重楼属植物AFLP实验体系的建立 被引量：12

1

作者 张瑞 唐铭霞 +1 位作者 翁周 王丽 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1105-1109,共5页

通过对影响重楼AFLP-银染技术体系的关键因素作对比研究,建立了一套优化的重楼AFLP分子标记体系.优化的关键因素为:1)DNA采用CTAB法提取更适于重楼的AFLP分析,且从幼叶中提取的DNA纯度和质量最高;2)酶切时间为9h时效果最佳;3)选择性扩... 通过对影响重楼AFLP-银染技术体系的关键因素作对比研究,建立了一套优化的重楼AFLP分子标记体系.优化的关键因素为:1)DNA采用CTAB法提取更适于重楼的AFLP分析,且从幼叶中提取的DNA纯度和质量最高;2)酶切时间为9h时效果最佳;3)选择性扩增时退火温度为56℃;4)从15对引物中筛选出4对进行选择性扩增,得到扩增条带276条,其中多态性带201条(占72.83%). 展开更多

关键词 黑籽重楼 AFLP 体系优化

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黑籽重楼种内AFLP遗传多样性及遗传分化研究 被引量：12

2

作者 唐铭霞 王丽 翁周 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期402-408,共7页

以四川瓦屋山、峨眉山和彭州3个地区的黑籽重楼原变种居群及峨眉山、彭州2个地区的无瓣黑籽居群为供试材料，用筛选出的4对引物，对5个群体共计74个个体进行AFLP分析，每对AFLP引物扩增出61-78条多态带，共得到235条多态带．黑籽重楼遗... 以四川瓦屋山、峨眉山和彭州3个地区的黑籽重楼原变种居群及峨眉山、彭州2个地区的无瓣黑籽居群为供试材料，用筛选出的4对引物，对5个群体共计74个个体进行AFLP分析，每对AFLP引物扩增出61-78条多态带，共得到235条多态带．黑籽重楼遗传多样性较高，物种水平的多态带百分率PPB为81．88％，Nei’s基因多样性指数H为0．2490，Shannon多样性指数I为0．3867，居群间基因流为1．6870；在变种水平上，黑籽重楼原变种PPB为78．40％，Nei’s基因多样性指数H为0．2849，Shannon多样性指数I为0．4237；无瓣黑籽的PPB为63．07％，Shannon多样性指数I为0．3603，Nei’s基因多样性指数H为0．2439．黑籽重楼种下的两个变种间的遗传分化系数Gst为0．0726，遗传分化指数PHIst为13．33％．聚类结果无瓣黑籽重楼和黑籽重楼原变种分别分成两支．总而言之，黑籽重楼物种水平上有丰富的遗传多样性，居群内遗传分化大于居群间，居群间的相似性系数很大，但种下的两个变种间有一定的遗传分化． 展开更多

关键词 黑籽重楼 无瓣黑籽 AFLP 遗传分化 遗传多样性

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黑籽重楼化学成分及其抗肿瘤活性研究 被引量：9

3

作者 景松松 王颖 +4 位作者 李雪娇 李霞 黄璐琦 肖培根 高文远 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1093-1098,共6页

目的研究黑籽重楼Paris thibetica根状茎的化学成分及其抗肿瘤活性。方法综合运用正相硅胶、Sephadex LH-20、ODS-C18等柱色谱以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱学方法进行结构鉴定。采用MTT... 目的研究黑籽重楼Paris thibetica根状茎的化学成分及其抗肿瘤活性。方法综合运用正相硅胶、Sephadex LH-20、ODS-C18等柱色谱以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱学方法进行结构鉴定。采用MTT法研究化合物的体外抗肿瘤活性。结果从黑籽重楼根状茎的乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为重楼皂苷V(1)、重楼皂苷I(2)、重楼皂苷II(3)、重楼皂苷VI(4)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、重楼皂苷H(6)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、重楼皂苷VII(8)、parisyunnanoside G(9)、trikamsteroside E(10)、豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(11)、β-谷甾醇棕榈酸酯(12)、β-香树脂醇(13)、4-羟基-5-甲基呋喃-3-羧酸(14)。结论所有化合物均为首次从黑籽重楼中分离得到,化合物10、12~14为首次从重楼属植物中分离得到。化合物1~8对人肝癌细胞BEL-7402有细胞毒活性,其中化合物3活性最好,IC50为0.48μmol/L。 展开更多

关键词 黑籽重楼 甾体皂苷 重楼皂苷I 重楼皂苷II 抗肿瘤活性

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HPLC测定黑籽重楼中的皂苷含量并评价其药材质量 被引量：8

4

作者 李青 文飞燕 +1 位作者 尹鸿翔 张浩 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期395-397,共3页

