PRRSV高致病性毒株和经典毒株SYBR GreenⅠ实时荧光PCR鉴别方法的建立 被引量：10

1

作者 柴政 李曦 +6 位作者 王小武 符芳 张永欣 肖晶 蔡雪辉 周艳君 宋淑萍 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期140-144,共5页

根据猪生殖与呼吸综合征病毒高致病性毒株、经典毒株Nsp2基因序列的差异,应用Oligo软件设计了2对特异引物,建立了鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。用该方法检测JEV、CSFV、FMDV和PRCV均呈阴性,表明该方... 根据猪生殖与呼吸综合征病毒高致病性毒株、经典毒株Nsp2基因序列的差异,应用Oligo软件设计了2对特异引物,建立了鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。用该方法检测JEV、CSFV、FMDV和PRCV均呈阴性,表明该方法特异性良好;敏感性试验结果表明,该方法的最低检出量为1 TCID50/0.1 mL;批内、批间重复性试验显示,其变异系数均低于0.3%,具有良好的重复性。应用该方法对人工感染动物进行检测,自感染后第3、5、7、10、142、1 d分别采集全血,检测结果均为阳性。证实,本试验所建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可以快速、准确地鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株。 展开更多

关键词 猪生殖与呼吸综合征病毒 SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR 高致病性毒株 经典毒株

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高致病性猪蓝耳病自然病例与美洲株(VR-2332)人工感染猪的比较病理学 被引量：11

2

作者 高晓磊 刘思当 +1 位作者 娄忠子 王天户 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期451-455,共5页

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株与我国当今流行的高致病性毒株在致病性上的差异,对高致病性PRRSV自然感染病例和美洲株VR-2332人工感染猪进行比较病理学研究,探讨PRRSV高致病性毒株的致病特点及发病机制。结果显示,高致病性... 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株与我国当今流行的高致病性毒株在致病性上的差异,对高致病性PRRSV自然感染病例和美洲株VR-2332人工感染猪进行比较病理学研究,探讨PRRSV高致病性毒株的致病特点及发病机制。结果显示,高致病性PRRSV会引起发病猪耳和四肢末端迅速发绀、皮肤点状出血、急性肺实变、全身出血性坏死性淋巴结炎、急性炎性脾肿、部分病例脾边缘出血性梗死灶、肾点状出血和胃肠黏膜出血等剖检病变,死亡病猪具有急性出血性败血症的剖检病变特征。全身性淋巴组织急性坏死、重度病毒性脑炎、实质器官变性坏死及肺继发感染为高致病性PRRSV自然感染病例的组织病变特征,这是导致病猪急性死亡和多继发感染的的主要原因。两病毒感染猪的肺和扁桃体免疫组化染色阳性细胞以及肺和脾电镜下病毒颗粒的分布、形态基本相同。 展开更多

关键词 猪蓝耳病 美洲株 高致病性毒株 比较病理学

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鉴别PRRSV经典、高致病性和类NADC30毒株PCR方法的建立及初步应用 被引量：5

3

作者 商佳亮 腾召剑 +3 位作者 陈立功 倪福太 宋勤叶 周双海 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期445-450,共6页

为了建立鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory virus,PRRSV)经典毒株、高致病性毒株与类NADC30毒株的快速检测方法,根据不同毒株的ORF1a核苷酸序列,设计并合成PRRSV特异性引物。经过引物筛选以及对退火温... 为了建立鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory virus,PRRSV)经典毒株、高致病性毒株与类NADC30毒株的快速检测方法,根据不同毒株的ORF1a核苷酸序列,设计并合成PRRSV特异性引物。经过引物筛选以及对退火温度、引物浓度的优化,建立了应用1对引物鉴别检测经典、高致病性及类NADC30 PRRSV毒株的PCR方法。该方法的反应体系为20μL,退火温度为58°C,引物含量为10 pmol,对经典毒株、高致病毒株和类NADC30毒株cDNA的最低检出量分别为12.16、138.70和59.30 pg;对猪瘟病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型等的检测均为阴性。进而用建立的PCR方法检测2017-2019年采集的38份PRRSV阳性组织病料,结果PRRSV总检出率为100%,其中类NADC30毒株、高致病性毒株与经典毒株的检出率分别为89.5%(34/38)、26.3%(10/38)和7.9%(3/38),并检测到2种或3种不同PRRSV毒株混合感染样本。该检测结果表明,建立的PCR方法可以用于PRRSV感染临床病例的检测,提示当前河北省部分地区猪场类NADC30毒株已成为优势流行毒株,不同PRRSV毒株的混合感染状态复杂多样。 展开更多

