可视化核酸试纸条法快速检测肉及肉制品中鸭源成分 被引量：5

1

作者 赵良娟 张霞 +1 位作者 刘国红 郑文杰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第2期155-158,共4页

建立肉及肉制品中鸭源成分快速检测的可视化核酸试纸条法。设计鸭特异性引物,建立鸭成分检测可视化核酸试纸条方法,验证方法的特异性与灵敏度,并对市售肉及肉制品进行检测。该方法检测灵敏度0.1%,能够从鸭肉样品扩增出291 bp特异性DNA片... 建立肉及肉制品中鸭源成分快速检测的可视化核酸试纸条法。设计鸭特异性引物,建立鸭成分检测可视化核酸试纸条方法,验证方法的特异性与灵敏度,并对市售肉及肉制品进行检测。该方法检测灵敏度0.1%,能够从鸭肉样品扩增出291 bp特异性DNA片段,而鸡、鹌鹑、猪、马、牛、羊、驴、鹿、骆驼、胡萝卜、白菜等动植物样品无扩增条带。建立的鸭源成分检测可视化核酸试纸条法特异性好,灵敏度高,简便,快速,是鸭源成分检测的有效方法。 展开更多

关键词 肉及肉制品 鸭成分 聚合酶链式反应(PCR) 核酸试纸条 可视化检测

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荧光定量PCR检测肉制品中鸭源性成分 被引量：39

2

作者 张驰 邱皓璞 张筠 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第18期154-157,共4页

根据鸭线粒体基因组细胞色素b基因中的保守序列设计鸭特异性引物和TaqMan探针,建立肉制品中鸭源性成分定性和定量检测的荧光定量PCR技术。结果表明,引物与探针对于鸭源性成分的特异性良好,检测灵敏度达到1.78pg/反应,该方法可对鸭肌肉组... 根据鸭线粒体基因组细胞色素b基因中的保守序列设计鸭特异性引物和TaqMan探针,建立肉制品中鸭源性成分定性和定量检测的荧光定量PCR技术。结果表明,引物与探针对于鸭源性成分的特异性良好,检测灵敏度达到1.78pg/反应,该方法可对鸭肌肉组织DNA进行准确定量。使用该技术对市售肉制品进行检测,发现大量使用鸭肉假冒的牛羊肉制品。本研究建立的鸭源性成分荧光定量PCR检测方法,为肉制品质量控制提供了有效的技术手段。 展开更多

关键词 鸭源性成分 荧光定量聚合酶链式反应 肉类掺假 检测方法

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鸭肉冒充牛羊肉的分子生物学检测 被引量：19

3

作者 王建昌 王金凤 +1 位作者 陈瑞春 田振祥 《肉类研究》 2012年第6期20-23,共4页

针对送检牛肉和羊肉样品,设计合成检测动物源性成分的通用引物,并对PCR产物测序后在NCBI数据库中进行比对;根据牛、羊、鸭源性成分检测的相关标准,合成引物和探针,进行送检样品中牛、羊和鸭源性成分的实时荧光PCR检测。结果表明:在7份... 针对送检牛肉和羊肉样品,设计合成检测动物源性成分的通用引物,并对PCR产物测序后在NCBI数据库中进行比对;根据牛、羊、鸭源性成分检测的相关标准,合成引物和探针,进行送检样品中牛、羊和鸭源性成分的实时荧光PCR检测。结果表明:在7份送检样品中4份检测到鸭源性成分,2份检测到牛源性成分,1份检测到羊源性成分。实时荧光PCR方法灵敏性更高、特异性更强、结果判定更为迅速。 展开更多

关键词 鸭源性成分 通用引物 实时荧光PCR

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PCR-mtDNA技术鉴别检测不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分 被引量：17

