腺病毒介导的骨形态发生蛋白2基因转染对成骨及血管化的影响 被引量：18

1

作者 李建军 韩冬 +6 位作者 刘建国 孙鸿斌 景元海 卜丽莎 张文岚 王宏 徐莘香 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期284-285,共2页

目的　观察骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因转染人骨髓基质干细胞 (hBMSC)对诱导成骨及血管化的影响　方法　基因转染后 ,检则骨钙素、Ⅰ型胶原和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。并利用转染后的培养液上清诱导小鼠成纤维细胞 (L92 9)。... 目的　观察骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因转染人骨髓基质干细胞 (hBMSC)对诱导成骨及血管化的影响　方法　基因转染后 ,检则骨钙素、Ⅰ型胶原和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。并利用转染后的培养液上清诱导小鼠成纤维细胞 (L92 9)。然后将转染后细胞接种到PLA/PCL(聚乳酸 /聚己内酯 )支架上 ,然后扫描电镜观察。　结果　BMP 2基因转染后 ,可诱导hBMSC有L92 9骨钙素、Ⅰ型胶原呈阳性表达 ,VEGF的表达明显增高。转染细胞在支架中上生长良好 ,能量谱仪测得钙质分泌。蛋白印迹法检测到培养液中有BMP 2蛋白产生。　结论　BMP 2基因转染可诱导hBMSC成骨转化 ,且通过上调VEGF表达促进血管化 ,复合转染后细胞构建的组织工程骨对治疗骨缺损具有重要意义。 展开更多

关键词 基因转染 BMP-2 血管化 成骨 骨形态发生蛋白2 腺病毒介导 诱导 BMSC 鼠成纤维细胞 培养液

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瘦素对体外大鼠成纤维细胞增殖与胶原合成的影响 被引量：16

2

作者 李培兵 金宏 +5 位作者 刘佃辛 王先远 许志勤 南文考 王永辉 高兰兴 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期20-22,共3页

目的　研究瘦素对体外培养大鼠成纤维细胞 (fibroblast,FB)增殖与胶原合成的影响 ,以阐明 FB介导瘦素在大鼠皮肤创伤愈合中的促进作用。　方法　体外培养乳鼠真皮 FB,通过 MTT比色分析法、3H-胸腺嘧啶核苷(3H- Td R)和 3H-脯氨酸 (3H- P... 目的　研究瘦素对体外培养大鼠成纤维细胞 (fibroblast,FB)增殖与胶原合成的影响 ,以阐明 FB介导瘦素在大鼠皮肤创伤愈合中的促进作用。　方法　体外培养乳鼠真皮 FB,通过 MTT比色分析法、3H-胸腺嘧啶核苷(3H- Td R)和 3H-脯氨酸 (3H- Pro)掺入法观察不同浓度的瘦素 ,分别为 0、10、5 0、10 0、2 0 0及 4 0 0 ng/ ml对其增殖和胶原合成的影响。　结果　瘦素剂量在 4 0 0 ng/ ml以下时 ,随瘦素剂量增加明显增加了体外培养大鼠 FB MTT的光密度值和 3H- Td R的掺入量。3H- Pro的掺入量随瘦素剂量增加基本呈增大趋势。 2 0 0、4 0 0 ng/ ml剂量组的3H- Td R掺入量 379±10 1cpm、32 6± 33cpm,与对照组 2 19± 5 6 cpm比较有统计学差异 (P<0 .0 5 ) ;且 2 0 0、4 0 0 ng/ ml剂量组的 MTT吸光度(A)值 0 .0 82± 0 .0 13、0 .0 91± 0 .0 18与对照组 0 .0 6 3± 0 .0 10比较有统计学差异 (P<0 .0 5 ) ;2 0 0、4 0 0 ng/ ml剂量组的 3H- Pro掺入量 911± 5 5 cpm、10 72± 2 5 9cpm,与对照组 6 79± 176 cpm比较有统计学差异 (P<0 .0 5 )。　结论　瘦素促进了 FB的增殖和胶原蛋白的合成 ,这可能是瘦素发挥促进大鼠皮肤愈合作用的途径之一。 展开更多

