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清朝前中期的民间火器 被引量：5
1
作者 邱捷 《社会科学研究》 CSSCI 北大核心 2012年第2期164-172,共9页
清朝前中期,团练、宗族、盗匪、会党等群体以及平民百姓私人掌握了大量火铳、鸟枪、抬枪、火炮等火器。对民间火器,清朝法律都予以禁止、限制。但在一定情况下,又希望民间武力补助国家武力之不足。清皇朝对民间火器一直在严厉禁止和适... 清朝前中期,团练、宗族、盗匪、会党等群体以及平民百姓私人掌握了大量火铳、鸟枪、抬枪、火炮等火器。对民间火器,清朝法律都予以禁止、限制。但在一定情况下,又希望民间武力补助国家武力之不足。清皇朝对民间火器一直在严厉禁止和适当限制之间摇摆不定,其主旨都是为了维护清皇朝的统治秩序。清朝禁止、限制民间武器的法律,实际上并未得到贯彻执行。清朝前中期民间武器流散的格局以及清廷的政策,到晚清仍有影响。 展开更多
关键词 民间武器 火器 鸟枪 抬枪 国家与社会
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清代内地弓箭、鸟枪在达斡尔、鄂温克人众间的传播及影响 被引量：4
2
作者 金鑫 《民族研究》 CSSCI 北大核心 2017年第4期110-120,共11页
有清一代,通过朝廷配给制式装备,以及直接赴京城等地采买等途径,内地的角弓、铁镞、鸟枪等武器迅速在黑龙江驻防八旗的达斡尔、鄂温克人中间流行开来,成为其从事狩猎生产的主要工具。由于长期使用过程中的经验积累,加之受各牛录内专职... 有清一代,通过朝廷配给制式装备,以及直接赴京城等地采买等途径,内地的角弓、铁镞、鸟枪等武器迅速在黑龙江驻防八旗的达斡尔、鄂温克人中间流行开来,成为其从事狩猎生产的主要工具。由于长期使用过程中的经验积累,加之受各牛录内专职匠人的设立、周邻满汉官兵引导等因素的影响,上述各种武器的修造技术亦在达斡尔、鄂温克人众间有一定传播。新式狩猎工具所带来的生产效率提高,使得个体家庭的单独近猎及季节性的小组远狩成为两族狩猎生产的主导性经营模式,传统的大规模集体围猎则渐被淘汰。 展开更多
关键词 达斡尔 鄂温克 弓箭 鸟枪 清朝
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乾隆三十一年各省民壮改练鸟枪档案
3
作者 无 哈恩忠 《历史档案》 CSSCI 北大核心 2024年第4期28-38,共11页
民壮是明清以来的民兵组织,是国家常备军事力量的辅助和补充。清代民壮的主要职能是地方巡缉盗匪、防护监仓,并随军队训练,练习鸟枪、弓箭及刀枪等。鸟枪是操作迅捷、射程较远的武器,在军队中装备较多,由此出现私卖枪支、火药等弊端,清... 民壮是明清以来的民兵组织,是国家常备军事力量的辅助和补充。清代民壮的主要职能是地方巡缉盗匪、防护监仓,并随军队训练,练习鸟枪、弓箭及刀枪等。鸟枪是操作迅捷、射程较远的武器,在军队中装备较多,由此出现私卖枪支、火药等弊端,清廷屡次颁谕严格管理。对于民间持有鸟枪,虽有例禁,却持默许态度,如顺治时,“近闻民间无兵器,不能御侮,贼反得利,良民受其荼毒……其三眼枪、鸟枪弓箭、刀枪、马匹等项,悉听民间存留,不得禁止”。乾隆时,“民间私藏军器,原有例禁。但地方幅员辽阔,户口繁众,为数必多,岂能一时查清?……且闽省山海交错,匪类易于潜藏,人民聚族而居,不无赖军器以资守御”。乾隆三十一年(1766)五月,山东巡抚崔应阶将省内民壮所练军器尽改鸟枪,得到乾隆帝赞许,并要求直省各州县民壮或可仿照添改鸟枪,以缉盗御守。各省遂根据各自情况,将民壮或全部或部分改练鸟枪。乾隆四十二年,乾隆帝鉴于鸟枪在镇压地方叛乱中发挥的作用,为防止民间熟悉使用鸟枪或酿隐患,责令民壮“其鸟枪一项不必演习”,并严禁民间制造、私藏火器。本组档案史料选编自馆藏宫中朱批奏折,集中反映了民壮改练鸟枪的史实,可供相关研究参考。 展开更多
关键词 民壮 山东巡抚 鸟枪 守御 乾隆帝 弓箭 聚族而居 民兵组织
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中国古代的鸟枪与日本 被引量：4