关键词 PRRSV PRRSV经典毒株 高致病性毒株 类NADC30毒株 PCR ORFla

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建立快速区分猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、高致病性毒株、天津疫苗株RT-PCR方法的研究 被引量：4

4

作者 曾繁文 刘向楠 +4 位作者 饶丹 丛锋 郭鹏举 陈梅丽 罗满林 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第5期1-4,10,共5页

为了快速区分猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）经典毒株、高致病性毒株和天津疫苗株,试验通过建立的RT-PCR方法获得电泳条带大小不同的PCR产物,以此区分猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、高致病性毒株和天津疫苗株,并用RT-PCR方法检测... 为了快速区分猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）经典毒株、高致病性毒株和天津疫苗株,试验通过建立的RT-PCR方法获得电泳条带大小不同的PCR产物,以此区分猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、高致病性毒株和天津疫苗株,并用RT-PCR方法检测实验室保存的12份临床阳性样品。结果表明：可以通过RT-PCR方法区分经典毒株、高致病性毒株、天津疫苗株,并且与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型等猪常见病毒无交叉反应;临床样品检测试验显示,1份为经典毒株、5份为高致病性毒株、5份为天津疫苗株,与测序结果相符。说明试验成功建立了同时区分猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、高致病性毒株和天津疫苗株的RT-PCR方法,且特异性强、灵敏度较高、重复性好、操作简单。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 经典毒株 高致病性毒株 天津疫苗株 鉴别诊断

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2021年猪蓝耳病临床检测分析与防控建议 被引量：4

5

作者 李相钊 朱绍伟 +3 位作者 李秀娟 周忠涛 张广 陈方园 《猪业科学》 2022年第4期72-75,共4页

2021年猪蓝耳病病毒(PRRSV)抗原检出率为33.0%,平均抗体合格率为74.6%。类NADC30毒株、类NADC34毒株与高致病性毒株几乎呈三足鼎立之势,并且后备猪、60-90日龄阶段的猪群抗体相对较差。猪蓝耳病依然非常严重。在重视生物安全的大背景下... 2021年猪蓝耳病病毒(PRRSV)抗原检出率为33.0%,平均抗体合格率为74.6%。类NADC30毒株、类NADC34毒株与高致病性毒株几乎呈三足鼎立之势,并且后备猪、60-90日龄阶段的猪群抗体相对较差。猪蓝耳病依然非常严重。在重视生物安全的大背景下,走净化之路是解决猪蓝耳病的根本出路。 展开更多

关键词 猪蓝耳病 后备猪 抗体合格率 三足鼎立之势 临床检测 高致病性毒株 PRRSV 分析与防控

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一例猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与链球菌混合感染的实验室诊断 被引量：2

6

作者 韩相敏 马晶晶 +6 位作者 吴汉宇 奉中花 贾济宇 孔维苏 盘金华 高俊锋 赖志 《中国兽药杂志》 2023年第4期11-17,共7页

某规模化自繁自养猪场产房母猪出现流产,保育猪关节肿胀、倒地不起、大量死亡,为研究发病原因,采集流产胎儿、死亡仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和关节液,进行分子生物学检测,病毒和细菌分离鉴定,并检测不同胎龄母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒... 某规模化自繁自养猪场产房母猪出现流产,保育猪关节肿胀、倒地不起、大量死亡,为研究发病原因,采集流产胎儿、死亡仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和关节液,进行分子生物学检测,病毒和细菌分离鉴定,并检测不同胎龄母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体,结果显示猪繁殖与呼吸综合征病毒检测为阳性,使用PAM分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒,经序列鉴定为高致病性毒株;抗体结果表明四胎及以上母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率异常升高;病料分离的细菌经鉴定为猪链球菌,经实验室诊断确定猪场发病的原因为猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与猪链球菌混合感染。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 高致病性毒株 猪链球菌 诊断

