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禽流感病毒M2e基因与鸡IgG Fc基因在巴斯德毕赤酵母中的融合表达 被引量：3
1
作者 尚书文 侯继波 +5 位作者 徐公豹 牛明福 王秀清 何家惠 陈溥言 姜平 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第1期17-22,共6页
【目的】得到融合蛋白M2e-Fc,并检测其免疫学特性,为研制禽流感通用疫苗奠定基础。【方法】根据禽流感病毒H5N1的M2e蛋白氨基酸序列设计2条长互补引物,通过重叠区互补扩增基因法扩增出目的基因M2e,然后与鸡IgGFc片段基因一起克隆入毕赤... 【目的】得到融合蛋白M2e-Fc,并检测其免疫学特性,为研制禽流感通用疫苗奠定基础。【方法】根据禽流感病毒H5N1的M2e蛋白氨基酸序列设计2条长互补引物,通过重叠区互补扩增基因法扩增出目的基因M2e,然后与鸡IgGFc片段基因一起克隆入毕赤酵母表达质粒中,构建酵母表达载体。将阳性质粒线性化后电转化入感受态毕赤酵母X-33中,再经甲醇诱导后,通过Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定融合蛋白。之后用其免疫非免疫鸡,检验其免疫原性。【结果】成功构建了表达M2e和Fc融合蛋白的酵母表达载体pPICZαA-M2-Fc,并通过Zeocin筛选及PCR鉴定出了阳性重组子;阳性重组子经甲醇诱导后得到融合蛋白,Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定证实,融合蛋白得到正确表达,并且可以与M2e阳性血清反应。动物免疫试验证实,该融合蛋白可以诱导鸡产生抗M2e抗体,具有良好的免疫原性。【结论】融合蛋白M2e-Fc在巴斯德毕赤酵母表达系统中得到了成功表达,该融合蛋白具有较好的免疫原性,为后期进行其他免疫试验奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 M2e基因 鸡igg Fc基因 巴斯德毕赤酵母
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鸡IgG单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：2
2
作者 王骏俊 余为一 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第28期15653-15654,共2页
[目的]制备鸡免疫球蛋白单克隆抗体,提高诊断鸡特异性抗体的水平。[方法]应用盐析法粗提和葡聚糖G200凝胶层析分离纯化鸡血清IgG,免疫BALB/c小鼠,并进行细胞融合和ELISA筛选。[结果]间接ELISA法检测C44、C45、C67和C68共4株鸡IgG单克隆... [目的]制备鸡免疫球蛋白单克隆抗体,提高诊断鸡特异性抗体的水平。[方法]应用盐析法粗提和葡聚糖G200凝胶层析分离纯化鸡血清IgG,免疫BALB/c小鼠,并进行细胞融合和ELISA筛选。[结果]间接ELISA法检测C44、C45、C67和C68共4株鸡IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞的腹水效价分别为1∶640000、1∶320000、1∶640000和1∶80000。Westernblot分析显示,C44和C45株单克隆抗体识别鸡IgG轻链,而C67和C68株单克隆抗体识别鸡IgG重链,它们与鸭、猪等血清Ig均没有反应。小鼠Ig亚类分析表明,4株细胞分泌的抗体均为IgG1型。[结论]成功获得了4株稳定分泌鸡IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞。 展开更多
关键词 鸡igg 单克隆抗体 特异性 鉴定
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应用抗鸡IgG单克隆抗体快速检测鸡传染性腔上囊病抗体的研究 被引量：1
3
作者 王红 魏云玲 辛颜彬 《中国兽医科技》 CSCD 1998年第4期20-21,共2页
应用抗鸡ＩｇＧ单克隆抗体快速检测鸡传染性腔上囊病抗体的研究王红魏云玲１）辛颜彬１）（解放军石家庄医学高等专科学校中心实验室０５００８１）鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）是雏鸡的一种高度接触性传染病，主要特征是鸡腔上囊严重损... 应用抗鸡ＩｇＧ单克隆抗体快速检测鸡传染性腔上囊病抗体的研究王红魏云玲１）辛颜彬１）（解放军石家庄医学高等专科学校中心实验室０５００８１）鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）是雏鸡的一种高度接触性传染病，主要特征是鸡腔上囊严重损伤进而导致免疫抑制。检测ＩＢＤ抗体... 展开更多
