学 O-GlcNAc修饰 UDP-GLCNAC ogt O-GLCNACASE
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不同时长冷暴露下C2C12细胞中O-GlcNAc和IL-6表达的变化
14
作者 胡亚婕 刘洋 +5 位作者 姚睿智 史宏昭 刘鹏 徐彬 吕红明 李士泽 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期219-225,共7页
冷暴露下骨骼肌中O-GlcNAc(O-linkedβ-N-acetylglucosamine)糖基化修饰水平显著升高,作为"应激感受器"调控细胞信号转导及基因转录等;而骨骼肌作为分泌器官通过收缩产生的肌源性IL-6具有免疫作用,更能够调节骨骼肌中糖、脂... 冷暴露下骨骼肌中O-GlcNAc(O-linkedβ-N-acetylglucosamine)糖基化修饰水平显著升高,作为"应激感受器"调控细胞信号转导及基因转录等;而骨骼肌作为分泌器官通过收缩产生的肌源性IL-6具有免疫作用,更能够调节骨骼肌中糖、脂代谢。本试验旨在检测不同时长冷暴露下小鼠成肌细胞系C2C12中O-GlcNAc相关蛋白和IL-6表达变化,初步探究冷暴露下O-GlcNAc与IL-6之间的潜在联系。本试验通过体外培养小鼠成肌细胞系C2C12,并随机分为不做冷暴露处理的对照组(cold 0 h组,也称为control组,37℃±0.5℃)和冷暴露(32℃±0.5℃)3、6、9、12 h处理组,采用Western blot方法检测不同时长冷暴露下O-GlcNAc糖基化水平和OGT、OGA及IL-6表达水平。结果显示,与对照组相比,冷暴露3 h,OGT表达水平显著升高(P<0.05),冷暴露6 h,OGA表达水平显著升高(P<0.05);冷暴露3 h,O-GlcNAc糖基化修饰水平和IL-6表达水平极显著升高(P<0.01)。不同时长冷暴露下,C2C12细胞中O-GlcNAc糖基化修饰水平及IL-6表达水平显著升高,并且,不同时长冷暴露下,O-GlcNAc糖基化修饰和IL-6表达变化趋势高度相似,提示冷暴露下O-GlcNAc糖基化修饰可能参与IL-6表达的调控。 展开更多
关键词 冷暴露 O-GLCNAC IL-6 ogt OGA
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OGT结构改造对糖探针GlcNAz利用率的影响
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作者 李玲 刘丽 +3 位作者 刘晓燕 白冰洋 刘丕 张连文 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期37-44,共8页
GlcNAz作为探针,可用于代谢标记细胞内O-GlcNAc修饰蛋白,帮助蛋白富集和后续质谱鉴定.但细胞内大量存在的天然糖供体(UDP-GlcNAc)会竞争结合OGT蛋白,从而降低GlcNAz利用效率.为了提高GlcNAz利用率,在分子对接基础上,对OGT进行结构改造,... GlcNAz作为探针,可用于代谢标记细胞内O-GlcNAc修饰蛋白,帮助蛋白富集和后续质谱鉴定.但细胞内大量存在的天然糖供体(UDP-GlcNAc)会竞争结合OGT蛋白,从而降低GlcNAz利用效率.为了提高GlcNAz利用率,在分子对接基础上,对OGT进行结构改造,构建了两种sOGT突变体(M130A、Y470A)并测定了它们对UDP-GlcNAz的利用率.与野生型sOGT相比,两种突变体对UDP-GlcNAz的利用率(相对于UDPGlcNAc)均有显著提高,细胞内M130A对GlcNAz的利用率(相对于GlcNAc)提高了2.2倍.最终结果表明:M130A能显著提高细胞对探针GlcNAz的利用率,为大量鉴定细胞内O-GlcNAc修饰蛋白提供了新思路. 展开更多
关键词 ogt 结构优化 分子探针 GlcNAz
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利用大肠杆菌表达系统制备具有O-GlcNAc修饰的p120ctn蛋白的研究
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作者 刘海艳 单慧 +2 位作者 韩翠芳 于文功 顾玉超 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期91-95,共5页
p120-连环蛋白(p120-catenin,p120ctn)是一个多功能蛋白,其在E-钙黏蛋白(E-cadherin)粘附复合体形成、Rho GTP酶信号通路和基因转录调节等过程中发挥重要作用。前期研究发现p120ctn蛋白具有O-连接的β-N-乙酰葡糖胺(Olinked N-acetylglu... p120-连环蛋白(p120-catenin,p120ctn)是一个多功能蛋白,其在E-钙黏蛋白(E-cadherin)粘附复合体形成、Rho GTP酶信号通路和基因转录调节等过程中发挥重要作用。前期研究发现p120ctn蛋白具有O-连接的β-N-乙酰葡糖胺(Olinked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰,然而O-GlcNAc修饰对于p120ctn功能的调节作用及其机制还未阐明。本研究中构建了p120ctn的重组表达质粒,并将其与O-GlcNAc糖基转移酶(O-GlcNAc transferase,OGT)的表达质粒共同转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中。利用该菌株,实现了将p120ctn蛋白与OGT蛋白在大肠杆菌中共表达。通过免疫印迹检测发现与OGT蛋白共表达的p120ctn蛋白具有O-GlcNAc修饰。具有O-GlcNAc修饰的p120ctn蛋白的获得为后续在体外实验中对O-GlcNAc修饰调节p120ctn的作用和机制的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 O-GLCNAC P120CTN ogt 重组表达
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miR-204通过抑制OGT的表达调控非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移
17
作者 景鹏宇 赵楠 +2 位作者 朱喜明 党海舟 王晓东 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第22期4220-4227,共8页
