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动物microRNA靶基因的筛选与鉴定研究进展 被引量：3
1
作者 刘悦 李丹 +6 位作者 张玉 王婵 盛清 吕正兵 陈健 张耀洲 聂作明 《生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期82-86,共5页
miRNA(microRNA)是一类在生物体内广泛存在的长度约22 nt的小分子非编码RNA,其在转录后水平调控靶基因的表达,在生物体生长发育过程中起重要的调控作用。近年来,miRNA的功能研究越来越受到人们的重视,而miRNA功能研究的关键在于其调控... miRNA(microRNA)是一类在生物体内广泛存在的长度约22 nt的小分子非编码RNA,其在转录后水平调控靶基因的表达,在生物体生长发育过程中起重要的调控作用。近年来,miRNA的功能研究越来越受到人们的重视,而miRNA功能研究的关键在于其调控靶基因的确定。miRNA主要作用于靶基因mRNA的3’UTR区的结合位点,但由于miRNA和靶基因的作用位点并不完全匹配,没有明显的规律可寻,导致应用传统方法鉴定靶基因十分困难。近年来,人们开发了各种特异的、灵敏度高的高通量miRNA靶基因筛选与鉴定方法,极大地促进了miRNA的功能研究。 展开更多
关键词 MIRNA 基因调控 靶基因 高通量鉴定
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高通量质谱法用于小鼠器官内源性肽的鉴定 被引量：1
2
作者 张佩 邵先锋 +1 位作者 王振山 贾辰熙 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期697-706,共10页
内源性肽以细胞因子、生长激素、激素肽等形式在人体的内分泌、神经、细胞生长和生殖各个领域发挥功能。神经肽是一种内源性肽,与痛觉、睡眠、情绪、学习与记忆等生理活动相关,不但存在于脑部神经细胞,也存在于其他体液和器官内并发挥... 内源性肽以细胞因子、生长激素、激素肽等形式在人体的内分泌、神经、细胞生长和生殖各个领域发挥功能。神经肽是一种内源性肽,与痛觉、睡眠、情绪、学习与记忆等生理活动相关,不但存在于脑部神经细胞,也存在于其他体液和器官内并发挥重要作用。目前对器官内源性肽的研究仍不足,尤其是其中的神经肽。文中应用液质联用串联质谱高通量鉴定胰腺、心脏、肝脏和肾脏中内源性肽的分布以及神经肽的种类。鉴定结果显示,在肝脏中内源性肽和神经肽的数目最多,而胰腺中最少;所鉴定到的内源性肽具有器官特异性,在4个器官中分别呈现不同的动态分布;4个器官中神经肽的LPV(最长肽变异体)数目差异较大,而且基因家族的分布也各不相同,比如胰腺中的神经肽多属于Glucagon家族,心脏中的神经肽分别属于ACBD7、Granins、PEBP等几个家族。鉴定结果将为疾病的机制研究和治疗药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 器官 内源性肽 神经肽 高通量鉴定 液质联用串联质谱
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高通量质谱法用于小鼠脑部神经肽的鉴定 被引量：1
3
作者 邵先锋 马敏 +1 位作者 陈瑞冰 贾辰熙 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期594-601,共8页
神经肽在参与调控人体各种生理功能上发挥着重要的作用,如痛觉、睡眠、情绪、学习与记忆等生理活动都受到神经肽的影响。神经肽主要存在于机体的神经组织内,其他体液和器官中也有少量的分布。目前对全脑组织神经肽高通量鉴定的研究仍不... 神经肽在参与调控人体各种生理功能上发挥着重要的作用,如痛觉、睡眠、情绪、学习与记忆等生理活动都受到神经肽的影响。神经肽主要存在于机体的神经组织内,其他体液和器官中也有少量的分布。目前对全脑组织神经肽高通量鉴定的研究仍不足,高通量检测这些神经肽对了解神经肽的组成和功能具有重要的意义。本研究通过对小鼠全脑组织内源性肽段的萃取,运用液相串联质谱(LC-MS/MS)技术对全脑组织的神经肽进行检测,共鉴定到1 830条内源性肽段和99条预测神经肽肽段。这些内源性肽段的鉴定在疾病的治疗和机制研究以及药物的研发方面提供了参考价值,也为研究新的神经肽及其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 神经肽 全脑组织 高通量鉴定 内源性肽段 液相串联质谱
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MicroRNA靶基因的高通量鉴定方法 被引量：4
4
作者 陈灵锋 张均平 王明席 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期207-212,共6页
MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小RNA,可在转录后水平调节基因的表达,在细胞生长、发育、疾病发生等过程中发挥着重要作用.明确miRNAs所调控的靶基因对阐明miRNAs的功能及在各种生命过程和疾病发生机制的角色非常关键.目前,鉴定mi... MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小RNA,可在转录后水平调节基因的表达,在细胞生长、发育、疾病发生等过程中发挥着重要作用.明确miRNAs所调控的靶基因对阐明miRNAs的功能及在各种生命过程和疾病发生机制的角色非常关键.目前,鉴定miRNAs的靶基因的方法主要计算机预测方法和生物学实验方法.前者对miRNA靶基因的寻找作出巨大贡献,但常存在很多假阳性,必须通过生物学实验方法加以验证.后者涉及单靶基因鉴定技术和高通量多靶基因鉴定技术,高通量技术又包括基因芯片分析技术、蛋白质组学分析技术、RNA连接酶介导的cDNA末端扩增技术和生物化学法等.本文主要对这些高通量技术的应用、优劣进行归纳,并对其改进方向予以讨论. 展开更多
关键词 微小RNA 靶基因 高通量鉴定方法
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一个用于黄单胞菌核开关筛选鉴定的GUS报告载体的构建
5
作者 张云帆 王家孟 +3 位作者 詹紫璐 陈泳伶 杨汇瀛 唐东阶 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期117-128,共12页
核开关(riboswitch)是存在于信使RNA(messenger RNA,mRNA)分子的5′非翻译区(5′-untranslated region,5′UTR)的一段具有调控功能的RNA片段,它通过与特定的代谢物分子直接结合来调控所在mRNA自身的表达。核开关广泛存在于细菌中,在调... 核开关(riboswitch)是存在于信使RNA(messenger RNA,mRNA)分子的5′非翻译区(5′-untranslated region,5′UTR)的一段具有调控功能的RNA片段,它通过与特定的代谢物分子直接结合来调控所在mRNA自身的表达。核开关广泛存在于细菌中,在调控细菌的基础代谢以及致病等生理过程中发挥非常重要的作用。尽管目前在大肠杆菌(Escherichia coli)等模式细菌中已经鉴定了许多核开关,然而,至今在重要的植物病原细菌黄单胞菌属(Xanthomonas)细菌中只鉴定了1个核开关。为了实现在全基因组水平上对黄单胞菌的核开关进行高通量筛选鉴定,本研究设计和构建了1个β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)报告载体pL3-SD^(+)gusA。该载体既适用于在黄单胞菌属细菌中对候选的核开关进行验证,也可以通过构建基因组DNA表达文库而实现对黄单胞菌核开关的高通量筛选鉴定。 展开更多
关键词 黄单胞菌 GUS报告载体 核开关 高通量筛选鉴定
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