目的研究不同产地黑籽重楼中10种重楼皂苷的含量。方法采用HPLC-ELSD法,Kromasil RP-C18(250 mm×4.6mm,5μm)柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃。氮气流速1.6 L.min-1,检测器漂移管温度45℃。结果测定了黑籽... 目的研究不同产地黑籽重楼中10种重楼皂苷的含量。方法采用HPLC-ELSD法,Kromasil RP-C18(250 mm×4.6mm,5μm)柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃。氮气流速1.6 L.min-1,检测器漂移管温度45℃。结果测定了黑籽重楼药材中10种皂苷的含量,在线性范围内线性关系良好(r2>0.9998)。结论所用方法测定重楼皂苷准确,重复性好,可作为黑籽重楼药材质量控制的方法。 展开更多

关键词 黑籽重楼 重楼皂苷 含量测定 高效液相色谱法

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黑籽重楼种内形态标记和ISSR标记的遗传分化研究 被引量：8

5

作者 陈照 叶睿超 +2 位作者 张瑞 李伟阳 王丽 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2647-2649,共3页

该文对黑籽重楼Paris thibetica种内两变种——黑籽重楼原变种Paris thibeticavar.thibetica与无瓣黑籽重楼Paristhibeticavar.apetala在形态学及ISSR分子标记上的差异进行了研究和比较。形态特征分析表明黑籽重楼原变种与无瓣黑籽重楼... 该文对黑籽重楼Paris thibetica种内两变种——黑籽重楼原变种Paris thibeticavar.thibetica与无瓣黑籽重楼Paristhibeticavar.apetala在形态学及ISSR分子标记上的差异进行了研究和比较。形态特征分析表明黑籽重楼原变种与无瓣黑籽重楼在萼片长宽、花药数、花丝长等7个花器官性状方面有显著差异,但通过在主成分分析图上不能明显区分两个变种,两变种总体形态上的分化不明显。ISSR分析上,从100个ISSR引物中筛选出8个引物,在3001500 bp间共扩增出36条带,其中黑籽重楼原变种特征带有5条,无瓣黑籽重楼扩特征带有8条。 展开更多

关键词 黑籽重楼 变种 形态差异 ISSR

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怒江州滇重楼种植技术 被引量：6

6

作者 胡陈花 《云南农业科技》 2014年第1期38-41,共4页

滇重楼又叫云南重楼、七叶一枝花、独脚莲,为百合科多年生草本植物,主产云南、贵州、四川等省,以根茎入药。性微寒、味苦,有小毒,有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功能,用于治疗痈肿、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等症。滇... 滇重楼又叫云南重楼、七叶一枝花、独脚莲,为百合科多年生草本植物,主产云南、贵州、四川等省,以根茎入药。性微寒、味苦,有小毒,有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功能,用于治疗痈肿、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等症。滇重楼是云南白药、宫血宁胶囊、抗病毒颗粒等著名中成药的重要组成部分,由于近年来对野生药材的掠夺式采挖,野生重楼资源储量已严重下降,这将直接危及到中国中药产业的发展。 展开更多

关键词 滇重楼 种植技术 云南重楼 独脚莲 七叶一枝花 多年生草本 怒江州 宫血宁胶囊 惊风抽搐 黑籽重楼

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重楼植物的组织培养研究 被引量：7

7

作者 王跃华 蒋婷婷 +4 位作者 付伟 田孟良 张珏 陈燕 张红玉 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期2014-2016,共3页

目的建立重楼植物愈伤组织培养的快速繁殖体系。方法文章以黑籽重楼不同处理的芽为外植体,研究了不同消毒时间和激素配比对其外植体愈伤组织诱导与增殖的影响。结果去芽鞘的芽外植体用升汞消毒8 min时,其污染率较低为(11.97±0.91)... 目的建立重楼植物愈伤组织培养的快速繁殖体系。方法文章以黑籽重楼不同处理的芽为外植体,研究了不同消毒时间和激素配比对其外植体愈伤组织诱导与增殖的影响。结果去芽鞘的芽外植体用升汞消毒8 min时,其污染率较低为(11.97±0.91)%、而启动率却较高为(84.82±2.59)%;诱导去芽鞘的芽外植体产生愈伤组织的最佳培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA2.0 mg/L,其愈伤组织增殖的最佳培养基配方为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。结论实验实现了黑籽重楼愈伤组织的诱导和快速增殖,并为进一步研究重楼属其它植物的生物技术研究奠定了技术基础。 展开更多

关键词 黑籽重楼 组织培养 诱导 增殖

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峨眉山2种重楼属植物同域分化的分子遗传学及其形态学证据初探 被引量：3

8

作者 张瑞 王丽 +1 位作者 唐铭霞 翁周 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期59-63,共5页