4

作者 张娟 宗卉 张利平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1832-1836,共5页

以鸭肌肉组织DNA为模板,利用PCR-mtDNA技术成功克隆出了鸭mtDNA COⅢ基因(GenBank Accession No.DQ655706)。对所克隆的序列分析表明,其序列包括鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因全序列784 bp,通过同源性分析可知,动物的线粒体DNA COⅢ基... 以鸭肌肉组织DNA为模板,利用PCR-mtDNA技术成功克隆出了鸭mtDNA COⅢ基因(GenBank Accession No.DQ655706)。对所克隆的序列分析表明,其序列包括鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因全序列784 bp,通过同源性分析可知,动物的线粒体DNA COⅢ基因是相对保守的,利用此特性设计PCR-mtDNA方法鉴别检测鸭源性成分的特异性引物;以各种动物肌肉组织及饲料DNA为模板进行PCR扩增、经反复验证筛选出只能扩增出鸭DNA的目的片段,而不能扩增出其他动物DNA片段的特异性强、稳定性好的引物P3、P4;利用此引物PCR扩增鸭DNA的特异性片段为226 bp,对PCR产物进行测序分析可知与已克隆的鸭mtDNA COⅢ基因同源性达到100%,证明了所筛选引物的准确性。通过对不同含量的DNA模板溶液进行PCR扩增的方法,对筛选出的特异性引物P3、P4进行灵敏度试验,结果分析表明灵敏度约为0.001%,证明该PCR方法具有特异性强、灵敏度高的特点,完全可作为鉴别不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分的方法。 展开更多

关键词 鸭源性成分 鉴别检测 线粒体DNA 细胞色素C氧化酶Ⅲ基因 不同动物肌肉组织和饲料 克隆

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微滴数字PCR方法检测畜肉食品中鸭源性成分 被引量：15

5

作者 史艳宇 王莹 +2 位作者 石虹 李天雨 华蕾 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第3期583-588,共6页

目的利用微滴数字PCR技术,建立鸭源性成分的快速、特异、灵敏检测方法。方法根据鸭线粒体基因全序列设计的引物及探针,利用微滴数字PCR进行扩增,建立鸭源性成分检测方法;以市场中常见畜禽肉为参考物种作微滴数字PCR特异性检测;以羊肉为... 目的利用微滴数字PCR技术,建立鸭源性成分的快速、特异、灵敏检测方法。方法根据鸭线粒体基因全序列设计的引物及探针,利用微滴数字PCR进行扩增,建立鸭源性成分检测方法;以市场中常见畜禽肉为参考物种作微滴数字PCR特异性检测;以羊肉为干扰物观察微滴数字PCR的抗干扰性;将鸭肉DNA进行梯度稀释,对方法灵敏度进行检测。结果该方法能够有效对鸭源性成分进行检测,特异性强,灵敏度高,并且其他物种成分的存在对方法灵敏度检测没有影响。结论该方法特异性强,灵敏度高,可以实现畜肉食品中的鸭源性成分检测。 展开更多

关键词 鸭源性成分 线粒体基因 微滴数字PCR 检测

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实时荧光定量PCR检测畜禽肉制品中鸭源性成分 被引量：13

6

作者 林彦星 张彩虹 +8 位作者 阮周曦 刘建利 宗卉 廖立珊 孙洁 杨俊兴 吕建强 花群义 曹琛福 《动物医学进展》 北大核心 2016年第11期48-53,共6页

根据鸭mtDNA COX基因上的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR用于检测畜禽肉制品中的鸭源性成分。结果表明,建立的方法特异性强,与鹅、鸡、羊、牛等15种动物DNA无非特异性扩增;灵敏度高,可检测1.0pg/μL鸭源DNA的... 根据鸭mtDNA COX基因上的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR用于检测畜禽肉制品中的鸭源性成分。结果表明,建立的方法特异性强,与鹅、鸡、羊、牛等15种动物DNA无非特异性扩增;灵敏度高,可检测1.0pg/μL鸭源DNA的存在;重复性好,同DNA浓度所测得Ct值的变异系数均小于3%;应用该法对模拟混合样品进行检测,结果与预期相符,且常见肉类DNA的存在并不影响该法对鸭源性成分检测的灵敏度。说明本试验建立的鸭源性成分实时荧光定量PCR法特异、敏感、稳定,可快速准确检测畜禽肉制品中含有的鸭源性成分。 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR 检测 鸭源性成分

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可视化环介导等温扩增技术检测鸡鸭源性成分 被引量：11

7

作者 杨丽霞 邱华丽 +3 位作者 蒋成 徐睿鑫 周金沙 邱志鹏 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第2期624-628,共5页