4
作者 南炳文 《史学集刊》 CSSCI 北大核心 1994年第2期60-66,共7页
中国古代的鸟枪与日本南炳文一、中国古代鸟枪的特点、历史地位和演变鸟枪也叫鸟铳或鸟嘴铳，是古代的一种单兵射击性管形武器，其特点是依靠火药燃烧时急剧放出大量气体从而形成的推动力，将管形枪体中的弹刃发射出去，击向目标；在管... 中国古代的鸟枪与日本南炳文一、中国古代鸟枪的特点、历史地位和演变鸟枪也叫鸟铳或鸟嘴铳，是古代的一种单兵射击性管形武器，其特点是依靠火药燃烧时急剧放出大量气体从而形成的推动力，将管形枪体中的弹刃发射出去，击向目标；在管形枪体之下设有曲形木托（枪床，长约... 展开更多
关键词 鸟枪 中国古代 日本 外来说 鸟铳 葡萄牙人 戚继光 中国内地 《筹海图编》 管形火器
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清代严禁私藏私造私贩火器 被引量：1
5
作者 刘旭 《湘潭大学学报（哲学社会科学版）》 CSSCI 1992年第3期90-94,共5页
自公元10世纪火器发明以来,历代统治者对民间私造私藏私贩火器作了种种严格规定,清朝统治者在这方面尤为突出。本文就清朝政府严禁火器的范围、内容、特殊情况的变通处理,对违禁者的处罚措施及严禁火器的原因、效果、社会影响等问题作... 自公元10世纪火器发明以来,历代统治者对民间私造私藏私贩火器作了种种严格规定,清朝统治者在这方面尤为突出。本文就清朝政府严禁火器的范围、内容、特殊情况的变通处理,对违禁者的处罚措施及严禁火器的原因、效果、社会影响等问题作了探讨。 展开更多
关键词 鸟枪 清政府 宣宗 地方官 禁火 道光 清朝统治者 奏折 乾隆 抬枪
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清乾隆时期福建的社会经济与生活——以刑科题本为基本资料 被引量：1
6
作者 常建华 《人文论丛》 2021年第2期85-113,共29页
乾隆朝刑科题本提供的人口信息表明,当时福建家庭规模较大。福建基层社会家庭、邻居情感问题的非正统化现象较为显著,夫故改嫁事例也较多。闽南宗族祭田较为普及,祭田的管理多是各房轮流办祭。福建租佃制发达,不少地方租地需要交纳押租... 乾隆朝刑科题本提供的人口信息表明,当时福建家庭规模较大。福建基层社会家庭、邻居情感问题的非正统化现象较为显著,夫故改嫁事例也较多。闽南宗族祭田较为普及,祭田的管理多是各房轮流办祭。福建租佃制发达,不少地方租地需要交纳押租,福建的田地租佃有田根与田面之分,土地所用权与使用权分离。田主特别是有举监身份者多居城中,佃户则居于乡下,主佃的对立呈现出空间上的城乡对立关系。晚稻收割是产生主佃纠纷的主要时间点,多种经济作物的种植较多。闽人备有刀枪、火铳甚至是鸟枪用于打猎、防兽,以利于出行安全和生活,有时这些工具、武器成为人们纠纷中的凶器。乾隆朝整饬民间鸟枪条例以及福建的执行有过变化,乾隆初年清廷决定福建各地鸟枪管理条例因地制宜。乾隆后期鸟枪管理政策由松而紧。 展开更多
关键词 人口 家庭 农民 生产 鸟枪
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威远攻坚资火器——八旗枪炮漫话 被引量：1
7
作者 张国昌 《满族研究》 1987年第2期37-40,共4页
入关前,后金兵作战以马队为主,因此擅长野战。在战斗中常是一边射箭一边进攻,具有很强的战斗力。统一女真各部,兵器基本上全赖弓箭。同明朝作战,弓箭仍起很大的作用,战争开始,明朝军队以进剿为主,后金军队处于防守的地位,弓箭对于固守... 入关前,后金兵作战以马队为主,因此擅长野战。在战斗中常是一边射箭一边进攻,具有很强的战斗力。统一女真各部,兵器基本上全赖弓箭。同明朝作战,弓箭仍起很大的作用,战争开始,明朝军队以进剿为主,后金军队处于防守的地位,弓箭对于固守阵地仍能发挥长处,因此曾取得不少的胜利。从萨尔浒战后,战争形势发生了变化,后金军队由防守转为进攻,而明军被迫防守,这时对武器的要求开始有了变化。弓矢长于野战而短于攻坚,在作战中,清军逐渐感到了使用火器的重要作用。 展开更多