关键词 瘦素 大鼠 胶原合成 增殖 剂量 FB 对照组 鼠成纤维细胞 体外培养 脯氨酸

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纳米羟基磷灰石-氧化锆复合陶瓷体外细胞毒性研究 被引量：11

3

作者 李静 张富强 +1 位作者 靳喜海 高濂 《北京口腔医学》 CAS 2004年第4期191-194,共4页

目的 :为今后将纳米羟基磷灰石 氧化锆复合陶瓷应用于口腔种植修复 ,先对该材料进行体外细胞毒性试验 ,评价其初步生物安全性。方法 :体外培养L92 9小鼠成纤维细胞用不同材料的浸提液培养 1、4、7天 ,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化 ... 目的 :为今后将纳米羟基磷灰石 氧化锆复合陶瓷应用于口腔种植修复 ,先对该材料进行体外细胞毒性试验 ,评价其初步生物安全性。方法 :体外培养L92 9小鼠成纤维细胞用不同材料的浸提液培养 1、4、7天 ,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化 ;用四氮唑盐比色法 (MTT)检测 ,计算细胞相对增殖度 ,用六级毒性分类法评级。结果 :培养期细胞贴壁生长 ,形态良好 ,随着培养天数增加细胞大量增殖 ,毒级为 0～ 1级。结论 :初步证实了该材料具有人体应用的生物安全基础 ,无细胞毒性。 展开更多

关键词 体外细胞毒性 纳米羟基磷灰石 增殖 口腔种植 MTT 小鼠 细胞形态 鼠成纤维细胞 生物安全性 体外培养

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血小板源性生长因子基因修饰的人工复合皮移植大鼠创面效果观察 被引量：7

4

作者 陈曦 谭谦 +3 位作者 梁志为 浦跃朴 林子豪 吴建明 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期33-36,共4页

目的观察血小板源性生长因子B(PDGFB)基因修饰的人工复合皮移植大鼠创面后的效果。方法构建PDGFB真核表达质粒,在脂质体介导下转染大鼠成纤维细胞。分别构建复合皮1(角质形成细胞+猪脱细胞真皮基质+PDGFB基因转染的成纤维细胞)和复合皮2... 目的观察血小板源性生长因子B(PDGFB)基因修饰的人工复合皮移植大鼠创面后的效果。方法构建PDGFB真核表达质粒,在脂质体介导下转染大鼠成纤维细胞。分别构建复合皮1(角质形成细胞+猪脱细胞真皮基质+PDGFB基因转染的成纤维细胞)和复合皮2(角质形成细胞+猪脱细胞真皮基质+未转染的成纤维细胞),移植于大鼠背部全层皮肤缺损创面,相应设为转染组、未转染组(各18只)。以不作皮肤移植的8只大鼠全层皮肤缺损创面为对照组。术后2周观察大鼠创面移植皮片存活情况。术后2、4、6周观察大鼠创面大体情况,计算创面收缩率,并取创面组织标本进行组织学观察。结果(1)术后2周,转染组大鼠中皮片完全存活者14只、部分存活者3只、未存活者1只;未转染组大鼠中皮片完全存活者10只、部分存活者4只、未存活者4只。(2)术后2周,对照组创面结痂。术后6周转染组移植皮片表面光滑,有弹性,抗磨擦性强,愈合效果优于其他两组。(3)术后2、4、6周,对照组大鼠创面收缩率均高于其他两组,转染组创面收缩率低于未转染组(P<0.05)。(4)术后2周转染组移植皮片内可见较多毛细血管分布;6周时表皮细胞分化达7～10层,纤维排列致密整齐,毛细血管分布均匀。结论用含PDGFB基因的人工复合皮移植修复创面,可明显提高创面愈合质量。 展开更多

