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中草药免疫增强剂对鸡免疫器官指数和生化指标的影响 被引量:5
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作者 高桂生 邵欣华 +3 位作者 史秋梅 徐建忠 沈萍 粱银聚 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期130-132,共3页
为了阐述紫黄散的药用机理,试验将240只6日龄雏鸡随机分为A、B、C、D、E、F 6个组。14日龄时A、B、C组按高、中、低3个剂量灌服中药组方紫黄散,D、E、F组灌服生理盐水,每只鸡1 mL,连续7 d,其中F组为空白对照组。21日龄时A^E组每只点眼接... 为了阐述紫黄散的药用机理,试验将240只6日龄雏鸡随机分为A、B、C、D、E、F 6个组。14日龄时A、B、C组按高、中、低3个剂量灌服中药组方紫黄散,D、E、F组灌服生理盐水,每只鸡1 mL,连续7 d,其中F组为空白对照组。21日龄时A^E组每只点眼接种0.2 mL鸡传染性法氏囊病毒(IBDV),F组灌服0.2 mL生理盐水。攻毒3 d后,D组每只鸡肌注卵黄抗体0.5 mL,其他各组注射0.5 mL生理盐水。至试验的第24,31,40,49天,从各组中随机取10只鸡分别采集其免疫器官与血清进行相关指标测定。结果表明:自拟免疫增强剂组方能明显降低感染IBDV的雏鸡病死率,能促进免疫器官发育,增加外周血蛋白含量,其中B组的用药剂量45 mg/mL最佳。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) 免疫调节剂 免疫器官 生化指标
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中药复方提取物的抗病毒效果试验 被引量:3
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作者 吴金梅 胡迎利 +1 位作者 郭良兴 郑保军 《家禽科学》 2010年第2期9-10,共2页
近期,郑州周边部分肉鸡养殖户遭遇鸡传染性法氏囊炎与非典型新城疫混合感染,25~35日龄突然发病,主要症状为食欲减退,缩颈嗜眠,重症者出现扭头、伏地、软腿等神经症状,排乳白、黄、绿色稀粪,发病率达60%,死亡率达15%。结合剖检病理变化... 近期,郑州周边部分肉鸡养殖户遭遇鸡传染性法氏囊炎与非典型新城疫混合感染,25~35日龄突然发病,主要症状为食欲减退,缩颈嗜眠,重症者出现扭头、伏地、软腿等神经症状,排乳白、黄、绿色稀粪,发病率达60%,死亡率达15%。结合剖检病理变化特点、实验室病毒学、细菌学和血清学检测,确诊为传染性法氏囊病和非典型新城疫感染。采用中药复方提取物治疗取得良好效果。中药复方提取物中药制剂,具有清热解毒、行气化血、宣肺祛痰、补脾益气、生津止渴等功效,本试验观察了中药复方提取物对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)和非典型新城疫病毒(NDV)的抑制作用,证明中药复方提取物具有明显的抗病毒效果。 展开更多
关键词 中药复方提取物 传染性法氏囊病毒(ibdv) 非典型新城疫病毒(NDV) 混合感染
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铁蛋白与法氏囊病毒核衣壳蛋白重组蛋白的原核表达及纳米颗粒胞外自组装 被引量:2
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作者 杜梦潭 张伟业 +3 位作者 刘兴健 李轶女 张志芳 胡小元 《生物技术进展》 2020年第4期378-385,共8页
传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)是传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)的病原,其导致的高死亡率使全球的家禽养殖业受到了严重的经济损失。近年来,基因工程疫苗和DNA疫苗的迅速发展为IBD更有效的... 传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)是传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)的病原,其导致的高死亡率使全球的家禽养殖业受到了严重的经济损失。近年来,基因工程疫苗和DNA疫苗的迅速发展为IBD更有效的防控带来了希望。基于自然合成的铁蛋白大多可以组装成较稳定的多聚体这一特点,其可以作为很多疾病的免疫原载体。根据大肠杆菌密码子的偏好性,对IBDV-VP2、铁蛋白序列进行了优化,并通过大肠杆菌表达系统进行了融合表达,通过质谱、Western blotting、SDS-PAGE检测,该融合蛋白已成功在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,且通过透射电镜可观察到大小均一的纳米级颗粒,研究结果为后期探究铁蛋白自组装对提高IBDV疫苗的广谱性、免疫原性的作用提供了参考,也为进一步研究其作为药物和抗原载体的应用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) 纳米铁蛋白 VP2 原核表达