关键词 八旗军队 鸟枪 子母炮 清军 武器 后金兵 红衣 弓箭 皇太极 满州
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清武勋王战殁史事考
8
作者 张建 《满族研究》 2009年第2期71-74,共4页
崇德二年(1637),清伐朝鲜时,超品公杨古利阵亡,后被追封武勋王,是清入关前阵殁将领中职衔最高者。其死因众说纷纭,莫衷一是。本文通过考证,证实其死于鸟枪。
关键词 清伐朝鲜 杨古利 鸟枪
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聂士成的风雪之旅
9
作者 王戡 《同舟共进》 2019年第11期77-80,共4页
天津市南郊八里台立交桥附近,有一座清军武将铜像,挥刀跃马,仪态昂扬,基座上刻着一首诗:"将军驱骑刀光寒,一跃桥头此生瞻。聂公当年激扬处,多少青松配雨寒。"这是晚清直隶提督、武卫前军总统聂士成的殉难纪念碑。光绪二十六年... 天津市南郊八里台立交桥附近,有一座清军武将铜像,挥刀跃马,仪态昂扬,基座上刻着一首诗:"将军驱骑刀光寒,一跃桥头此生瞻。聂公当年激扬处,多少青松配雨寒。"这是晚清直隶提督、武卫前军总统聂士成的殉难纪念碑。光绪二十六年(1900)七月初九,聂士成率军在八里台抗击八国联军,战斗中"飞炮洞胸,肠胃溃流",殒命疆场,成为"庚子之役"中清军阵亡的最高级别军官。晚清军队随着时局变化而迅速进化。摆弄了几百年长矛、鸟枪的绿营,在太平天国战争中被使用新式枪炮的湘军代替。 展开更多
关键词 光绪二十六年 聂士成 直隶提督 太平天国战争 八里台 武将 八国联军 鸟枪
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渊子崖:中国抗日第一村
10
作者 尹召功(摄) 赵桂星(摄) 孙烨(摄) 《山东画报》 2021年第11期6-7,共2页
渊子崖村是山东省临沂市莒南县沐河东岸的一个村庄。这个村名听上去普普通通,但是,这里的村民可干过一件感天动地的大事。那是1941年农历十一月里的一天,日伪军一千多步兵、骑兵,拉着四门大炮,气势汹汹向渊子崖杀过来。而村里能派上用... 渊子崖村是山东省临沂市莒南县沐河东岸的一个村庄。这个村名听上去普普通通,但是,这里的村民可干过一件感天动地的大事。那是1941年农历十一月里的一天,日伪军一千多步兵、骑兵,拉着四门大炮,气势汹汹向渊子崖杀过来。而村里能派上用场的武器却只有鸟枪、土炮,勉强再算上铁锁、木棍和大刀片。 展开更多
关键词 感天动地 山东省临沂市 日伪军 村名 鸟枪 莒南县 抗日
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抑郁症患者肠道菌群丰度和种类及基因功能通路的病例对照研究 被引量：27
11
作者 荣晗 徐丹 +5 位作者 刘铁榜 王明帮 赵杰 刘泱慧 杨海晨 张建 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期208-213,共6页
目的探讨抑郁症患者的肠道菌群丰度和种类及基因功能通路情况。方法采用鸟枪法宏基因组测序方法，对18例抑郁症患者（抑郁症组）及24名健康对照者（对照组）的肠道菌群丰度和种类及基因功能通路情况进行分析。结果抑郁症和对照组在菌群... 目的探讨抑郁症患者的肠道菌群丰度和种类及基因功能通路情况。方法采用鸟枪法宏基因组测序方法，对18例抑郁症患者（抑郁症组）及24名健康对照者（对照组）的肠道菌群丰度和种类及基因功能通路情况进行分析。结果抑郁症和对照组在菌群丰度上差异无统计学意义（t=0.33，P=0.74），而在细菌种类水平上差异有统计学意义（t=-4.37，P〈0.01）。氨基酸球菌属、发酵型氨基酸球菌、发酵氨基酸球菌DSM20731、糖解梭菌WM1、瘤胃菌属、嗜中温螺旋杆菌为抑郁症组较对照组表达较多的6种细菌（F=19.50、15.50、26.46、26.72、13.57、14.59，均P〈0.01），而嗜二氧化碳噬细胞菌、绿色糖单孢菌、猫螺杆菌ATCC_49179为抑郁症组较对照组表达较少的3种细菌（F=19.95、12.66、69.52，均P〈0.01）。2组在菌群基因的功能通路上差异有统计学意义（均P〈0.01），抑郁症组较对照组表达较高的2种通路为泛酸酯和辅酶A合成、色氨酸代谢通路（F=12.84、10.46），抑郁症组较对照组表达较低的通路为P53信号通路（F=13.35）。结论抑郁症患者肠道菌群的表达失调，这可能与泛酸酯和辅酶A合成、色氨酸代谢、P53信号通路表达差异有关，提示肠道菌群种类的表达失调可能参与了抑郁症的发病。 展开更多
