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鸡蛋过敏原与婴幼儿鸡蛋过敏的研究进展 被引量:16
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作者 李凯文 邵洁 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期386-389,共4页
鸡蛋过敏是婴幼儿最常见的食物过敏问题,主要表现为皮肤症状、消化道症状或呼吸道症状。卵类黏蛋白(ovomucoid)、卵白蛋白(ovalbumin)、卵转铁蛋白(ovotransferrin)、溶菌酶(lysozyme)以及卵黏蛋白(ovomucin)是鸡蛋中主要几种过敏原,卵... 鸡蛋过敏是婴幼儿最常见的食物过敏问题,主要表现为皮肤症状、消化道症状或呼吸道症状。卵类黏蛋白(ovomucoid)、卵白蛋白(ovalbumin)、卵转铁蛋白(ovotransferrin)、溶菌酶(lysozyme)以及卵黏蛋白(ovomucin)是鸡蛋中主要几种过敏原,卵类黏蛋白是最具代表性的抗原,并且与预后密切相关。鸡蛋过敏的主要治疗措施是鸡蛋回避,而特异性免疫治疗仍在实验研究阶段。 展开更多
关键词 鸡蛋过敏原 鸡蛋过敏 婴幼儿
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热加工对鸡蛋中4种主要过敏原结构的影响 被引量:14
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作者 刘珂 熊丽姬 +2 位作者 高金燕 陈红兵 佟平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第23期51-58,共8页
为探究热加工对鸡蛋主要过敏原结构的影响,对鸡蛋清中的4种过敏原进行不同条件的热加工,并利用圆二色光谱、紫外-可见光光谱、外源荧光光谱对加热前后过敏原的空间结构进行表征。结果表明,卵转铁蛋白对热不稳定,随加热时间的延长和温度... 为探究热加工对鸡蛋主要过敏原结构的影响,对鸡蛋清中的4种过敏原进行不同条件的热加工,并利用圆二色光谱、紫外-可见光光谱、外源荧光光谱对加热前后过敏原的空间结构进行表征。结果表明,卵转铁蛋白对热不稳定,随加热时间的延长和温度的升高,分子结构逐渐展开,芳香族残基和疏水基团暴露于分子表面;轻微加热使卵白蛋白分子的二级结构更加有序,吸光度减小,表面疏水性增大,随着加热程度的增大,其二级结构变得无序,分子发生聚集;加热后卵类黏蛋白的二级结构较为稳定,轻微加热其分子展开,吸光度和荧光强度增大,继续加热使蛋白分子部分聚集;热处理使溶菌酶分子的有序性下降,芳香族残基和疏水基团逐渐暴露,但随着加热程度的增加,蛋白分子发生部分聚集。本实验结果为后续研究加热对鸡蛋过敏原致敏性的影响提供理论依据。 展开更多
关键词 热加工 鸡蛋过敏原 光谱分析 结构
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鸡蛋主要过敏原Gal d1片段基因的克隆、表达、纯化及免疫学鉴定 被引量:6
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作者 马艳梅 黄钟 +4 位作者 刘志刚 闫浩 王和平 罗新萍 孔小丽 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期589-593,共5页
目的克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原Gald1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定。方法用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原Gald1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增Gald1N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32... 目的克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原Gald1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定。方法用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原Gald1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增Gald1N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32a上。重组质粒转入大肠杆菌,用IPTG诱导表达,通过镍亲和柱层析法纯化重组蛋白,最后用Western-blotting检测重组蛋白的免疫原性。结果表达的蛋白均以可溶性为主,N端融合蛋白相对分子质量为28600,C端融合蛋白相对分子质量为26800,纯化的N端和C端蛋白均有较好的免疫原性,C端的免疫原性强于N端。结论成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原基因Gald1的N端和C端,为鸡蛋过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡蛋过敏原 Gald1 克隆 表达
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时间分辨免疫荧光法测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分 被引量:2