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PRRSV不同毒株RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：2

7

作者 饶云萍 《福建畜牧兽医》 2020年第5期1-3,共3页

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、高致病性毒株与流行株NADC30-like Nsp2的特点设计特异性引物,建立能够快速区分这三类毒株的RT-PCR检测方法。该方法能够对猪繁殖与呼吸综合征病毒的经典毒株、高致病性毒株与NADC30-lik... 根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、高致病性毒株与流行株NADC30-like Nsp2的特点设计特异性引物,建立能够快速区分这三类毒株的RT-PCR检测方法。该方法能够对猪繁殖与呼吸综合征病毒的经典毒株、高致病性毒株与NADC30-like流行株扩增出特异性片段,其大小分别为1000 bp、900 bp和700 bp。具有快速、特异、通用等特点,可用于实验室快速诊断,为该病的诊断及免疫防控提供参考依据。用本试验所建立的方法对福建省疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的58份样品进行检测,结果显示34份为猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性,其中高致病性毒株占41.18%,NADC30-like占14.71%,多毒株共感染占35.29%,提示高致病性毒株仍占主导,但多毒株共感染成为流行趋势。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 经典毒株 高致病性毒株 NADC30-like

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猪繁殖与呼吸综合征病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及应用

8

作者 陈雷 《福建畜牧兽医》 2023年第4期27-30,共4页

为解决当前猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株类型复杂、各毒株之间交叉免疫保护不佳的现状,本研究针对NSP2基因保守区域设计1对特异性引物,通过条件优化,建立一种能够快速区分经典株、高致病性毒株和NADC30-like毒株的检测方法。该方法与CSFV... 为解决当前猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株类型复杂、各毒株之间交叉免疫保护不佳的现状,本研究针对NSP2基因保守区域设计1对特异性引物,通过条件优化,建立一种能够快速区分经典株、高致病性毒株和NADC30-like毒株的检测方法。该方法与CSFV、PCV2、PRV、PEDV、TGEV无交叉反应。对不同毒株类型进行检测,结果显示该方法特异性强,能够将经典株、高致病性猪蓝耳病毒株和类NADC30株进行快速区分,为猪群快速区分PRRSV感染类型及疫苗的选择、使用提供科学防控依据。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 经典毒株 高致病性毒株 NADC30-like毒株

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2016-2018年怀化市猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查与分析 被引量：2

9

作者 邹秀明 印怀文 《养猪》 2020年第3期123-124,共2页

为了解怀化市发病猪群猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染情况,从该地区收集326份临床发病猪群组织样品,采用RT/PCR技术检测PRRSV流行情况。结果发现:326份样品中有140份检测为PRRSV阳性,阳性率为42.94%,其中经典毒株和高致病性毒株单... 为了解怀化市发病猪群猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染情况,从该地区收集326份临床发病猪群组织样品,采用RT/PCR技术检测PRRSV流行情况。结果发现:326份样品中有140份检测为PRRSV阳性,阳性率为42.94%,其中经典毒株和高致病性毒株单一感染阳性率分别为14.72%和21.17%,混合感染两种毒株的病料所占比例为7.01%。结果表明,怀化市主要流行的是高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒,且流行情况较为复杂,应加强对其流行情况的监测力度。 展开更多

关键词 怀化市 猪繁殖与呼吸综合征 分子流行病学调查 高致病性毒株

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标记基因型猪繁殖与呼吸综合征重组病毒活疫苗的特点及应用关键技术施