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应用ELISA间接法检测抗IBDV单克隆抗体 被引量:1
4
作者 陆苹 周培 王国丰 《上海交通大学学报(农业科学版)》 1990年第3期179-181,共3页
本文用 ELISA 间接法,研究并建立了抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的检测体系。实验证明,该法具有简便、灵敏、迅速、特异性强、准确性高及重复性好的优点。是研究筛选抗 IBDV单抗杂交瘤细胞的可靠方法。
关键词 酶联免疫吸附测定(ELISA) 传染性法氏囊病毒(ibdv) 单克隆抗体(McAb)
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鸡传染性法氏囊病毒的分离和鉴定 被引量:1
5
作者 邓凯文 徐斌 +2 位作者 何琴 张强 侯磊 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 CAS 北大核心 2015年第9期134-136,共3页
为了对内江市某养鸡场疑似传染性法氏囊病毒感染的病死鸡进行诊断,并对致病病原进行分离鉴定,通过对临床症状、病理变化进行观察,结合病毒分离和动物回归试验、血清学检测及分子生物学鉴定,最终证明该鸡场发生了传染性法氏囊病毒(IBDV)... 为了对内江市某养鸡场疑似传染性法氏囊病毒感染的病死鸡进行诊断,并对致病病原进行分离鉴定,通过对临床症状、病理变化进行观察,结合病毒分离和动物回归试验、血清学检测及分子生物学鉴定,最终证明该鸡场发生了传染性法氏囊病毒(IBDV)感染并分离到致病毒株,以期为该病的临床诊断和防控提供参考。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) 临床症状 病理变化 病毒分离鉴定 PCR
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无血清微载体培养Vero细胞增殖传染性法氏囊病毒 被引量:1
6
作者 吴培培 冯磊 +3 位作者 唐应华 褚轩 王伟峰 侯继波 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第2期244-246,共3页
为了获得用生物反应器无血清培养基微载体悬浮培养Vero细胞增殖传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的工艺参数,通过驯化Vero细胞适应无血清微载体悬浮培养后,再优化传染性法氏囊病毒在此细胞上的增殖工艺参数,包... 为了获得用生物反应器无血清培养基微载体悬浮培养Vero细胞增殖传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的工艺参数,通过驯化Vero细胞适应无血清微载体悬浮培养后,再优化传染性法氏囊病毒在此细胞上的增殖工艺参数,包括初始细胞密度、微载体浓度、IBDV的感染复数(MOI)、接种时间和病毒收获时间。结果表明:获得适应无血清培养的细胞株——V0株,建立细胞库。获得3 L反应器中培养V0细胞增殖IBDV工艺参数,其初始接种密度为3×105cell/m L、微载体浓度为3 g/L、细胞培养1 d后按MOI为0.2接种IBDV,接毒后120 h收获病毒,可达最高病毒效价109.307TCID50/m L。本研究获得的Vero细胞、IBDV以及各项工艺参数为后续大规模悬浮培养制备法氏囊疫苗提供了生物材料和技术支持。 展开更多
关键词 无血清培养 VERO细胞 传染性法氏囊病毒(ibdv) 微载体 生物反应器 增殖工艺
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法氏囊病毒B87株B节段cDNA定点突变及真核表达载体的构建
7
作者 刘锴 韩秀兰 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期41-43,206,共4页
为了探索构建具有分子标记的传染性法氏囊病毒(IBDV)B87株B节段真核表达载体,试验在不改变载体氨基酸序列的基础上,采用PCR方法将新的酶切标记位点引入表达载体上,通过酶切鉴定、测序鉴定及转染对载体表达情况进行观察和分析。结果表明... 为了探索构建具有分子标记的传染性法氏囊病毒(IBDV)B87株B节段真核表达载体,试验在不改变载体氨基酸序列的基础上,采用PCR方法将新的酶切标记位点引入表达载体上,通过酶切鉴定、测序鉴定及转染对载体表达情况进行观察和分析。结果表明:目的片段与载体片段连接正确,构建的绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-NB能在Vero细胞内表达。说明成功构建了含分子标记的突变真核表达载体pEGFP-NB。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) B节段 定点突变 载体构建 绿色荧光蛋白
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VP_4和VP_5蛋白在鸡传染性法氏囊病毒感染Vero细胞中的作用
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作者 李双洁 卢宇 +2 位作者 张金秋 苗晋锋 侯继波 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1030-1036,共7页