关键词 创面 大鼠 转染 存活者 术后 皮片 移植 PDGF-B B基因 鼠成纤维细胞

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蚯蚓组织成分对成纤维细胞增生作用的实验研究 被引量：8

5

作者 崔泓 于培兰 +3 位作者 孙林 张祖珣 张海燕 李卫红 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第3期317-320,共4页

通过蚯蚓组织成分对成纤维细胞增生作用的实验研究 ,探讨其对创伤愈合的作用机制。用醋酸盐缓冲液抽提蚯蚓组织成分 ,经硫酸铵分段盐析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析等方法 ,分离提取到 1组蛋白质成分。采用MTT法分析各分离组分对小... 通过蚯蚓组织成分对成纤维细胞增生作用的实验研究 ,探讨其对创伤愈合的作用机制。用醋酸盐缓冲液抽提蚯蚓组织成分 ,经硫酸铵分段盐析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析等方法 ,分离提取到 1组蛋白质成分。采用MTT法分析各分离组分对小鼠成纤维细胞增生作用的影响。结果 :经分离提取促增生组分位于SephadexG1 0 0层析第 1峰 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳显示此促增生组分为 3条区带 ,相对分子质量范围 5 70 0 0、72 0 0 0、870 0 0。 展开更多

关键词 鼠成纤维细胞 增生作用 实验研究 白质 MTT法 创伤愈合 小鼠 组蛋白 阴离子交换层析 蚯蚓

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以两种不同成纤维细胞为饲养层培养牛胚胎干细胞的比较 被引量：5

6

作者 靳木子 马玉珍 +3 位作者 仓明 王瑞 任宇 刘东军 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第6期57-61,共5页

牛胚胎干细胞的培养一直未能确定最适合的饲养层,寻找一种适合于其生长的饲养层对于成功培养牛胚胎干细胞有重要意义。本研究以胎鼠和牛胎儿为材料,分别以含10%FBS的高糖DMEM和含10%FBS的DMEMF12为培养液,分离并且获得2～5代的胎鼠成纤... 牛胚胎干细胞的培养一直未能确定最适合的饲养层,寻找一种适合于其生长的饲养层对于成功培养牛胚胎干细胞有重要意义。本研究以胎鼠和牛胎儿为材料,分别以含10%FBS的高糖DMEM和含10%FBS的DMEMF12为培养液,分离并且获得2～5代的胎鼠成纤维细胞和5～6代的牛胎儿成纤维细胞。在上述两种成纤维细胞为饲养层的条件下,采用含10%胎牛血清、0.1 mmol/Lβ-巯基乙醇、0.1 mmol/L非必须氨基酸、100 U/mL青霉素、0.05 mg/mL链霉素、20 ng/mL LIF和10 ng/mL bFGF的DMEMF12培养液培养牛胚胎干细胞,来寻找一种适合于牛胚胎干细胞培养的饲养层。结果表明,在相同的培养体系条件下培养牛胚胎干细胞,以胎鼠成纤维细胞为饲养层的贴壁率显著高于以牛胎儿成纤维细胞为饲养层的贴壁率(P<0.05),以牛胎儿成纤维细胞为饲养层更利于胚胎滋养层的去除。 展开更多

关键词 牛胎儿成纤维细胞 饲养层 养牛 胚胎干细胞培养 牛胚胎 鼠成纤维细胞 贴壁率 胎鼠 培养液 DMEM 细胞的培养 胚胎滋养层 条件 胎牛血清 巯基乙醇 培养体系 青霉素 链霉素 氨基酸 生长

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卵巢癌细胞系中CD147的表达对基质金属蛋白酶分泌和活性的影响 被引量：3