关键词 鸡病 IBD 抗体 鸡igg 单克隆抗体 ELISA
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抗鸡IgG单竞隆抗体及其酶标记抗体的研制 被引量：1
4
作者 吴胜昔 蔡家利 +1 位作者 胡仁建 郑伟 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第11期70-72,共3页
鸡源疾病种类繁多，一般鸡场均接种过菌（疫）苗，鸡血清中IgG水平的测定，已是疫苗免疫效果评定和体液免疫研究的常用指标。抗鸡IgG的单克隆抗体与常规免疫血清相比，具有特异性高、成分均一等优点。研究旨在制备抗鸡IgG单克隆抗体，... 鸡源疾病种类繁多，一般鸡场均接种过菌（疫）苗，鸡血清中IgG水平的测定，已是疫苗免疫效果评定和体液免疫研究的常用指标。抗鸡IgG的单克隆抗体与常规免疫血清相比，具有特异性高、成分均一等优点。研究旨在制备抗鸡IgG单克隆抗体，并对其进行辣根过氧化物酶（HRP）标记和鉴定，为以后研制有效试剂盒、检测禽病及疫苗免疫水平奠定基础。 展开更多
关键词 单克隆抗体 鸡igg 酶标记 辣根过氧化物酶 疫苗免疫 免疫水平 疾病种类 常用指标
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兔抗鸡IgG-HRP酶标抗体的制备与检测 被引量：4
5
作者 张国中 李春富 +1 位作者 蒲娟 赵继勋 《畜牧与兽医》 北大核心 2004年第7期16-18,共3页
将经多种方法提纯的鸡IgG与从美国Sigma公司购买的纯鸡IgG产品进行对比研究证实 ,用辛酸沉淀 50 %SAS 离子交换层析方法可获得纯度很好的鸡IgG产物。运用该产物成功制备了兔抗鸡IgG抗血清以及抗鸡IgG重链抗血清。用辛酸沉淀 50 %SAS 35 ... 将经多种方法提纯的鸡IgG与从美国Sigma公司购买的纯鸡IgG产品进行对比研究证实 ,用辛酸沉淀 50 %SAS 离子交换层析方法可获得纯度很好的鸡IgG产物。运用该产物成功制备了兔抗鸡IgG抗血清以及抗鸡IgG重链抗血清。用辛酸沉淀 50 %SAS 35 %SAS盐析提纯的兔抗鸡IgG与用NaIO4 作用 1 6～ 2 0min的已氧化辣根过氧化物酶 (HRP)结合 6h,获得了优质可靠的兔抗鸡IgG 展开更多
关键词 兔抗鸡igg-HRP酶标抗体 鸡igg 酶标记物
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酶标兔抗鸡IgG的制备 被引量：4
6
作者 王彦彬 李艳伍 +1 位作者 郑杰 张红英 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2004年第2期53-54,共2页
无菌采健康鸡心脏血 ,辛酸—硫酸铵法提取血清IgG ,SephadexG2 5柱层析 ,SDS -PAGE电泳检测IgG纯度 ,分光光度计测定含量 ,透析袋浓缩。与福氏完全佐剂和不完全佐剂乳化后 ,免疫 4只雄性健康家兔 ,1 0d心脏采血。用同样方法纯化兔IgG。... 无菌采健康鸡心脏血 ,辛酸—硫酸铵法提取血清IgG ,SephadexG2 5柱层析 ,SDS -PAGE电泳检测IgG纯度 ,分光光度计测定含量 ,透析袋浓缩。与福氏完全佐剂和不完全佐剂乳化后 ,免疫 4只雄性健康家兔 ,1 0d心脏采血。用同样方法纯化兔IgG。过碘酸钠氧化法标记辣根过氧物酶 ,即得酶标兔抗鸡IgG。 展开更多
关键词 酶标兔抗鸡igg 制备技术 酶联免疫吸附试验 鸡病诊断 抗体检测
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特异性抗菌抗体喷剂与牛黄上清胶囊治疗急性咽炎的疗效比较 被引量：1
7
作者 唐宁 林照亮 +5 位作者 朱慧 郁辉 包伟光 王小文 张敏 陈玉新 《实用临床医学（江西）》 CAS 2005年第12期131-133,共3页
目的:比较抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌鸡卵黄IgG喷剂与牛黄上清胶囊治疗急性咽炎的临床疗效。方法:100例急性咽炎患者随机分为两组:治疗组50例和对照组50例。治疗组采用0.2%抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌鸡卵黄IgG喷剂口腔喷雾治... 目的:比较抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌鸡卵黄IgG喷剂与牛黄上清胶囊治疗急性咽炎的临床疗效。方法:100例急性咽炎患者随机分为两组:治疗组50例和对照组50例。