[目的]鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)感染会引起鸡的免疫抑制,给养禽业带来巨大危害。本文旨在探讨鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)蛋白VP4和VP5在病毒感染引起的免疫抑制中的作用。[方法]构建VP4和VP5蛋白的真核表达质粒并转染Vero细胞,再用IBDV ... [目的]鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)感染会引起鸡的免疫抑制,给养禽业带来巨大危害。本文旨在探讨鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)蛋白VP4和VP5在病毒感染引起的免疫抑制中的作用。[方法]构建VP4和VP5蛋白的真核表达质粒并转染Vero细胞,再用IBDV CV03病毒株感染转染后的细胞,Western-blot方法检测细胞中模式识别受体及下游转录因子的表达;RT-q PCR检测细胞因子及抗病毒基因的表达。[结果]IBDV CV03病毒感染Vero细胞后,VP4蛋白在一定程度上能够提高TLR3、RIG-Ⅰ蛋白含量,但差异不显著;VP5对TLR3、RIG-Ⅰ等介导的天然免疫通路有一定的抑制作用;过表达VP5在IBDV CV03病毒感染后显著抑制了Vero细胞IRF3的表达及其磷酸化水平,也显著抑制了IRF7蛋白和NF-κB基因的表达,并在抑制NF-κB后抑制了TNF-α,而过表达VP4无此作用。[结论]VP5蛋白对Vero细胞相关信号通路有一定的抑制作用,这种抑制作用和核转录因子及TNF-α的抑制密切相关。 展开更多
关键词 VP蛋白 传染性法氏囊病毒(ibdv) 细胞转染 免疫抑制
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鸡传染性法氏囊病毒鸡胚适应株的培育 被引量:2
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作者 张春杰 陈树光 郑祥海 《河南畜牧兽医(综合版)》 1998年第1期24-26,共3页
将鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)野毒株分别经绒毛膜和尿囊腔途径接种于鸡胚进行传代培养,应用AGP法和Dot-ELISA法分别对每代收取的不同培养物(绒毛膜和尿囊液)进行检测。结果显示,经绒毛膜途径传至第3代,尿囊腔途径传至第4—5代,... 将鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)野毒株分别经绒毛膜和尿囊腔途径接种于鸡胚进行传代培养,应用AGP法和Dot-ELISA法分别对每代收取的不同培养物(绒毛膜和尿囊液)进行检测。结果显示,经绒毛膜途径传至第3代,尿囊腔途径传至第4—5代,即成为鸡胚完全适应株,可作为鸡胚培养病毒用毒种,方法应选择操作简便、且收获物质量高。数量多的尿囊腔接种途径。 展开更多
关键词 适应株 传染性法氏囊病毒(ibdv) 胚培养 传染性 绒毛膜 收获物 尿囊腔 Dot-ELISA法 接种方法 尿囊液
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紫锥菊多糖对IBDV疫苗免疫雏鸡外周血CD_4^+/CD_8^+含量的影响 被引量:2
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作者 卫书朋 倪耀娣 +1 位作者 卫雪娇 杜健 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第12期141-142,共2页
为了从细胞免疫学角度探讨紫锥菊多糖对传染性法氏囊病病毒(IBDV)疫苗免疫效果的影响,试验选用3种剂量紫锥菊多糖,自雏鸡6日龄开始连续口服7 d,于13,20,27日龄时用流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+含量并计算CD4+/CD8+比值。结果表明:... 为了从细胞免疫学角度探讨紫锥菊多糖对传染性法氏囊病病毒(IBDV)疫苗免疫效果的影响,试验选用3种剂量紫锥菊多糖,自雏鸡6日龄开始连续口服7 d,于13,20,27日龄时用流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+含量并计算CD4+/CD8+比值。结果表明:在13日龄时,紫锥菊中、高剂量组对外周血CD4+/CD8+比值的影响显著高于对照组(P<0.05),随着时间的推移各组CD4+/CD8+比值均下降。说明紫锥菊提取物对雏鸡免疫IBDV疫苗初期具有明显的免疫促进作用,是一种效果较为明显的免疫调节剂。 展开更多
关键词 紫锥菊多糖 传染性法氏囊病毒(ibdv)疫苗 CD4^+ CD8^+比值
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传染性法氏囊病病毒野毒株的致病性及其vp2基因比较 被引量:10
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作者 孙淑红 崔治中 +1 位作者 丁家波 朱瑞良 《中国病毒学》 CSCD 2004年第3期245-249,共5页