7

作者 杨红 侯向华 辛晓燕 《现代妇产科进展》 CSCD 2004年第1期31-33,共3页

目的 :探讨CD1 4 7在卵巢癌细胞中的表达和卵巢癌细胞与鼠成纤维细胞共孵育对基质金属蛋白酶产生及活性的影响。方法 :Westernblot方法检测不同卵巢癌细胞系HO 891 0 ,3AO ,SKOV3 ,TC 1及鼠成纤维细胞NIH3T3中CD1 4 7的表达 ,检测卵巢... 目的 :探讨CD1 4 7在卵巢癌细胞中的表达和卵巢癌细胞与鼠成纤维细胞共孵育对基质金属蛋白酶产生及活性的影响。方法 :Westernblot方法检测不同卵巢癌细胞系HO 891 0 ,3AO ,SKOV3 ,TC 1及鼠成纤维细胞NIH3T3中CD1 4 7的表达 ,检测卵巢癌细胞系与鼠成纤维细胞共孵育时CD1 4 7的表达及基质金属蛋白酶的分泌 ;凝胶酶谱分析其产生MMPs的含量及活性。结果 :SKOV3 ,TC 1 ,NIH3T3细胞系中CD1 4 7表达阴性 ,HO 891 0 ,3AO细胞系CD1 4 7表达阳性 ;MMP 2 ,MMP 9在HO 891 0 ,3AO细胞系中表达明显增高 ,MMP 9以酶原和活性形式表达 ,MMP 2仅以酶原形式表达 ;CD1 4 7可以促进MMPs的分泌 ,增加MMPs活性。结论 :CD1 4 7可能在卵巢癌侵袭转移过程中起重要作用 。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 细胞系 CD147 金属蛋白酶类 鼠成纤维细胞 活性 分泌

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表皮调节素的生理功能及其在消化系统肿瘤中的研究进展

8

作者 刘福源 王旭丹 +1 位作者 李霄 岳树强 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期312-315,共4页

表皮调节素(EREG)是表皮生长因子超家族成员,最初是从鼠成纤维细胞来源的肿瘤细胞系NIH3T3/T7的条件培养基中纯化出来的。正常情况下,EREG编码的蛋白质广泛参与细胞增殖、再生、皮肤炎症、伤口愈合、卵母细胞成熟等多个生物过程,另外,E... 表皮调节素(EREG)是表皮生长因子超家族成员,最初是从鼠成纤维细胞来源的肿瘤细胞系NIH3T3/T7的条件培养基中纯化出来的。正常情况下,EREG编码的蛋白质广泛参与细胞增殖、再生、皮肤炎症、伤口愈合、卵母细胞成熟等多个生物过程,另外,EREG也与多种消化系统肿瘤的发生、侵袭、转移、预后以及药物敏感性等密切相关。因此,EREG可作为抗癌治疗的潜在靶点,也可作为预测肿瘤进展和预后的潜在标志物。 展开更多

关键词 鼠成纤维细胞 抗癌治疗 消化系统肿瘤 肿瘤进展 表皮生长因子 皮肤炎症 伤口愈合 条件培养基

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饲养层体系的建立与胚胎干细胞的培养 被引量：2

9

作者 盛利琴 叶荣 +2 位作者 陈学进 韩甫 张焕相 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期364-366,共3页

胚胎干细胞（ES细胞）是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞。ES细胞的研究已在多种动物实验中获得了突破性进展。ES细胞在体外培养不仅要保持其增殖能力，而且要维持其未分化的状态。由于饲养... 胚胎干细胞（ES细胞）是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞。ES细胞的研究已在多种动物实验中获得了突破性进展。ES细胞在体外培养不仅要保持其增殖能力，而且要维持其未分化的状态。由于饲养层细胞能分泌白血病抑制因子（LIF）等抑制ES细胞分化的因子，目前，ES细胞的培养主要是以饲养层来维持其干细胞特性。本实验探讨了胎鼠成纤维细胞（MEF）的分离培养、传代及其作为饲养层细胞的处理条件，建立快速稳定的MEF培养体系，并在此基础上探索了小鼠ES细胞的适宜培养、传代条件。 展开更多

关键词 饲养层细胞 胚胎干细胞 体外培养 白血病抑制因子 ES细胞 原始生殖细胞 鼠成纤维细胞 动物实验

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心脏成纤维细胞的来源与研究进展 被引量：3

10

作者 杨莹 古振杰 +2 位作者 麦憬霆 陈样新 王景峰 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期750-752,共3页