治疗组采用0.2%抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌鸡卵黄IgG喷剂口腔喷雾治疗,对照组采用牛黄上清胶囊治疗。两组均5 d为1疗程。结果:治疗组治愈率26.0%、显效率34.0%、有效率28.0%、无效率12.0%、总有效率88.0%;对照组治愈率5.0%、显效率26.0%、有效率32.0%、无效率32.0%、总有效率68.0%,两组总有效率比较,差异有显著性(χ2=9.00,P<0.05)。结论:0.2%的抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌鸡卵黄IgG抗体喷剂治疗急性咽炎疗效显著,安全、无毒副作用。 展开更多
关键词 鸡卵黄igg 金黄色葡萄球菌 溶血性链球菌 咽炎 急性 治疗
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抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌IgY的制备及临床疗效观察 被引量：1
8
作者 唐宁 包伟光 +4 位作者 陈勤玲 张进 聂荣庆 胡国柱 吴东风 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期423-425,429,共4页
目的 制备抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌鸡卵黄IgG（IgY），并观察其治疗急性咽炎的临床疗效。方法 将金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌混合免疫母鸡，使用水稀释法、超滤法、西曲溴胺除脂法和硫酸铵盐析法提取、纯化IgY后，经全面检定，... 目的 制备抗金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌鸡卵黄IgG（IgY），并观察其治疗急性咽炎的临床疗效。方法 将金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌混合免疫母鸡，使用水稀释法、超滤法、西曲溴胺除脂法和硫酸铵盐析法提取、纯化IgY后，经全面检定，对110例急性咽炎进行临床疗效观察，治疗组60例，使用0．2％IgY口腔喷剂治疗7d；对照组50例，口服双黄连胶囊7d。结果 IgY粗提物和纯化物纯度分别为41．6％和96．0％，效价分别达1：1024和1：8192；IgY粗提物在pH2．07-11．71条件下7d，效价基本不变；2．5—10．0mg／ml的纯化物抑制率为20．81％-68．11％。治疗组治愈率为26．67％，显效率为36．37％，有效率为30．00％，无效率为6．67％，总有效率为93．33％；对照组治愈率为12．00％，显效率为18．00％，有效率为44．00％，无效率为26．00％，总有效率为74．00％，差异有非常显著意义（P〈0．005）。治疗组未见毒副作用。结论 金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌能够诱导母鸡产生特异性抗体，治疗急性咽炎疗效显著、安全： 展开更多
关键词 鸡卵黄igg(IgY) 金黄色葡萄球菌 溶血性链球菌 急性咽炎
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抗猪繁殖与呼吸综合征病毒IgY的制备
9
作者 田树华 佟婧洋 +2 位作者 邹宇 柳伟鹏 毕聪明 《畜牧兽医科技信息》 2009年第3期32-32,共1页
利用猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗超量免疫母鸡,用水稀释法和硫酸铵沉淀法分离纯化IgY抗体,并用间接ELISA方法测抗体效价。结果表明:母鸡初次免疫后10d即有抗体产生,初次免疫75d后IgY效价可达1:10000,最高可达1:12800并能持续7～10d。... 利用猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗超量免疫母鸡,用水稀释法和硫酸铵沉淀法分离纯化IgY抗体,并用间接ELISA方法测抗体效价。结果表明:母鸡初次免疫后10d即有抗体产生,初次免疫75d后IgY效价可达1:10000,最高可达1:12800并能持续7～10d。IgY蛋白含量为10.64mg/mL蛋黄。IgY纯度达90%以上。 展开更多
关键词 鸡卵黄igg(IgY) 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) 酶联免疫吸附
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