对4个IBDV野毒株的致病性和它们的vp2基因高变区序列同时做了比较分析。结果表明,4个IBDV毒株在致病性程度上存在较大差异。其中有一个是真正的超强毒,即GX8/99,其他几个虽然达不到真正超强毒的毒力,但也比经典的标准毒的致死性高得多。... 对4个IBDV野毒株的致病性和它们的vp2基因高变区序列同时做了比较分析。结果表明,4个IBDV毒株在致病性程度上存在较大差异。其中有一个是真正的超强毒,即GX8/99,其他几个虽然达不到真正超强毒的毒力,但也比经典的标准毒的致死性高得多。在vp2基因高变区,这4个IBDV野毒株与超强毒参考株HK46同源性很高,在DNA水平为96.8%~99.5%,在氨基酸(aa)水平为96.6%~100%。而与疫苗毒D78有很大差异,分别只有91.7%~93.6%和91.8%~93.2%。说明IBDV毒株的vp2基因高变区确实与其致病性有一定关系。特别是SD-1/97、SD-3/98、JS-30/99株之间及其与HK46在DNA和aa水平的同源性高达98.4%和98.6%以上,SD-3/99、JS-30/99株之间及其与HK46的氨基酸同源性为100%。然而,致病性特别高的GX8/99株病毒与其他3个野毒株及HK46在DNA和氨基酸水平的同源性相对较低,在DNA和aa水平的同源性只有96.8%~97.2%和96.6%~97.9%。相对于国内的流行毒株和香港超强毒参考株HK46,GX8/99株在致病性和VP2高变区都已发生了一定的变异。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) 致病 VP2基因 高变区
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传染性法氏囊病病毒五个抗原表位短肽的鉴定与序列分析 被引量:6
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作者 王永山 范红结 +4 位作者 李银 周宗安 施正良 王选年 张改平 《中国病毒学》 CSCD 2005年第5期503-506,共4页
以5株传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)单克隆抗体HNF1、HNF7、B34、2B1和2G8作为筛选分子,对噬菌体展示12肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"淘洗,从每株单克隆抗体筛选到的噬菌斑中随机挑取12个单克隆... 以5株传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)单克隆抗体HNF1、HNF7、B34、2B1和2G8作为筛选分子,对噬菌体展示12肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"淘洗,从每株单克隆抗体筛选到的噬菌斑中随机挑取12个单克隆蓝色噬菌斑,合计60个,用间接ELISA检测,A值大于1.00;用竞争抑制ELISA分析,单克隆抗体和IBDV抗原均能竞争抑制筛选12肽与固相包被单克隆抗体的反应,抑制率大于40%,表明在该12肽内含有IBDV抗原表位。选取35个单克隆噬菌斑,测定噬菌体gIII部分基因的核苷酸序列,确定了这5个含有不同IBDV抗原表位12肽的核苷酸和氨基酸序列。进一步将其与GenBank中IBDV基因组编码蛋白的氨基酸序列进行比较,发现2B1筛选肽有4个连续氨基酸残基Leu-Ala-Ser-Pro与IBDV基因组A片段编码多聚蛋白的第536-599氨基酸残基一致,推测2B1为线性表位;而HNF1、HNF7、B34和2G8筛选肽均没找到有3个以上连续氨基酸残基与IBDV蛋白序列相同之处,推测可能是构象依赖性表位。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) 抗原表位 序列分析
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IBDVvp2基因高变区序列测定与进化分析 被引量:3
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作者 闫笑 李天宪 +2 位作者 范兆军 寇铮 陈绳亮 《中国病毒学》 CSCD 2004年第6期620-623,共4页
本实验采用来源于江苏地区的六株不同鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)毒株,应用 RT-PCR 法对 vp2 基因高变区进行了扩增,构建重组质粒 pMD18T- vp2,测序。与有代表性的 IBDV 毒株 VP2 基因高变区序列进行... 本实验采用来源于江苏地区的六株不同鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)毒株,应用 RT-PCR 法对 vp2 基因高变区进行了扩增,构建重组质粒 pMD18T- vp2,测序。与有代表性的 IBDV 毒株 VP2 基因高变区序列进行比较分析,以 ClustalX 软件进行序列比对,得到基因序列及氨基酸序列同源性,IBDVY3、P2G、P8G、SZ、Y5 和 W04(6 株)IBDV 与 D6984(荷兰)的同源性达到 99.0%以上,与其它一些超强毒株(very virulent IBDV,vvIBDV)的同源性也达到了 97.8%以上,并在关键氨基酸位点符合 vvIBDV 特征,采用Phylip3.5 软件分析作出进化树,其结果从分子水平说明六个毒株均为 vvIBDV,与欧洲和日本的超强毒株有较近的亲缘关系,而与美洲株的较远,从而为 IBDV 分子流行病学研究和疫苗的研制提供了科学依据。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) VP2基因 高变区 超强毒株