心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CF）、心肌细胞、内皮细胞和血管平滑肌细胞是心脏的主要细胞组分.研究显示,成纤维细胞占正常心脏组织细胞总数的百分比与种属及发育阶段密切相关.胚胎期18.5 d小鼠成纤维细胞约占心脏组织细胞总数... 心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CF）、心肌细胞、内皮细胞和血管平滑肌细胞是心脏的主要细胞组分.研究显示,成纤维细胞占正常心脏组织细胞总数的百分比与种属及发育阶段密切相关.胚胎期18.5 d小鼠成纤维细胞约占心脏组织细胞总数的14％,出生后1d降至10％,而后逐渐上升,到成年时约占27％.而出生后1d大鼠心脏成纤维细胞约占30％,到生后15d则占约64％.人类心脏成纤维细胞百分比尚未见报道.CF通过合成分泌胶原蛋白、纤连蛋白等细胞外基质（extracellular matrix,ECM）成分,为心脏细胞群提供完整的网状支撑系统,在维持心脏结构、功能、生物化学和电机械信号转导中发挥重要作用. 展开更多

关键词 心脏成纤维细胞 血管平滑肌细胞 鼠成纤维细胞 matrix 机械信号转导 细胞总数 心脏组织 合成分泌

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3种体细胞共培养体系对昆明鼠早期胚胎体外发育潜力的影响研究 被引量：3

11

作者 李娟 盖凌 +5 位作者 魏斌 王洪岩 王磊光 邱毅 张琦 于小洁 《中国计划生育学杂志》 2012年第7期455-458,共4页

目的:评价不同体细胞共培养体系对昆明鼠早期胚胎体外发育潜力的影响。方法:采用人卵丘细胞、昆明鼠卵丘细胞、昆明鼠成纤维细胞3种共培养体系与昆明鼠2细胞期胚胎共培养,与对照组比较,观察胚胎发育情况,计数囊胚细胞数、囊胚细胞凋亡... 目的:评价不同体细胞共培养体系对昆明鼠早期胚胎体外发育潜力的影响。方法:采用人卵丘细胞、昆明鼠卵丘细胞、昆明鼠成纤维细胞3种共培养体系与昆明鼠2细胞期胚胎共培养,与对照组比较,观察胚胎发育情况,计数囊胚细胞数、囊胚细胞凋亡数。结果:培养24～48h,4～8细胞及桑葚胚形成率共培养3组与对照组间无差异(P>0.05);培养72h,共培养3组间扩张囊胚形成率和囊胚形成率无差异(P>0.05),但均明显高于对照组(P<0.05);共培养3组间囊胚细胞数及囊胚细胞凋亡率无差异(P>0.05),但与对照组比较存在差异(P<0.05)。结论:不同类型的体细胞共培养体系均可在体外为胚胎发育提供一种更类似于体内的环境,有利于胚胎在体外发育。 展开更多

关键词 共培养 人卵丘细胞 鼠卵丘细胞 鼠成纤维细胞

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EPS8与肿瘤关系的研究进展 被引量：3

12

作者 甘金莹 李玉华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期439-442,448,共5页

1 EPS8的发现,结构特点及其作用 表皮生长因子受体通路底物8（EPS8）是细胞内信号通路底物。1993年Fazioli在过表达表皮生长因子受体（EGFR）的小鼠成纤维细胞（NIH-3T3）中,克隆出EGFR受体通路中受到酪氨酸磷酸化的底物,通过构建这些... 1 EPS8的发现,结构特点及其作用 表皮生长因子受体通路底物8（EPS8）是细胞内信号通路底物。1993年Fazioli在过表达表皮生长因子受体（EGFR）的小鼠成纤维细胞（NIH-3T3）中,克隆出EGFR受体通路中受到酪氨酸磷酸化的底物,通过构建这些底物的cDNA文库,发现第8号克隆含有一段1.6 kb片段, 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 细胞内信号通路 肿瘤 鼠成纤维细胞 酪氨酸磷酸化 EGFR受体 CDNA文库 底物

