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鼠白细胞介素12(mIL-12)在昆虫细胞中的表达
被引量:
3
1
作者
李昌麟
沈惠
+2 位作者
林明群
张宗梁
申庆祥
《实验生物学报》
CSCD
1998年第2期171-178,共8页
人IL-12的作用具有种属特异性,无法对鼠淋巴细胞起作用。因此,为了在啮齿动物模型上研究该细胞因子的免疫学效应,并评价其临床应用前景,就很有必要获得重组鼠IL-12(mIL-12)。为此,我们首先构建了两个表达载体pVL1393-mp40和pVL1393-mp35...
人IL-12的作用具有种属特异性,无法对鼠淋巴细胞起作用。因此,为了在啮齿动物模型上研究该细胞因子的免疫学效应,并评价其临床应用前景,就很有必要获得重组鼠IL-12(mIL-12)。为此,我们首先构建了两个表达载体pVL1393-mp40和pVL1393-mp35,并分别与线性化多角体病毒基因组DNA共转染昆虫细胞株Sf9,用目视法筛选出重组病毒AcNPV-mp40和AcNPV-mp35,然后共感染昆虫细胞,使mp40和mp35在昆虫细胞中共表达。经实时BIA和Northern blot分析,表明重组mIL-12在昆虫细胞中表达成功。经还原条件下的SDS-PAGE分析,重组mp40和mp35的分子量分别为40KDa和22KDa。非还原条件下的Western blot结果显示,重组mIL-12的表观分子量为80KDa。用抗体捕获法在条件培液中测到了重组产物的生物活性,经与参照标准相比照,重组mIL-12的表达量约为10-15μg/10~6细胞。
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关键词
鼠
白细胞介素
12
昆虫
细胞
表达
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职称材料
以沙门氏菌为载体的DNA疫苗对小鼠肿瘤的预防作用
被引量:
2
2
作者
齐桓
李玉华
《现代医药卫生》
2007年第13期1897-1899,共3页
目的:探讨减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的DNA口服疫苗防治小鼠肿瘤的可行性。方法:通过电转化法将真核表达载体pCMVmIL-12、EGFPN1导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中,经由胃管饲于BALB/c和C57BL/6小鼠。6周后分别用4T1乳腺癌细胞和Lewis肺癌...
目的:探讨减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的DNA口服疫苗防治小鼠肿瘤的可行性。方法:通过电转化法将真核表达载体pCMVmIL-12、EGFPN1导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中,经由胃管饲于BALB/c和C57BL/6小鼠。6周后分别用4T1乳腺癌细胞和Lewis肺癌细胞进行攻击。通过流式细胞仪、共聚焦显微镜检测绿色荧光蛋白在小鼠各组织中的表达,通过PCR和ELISA的方法检测mIL-12基因的整合和表达情况。并考察肿瘤的受抑情况和小鼠的生存期。结果:在小鼠的肝、脾、小肠、肾脏和肿瘤中可检测到绿色荧光蛋白的表达和相应细胞因子基因的整合。血清中相应的细胞因子水平较对照组明显升高(P<0.05),生存期远远超过对照组小鼠(P<0.05)。结论:减毒沙门氏菌可作为口服基因治疗载体,为肿瘤的预防和治疗提供一条简便、安全、有效的途径。
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关键词
基因治疗
减毒沙门氏菌
鼠
白细胞介素
-
12
下载PDF
职称材料
题名
鼠白细胞介素12(mIL-12)在昆虫细胞中的表达
被引量:
3
1
作者
李昌麟
沈惠
林明群
张宗梁
申庆祥
机构
中国科学院上海细胞生物学研究所
出处
《实验生物学报》
CSCD
1998年第2期171-178,共8页
文摘
人IL-12的作用具有种属特异性,无法对鼠淋巴细胞起作用。因此,为了在啮齿动物模型上研究该细胞因子的免疫学效应,并评价其临床应用前景,就很有必要获得重组鼠IL-12(mIL-12)。为此,我们首先构建了两个表达载体pVL1393-mp40和pVL1393-mp35,并分别与线性化多角体病毒基因组DNA共转染昆虫细胞株Sf9,用目视法筛选出重组病毒AcNPV-mp40和AcNPV-mp35,然后共感染昆虫细胞,使mp40和mp35在昆虫细胞中共表达。经实时BIA和Northern blot分析,表明重组mIL-12在昆虫细胞中表达成功。经还原条件下的SDS-PAGE分析,重组mp40和mp35的分子量分别为40KDa和22KDa。非还原条件下的Western blot结果显示,重组mIL-12的表观分子量为80KDa。用抗体捕获法在条件培液中测到了重组产物的生物活性,经与参照标准相比照,重组mIL-12的表达量约为10-15μg/10~6细胞。
关键词
鼠
白细胞介素
12
昆虫
细胞
表达
Keywords
mIL-
12
Real-time Biomolecular Interaction Analysis(BIA). Baculovirus expression vector.Co-expression. Insect cells.
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q962
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职称材料
题名
以沙门氏菌为载体的DNA疫苗对小鼠肿瘤的预防作用
被引量:
2
2
作者
齐桓
李玉华
机构
南方医科大学南方医院泌尿外科
南方医科大学珠江医院泌尿外科
出处
《现代医药卫生》
2007年第13期1897-1899,共3页
基金
广东省自然科学基金博士科研启动基金(04300412)。
文摘
目的:探讨减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的DNA口服疫苗防治小鼠肿瘤的可行性。方法:通过电转化法将真核表达载体pCMVmIL-12、EGFPN1导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中,经由胃管饲于BALB/c和C57BL/6小鼠。6周后分别用4T1乳腺癌细胞和Lewis肺癌细胞进行攻击。通过流式细胞仪、共聚焦显微镜检测绿色荧光蛋白在小鼠各组织中的表达,通过PCR和ELISA的方法检测mIL-12基因的整合和表达情况。并考察肿瘤的受抑情况和小鼠的生存期。结果:在小鼠的肝、脾、小肠、肾脏和肿瘤中可检测到绿色荧光蛋白的表达和相应细胞因子基因的整合。血清中相应的细胞因子水平较对照组明显升高(P<0.05),生存期远远超过对照组小鼠(P<0.05)。结论:减毒沙门氏菌可作为口服基因治疗载体,为肿瘤的预防和治疗提供一条简便、安全、有效的途径。
关键词
基因治疗
减毒沙门氏菌
鼠
白细胞介素
-
12
Keywords
Gene therapy
Attenuated salmonella
Mouse IL-
12
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鼠白细胞介素12(mIL-12)在昆虫细胞中的表达
李昌麟
沈惠
林明群
张宗梁
申庆祥
《实验生物学报》
CSCD
1998
3
下载PDF
职称材料
2
以沙门氏菌为载体的DNA疫苗对小鼠肿瘤的预防作用
齐桓
李玉华
《现代医药卫生》
2007
2
下载PDF
职称材料
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参考文献
引证文献
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