目的建立生肉及熟肉制品中鸡、鸭源性成分的特异性基因LAMP可视化快速检测方法。方法根据鸡鸭物种特异性cytb、COX3基因的6个特异性区域设计LAMP引物,在反应前加入羟基萘酚蓝(HNB),在63℃条件下反应45 min;反应结果可以根据颜色变化直... 目的建立生肉及熟肉制品中鸡、鸭源性成分的特异性基因LAMP可视化快速检测方法。方法根据鸡鸭物种特异性cytb、COX3基因的6个特异性区域设计LAMP引物,在反应前加入羟基萘酚蓝(HNB),在63℃条件下反应45 min;反应结果可以根据颜色变化直接判断,阳性为天蓝色,阴性为紫罗兰色。并对30个肉制品样品进行可视化LAMP和PCR方法平行检测。结果 LAMP方法的最低检出限为1 pg,特异性良好,同时对肉制品中目标物检测的检出限可达到0.01%。结论该方法用于肉制品中鸡鸭源性成分的快速检测,具有操作简单、无需贵重仪器、反应结果肉眼可观察、灵敏度高和特异性强等特点,适合于基层监管部门进行肉制品现场快速检测。 展开更多

关键词 鸡源性成分 鸭源性成分 环介导等温扩增 可视化检测

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荧光定量PCR方法检测畜肉食品中鸭源性成分 被引量：10

8

作者 史艳宇 刘金华 +6 位作者 吴月丹 王莹 王颖 王潇 刘晓晖 周亮 赵立群 《食品安全质量检测学报》 CAS 2013年第6期1859-1864,共6页

目的建立一种快速、特异、灵敏的鸭源性成分检测方法。方法本研究以鸭线粒体基因全序列为靶位点设计引物和探针,进行荧光定量PCR扩增,建立鸭源性成分检测方法;以常见畜禽肉包括羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿肉等参考动... 目的建立一种快速、特异、灵敏的鸭源性成分检测方法。方法本研究以鸭线粒体基因全序列为靶位点设计引物和探针,进行荧光定量PCR扩增,建立鸭源性成分检测方法;以常见畜禽肉包括羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿肉等参考动物物种作特异性检测;以50 mg/kg羊肉DNA作为稀释液对鸭肉DNA进行梯度稀释,做灵敏度检测。结果该方法能够有效对鸭源性成分进行快速检测,具有较强的特异性,灵敏度较高(可达0.1μg/kg)并且羊肉成分的存在对鸭肉灵敏度检测没有影响。结论该方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测畜肉食品中含有的鸭源性成分。 展开更多

关键词 鸭源性成分 线粒体基因 REAL time PCR 检测

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聚合酶链式反应快速检测畜肉食品中鸭源性成分 被引量：10

9

作者 史艳宇 刘金华 +6 位作者 王莹 邴炜 华蕾 刘晓晖 王颖 周亮 王潇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第10期163-165,共3页

目的:建立一种快速、特异、灵敏的鸭源性成分检测方法。方法:以鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因序列为靶位点设计引物,进行聚合酶链式反应扩增,建立鸭源性成分检测方法;以常见畜禽肉,包括羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿... 目的:建立一种快速、特异、灵敏的鸭源性成分检测方法。方法:以鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因序列为靶位点设计引物,进行聚合酶链式反应扩增,建立鸭源性成分检测方法;以常见畜禽肉,包括羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿肉等参考动物物种进行特异性检测;以50 mg/kg羊肉DNA作为稀释液,对鸭肉DNA进行梯度稀释,检测灵敏度。结果:该方法能够有效的对鸭源性成分进行快速检测,具有较强的特异性,灵敏度较高(0.1μg/kg),且羊肉成分的存在对鸭肉灵敏度检测没有影响,可以快速、准确检测畜肉食品中掺杂的鸭源性成分。 展开更多

关键词 鸭源性成分 细胞色素C氧化酶Ⅲ基因 聚合酶链式反应 检测

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利用PCR技术鉴别畜禽肉中鸭源性成分研究 被引量：7

10

作者 张晶鑫 高玉时 +4 位作者 樊艳凤 唐修君 贾晓旭 顾荣 陆俊贤 《安徽农业科学》 CAS 2015年第34期202-203,322,共3页

[目的]建立一种快速准确的鸭源性成分检测方法。[方法]分别以线粒体16S rRNA基因和COⅠ基因序列为靶位点设计鸭特异性引物,以常见畜禽肉(羊肉、牛肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉)DNA为模板,进行PCR扩增,检测引物的特... [目的]建立一种快速准确的鸭源性成分检测方法。[方法]分别以线粒体16S rRNA基因和COⅠ基因序列为靶位点设计鸭特异性引物,以常见畜禽肉(羊肉、牛肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉)DNA为模板,进行PCR扩增,检测引物的特异性和灵敏度。[结果]筛选的引物能够有效地对鸭源性成分进行检测,方便简洁,灵敏度较高。[结论]该方法能够快速有效地鉴别畜禽肉中鸭源性成分。 展开更多