关键词 抑郁症 肠道菌群 宏基因组学 鸟枪法测序
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甲基对硫磷水解酶基因的克隆与融合表达 被引量：13
12
作者 刘智 洪青 +6 位作者 徐剑宏 武俊 张晓舟 张小华 马爱芝 朱军 李顺鹏 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1020-1026,共7页
利用鸟枪法从甲基对硫磷降解菌DLL 1Peudomonasputida)中克隆了甲基对硫磷水解酶基因 (mpd)片段2 5kb ,并进行了测序。通过软件分析开放阅读框和启动子序列 ,表明该序列中最可能为甲基对硫磷水解酶结构基因的阅读框为 76 9～ 1 794区... 利用鸟枪法从甲基对硫磷降解菌DLL 1Peudomonasputida)中克隆了甲基对硫磷水解酶基因 (mpd)片段2 5kb ,并进行了测序。通过软件分析开放阅读框和启动子序列 ,表明该序列中最可能为甲基对硫磷水解酶结构基因的阅读框为 76 9～ 1 794区域。软件分析还表明该水解酶前端 4 5个氨基酸为典型的信号肽结构。通过PCR扩增了mpd结构基因 ,亚克隆到表达载体pET 32a中 ,构建了完整的融合表达载体pET MP。转化大肠杆菌BL2 1 (DE3) ,在IPTG的诱导下 2～ 4h甲基对硫磷水解酶表达可以达到最高水平 ;同时还研究了乳糖的诱导效果 ,2 %乳糖诱导 2h就可以起到很好的效果。通过PCR反应验证了mpd基因定位于DLL 展开更多
关键词 鸟枪法 甲基对硫磷水解酶基因 基因分析 融合表达 基因定位
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罗汉果全基因组Survey分析 被引量：21
13
作者 唐其 马小军 +3 位作者 莫长明 潘丽梅 韦荣昌 赵欢 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期786-791,共6页
罗汉果是广西特有药用及甜料植物,其主要成分之一甜苷V作为天然、非糖甜味剂,具有广阔的开发前景,但罗汉果目前完全来自于栽培,适生区狭窄,连作障碍严重,加之含量低导致甜苷V生产成本居高不下,严重限制了其应用。为了减少盲目性,在大规... 罗汉果是广西特有药用及甜料植物,其主要成分之一甜苷V作为天然、非糖甜味剂,具有广阔的开发前景,但罗汉果目前完全来自于栽培,适生区狭窄,连作障碍严重,加之含量低导致甜苷V生产成本居高不下,严重限制了其应用。为了减少盲目性,在大规模全基因组深度测序之前,先做低覆盖度的基因组Survey测序,评价基因组的大小及复杂程度,以确定适合该植物全基因组的测序研究策略。该研究采用第二代高通量测序技术(Illumina Hiseq TM 2000)首次测定了罗汉果基因组大小,并利用生物信息学方法估计罗汉果杂合率、重复序列和GC含量等基因组信息。结果表明:(1)获得了18.1 Gb罗汉果基因组测序数据,基因组大小估计为344.95 Mb左右,测序深度为52×;(2)从K-mer分布曲线发现罗汉果基因组有明显的杂合峰,杂合率达1.5%,基因组高杂合导致组装的结果中Contig N50和Scaffold N50的长度比预期的要短很多,还造成GC平均深度及含量分布明显异常,存在一个低深度分布区域。基因组主峰后面有微弱的重复峰,说明罗汉果存在较多的重复序列;(3)由于罗汉果存在高杂合率和重复序列较多的特点,该基因组测序分析仅采用全基因组鸟枪法(WGS)策略不合适,为了更好地对全基因组进行序列拼接和组装,可尝试结合采用Fosmid-to-Fosmid或BAC-to-BAC策略。该研究结果对于揭示罗汉果产量、有效成分含量、发育及抗病虫的分子机制,以及通过分子育种来提高甜苷V含量和降低生产成本具有重要意义,为全基因组测序策略的选择提供了依据。 展开更多
