目的研究鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1对大鼠糖尿病机械性疼痛的影响。
方法雄性SD大鼠随机分为CON组和STZ组,CON组随机分为CONshRNA组、CONEpac1shRNA组,STZ组大鼠诱导成为糖尿病机械性疼痛(DMA)模型后随机分为DMAshRNA组、DMAE...目的研究鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1对大鼠糖尿病机械性疼痛的影响。
方法雄性SD大鼠随机分为CON组和STZ组,CON组随机分为CONshRNA组、CONEpac1shRNA组,STZ组大鼠诱导成为糖尿病机械性疼痛(DMA)模型后随机分为DMAshRNA组、DMAEpac1shRNA组、DMANS组、DMA8-pCPT组。Epac1shRNA慢病毒载体用于抑制Epac1的表达,对照shRNA慢病毒载体为阴性对照,8-pCPT为Epac1的激活剂。CONshRNA组、DMAshRNA组鞘内注射对照shRNA慢病毒载体,CONEpac1shRNA组、DMAEpac1shRNA组鞘内注射Epac1shRNA慢病毒载体,DMANS组足底注射生理盐水,DMA8-pCPT组足底注射8-pCPT。观察各组大鼠的后爪回缩阈值(PWT)变化,用实时PCR、Western印迹检测大鼠背根神经节(DRG)部位鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1(Epac1)mRNA和蛋白表达的变化。
结果与CON组大鼠相比,STZ组大鼠的机械疼痛敏感性阈值下降(P=0.035)。DMA大鼠注射Epac1激活剂8-pCPT组与生理盐水组相比,疼痛时间延长(2 h P=0.012,4 h P=0.020)。DMA组与CON组相比Epac1mRNA和蛋白的表达升高(均P〈0.01),鞘内注射shRNA可降低Epac1的mRNA和蛋白表达(P〈0.01, P=0.020)。DMA组的PWT值明显低于CON组(P=0.006)。
结论Epac1在糖尿病机械性疼痛大鼠中表达增高,下调Epac1可缓解疼痛。展开更多
目的:观察术后持续性疼痛大鼠鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白(exchange protein directly activated by cyclic adenosine monophosphate,Epac1)表达的变化。方法 :随机将15只月龄2~3个月,体质量200~250 g的成年雄性SD大鼠分为对照...目的:观察术后持续性疼痛大鼠鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白(exchange protein directly activated by cyclic adenosine monophosphate,Epac1)表达的变化。方法 :随机将15只月龄2~3个月,体质量200~250 g的成年雄性SD大鼠分为对照组、假手术组、术后持续性疼痛组[皮肤肌肉牵拉模型(skin/muscle incision and retraction,SMIR)组](n=5)。对照组:不做任何操作处理;假手术组:仅切割皮肤、肌肉;SMIR组:在假手术组操作基础上牵拉皮肤、肌肉1 h。测定各组术后1、3、7、14、21 d时机械性刺激缩爪阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT);用Western Blot、免疫荧光染色技术比较各组术后第7天,L3~5脊髄、L3~5背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中Epac1蛋白的表达和阳性细胞数。结果:和术前比较,SMIR组术后3~21 d MWT显著降低(P〈0.001),术后7 d下降最显著;和对照组、假手术组比较,SMIR组术后各时间点MWT降低显著(P〈0.001)、术后7 d L3~5脊髄、L3~5DRG中Epac1蛋白的表达和阳性细胞数增加显著(P〈0.05,P〈0.01)。结论:术后持续性疼痛激活大鼠Epac1信号;手术操作方法影响Epac1的表达和持续性痛觉超敏,长时间撑开手术切口易引起慢性疼痛。展开更多
文摘目的研究鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1对大鼠糖尿病机械性疼痛的影响。
方法雄性SD大鼠随机分为CON组和STZ组,CON组随机分为CONshRNA组、CONEpac1shRNA组,STZ组大鼠诱导成为糖尿病机械性疼痛(DMA)模型后随机分为DMAshRNA组、DMAEpac1shRNA组、DMANS组、DMA8-pCPT组。Epac1shRNA慢病毒载体用于抑制Epac1的表达,对照shRNA慢病毒载体为阴性对照,8-pCPT为Epac1的激活剂。CONshRNA组、DMAshRNA组鞘内注射对照shRNA慢病毒载体,CONEpac1shRNA组、DMAEpac1shRNA组鞘内注射Epac1shRNA慢病毒载体,DMANS组足底注射生理盐水,DMA8-pCPT组足底注射8-pCPT。观察各组大鼠的后爪回缩阈值(PWT)变化,用实时PCR、Western印迹检测大鼠背根神经节(DRG)部位鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1(Epac1)mRNA和蛋白表达的变化。
结果与CON组大鼠相比,STZ组大鼠的机械疼痛敏感性阈值下降(P=0.035)。DMA大鼠注射Epac1激活剂8-pCPT组与生理盐水组相比,疼痛时间延长(2 h P=0.012,4 h P=0.020)。DMA组与CON组相比Epac1mRNA和蛋白的表达升高(均P〈0.01),鞘内注射shRNA可降低Epac1的mRNA和蛋白表达(P〈0.01, P=0.020)。DMA组的PWT值明显低于CON组(P=0.006)。
结论Epac1在糖尿病机械性疼痛大鼠中表达增高,下调Epac1可缓解疼痛。
文摘目的:观察术后持续性疼痛大鼠鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白(exchange protein directly activated by cyclic adenosine monophosphate,Epac1)表达的变化。方法 :随机将15只月龄2~3个月,体质量200~250 g的成年雄性SD大鼠分为对照组、假手术组、术后持续性疼痛组[皮肤肌肉牵拉模型(skin/muscle incision and retraction,SMIR)组](n=5)。对照组:不做任何操作处理;假手术组:仅切割皮肤、肌肉;SMIR组:在假手术组操作基础上牵拉皮肤、肌肉1 h。测定各组术后1、3、7、14、21 d时机械性刺激缩爪阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT);用Western Blot、免疫荧光染色技术比较各组术后第7天,L3~5脊髄、L3~5背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中Epac1蛋白的表达和阳性细胞数。结果:和术前比较,SMIR组术后3~21 d MWT显著降低(P〈0.001),术后7 d下降最显著;和对照组、假手术组比较,SMIR组术后各时间点MWT降低显著(P〈0.001)、术后7 d L3~5脊髄、L3~5DRG中Epac1蛋白的表达和阳性细胞数增加显著(P〈0.05,P〈0.01)。结论:术后持续性疼痛激活大鼠Epac1信号;手术操作方法影响Epac1的表达和持续性痛觉超敏,长时间撑开手术切口易引起慢性疼痛。