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肝癌相关抗原HAb18G对小鼠成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶2、9的影响 被引量：1

13

作者 黄勇 窦科峰 +1 位作者 蒋建利 陈志南 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第24期1524-1526,共3页

HAb18G为高特异性地表达于肝癌细胞膜表面的一种膜抗原[1,2],本研究将HAb18G全长cDNA直接转染入小鼠成纤维细胞株NIH/3T3,建立高效表达HAb18G的小鼠成纤维细胞株,观察其对基质金属蛋白酶(MMPs)的分泌所产生的影响,研究肝癌易于浸润转移... HAb18G为高特异性地表达于肝癌细胞膜表面的一种膜抗原[1,2],本研究将HAb18G全长cDNA直接转染入小鼠成纤维细胞株NIH/3T3,建立高效表达HAb18G的小鼠成纤维细胞株,观察其对基质金属蛋白酶(MMPs)的分泌所产生的影响,研究肝癌易于浸润转移的机制. 展开更多

关键词 HAB18G 小鼠 肝癌 基质金属蛋白酶2 相关抗原 鼠成纤维细胞 分泌 高效表达 全长cDNA 转染

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pcDNA3.1(+)/ATP7B对TX小鼠成纤维细胞铜代谢的影响 被引量：1

14

作者 汤其强 梁秀龄 +3 位作者 陈曦 徐评议 王莹 徐琳 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期388-391,共4页

【目的】研究Wilson病野生型基因ATP7BcDNA真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B对TX小鼠成纤维细胞铜代谢的影响。【方法】构建人Wilson病野生型基因ATP7BcDNA的真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B。随机选取TX小鼠20只构建TX小鼠的成纤维细胞模... 【目的】研究Wilson病野生型基因ATP7BcDNA真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B对TX小鼠成纤维细胞铜代谢的影响。【方法】构建人Wilson病野生型基因ATP7BcDNA的真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B。随机选取TX小鼠20只构建TX小鼠的成纤维细胞模型,平行分成3组,一组未加质粒,另两组分别加入等量pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1(+)/ATP7B,观察对细胞模型铜代谢的影响。并进行免疫组化实验以观察表达是否增强。【结果】实验前未加质粒组,加入pcDNA3.1(+)组与加入pcDNA3.1(+)/ATP7B组细胞内铜含量分别为(78±20),(77±17),(75±13)ng/mg;实验后分别为(76±20),(74±13),(40±10)ng/mg。与未加质粒组和加入pcDNA3.1(+)相比,加入pcDNA3.1(+)/ATP7B组的细胞内铜含量显著下降(P皆<0.01),其细胞内ATP7B蛋白的表达明显增强。【结论】Wilson病真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B在TX小鼠成纤维细胞水平上确有排铜作用。 展开更多

关键词 PCDNA3.1(+) 鼠成纤维细胞 铜代谢 Wilson病 真核表达载体 ATP7B蛋白 野生型基因 细胞模型 细胞内 免疫组化 细胞水平 铜含量 小鼠 质粒 观察表 实验前 mgc B组

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组织工程皮肤的应用研究 被引量：2

15

作者 罗奇志 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期233-235,共3页

目前，人们对人工活性皮肤替代物（细胞工程或组织工程人工皮肤）的研究已进行了约半个世纪。将表皮细胞培养于经辐照的鼠成纤维细胞（Fb）滋养层，是组织工程皮肤治疗大面积烧伤的里程碑。由于培养基的改良与商品化，促使角质形成细胞... 目前，人们对人工活性皮肤替代物（细胞工程或组织工程人工皮肤）的研究已进行了约半个世纪。将表皮细胞培养于经辐照的鼠成纤维细胞（Fb）滋养层，是组织工程皮肤治疗大面积烧伤的里程碑。由于培养基的改良与商品化，促使角质形成细胞的无血清层和无滋养层培养成功，结合早期切痂和应用临时皮肤覆盖物， 展开更多