关键词 罗汉果 基因组测序 杂合率 GC含量 鸟枪法测序策略
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小麂线粒体基因组全序列的测定和分析 被引量：17
14
作者 张晓梅 单祥年 +3 位作者 施燕峰 张海军 李健 郑爱玲 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期849-853,共5页
通过建立麂属动物小麂线粒体DNA文库、鸟枪法测序 ,获得了小麂线粒体基因组全序列并对其基因组成、蛋白质的编码序列、tRNA基因等结构作了详细分析 ,这也是国内有关哺乳动物线粒体基因组全序列的首次报道。与其他哺乳动物线粒体基因组... 通过建立麂属动物小麂线粒体DNA文库、鸟枪法测序 ,获得了小麂线粒体基因组全序列并对其基因组成、蛋白质的编码序列、tRNA基因等结构作了详细分析 ,这也是国内有关哺乳动物线粒体基因组全序列的首次报道。与其他哺乳动物线粒体基因组全序列的比较研究发现 :全长为 16 35 4bp的小麂线粒体基因组同样编码 13种蛋白质、2种rRNA和 2 2种tRNA ,除了用于调控线粒体DNA复制和转录的D Loop区以外 ,小麂线粒体基因组各基因长度、位置与其他哺乳动物相似 。 展开更多
关键词 小麂 线粒体基因组 鸟枪法测序 序列分析
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响应面法提取南极磷虾磷脂及其分子种组成的测定 被引量：17
15
作者 陈康 戴志远 +1 位作者 沈清 黄耀文 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期104-112,共9页
南极磷虾(Euphausia superba)生物储量巨大,含有丰富的磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC),而PC是生物生长的必需磷脂。现今南极磷虾的研究主要针对磷虾油和蛋白,尚未见有PC分子组成的系统研究报道。该研究使用超声辅助Bligh Dyer脂质... 南极磷虾(Euphausia superba)生物储量巨大,含有丰富的磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC),而PC是生物生长的必需磷脂。现今南极磷虾的研究主要针对磷虾油和蛋白,尚未见有PC分子组成的系统研究报道。该研究使用超声辅助Bligh Dyer脂质提取法提取南极磷虾中磷脂,并采用Box-Benhnken设计原理优化提取工艺,以正离子模式下胆碱碎片(m/z 184)为特异性碎片,利用鸟枪脂质组学法鉴定南极磷虾组织中的PC分子组成。结果表明,南极磷虾磷脂的最佳提取条件为超声时间21.0 min、超声温度30℃、溶剂用量3.1 mL,此条件下磷脂实际提取率的平均值为(7.59±0.03)%。利用鸟枪脂质组学法鉴定出南极磷虾中共含有36种PC分子,其中EPA/DHA脂肪酸链含量占47.75%,质量分数为269.82μg·g^(-1)。研究表明南极磷虾组织中含有丰富的EPA和DHA,而磷脂状态存在的ω-3脂肪酸具有较高的利用效率,这为开发南极磷虾类营养保健产品提供数据支持和理论基础。 展开更多
关键词 南极磷虾 磷脂酰胆碱 鸟枪质谱法
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用EM算法改进鸟枪法蛋白质鉴定中的无标记定量方法 被引量：5
16
作者 薛晓芳 吴松锋 +1 位作者 朱云平 贺福初 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第1期19-24,共6页