关键词 鸭源性成分 16S RRNA基因 COⅠ基因 PCR 鉴别

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基于线粒体DNA 16S rRNA基因鉴别畜禽肉中鸭源性成分研究 被引量：6

11

作者 张晶鑫 樊艳凤 +4 位作者 唐修君 贾晓旭 葛庆联 陆俊贤 高玉时 《中国家禽》 北大核心 2016年第17期41-44,共4页

研究以鸭线粒体16S rRNA基因序列为靶位点设计特异性引物,以常见畜禽肉包括牛肉、羊肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉等参考动物肌肉DNA为模板,进行常规PCR和荧光定量PCR扩增,建立鸭源性成分检测方法;并将鸭肉DNA模板浓... 研究以鸭线粒体16S rRNA基因序列为靶位点设计特异性引物,以常见畜禽肉包括牛肉、羊肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉等参考动物肌肉DNA为模板,进行常规PCR和荧光定量PCR扩增,建立鸭源性成分检测方法;并将鸭肉DNA模板浓度进行8个梯度稀释,检测方法灵敏度。结果显示,所设计的引物对能够有效地对鸭源性成分进行快速检测,具有较强的特异性,方法灵敏度较高,可达pg级,可快速准确地检测畜禽肉中鸭源性成分。 展开更多

关键词 鸭源性成分 荧光定量PCR 线粒体DNA 16 S RRNA 检测

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锁核酸探针技术快速检测鸭源性成分的试验 被引量：6

12

作者 许如苏 周广彪 +4 位作者 魏霜 段建发 刘中勇 陈冠武 苏建晖 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第9期91-93,共3页

为了建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的改良荧光PCR方法,针对鸭线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和锁核酸(LNA)探针,建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的Taqman-LNA荧光PCR方法,通过设定合理的掺假判定标准,解决肉... 为了建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的改良荧光PCR方法,针对鸭线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和锁核酸(LNA)探针,建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的Taqman-LNA荧光PCR方法,通过设定合理的掺假判定标准,解决肉污染导致的掺假误判。结果建立的方法对鸭肉DNA的检测灵敏度高达1.64 pg;与猪、牛、鸡等11种动物的DNA无非特异性反应;应用该法检测模拟掺假肉制品,结果与预期相符;应用该法检测80份市售肉制品,发现有5份产品掺有鸭源性成分而标签未标示。表明本试验建立的方法特异、敏感,可快速、准确鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分。 展开更多

关键词 LNA探针 Taqman-LNA荧光PCR 鸭源性成分 肉及肉制品

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食品中鸭源性成分的微滴数字PCR定量检测方法的建立 被引量：6

13

作者 张秀平 苗丽 +5 位作者 黄世英 蔡一村 罗宝正 郑秋月 汪琳 孔凡德 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期29-34,共6页

为准确定量食品中鸭源性成分的含量,根据一定范围内鸭肉质量与DNA含量、DNA含量与DNA拷贝数之间的线性关系,建立微滴数字PCR检测系统。运用方法对已知质量分数的鸭肉模拟样品检测结果显示,每种模拟肉样中测出的鸭源性成分的含量与真实... 为准确定量食品中鸭源性成分的含量,根据一定范围内鸭肉质量与DNA含量、DNA含量与DNA拷贝数之间的线性关系,建立微滴数字PCR检测系统。运用方法对已知质量分数的鸭肉模拟样品检测结果显示,每种模拟肉样中测出的鸭源性成分的含量与真实含量基本一致。通过对市售样品的检测,在抽检的51份样品中,有10份牛、羊肉制品掺有鸭肉,掺有鸭肉的样品(掺假样品)所占的比例为19.61%,而且掺假样品中鸭肉的最大含量达到了89.23%,说明本试验建立的定量检测方法具有潜在的市场应用价值,为肉制品日常检测及是否掺假提供有力的科学依据。 展开更多