对峨眉山2种重楼—小重楼(Paris polyphyllaSmith var.minoraS.F.Wang)、黑籽重楼(P.thibeticaFranch)DNA进行了AFLP(扩增的限制性片段长度多态性)分析和形态上的差异分析。AFLP分析可知小重楼和黑籽重楼在DNA分子水平上表现出极为丰富... 对峨眉山2种重楼—小重楼(Paris polyphyllaSmith var.minoraS.F.Wang)、黑籽重楼(P.thibeticaFranch)DNA进行了AFLP(扩增的限制性片段长度多态性)分析和形态上的差异分析。AFLP分析可知小重楼和黑籽重楼在DNA分子水平上表现出极为丰富的遗传多样性,每个种内个体间的相似性很大,但有明显种间的遗传差异。形态对比分析可知小重楼和黑籽重楼在花部性状上有明显的差异。AFLP和形态分析结果表明小重楼和黑籽重楼无论是在形态还是遗传上均有明显差异。它们之间已经有了明显的分化。 展开更多

关键词 峨眉山 重楼属 同域分化 小重楼 黑籽重楼 AFLP 遗传分化 形态差异

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3种重楼属药用植物挥发性成分和抑菌活性研究 被引量：2

9

作者 何银生 邱姣 +4 位作者 李宇 袁名远 何美军 张美德 杨旭 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第8期80-83,共4页

目的 比较3种5年生重楼属药用植物的挥发性成分和抑菌活性差异,为推动重楼资源在医药方面的开发和合理利用提供参考。方法 采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术研究七叶一枝花、啟良重楼、黑籽重楼3种重楼属药用植物提取物挥发性成分,采... 目的 比较3种5年生重楼属药用植物的挥发性成分和抑菌活性差异,为推动重楼资源在医药方面的开发和合理利用提供参考。方法 采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术研究七叶一枝花、啟良重楼、黑籽重楼3种重楼属药用植物提取物挥发性成分,采用滤纸片法研究3种提取物对11种供试菌的抑菌活性。结果 从七叶一枝花、啟良重楼、黑籽重楼中分别鉴定出33、29、22种挥发性成分,占其相对百分含量29.35%、30.13%、20.09%,三者相同挥发性成分14种;酯类化合物为主要挥发性成分,其中己二酸二(2-乙基己)酯含量最高,七叶一枝花、啟良重楼、黑籽重楼中分别为4.28%、4.94%、5.43%。七叶一枝花对苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌等4株供试菌有良好抑制效果,啟良重楼对苏云金芽孢杆菌、多耐铜绿假单胞菌、藤黄微球菌等3株供试菌有良好抑制效果,黑籽重楼对苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌2株供试菌有良好抑制效果。结论 3种重楼属药用植物提取物挥发性成分的组成和含量存在很大差异;对11株供试菌的抑菌效果依次为七叶一枝花、啟良重楼、黑籽重楼。 展开更多

关键词 啟良重楼 七叶一枝花 黑籽重楼 挥发性成分 抑菌活性

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华重楼及其常见混伪品的多重聚合酶链式反应快速鉴定体系的建立和应用 被引量：1

10

作者 尹显梅 张开元 +4 位作者 饶文霞 唐卓 蒋桂华 杨芝芳 尹鸿翔 《科学技术与工程》 北大核心 2017年第30期179-185,共7页

收集华重楼常见混种栽培种的根茎,叶片及种子样品,对华重楼极其常见混伪品的r DNA-ITS片段进行对比分析。基于重楼属植物r DNA-ITS的SNP位点,针对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼设计3组共6条特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系。应用... 收集华重楼常见混种栽培种的根茎,叶片及种子样品,对华重楼极其常见混伪品的r DNA-ITS片段进行对比分析。基于重楼属植物r DNA-ITS的SNP位点,针对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼设计3组共6条特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系。应用已建立的多重PCR方法对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼及常见的其他重楼属混伪品进行鉴别,验证方法的准确性。通过观察电泳检测扩增产物条带的位置及数量实现快速检测的目的。建立的多重PCR鉴定方法能准确地对华重楼极其常见重楼属混杂栽培种进行快速鉴别。多重PCR方法特异性强,灵敏度高,高效快速,可用于多基源中药材及同属近缘种的快速鉴别,同时为中药材的种质资源鉴定提供可行的方法。 展开更多

关键词 华重楼 球药隔重楼 黑籽重楼 多重PCR 鉴定

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黑籽重楼的生药学研究 被引量：2

11

作者 赵兴蕊 刘常逊 +1 位作者 杨发建 王洪云 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第23期3246-3250,共5页