蛋白质定量是探索疾病发生发展状况和寻找新药靶标的重要手段。在shotgun蛋白组学中,目前常用定量方法包括综合同位素标记后的质谱峰强度方法和无标记定量方法。根据数据类型无标记定量方法可以分为两类:基于鉴定蛋白的质谱数的方法和... 蛋白质定量是探索疾病发生发展状况和寻找新药靶标的重要手段。在shotgun蛋白组学中,目前常用定量方法包括综合同位素标记后的质谱峰强度方法和无标记定量方法。根据数据类型无标记定量方法可以分为两类:基于鉴定蛋白的质谱数的方法和基于质谱峰强度的方法。本研究主要用EM算法改进基于鉴定蛋白质谱数的定量方法,并用免疫印迹实验获得的酵母全蛋白的丰度来验证EM算法改进后定量的有效性结果表明,改进后的质谱数和蛋白丰度的相关性比改进前有一定的提高。同时,利用这些数据对主要的几种基于鉴定蛋白的质谱数的模型进行了比较,发现PAI模型最好,SpS模型次之,emPAI模型最不适合于蛋白质定量。 展开更多
关键词 EM算法 鸟枪法 蛋白无标记定量 质谱数
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鸟枪法蛋白质鉴定质量控制方法研究进展 被引量：10
17
作者 李宁 吴松锋 +1 位作者 朱云平 杨晓明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第6期668-675,共8页
鸟枪法串联质谱蛋白质鉴定策略由于其高可靠和高效率而被广泛应用于蛋白质组学研究中,这种方法直接对蛋白质混合物进行酶切,以肽段为鉴定单元,继而推导真实的样品蛋白质.由于利用质谱图推导肽段存在一定的假阳性率,而且直接对蛋白质混... 鸟枪法串联质谱蛋白质鉴定策略由于其高可靠和高效率而被广泛应用于蛋白质组学研究中,这种方法直接对蛋白质混合物进行酶切,以肽段为鉴定单元,继而推导真实的样品蛋白质.由于利用质谱图推导肽段存在一定的假阳性率,而且直接对蛋白质混合物的酶切也导致了肽段和蛋白质之间关联信息的丢失,所鉴定的蛋白质难免存在部分不可靠结果.因此,蛋白质鉴定的质量控制在蛋白质组学研究中极为重要.蛋白质鉴定的质量控制包含两大类主要方法,其一为利用肽段进行蛋白质组装,当前最常用也被证明最有效的方法是使用简约原则,即用最少的蛋白质解释所有鉴定肽段,现有的方法可以分为布尔型和概率型,其二为鉴定蛋白质的可靠性评估,包括单个蛋白质鉴定置信度和蛋白质鉴定整体水平的假阳性率计算.综合各种可辅助蛋白质鉴定的先验信息,构建普适的概率统计模型,是目前蛋白质鉴定质量控制方法的发展趋势. 展开更多
关键词 串联质谱 蛋白质鉴定 蛋白质组装 蛋白质鉴定置信度 鸟枪法
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酸性木聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达 被引量：7
18
作者 李春华 李翔 马立新 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期89-95,共7页
运用“鸟枪法”克隆构建了环境微生物的基因组文库,并从中筛选得到一个酸性木聚糖酶基因,命名为xyl3,其在GenBank中的登录号为gb:AY300805。BLAST分析表明,该基因的序列同源性很低,其中仅存在很短的木聚糖酶基因的同源片段,其编码的木... 运用“鸟枪法”克隆构建了环境微生物的基因组文库,并从中筛选得到一个酸性木聚糖酶基因,命名为xyl3,其在GenBank中的登录号为gb:AY300805。BLAST分析表明,该基因的序列同源性很低,其中仅存在很短的木聚糖酶基因的同源片段,其编码的木聚糖酶属于G lycosyl hydrolases fam ily 10,与来源于Geobacillus stearotherm ophilus的intra-cellu larxylanase在氨基酸水平具77%同源性。该基因经T4 DNA polym erase处理后,克隆至经限制性内切酶CpoⅠ和NotⅠ双酶切后的毕赤酵母表达载体pHBM905,获得重组质粒pHBM706。此重组质粒转化毕赤酵母GS115,经含有交联木聚糖的选择性培养平板和PCR扩增鉴定筛选得到重组毕赤酵母GS115(pHBM706)。以0.5%甲醇于28℃诱导产酶,测得重组毕赤酵母GS115(pHBM706)在诱导的第36h产酶达最高值,所产粗酶液酶活为0.177 IU/mL。该酶的最适反应pH为5.5,最适反应温度为50℃。 展开更多