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传染性法氏囊病病毒VP2单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制 被引量:5
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作者 刘静静 王永山 +6 位作者 欧阳伟 夏兴霞 潘群兴 王晓丽 毕振威 诸玉梅 朱瑞良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期530-535,共6页
为研制传染性法氏囊病病毒(IBDV)快速检测试剂盒,用重组IBDV-VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞触合,获得3株稳定分泌抗VP2蛋白单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为1D11、2G8和2E5,抗体亚类分别为IgG1κ、I... 为研制传染性法氏囊病病毒(IBDV)快速检测试剂盒,用重组IBDV-VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞触合,获得3株稳定分泌抗VP2蛋白单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为1D11、2G8和2E5,抗体亚类分别为IgG1κ、IgG2bκ和IgG1κ。间接免疫荧光试验(IFA)证明,3株单抗均与VP2发生特异性反应。相加ELISA证明3株mAb识别VP2不同的抗原表位。在病毒中和试验中,1D11和2G8腹水对IBDV的中和效价分别为104和103,而2E5无中和活性。用亲和层析方法纯化1D11和2E5,分别作为包被抗体和标记抗体,建立了IBDV夹心ELISA检测方法,优化了试验条件,测定了其主要性能指标,对IBDV的最低检出量为102 TCID50/mL。用夹心ELISA、AGP和RT-PCR 3种方法同步检测8种试验样品,夹心ELISA与RT-PCR的检测结果一致,显著高于AGP方法。组装成的试剂盒,置于37℃保存7d、4℃保存6个月和-20℃保存24个月,其检测结果没有显著差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) VP2 单克隆抗体(mAb) 夹心ELISA
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荧光定量RT-PCR鉴别IBDV超强毒株与经典疫苗毒株 被引量:4
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作者 汪振兴 李树清 孙建和 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2009年第2期120-124,共5页
鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株的出现给该病的防控带来了新的困难,有效鉴别IBDV超强毒株对IBD的防控有着积极意义。根据IBDV VP4基因的保守序列,设计了一对通用引物RPa/RPb,特异性扩增IBDV VP4基因720bp的目的片段。根据超强毒株... 鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株的出现给该病的防控带来了新的困难,有效鉴别IBDV超强毒株对IBD的防控有着积极意义。根据IBDV VP4基因的保守序列,设计了一对通用引物RPa/RPb,特异性扩增IBDV VP4基因720bp的目的片段。根据超强毒株和经典毒株VP4基因序列的差异,分别合成了FAM标记的超强毒荧光探针和JOE标记的经典毒荧光探针,建立了实时荧光RT-PCR鉴别IBDV超强毒株与经典疫苗毒株的方法。检测超强毒和经典毒的敏感性分别可达420和320个拷贝数。建立的实时荧光RT-PCR方法敏感性高、特异性强,可用于临床样品中IBDV超强毒和经典毒的鉴别诊断。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) Real-timeRT-PCR 鉴别诊断 荧光探针
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Genomic Sequencing and Molecular Characteristics of A Very Virulent Strain of Infectious Bursal Disease Virus Isolated in China 被引量:4
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作者 祁小乐 高立 +9 位作者 秦立廷 邓小芸 吴关 张礼洲 余飞 任宪刚 高玉龙 高宏雷 王永强 王笑梅 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第12期1946-1949,共4页