关键词 微滴数字PCR 鸭源性成分 定量

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发酵花生秧对番鸭生产性能、屠宰性能、血清生化指标及鸭粪常规成分的影响 被引量：5

14

作者 刘珍妮 雷小文 +4 位作者 孔智伟 钟云平 谢华亮 谭东海 吴异健 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第11期3493-3501,共9页

本研究旨在探究发酵花生秧的营养价值及其对番鸭生产性能、屠宰性能、生化指标及鸭粪污染指标的影响,探讨利用发酵花生秧进行番鸭节粮养殖的可行性。选取15日龄的公番鸭360只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复15只。对照组饲喂基础日粮... 本研究旨在探究发酵花生秧的营养价值及其对番鸭生产性能、屠宰性能、生化指标及鸭粪污染指标的影响,探讨利用发酵花生秧进行番鸭节粮养殖的可行性。选取15日龄的公番鸭360只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复15只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组饲喂90%基础日粮+10%发酵花生秧,试验Ⅱ组饲喂85%基础日粮+15%发酵花生秧,试验Ⅲ组饲喂80%基础日粮+20%发酵花生秧,预饲期7 d,正式试验期48 d,测定并计算各组番鸭的生产性能、屠宰性能及各脏器指数,同时采集各组番鸭的血清、肌肉及新鲜粪样,测定血清生化指标及鸭粪常规成分的变化情况。结果表明,①与未发酵的花生秧相比,发酵后的花生秧粗蛋白质、钙水平分别上升31.82%(P<0.01)、97.40%(P<0.01);粗纤维、磷及水分含量分别下降2.35%(P<0.05)、20.69%(P<0.05)、53.23%(P<0.01),营养价值得到提升。②与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组料重比分别下降6.51%(P<0.01)、6.84%(P<0.01);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的腿肌率分别上升20.50%(P<0.05)、25.55%(P<0.05)、9.27%(P>0.05);肝脏指数分别上升9.90%(P>0.05)、12.23%(P<0.05)、3.18%(P>0.05);肌胃指数分别上升17.70%(P<0.05)、30.82%(P<0.05)、36.66%(P<0.05);腺胃指数分别上升1.37%(P>0.05)、32.99%(P<0.05)、36.43%(P<0.05);③发酵花生秧可影响番鸭血清中TP、ALB、GLB、A/G、ALT、AST、AST/ALT、UREA、UA、CRE含量;与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组鸭粪中的总氮、磷、钾、水分含量均呈下降趋势。综上,10%、20%发酵花生秧饲料能显著提高番鸭的生产性能,明显降低增重成本,对番鸭的产肉性能无明显影响,但可能对其肝脏功能、肾脏功能、免疫功能有一定的影响。 展开更多

关键词 发酵花生秧 番鸭 生产性能 屠宰性能 血清生化指标 鸭粪常规成分

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应用多重Taqman-LNA荧光PCR同时检测肉制品中猪鸡鸭源性成分 被引量：4

15

作者 许如苏 纪玲珍 +3 位作者 黄帅 周广彪 魏霜 段建发 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期81-84,共4页

为了建立同时检测肉制品中猪、鸡、鸭3种动物源性成分的多重Taqman-LNA荧光PCR,给打击肉制品掺假提供技术手段。针对动物线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立同时检测肉制品中猪、鸡、鸭源性成分的多重荧光PCR... 为了建立同时检测肉制品中猪、鸡、鸭3种动物源性成分的多重Taqman-LNA荧光PCR,给打击肉制品掺假提供技术手段。针对动物线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立同时检测肉制品中猪、鸡、鸭源性成分的多重荧光PCR方法,并应用于市售肉制品的检测。建立的多重Taqman-LNA荧光PCR方法可同时检测肉制品中上述动物源性成分,与牛、羊、驴、兔、鹅等动物源性成分无交叉反应,其检测限均达到肉含量的0.001%。对170份市售肉制品检测发现,有42份样品检出与标签标示成分不符的肉种成分,样品不合格率为24.7%。本研究建立的多重Taqman-LNA荧光PCR方法可同时检测肉制品中猪、鸡、鸭3种动物源性成分,具有特异、快速、经济、高效等优点,可适应于肉制品中多种肉源性成分的高通量检测。 展开更多