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作者 吉坤美 李就鸿 +2 位作者 李盟 吴序栎 刘志刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期323-326,共4页
目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏... 目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏原总蛋白抗体、Eu3+标记的链酶亲和素和以β-二酮体为主的增强液等试剂,建立双抗夹心TRFIA方法,用于检测10种食品中是否含有鸡蛋蛋白成分。结果:鸡蛋总蛋白SDS-PAGE显示带大致有10条,其中主要条带有4条,分子量分别为71、55、38、14kDa;成功地研制出双抗体夹心TRFIA法检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分,具有特异性,其最低检出限为0·625ng/mL,标准曲线在12·5~640ng/mL范围内线性良好;8种食品检测结果与食物过敏原标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果均呈现阳性。结论:初步建立了检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分的双抗体夹心TRFIA,具有较好的特异性和灵敏度;该方法对于未标注鸡蛋过敏原成分的食品检测具有一定的实际应用价值。 展开更多
关键词 时间分辨免疫荧光法 鸡蛋过敏原 多克隆抗体 食物过敏
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鸡蛋过敏原Gal d 4线性表位的预测定位及鉴定
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作者 王涛 汤鑫磊 +1 位作者 李倩 姜松松 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期160-167,共8页
采用生物信息学软件GenBank数据库、PDB数据库、Immunomedicine Group、Bepipred-2.0 server、ABCpred、NetMHCⅡpan 4.0 Serer、SYFPEITHI、NetMHC和NetCTL在线工具分析鸡蛋过敏原溶菌酶Gal d 4的一级氨基酸序列、二级结构并预测其B细... 采用生物信息学软件GenBank数据库、PDB数据库、Immunomedicine Group、Bepipred-2.0 server、ABCpred、NetMHCⅡpan 4.0 Serer、SYFPEITHI、NetMHC和NetCTL在线工具分析鸡蛋过敏原溶菌酶Gal d 4的一级氨基酸序列、二级结构并预测其B细胞线性表位和T细胞表位。利用溶菌酶三级结构空间模型,对预测的线性表位进行定位。同时,利用鸡蛋过敏患者血清对Gal d 4的B细胞线性表位进行鉴定。结果表明,3种生物信息学软件预测的5个相同潜在B细胞线性表位为:19 KVFGRCELAAAMKR 32、57 NTQA 60、65 TDG 67、87 TPGSRNLCNI 96和132 RCKGTDVQAWI 142。此外发现,19 KVFGRCELAAAMKR 32、57 NTQA 60和132 RCKGTDVQAWI 142、65 TDG 67和87 TPGSRNLCNI 96在氨基酸序列上不连续,却在空间结构上邻近,因此,这部分线性表位可能共同构成构象表位。预测所得2个T细胞抗原表位分别为:42 SLGNWVCAA 50和100 ALLSSDITA 108。经鉴定所得具有免疫活性的B细胞线性表位为:19 KVFGRCELAAAMKR 32。该研究首次对鸡蛋过敏原Gal d 4的B细胞线性表位和T细胞表位预测定位及鉴定,有助于进一步认识鸡蛋过敏原Gal d 4的功能与结构,对鸡蛋过敏原的识别与检测具有重要的参考与借鉴作用。 展开更多
关键词 鸡蛋过敏原 溶菌酶 生物信息学 B细胞线性表位 T细胞表位
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鸡蛋过敏原卵转铁蛋白标准物质候选物的研究 被引量:1
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作者 袁锦 周煌 +3 位作者 佟平 吴志华 陈红兵 高金燕 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期342-347,共6页
目的:制备高纯度的鸡蛋过敏原卵转铁蛋白,并详细表征其理化性质及免疫学性质,满足标准物质候选物的质量要求。方法:通过两步柱层析法制备卵转铁蛋白并分装、冻干,然后借助质谱鉴定身份;采用SDS-PAGE银染方法鉴定纯度,圆二色光谱、荧光... 目的:制备高纯度的鸡蛋过敏原卵转铁蛋白,并详细表征其理化性质及免疫学性质,满足标准物质候选物的质量要求。方法:通过两步柱层析法制备卵转铁蛋白并分装、冻干,然后借助质谱鉴定身份;采用SDS-PAGE银染方法鉴定纯度,圆二色光谱、荧光光谱和核磁共振表征高级结构;利用Bradford法检测含量和SDS-PAGE银染方法评估稳定性,间接ELISA方法评估其与Ig E结合能力。结果:制备的蛋白经质谱鉴定为鸡蛋卵转铁蛋白,分子量约79.55 ku,等电点为6.85,纯度高达94.6%;结构分析显示,制备的卵铁蛋白保留了其天然结构特性,并且冻干未使卵转铁蛋白的结构产生明显的变化;在4℃条件下储藏5个月,卵转铁蛋白的含量、纯度、结构和免疫学活性均无明显变化。结论:制备的卵转铁蛋白可作为标准物质候选物。 展开更多
关键词 鸡蛋过敏原 卵转铁蛋白 标准物质候选物
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