目的:探究miR-204和O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O link N-acetylglucosamine transferase,OGT)对非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和转移的影响,并深入分析其可能机制。方法:采用Oncomine及KM-Ploter数据库分... 目的:探究miR-204和O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O link N-acetylglucosamine transferase,OGT)对非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和转移的影响,并深入分析其可能机制。方法:采用Oncomine及KM-Ploter数据库分析OGT在肺癌组织中的表达及与肺癌患者预后的关系;采用慢病毒转染人非小细胞肺癌A549及永生化人肺支气管上皮细胞BEAS-2B,分别构建OGT稳定下调和过表达的细胞系,利用CCK-8、平板克隆和裸鼠皮下成瘤实验检测细胞增殖的情况,划痕实验、Transwell实验和裸鼠尾静脉注射肺转移模型检测细胞转移的情况。利用数据库分析可能参与OGT调控的microRNA,并用双荧光素酶报告基因验证。利用TCGA数据库分析miR-204在肺癌中的表达情况,并在30例肺癌组织及其对应癌旁组织中分析miR-204与OGT之间的相关性。结果:OGT在肺癌组织中呈高表达,且与患者的不良预后相关(HR=1.22,P <0.01);OGT的表达上调肺癌细胞的增殖和转移;miR-204可以负向调控OGT的表达,且miR-204在肺癌组织中表达水平显著低于癌旁组织,在肺癌组织中miR-204的水平与OGT的表达水平呈负相关(R^2=-0.4729,P <0.01)。结论:在非小细胞肺癌中,miR-204的降低通过上调OGT的表达促进肺癌的增殖和转移。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 增殖 转移 miR-204 ogt
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一种FRET多肽的酶-化学法合成
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作者 刘晓燕 王玉秋 +4 位作者 何晔 周丰 郭祖浩 张连文 李玲 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期98-103,共6页
选择FITC和罗丹明类荧光分子Alexa Fluor(R)514作为荧光对,通过酶-化学方法合成了一种潜在的FRET多肽.首先,在OGT催化下,将N-叠氮乙酰葡糖胺(GlcNAz)通过O-糖苷键连接到FITC标记的底物八肽(YAVVPVSK)的丝氨酸羟基上;然后,... 选择FITC和罗丹明类荧光分子Alexa Fluor(R)514作为荧光对,通过酶-化学方法合成了一种潜在的FRET多肽.首先,在OGT催化下,将N-叠氮乙酰葡糖胺(GlcNAz)通过O-糖苷键连接到FITC标记的底物八肽(YAVVPVSK)的丝氨酸羟基上;然后,将炔基标记的Alexa Fluor(R)514通过点击化学反应连接到GlcNAz上,得到目标化合物,并通过质谱进行了表征. 展开更多
关键词 O-GLCNAC ogt 点击化学 荧光能量共振转移
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蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰在妇科肿瘤中的研究进展 被引量:1
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作者 马春 张鑫磊 +2 位作者 杨虎林 翟宇宏 张玮 《癌症进展》 2018年第11期1340-1343,共4页
妇科恶性生殖系统肿瘤在中国具有发病率高、病死率高和症状隐匿等特点。虽然目前对于妇科肿瘤的研究比较多,但是缺乏有效的特异性分子靶向研究。故寻求针对妇科恶性肿瘤的新型早期诊断标志物或新的治疗靶点已经成为临床研究的关键。蛋白... 妇科恶性生殖系统肿瘤在中国具有发病率高、病死率高和症状隐匿等特点。虽然目前对于妇科肿瘤的研究比较多,但是缺乏有效的特异性分子靶向研究。故寻求针对妇科恶性肿瘤的新型早期诊断标志物或新的治疗靶点已经成为临床研究的关键。蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰是广泛存在于细胞内的一种翻译后修饰,随着科学技术的不断发展,不仅发现多种蛋白质可以被O-GlcNAc糖基化修饰,而且发现在部分肿瘤中都存在OGlcNAc糖基化修饰的异常表达。蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰逐渐成为分子领域的研究热点,有望成为新的肿瘤标志物或是分子靶点治疗。本文就O-GlcNAc糖基化修饰的形成过程、修饰过程、潜在功能及其在妇科肿瘤发生发展中的作用作一综述。 展开更多
关键词 O-GLCNAC 糖基化 ogt OGA 妇科肿瘤
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蛋白分子O-糖基化的研究进展 被引量:1
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作者 徐林 于洪蛟 +3 位作者 管栋 殷一博 梁洪生 张相彤 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1689-1694,共6页
蛋白分子的氧连接糖基化(O-糖基化)修饰是生物体内必不可少的转录后化学修饰之一,其作用方式类似磷酸化,并且两者之间相互作用,共同调节生物大分子的活性。O-糖基化修饰在生物体的转录、翻译、核运输、细胞骨架的形成以及调节细胞器的... 蛋白分子的氧连接糖基化(O-糖基化)修饰是生物体内必不可少的转录后化学修饰之一,其作用方式类似磷酸化,并且两者之间相互作用,共同调节生物大分子的活性。O-糖基化修饰在生物体的转录、翻译、核运输、细胞骨架的形成以及调节细胞器的功能中发挥着重要的作用。通过影响细胞信号的传导,在细胞吞噬、炎性细胞的迁移以及细胞内大分子物质的循环中也起着重要作用。该文主要通过介绍蛋白分子O-糖基化修饰的基础理论以及O-糖基化修饰作用的几个方面,来简要阐述O-糖基化修饰在生物体内发挥的作用。 展开更多
关键词 O-糖基化 磷酸化 丝氨酸和苏氨酸残基 乙酰氨基葡糖转移酶 p—N-乙酰氨基己 糖苷酶
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