目的:对重楼药材原植物黑籽重楼进行系统的生药学研究。方法:对黑籽重楼的植物形态、药材特征、药材横切面及粉末进行观察;以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为对照品对药材进行薄层鉴别,采用高效液相色谱法测定黑籽重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、... 目的:对重楼药材原植物黑籽重楼进行系统的生药学研究。方法:对黑籽重楼的植物形态、药材特征、药材横切面及粉末进行观察;以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为对照品对药材进行薄层鉴别,采用高效液相色谱法测定黑籽重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量。结果:黑籽重楼的原植物特征包括具有侧膜胎座,果开裂,无外种皮,于一侧包以深红色多汁的鸡冠状假种皮;查阅文献,黑籽重楼与云南重楼、七叶一枝花在药材性状上的区别主要表现在表面颜色、形状、环纹、断面上,气味上没有明显的差异;黑籽重楼的横切面结构、粉末特征与云南重楼、七叶一枝花没有明显差异;经薄层色谱鉴别,在黑籽重楼根茎中都含有重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ,含量分别为0.117%、0.081%、0.114%、0.204%;重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总量为0.516%,与药典标准(含重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总量不得少于0.60%)存在差异。结论:本研究可为黑籽重楼的鉴定及进一步研究提供科学依据。 展开更多

关键词 黑籽重楼 性状鉴别 显微鉴别 理化鉴别 高效液相色谱法

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黑籽重楼高效繁育及栽培技术

12

作者 李大荣 李小玲 +3 位作者 由金文 张美德 周亮 周武先 《中南农业科技》 2023年第12期120-122,共3页

黑籽重楼(Paris thibetica Franch.)为百合科重楼属植物,属于名贵中药材。因其根茎生长缓慢,长期大量采挖使其野生资源面临枯竭,人工种植是缓解供需矛盾和保护野生资源的重要途径。通过对黑籽重楼的形态特征和生长习性进行总结,对人工... 黑籽重楼(Paris thibetica Franch.)为百合科重楼属植物,属于名贵中药材。因其根茎生长缓慢,长期大量采挖使其野生资源面临枯竭,人工种植是缓解供需矛盾和保护野生资源的重要途径。通过对黑籽重楼的形态特征和生长习性进行总结,对人工栽培过程中的种苗繁育、选地整地、种植管理、病虫害防治以及采收、加工储存等进行详细地介绍,以期为黑籽重楼的人工高效繁育及生产栽培提供参考。 展开更多

关键词 黑籽重楼(Paris thibetica Franch.) 种苗繁育 形态特征 种植管理 病虫害防治 采收 加工储存

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恩施地区三种重楼属植物活性成分与抗氧化活性研究

13

作者 孙慧茹 谭生权 +5 位作者 方昕悦 何美军 何银生 李宇 张美德 杨旭 《湖北农业科学》 2022年第12期67-71,共5页

对比分析恩施地区3种重楼5年生七叶一枝花[Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch).Hara]、啟良重楼(Paris qiliangiana H.Li,J.Yang&Y.H.Wang)、黑籽重楼(Paris thibetica Franch.)中重楼皂苷Ⅱ活性成分含量,建立气相色谱法... 对比分析恩施地区3种重楼5年生七叶一枝花[Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch).Hara]、啟良重楼(Paris qiliangiana H.Li,J.Yang&Y.H.Wang)、黑籽重楼(Paris thibetica Franch.)中重楼皂苷Ⅱ活性成分含量,建立气相色谱法(GC)检测方法,检测3种重楼提取物DPPH自由基清除活性,研究其抗氧化能力。乙酸乙酯提取重楼皂苷Ⅱ,采用FID检测器,升温程序为0~3 min,60℃,3℃/min升至280℃,保持20 min;进样口温度310℃;载气为氮气(99.999%);流速为1.0 mL/min;进样量为5μL,不分流。结果表明,GC检测得到重楼皂苷Ⅱ标准品的标准曲线为Y=0.845X+72.18,在浓度512.5~16400.0 ng/μL范围内线性良好,R2>0.9995。方法检出限为40.5 ng/μL,定量限为130.6 ng/μL。加标回收率为96.93%~98.33%,RSD为2.72%。GC检测发现七叶一枝花中重楼皂苷Ⅱ含量为0.104 mg/g,黑籽重楼中为0.098 mg/g,啟良重楼中为0.015 mg/g。3种重楼提取物的IC_(50)从强到弱为七叶一枝花(2.372 mg/mL)、啟良重楼(2.461 mg/mL)、黑籽重楼(2.473 mg/mL)。该方法准确可靠,简便快捷且灵敏度高,适用于重楼皂苷Ⅱ含量的测定。恩施地区七叶一枝花中的活性成分重楼皂苷Ⅱ含量最高,其次是黑籽重楼,啟良重楼的含量最低。重楼提取物有一定的抗氧化能力,且七叶一枝花的抗氧化能力最强。 展开更多

关键词 七叶一枝花[P.polyphylla] 黑籽重楼(P.thibetica) 啟良重楼(P.qiliangiana) 重楼皂苷Ⅱ 抗氧化

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