10

作者 宋庆庆 《兽药市场指南》 2021年第3期48-50,共3页

蓝耳病是困扰全球养猪业的主要疾病之一。我国猪场蓝耳病病毒流行和毒株多样性更为复杂。市场上蓝耳疫苗的毒株多种多样,但是传统疫苗存在对不同毒株交叉保护力差,毒力返强等缺点。新型标记型基因工程蓝耳活疫苗(PC株),商品名为蓝立优,... 蓝耳病是困扰全球养猪业的主要疾病之一。我国猪场蓝耳病病毒流行和毒株多样性更为复杂。市场上蓝耳疫苗的毒株多种多样,但是传统疫苗存在对不同毒株交叉保护力差,毒力返强等缺点。新型标记型基因工程蓝耳活疫苗(PC株),商品名为蓝立优,是通过反向遗传操作将蓝耳病毒经典毒株和高致病性毒株进行整合而成。试验室和田间试验证实,蓝立优对经典毒株和高致病性毒株均有保护力,同时可以改善由NADC30-like毒株造成的感染,提高生产成绩。另外,全国20余个猪场,7万多头猪只进行的田间应用显示,蓝立优有很好的安全性。科学的饲养管理有利于蓝耳病的防控。蓝立优是一个即安全又有效的新型标记基因型蓝耳活疫苗。 展开更多

关键词 蓝立优 新型标记型 经典毒株 高致病性毒株 NADC30-like毒株 安全 有效

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猪繁殖与呼吸综合征病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立 被引量：1

11

作者 张靖飞 张园 +3 位作者 李志辉 王慧煜 曹达江 梅琳 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第4期74-77,共4页

为了建立一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒并且能够区分普通毒株和高致病性毒株的荧光PCR方法,根据GenBank已经公布的国内发表的高致病性PRRSV NSP2基因序列,针对Nsp2缺失区设计一对引物和探针,在结合PRRSV通用检测引物探针进行荧光... 为了建立一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒并且能够区分普通毒株和高致病性毒株的荧光PCR方法,根据GenBank已经公布的国内发表的高致病性PRRSV NSP2基因序列,针对Nsp2缺失区设计一对引物和探针,在结合PRRSV通用检测引物探针进行荧光定量PCR,对反应条件进行优化,用已知PRRSV普通株和高致病性株及其他病毒进行试验。结果表明,该方法可以特异检测并区分高致病性株和普通株。将该方法用于临床标本的检测,通过对32份样本检测,通用阳性为28份,阳性率为87.5%。高致病性株为17份,阳性率为59.38%。表明建立的方法可以用于PRRSV的快速检测,并且可以区分普通株和高致病性株。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 高致病性毒株 双重荧光RT—PCR

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胸腺损伤与猪蓝耳病防控

12

作者 杨茂春 欧伟业 +1 位作者 彭俊平 胡永明 《猪业科学》 2019年第8期92-93,共2页

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称猪蓝耳病,它主要引起母猪繁殖障碍和生长育肥猪的呼吸道疾病,是一种严重危害全球养猪业的重要疫病.目前国内流行的猪蓝耳病毒株主要为PRRSV-2型(北美型),在我国又分为经典毒株和高致病性毒株,近年来又出现... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称猪蓝耳病,它主要引起母猪繁殖障碍和生长育肥猪的呼吸道疾病,是一种严重危害全球养猪业的重要疫病.目前国内流行的猪蓝耳病毒株主要为PRRSV-2型(北美型),在我国又分为经典毒株和高致病性毒株,近年来又出现了类NADC-30毒株.猪蓝耳病病毒感染猪群之后,会引起严重的免疫抑制,特别是高致病性毒株感染后,会严重破坏仔猪中枢免疫器官——胸腺,导致骨髓干细胞流经胸腺时,不能正常分化、发育为成熟的CD4+和CD8+ T细胞,从而抑制了细胞免疫和体液免疫,最终对各种疫苗免疫难以产生免疫应答,所以临床上表现为猪蓝耳病病毒感染后免疫猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病等疫苗效果不理想,并导致多种疫病混合感染. 展开更多