关键词 组织工程皮肤 无滋养层培养 活性皮肤替代物 鼠成纤维细胞 表皮细胞培养 角质形成细胞 人工皮肤 大面积烧伤

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谷氨酰胺对早产儿胃肠功能的影响 被引量：2

16

作者 郭熙英 彭怡 +2 位作者 高春婷 徐佩茹 李明珠 《中国实用医刊》 2009年第2期67-69,共3页

1935年，Krebs首先报道了谷氨酰胺（Gln）可以在哺乳动物组织细胞内水解和合成。但谷氨酰胺的代谢功能未引起人们的注意，1956年，Eagle和Oyama报道：鼠成纤维细胞和人类子宫上皮癌细胞的培养基中若无Gln，细胞就会降解甚至死亡；增加... 1935年，Krebs首先报道了谷氨酰胺（Gln）可以在哺乳动物组织细胞内水解和合成。但谷氨酰胺的代谢功能未引起人们的注意，1956年，Eagle和Oyama报道：鼠成纤维细胞和人类子宫上皮癌细胞的培养基中若无Gln，细胞就会降解甚至死亡；增加培养基中Gln的浓度则会出现剂量相关的细胞增殖，且这种作用不能被谷氨酸或葡萄糖替代，才提出了谷氨酰胺可能具有重要而独特的代谢特性。 展开更多

关键词 谷氨酰胺 胃肠功能 早产儿 鼠成纤维细胞 上皮癌细胞 动物组织 代谢功能 细胞增殖

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培养方式对自原始生殖细胞分离克隆小鼠胚胎干细胞的影响 被引量：1

17

作者 李松 窦忠英 +3 位作者 宋文刚 苗增民 高佩安 江新泉 《济宁医学院学报》 2005年第1期1-3,共3页

目的　比较与同源胎鼠生殖嵴共培养及其传统饲养层培养的方式 ,从小鼠原始生殖细胞中分离克隆胚胎干细胞的差异。方法　获取 8～ 14d龄的胎鼠 ,制备同源胎鼠成纤维细胞饲养层 ,采用常规饲养层培养的方式和与生殖嵴共同培养的方式 ,分离... 目的　比较与同源胎鼠生殖嵴共培养及其传统饲养层培养的方式 ,从小鼠原始生殖细胞中分离克隆胚胎干细胞的差异。方法　获取 8～ 14d龄的胎鼠 ,制备同源胎鼠成纤维细胞饲养层 ,采用常规饲养层培养的方式和与生殖嵴共同培养的方式 ,分离克隆小鼠胚胎干细胞。结果　在初期分离克隆的过程中 ,采用共同培养的方式优于传统饲养层培养模式。 展开更多

关键词 小鼠胚胎干细胞 原始生殖细胞 分离克隆 培养方式 鼠成纤维细胞 共同培养 饲养层 培养模式 共培养 传统 胎鼠 同源

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壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外表达的研究 被引量：1

18

作者 沈亚非 郭青云 +3 位作者 徐焱成 郭敏 孙家忠 谢海鹰 《医学新知》 CAS 2005年第2期42-44,共3页

目的研究壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外转染及表达。方法采用壳聚糖体外转染鼠成纤维细胞,对转染后72h的细胞应用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达。27只糖尿病大鼠随机分为3组(pCMV.INS组、pCMV组、生理盐水组),体内转染通... 目的研究壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外转染及表达。方法采用壳聚糖体外转染鼠成纤维细胞,对转染后72h的细胞应用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达。27只糖尿病大鼠随机分为3组(pCMV.INS组、pCMV组、生理盐水组),体内转染通过尾静脉注射糖尿病大鼠,检测空腹血糖和胰岛素。结果pCMV转染细胞无胰岛素表达,pCMV.INS转染大约10%的细胞有胰岛素表达;pCMV.INS转染大鼠血浆胰岛素显著高于生理盐水对照组(P<0.01)和pCMV对照组(P<0.01)。结论人胰岛素基因可通过壳聚糖直接转染至糖尿病大鼠体内发挥治疗作用及壳聚糖可能是一种很有前途的基因载体。 展开更多