[Objective] The paper was to determine the genomic sequence of a very virulent strain of infectious bursal disease virus(IBDV),and study its molecular characteristics.[Method] A very virulent strain(vvIBDV)(HLJ-0... [Objective] The paper was to determine the genomic sequence of a very virulent strain of infectious bursal disease virus(IBDV),and study its molecular characteristics.[Method] A very virulent strain(vvIBDV)(HLJ-0504) of infectious bursal disease virus(IBDV) with special characters was isolated in China and its genome was sequenced.[Result] Sequence analysis showed that segment A of HLJ-0504 was derived from vvIBDV,while segment B was from a distinct ancestor.The morbidity and mortality of HLJ-0504 was 100% and 86.7%to SPF chickens,respectively.[Conclusion] vvIBDV with distinct segment B were still circulating and the evolution of IBDV was diversified in China.Besides,it is hard to imagine that the virulence of IBDV is determined solely by segment A or B. 展开更多
关键词 Infectious bursal disease virus(ibdv GENOME EVOLUTION VIRULENCE
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传染性法氏囊病病毒C4毒株VP2基因的原核表达及生物信息学分析 被引量:3
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作者 王洁琼 赵玉杰 +5 位作者 周云飞 黄宗梅 陈盼盼 周薇帆 刘琳 李新生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3585-3591,共7页
试验旨在研究一株传染性法氏囊病病毒(IBDV)河南分离株的毒力特征及其与VP2氨基酸序列特征的关系。通过提取IBDV C4株RNA,利用RT-PCR扩增其VP2基因,与其他不同毒力IBDV毒株进行核苷酸及推导的氨基酸序列比对分析,同时使用pET-32a(+)原... 试验旨在研究一株传染性法氏囊病病毒(IBDV)河南分离株的毒力特征及其与VP2氨基酸序列特征的关系。通过提取IBDV C4株RNA,利用RT-PCR扩增其VP2基因,与其他不同毒力IBDV毒株进行核苷酸及推导的氨基酸序列比对分析,同时使用pET-32a(+)原核表达载体表达VP2基因,用SDS-PAGE和Western blotting检测重组VP2蛋白的表达。结果显示,扩增的IBDV C4株的VP2基因序列在进化关系上属于超强毒力IBDV(vvIBDV)分类,与选取的vvIBDV毒株代表毒株核苷酸序列同源性在98.1%~98.7%之间,其七肽区为S-W-S-AS-G-S(第326—332位氨基酸)符合超强毒株特征,且222(A)、256(I)、294(I)和299(S)位氨基酸与超强毒力毒株的4个特征性氨基酸一致;但IBDV C4毒株的VP2蛋白氨基酸序列与超强毒力毒株代表毒株UK661相比,201(D/G)、281(G/R)、313(V/A)位氨基酸不同,其中281位氨基酸的改变处于279—290的小亲水区内,与病毒抗原性有关;构建的pET-32a(+)-VP2原核表达载体在大肠杆菌BL21感受态细胞上表达出分子质量约67ku的重组VP2蛋白,为进一步比较201(G)、281(R)、313(A)位氨基酸差异导致的抗原特性改变提供了研究基础。本试验结果表明,IBDV C4株VP2基因与vvIBDV毒株VP2基因的主要特性一致,但也有3处氨基酸与代表毒株UK661存在差异,这些改变可能与中国IBDV毒株毒力的进化有关。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) VP2 分子特征 原核表达
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中药合剂对雏鸡淋巴细胞培养的免疫抑制效果研究 被引量:1