关键词 多重Taqman-LNA荧光PCR 猪源性成分 鸡源性成分 鸭源性成分 肉制品

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基于微滴式数字聚合酶链式反应技术的肉制品中鸭源性成分的定量检测 被引量：5

16

作者 刘立兵 员丽娟 +4 位作者 陈敏娜 王金凤 付琦 孙晓霞 王建昌 《肉类研究》 2021年第3期30-32,33,34,共5页

为实现肉制品中鸭源性成分的定量检测,基于微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)技术,以鸭生长激素(growth hormone,GH)基因为靶基因,建立肉制品中鸭源性成分的定量检测方法。结果表明:所建立的d... 为实现肉制品中鸭源性成分的定量检测,基于微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)技术,以鸭生长激素(growth hormone,GH)基因为靶基因,建立肉制品中鸭源性成分的定量检测方法。结果表明:所建立的ddPCR方法能特异性检测鸭源性成分,灵敏性为11.1 copies/μL;根据鸭肉粉质量(mg)与DNA质量浓度(ng/μL)、DNA质量浓度(ng/μL)与鸭GH基因拷贝数浓度(copies/μL)之间的线性关系,建立鸭肉粉质量(x)与鸭GH基因拷贝数浓度(y)之间的关系式为x=(n×y)/725.046-n/1317.06+0.153;模拟混合样本中鸭肉粉质量分数5%-100%时,鸭源性成分检测的绝对误差均小于±1.52%,变异系数均小于10.38%,回收率为98.35%~125.32%;在88份商品化肉制品中,11份肉制品中检出鸭源性成分,检出率为12.5%,且鸭源性成分含量为18.6%~87.4%。本研究所建立的鸭源性成分ddPCR方法有较好的准确性和较强的适用性,能够应用于肉制品中鸭源性成分的定量检测。 展开更多

关键词 肉制品 鸭源性成分 生长激素基因 微滴式数字聚合酶链式反应 定量检测

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环介导等温扩增结合免疫层析试纸条快速检测羊肉及其制品中的鸭源成分 被引量：4

17

作者 柳海宾 张海鑫 +2 位作者 宋腾飞 刘聪 聂付磊 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第16期238-242,251,共6页

为实现肉及肉制品中掺假成分的快速检测,本文将环介导等温扩增技术(loop mediated isothermal amplification,LAMP)与免疫层析试纸条(immunochromatographic test strip,ICTS)相结合,建立了一套可在羊肉及其制品中特异并灵敏地检测出鸭... 为实现肉及肉制品中掺假成分的快速检测,本文将环介导等温扩增技术(loop mediated isothermal amplification,LAMP)与免疫层析试纸条(immunochromatographic test strip,ICTS)相结合,建立了一套可在羊肉及其制品中特异并灵敏地检测出鸭源性成分的方法。根据鸭特异性细胞色素b(cytb)基因的6个特异性区域设计LAMP引物,其中两条内引物FIP和BIP分别使用生物素(biotin)和地高辛(digoxin)标记。使用LAMP扩增技术于65℃下扩增30 min产生生物素和地高辛标记的双链DNA产物,将扩增产生的双链DNA产物(10μL)与90μL上样缓冲液(PBS pH=7.4)混合均匀后使用免疫层析试纸条进行可视化检测。本研究所建立的LAMP-ICTS方法能够在40 min内特异性地检测出羊肉及其制品中的鸭源成分,且与其他肉类不存在交叉反应,检出限可达到0.01%(w/w)。市售实际样品检测结果显示,所采集的羊肉片、羊肉串样品中均有鸭源性成分,且此结果与行业标准方法(PCR-电泳)的检测结果一致。LAMP-ICTS方法具有灵敏度高、特异性好、检测速度快、对仪器的依赖低等优点,适用于基层监管部门对羊肉及其制品真伪进行快速检测。 展开更多

关键词 羊肉掺假 鸭源成分 环介导等温扩增 免疫层析试纸条 快速检测

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基于TaqMan探针的实时荧光LAMP检测肉制品中鸭源性成分研究

18

作者 柳梦思 时国强 +4 位作者 高娜婷 焦义然 孙旭飞 孟亚南 董振国 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期89-94,共6页