关键词 人胰岛素基因 糖尿病鼠 壳聚糖 体内外 表达的研究 介导 免疫组织化学方法 糖尿病大鼠 鼠成纤维细胞 转染及表达 生理盐水组 尾静脉注射 血浆胰岛素 INS 体外转染 体内转染 空腹血糖 转染细胞 基因载体 治疗作用 直接转染

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纳米TiO_2对鼠成纤维细胞Balb/c3T3遗传毒性的研究 被引量：1

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作者 哈森 朱金玲 +4 位作者 翟玉珊 祝嘉敏 陈文超 金绍静 何春玖 《中国优生与遗传杂志》 2017年第1期12-13,5,共3页

目的探讨不同粒径、不同浓度的纳米TiO_2对鼠成纤维细胞的遗传毒性效应。方法分别用含有0μg/ml(对照组)、1μg/ml、10μg/m1、100μg/m1,浓度的30nm和50nm的Ti0_2的DMEM培养基培养鼠成纤维细胞Balb/c3T3,24h后,采用单细胞凝胶电泳实验... 目的探讨不同粒径、不同浓度的纳米TiO_2对鼠成纤维细胞的遗传毒性效应。方法分别用含有0μg/ml(对照组)、1μg/ml、10μg/m1、100μg/m1,浓度的30nm和50nm的Ti0_2的DMEM培养基培养鼠成纤维细胞Balb/c3T3,24h后,采用单细胞凝胶电泳实验方法检测DNA损伤,评价毒性效应。结果与对照组比较,30nm和50nm的Ti0_2颗粒当浓度大于1μg/ml时均可对细胞产生遗传毒性效应,差异显著(P<0.05),且随着浓度的增加毒性作用增强,当TiO_2浓度为1 00μg/ml时毒性作用最强。结论纳米二氧化钛对小鼠成纤维细胞具有遗传毒性作用,且遗传毒性与纳米TiO_2浓度呈剂量依赖效应。 展开更多

关键词 纳米TIO2 鼠成纤维细胞 遗传毒性

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苯丙酸诺龙对大鼠成纤维细胞增殖作用的研究 被引量：1

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作者 刘宁 岑瑛 +1 位作者 李凯 刘晓雪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期42-44,共3页

目的　利用培养大鼠成纤维细胞 (fibroblast,FB) ,研究蛋白同化激素苯丙酸诺龙 (nandrolone phenyl-propionate,NP)对创伤后 FB的增殖作用。　方法　 Wistar大鼠致伤后取材行 FB原代培养 ,实验组培养液按 NP用药剂量 0 .5～ 15 .0μg/ m... 目的　利用培养大鼠成纤维细胞 (fibroblast,FB) ,研究蛋白同化激素苯丙酸诺龙 (nandrolone phenyl-propionate,NP)对创伤后 FB的增殖作用。　方法　 Wistar大鼠致伤后取材行 FB原代培养 ,实验组培养液按 NP用药剂量 0 .5～ 15 .0μg/ ml分为 NP1 ～ NP5共 5组 ,对照组为含 5 %胎牛血清的培养液 ,7d后 MTT法测定不同剂量 NP对FB存活力的影响 ,选作用最大的一组继续实验 ,流式细胞术测定 FB增殖指数。　结果　各 NP组 FB存活值均高于同时间点对照组 ,NP4 组第 1～ 7天差异均有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ,NP5组从第 1～ 6天与对照组相比差异有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ,而第 7天则无差异 ;流式细胞术检测 FB增殖指数显示 NP组均高于同期对照组 ,差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。　结论　蛋白同化激素 NP能够促进 FB的复制增殖 ,且这种增殖作用有剂量依赖性。 展开更多

关键词 FB 对照组 NP 增殖作用 苯丙酸诺龙 大鼠 增殖指数 鼠成纤维细胞 培养液 蛋白

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