关键词 “鸟枪法”克隆 基因组文库 木聚糖酶 毕赤酵母 表达
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微生物全基因组鸟枪法测序 被引量：8
19
作者 罗春清 杨焕明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期310-314,共5页
全基因组测序主要有二种策略 ,一种是分级鸟枪法测序 ,另一种是全基因组鸟枪法测序。微生物是一种十分重要的遗传资源 ,运用全基因组鸟枪法可以方便、快捷地完成其基因组的测序任务。本文对微生物全基因组鸟枪法测序中文库构建、插入片... 全基因组测序主要有二种策略 ,一种是分级鸟枪法测序 ,另一种是全基因组鸟枪法测序。微生物是一种十分重要的遗传资源 ,运用全基因组鸟枪法可以方便、快捷地完成其基因组的测序任务。本文对微生物全基因组鸟枪法测序中文库构建、插入片段的长短比例、反应投入量、拼接以及补洞等问题作了较细致的描述 ,有些步骤作了举例说明。 展开更多
关键词 微生物 全基因组 鸟枪法测序
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枯草芽孢杆菌寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：5
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作者 蒋思婧 马立新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期145-152,共8页
本研究用鸟枪法构建了枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)HB0 0 2的基因组文库 ,经平板法筛选得到了六株能水解合成底物对 硝基苯 α D 葡萄糖吡喃糖苷的阳性克隆 ,经鉴定均含克隆了寡聚 1 ,6 葡萄糖苷酶基因的重组质粒 (命名为pHBM0 ... 本研究用鸟枪法构建了枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)HB0 0 2的基因组文库 ,经平板法筛选得到了六株能水解合成底物对 硝基苯 α D 葡萄糖吡喃糖苷的阳性克隆 ,经鉴定均含克隆了寡聚 1 ,6 葡萄糖苷酶基因的重组质粒 (命名为pHBM0 0 1～pHBM0 0 6 )。选择pHBM0 0 3 ,对其插入片段测序分析 ,此片段内有一编码 5 6 1个氨基酸的开放阅读框 ,该蛋白质的计算分子量为 6 5 985kD。HB0 0 2的寡聚 1 ,6 葡萄糖苷酶的氨基酸序列与Bacillussp .和凝结芽孢杆菌 (Bacilluscoagulans)的寡聚 1 ,6 葡萄糖苷酶的氨基酸序列一致性分别为 81 %、6 7% ,相似性分别为 89%、79%。从pHBM0 0 3中扩增出寡聚 1 ,6 葡萄糖苷酶基因 ,克隆到pBV2 2 0上 ,转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)DH5α ,得到三个能水解对 硝基苯 α D 葡萄糖吡喃糖苷的阳性克隆HBM0 0 3 1～HBM0 0 3 3 ,将此三个菌株热诱导表达 ,SDS PAGE电泳可检测到特异表达的蛋白质 ,其中HBM0 0 3 1、HBM0 0 3 2表达的蛋白约 6 6kD ,为完整的寡聚 1 ,6 葡萄糖苷酶 ,而HBM0 0 3 3表达的蛋白质偏小 ;表达的蛋白质均有寡聚 1 ,6 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 寡聚-1 6-葡萄糖苷酶 鸟枪法克隆 基因表达
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