本研究建立1种基于TaqMan探针的实时荧光环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)(TaqMan—LAMP)检测方法,用于肉制品中鸭源性成分的快速鉴别。以鸭线粒体cytb基因的保守序列设计特异性引物,优化并建立基于TaqMan... 本研究建立1种基于TaqMan探针的实时荧光环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)(TaqMan—LAMP)检测方法,用于肉制品中鸭源性成分的快速鉴别。以鸭线粒体cytb基因的保守序列设计特异性引物,优化并建立基于TaqMan探针的实时荧光LAMP检测方法,对该方法进行特异性、灵敏度试验;同时与《GB/T38164—2019常见畜禽动物源成分检测方法 实时荧光PCR法》作比较,对市售肉制品进行检测,验证本方法的准确性。所建立的TaqMan-LAMP检测方法特异性强,仅鸭肉基因组DNA呈现特异性扩增曲线,30 min内完成检测,灵敏度为0.001%(w/w),重复性好,批次内变异系数CV为1.99%,对47份肉制品进行检测,检测结果与国标法相比,相对敏感性、特异性和符合率均为100%。本研究建立的鸭源性成分TaqMan-LAMP检测方法检测快速、特异性强、灵敏度高、重复性好,适用于肉制品中鸭源性成分的快速检测。 展开更多

关键词 环介导等温扩增 TaqMan-LAMP 鸭源性成分 检测

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鸭、马、鹿源性成分实时等温扩增检测方法的建立 被引量：2

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作者 邵长春 刘光瑞 +1 位作者 吴福祥 田妮娜 《甘肃科技》 2019年第11期41-44,共4页

建立了一种快速检测鸭、马、鹿动物源性成分的实时荧光环介导等温扩增法。针对鸭、马、鹿物种COXIII,atpase6,COXⅠ特异性基因分别设计LAMP引物,反应加入荧光染料SYTO-9,在63℃条件下反应40min,通过实时检测荧光强度判断反应结果,结果... 建立了一种快速检测鸭、马、鹿动物源性成分的实时荧光环介导等温扩增法。针对鸭、马、鹿物种COXIII,atpase6,COXⅠ特异性基因分别设计LAMP引物,反应加入荧光染料SYTO-9,在63℃条件下反应40min,通过实时检测荧光强度判断反应结果,结果显示鸭、鹿源性成分的检测灵敏度为1pg,马源性成分的检测灵敏度为100fg。对模拟掺杂肉制品检测时,掺杂鸭肉、马肉、鹿肉的检出限为0.01%。本文所建立的LAMP法特异性强、灵敏度高,能有效的对肉制品掺杂的鸭、马、鹿源性成分进行检测,可作为肉类鉴别的一种快速检测方法。 展开更多

关键词 鸭源性成分 马源性成分 鹿源性成分 环介导等温扩增 可视化检测

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基于Cyt-B基因鉴定肉制品中鸭源性成分的研究 被引量：3

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作者 刘玟妍 陈思秀 +4 位作者 王天添 段思琪 艾金霞 王艳双 孙丽媛 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第24期173-179,共7页

基于Cyt-B基因设计特异性引物,建立高效快速检测肉制品中鸭源性成分的方法。选取Cyt-B基因作为检测靶标,应用生物信息学技术设计各物种特异性引物,建立聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系检测肉制品中鸭源性成分,并将... 基于Cyt-B基因设计特异性引物,建立高效快速检测肉制品中鸭源性成分的方法。选取Cyt-B基因作为检测靶标,应用生物信息学技术设计各物种特异性引物,建立聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系检测肉制品中鸭源性成分,并将鸭特异性基因片段进行克隆和测序分析。该检测体系可以对鸭肉含量为1pg的肉制品实现稳定检测,灵敏度髙,特异性好。测序分析结果显示克隆的特异性基因序列与Genbank中相同物种(序列ID:EU755253.1)的核苷酸同源性达100%。该文建立的基于Cyt-B基因的PCR检测方法,可实现对肉制品中鸭源性成分高效快速的检测,既为肉类产品DNA鉴定试剂盒的研发提供试验基础,也有望对肉制品的市场监管和相关执法提供有力的技术保障。 展开更多

关键词 Cyt-B基因 鸭源性成分 聚合酶链式反应 克隆 生物信息学

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