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作者 谭雷涛 王凌燕 +1 位作者 常维山 刁有江 《家畜生态学报》 2006年第4期98-100,共3页
60只健康雏鸡随机分为A、B、C、D四组,每组15只。9日龄时,C、D两组人工感染传染性法氏囊炎病毒(IBDV),复制动物免疫抑制模型;B、D组同时饲喂中药;A组设为对照组。结果表明:免疫抑制的D组和A组在给药3 d后淋巴细胞转化率显著高于C组(P<... 60只健康雏鸡随机分为A、B、C、D四组,每组15只。9日龄时,C、D两组人工感染传染性法氏囊炎病毒(IBDV),复制动物免疫抑制模型;B、D组同时饲喂中药;A组设为对照组。结果表明:免疫抑制的D组和A组在给药3 d后淋巴细胞转化率显著高于C组(P<0.01);喂药7 d后,B组转化率显著高于A组(P<0.05);中药合剂直接刺激A、C组的淋巴细胞,中药浓度为1:1000细胞转化率最高,显著高于0、1:100、1:500(P<0.01),略高于1:2000(P<0.05);ELISA检测中,D组IL-2水平显著高于C组(P<0.01),但与A组差异不显著(P>0.05)。实验提示该中药合剂可有效缓解免疫抑制病,增强机体免疫力。 展开更多
关键词 免疫抑制 IL-2 中药 传染性法氏囊病毒(ibdv)
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靶向传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2有效miRNA的筛选 被引量:2
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作者 王永娟 崔平福 孙怀昌 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第6期1270-1276,共7页
为筛选出能有效抑制传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因复制的miRNA,采用RT-PCR方法从病毒基因组中进行结构蛋白VP2的基因扩增与序列测定,构建融合表达载体pVP2-EGFP。根据VP2测序结果,借助genscript软件设计针对VP2的5条miRNA,分别命名为... 为筛选出能有效抑制传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因复制的miRNA,采用RT-PCR方法从病毒基因组中进行结构蛋白VP2的基因扩增与序列测定,构建融合表达载体pVP2-EGFP。根据VP2测序结果,借助genscript软件设计针对VP2的5条miRNA,分别命名为miVP2A、miVP2B、miVP2C、miVP2D和miVP2E,将合成的5条miRNAs分别插入到pRFPRNAiC中形成miVP2s表达载体,这些载体分别与pVP2-EGFP共转染DF-1细胞系,通过NortheringBlotting方法检测miVP2s的表达,利用荧光共聚焦显微镜定性、流式细胞术定量的方法进行有效miVP2s的筛选。结果显示:miVP2s能成功表达;转染miVP2s表达载体组的绿色荧光蛋白(GFP)强度和数量都明显弱于或少于阴性对照组;miVP2s对VP2的抑制效率为59.7%到78.5%。表明所设计的miRNAs对VP2均有抑制作用,其中miVP2A和miVP2E效果最为显著。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒(ibdv) VP2 MIRNA 荧光共聚焦 流式细胞术
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从第十一届世界禽病国际大会看禽病研究发展方向
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作者 尹燕博 胡藕祥 《中国禽业导刊》 1999年第22期5-6,共2页
一.以单克隆抗体、聚合酶链反应(PCR)、限制性酶切片段分析(RFA)以及基因表达为代表的分子生物学技术日趋成熟,并逐步进入常规化应用,标志着禽病诊断和疫苗研制技术已进入分子生物学时代。 以单克隆抗体为基础的ELISA检测技术,已作为... 一.以单克隆抗体、聚合酶链反应(PCR)、限制性酶切片段分析(RFA)以及基因表达为代表的分子生物学技术日趋成熟,并逐步进入常规化应用,标志着禽病诊断和疫苗研制技术已进入分子生物学时代。 以单克隆抗体为基础的ELISA检测技术,已作为多种禽病的标准诊断方法被OIE等国际组织所采纳。此次会议上,匈牙利,特别是瑞典的学者报道了用单克隆抗体阻断ELISA检测新城疫病毒、禽腺病毒、禽传染性支气管炎病毒以及支原体等病原的特异性抗体的方法,中国学者则报道了用单克隆抗体双抗夹心法ELISA检测新城疫病毒的方法。 本次会议的论文摘要集共收入论文摘要374篇,其中35篇是有关基因和表达方面的文章,占摘要总数的9.36%,研究内容包括PCR检测技术、重组病毒疫苗及其免疫效果、核酸(DNA)疫苗、限制性酶切分析在病原鉴定方面的应用等等。荷兰和德国的学者报道了他们用PCR方法鉴别新城疫病毒致病力的研究。 展开更多
关键词 单克隆抗体 国际大会 新城疫病毒 研究发展 禽病 传染性支气管炎病毒 支原体 分子生物学技术 传染性法氏囊病毒(ibdv) 论文摘要
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