关键词 猪蓝耳病 胸腺 猪繁殖与呼吸综合征 高致病性毒株 防控 损伤 母猪繁殖障碍 病毒感染

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猫杯状病毒高致病性毒株特性研究进展 被引量：2

13

作者 桂亚萍 刘健 +2 位作者 白艺兰 王建 赵洪进 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1093-1098,共6页

猫致死性全身系统性疾病(Virulent systemic disease,VSD)由猫杯状病毒高致病性毒株(Virulent systemic feline calicivirus,VS⁃FCV)引起。患猫感染后表现为全身性症状,累及多个器官组织,引起高致死率。由于尚未发现VS⁃FCV相应的临床和... 猫致死性全身系统性疾病(Virulent systemic disease,VSD)由猫杯状病毒高致病性毒株(Virulent systemic feline calicivirus,VS⁃FCV)引起。患猫感染后表现为全身性症状,累及多个器官组织,引起高致死率。由于尚未发现VS⁃FCV相应的临床和遗传标志物,且疫苗免疫效果有限,给猫杯状病毒的防治带来了新的挑战。本文通过综述VS⁃FCV引起的流行病学特征、临床特点、病原学特性和生物学特性方面的研究进展,对该毒株的判定方法进行讨论,以期为其临床诊断和相应疫苗的研发提供理论依据。 展开更多

关键词 猫杯状病毒高致病性毒株 致死性全身系统性疾病

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春季非洲猪瘟的预防与控制 被引量：1

14

作者 梁贵强 《畜牧兽医科技信息》 2019年第4期22-22,共1页

非洲猪瘟是一种高度接触性的传染病,由非洲猪瘟病毒诱发,各种日龄、性别和品种的生猪均有可能感染非洲猪瘟,其病死率可达100%,已经对全球养猪业造成严重危害。目前来看,非洲猪瘟的发病率通常为40%~85%,若是低致病性毒株,生猪的致死率为1... 非洲猪瘟是一种高度接触性的传染病,由非洲猪瘟病毒诱发,各种日龄、性别和品种的生猪均有可能感染非洲猪瘟,其病死率可达100%,已经对全球养猪业造成严重危害。目前来看,非洲猪瘟的发病率通常为40%~85%,若是低致病性毒株,生猪的致死率为10%~30%;若是中等致病性毒株,生猪的致死率为70%~80%;若是高致病性毒株,生猪的致死率为90%~100%。我国是猪肉产品消费与生猪养殖的大国,必须重视非洲猪瘟的防控,以确保我国生猪养殖业的健康发展和百姓餐桌的动物性食品安全。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 高致病性毒株 生猪养殖业 动物性食品安全 控制 预防 致死率 产品消费

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猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性/经典毒株多重RT-PCR方法的建立及应用 被引量：14

15

作者 王晓波 李丽敏 +3 位作者 袁万哲 宋勤叶 孙泰然 逯继成 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期675-679,691,共6页

为了建立鉴别猪瘟病毒(Classical swine virus,CSFV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)及经典猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)的快速检测方法,根据GenBank中公布的已知序列,设计合成了针对CSFV、HP-PRRSV和C-PRRSV特异性引... 为了建立鉴别猪瘟病毒(Classical swine virus,CSFV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)及经典猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)的快速检测方法,根据GenBank中公布的已知序列,设计合成了针对CSFV、HP-PRRSV和C-PRRSV特异性引物。经过引物筛选及对退火温度、引物比例等扩增条件的优化,建立了用2对引物同时检测CSFV、HP-PRRSV和C-PRRSV的多重RT-PCR方法。该方法可同时扩增出287bp的CSFV、374bp的HP-PRRSV和464bp的C-PRRSV目的核苷酸片段,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)等无交叉反应,最低可以检测到11.3pg的CSFV、4.7pg的HP-PRRSV和2.8pg的C-PRRSV总RNA。分别用多重和单项RT-PCR检测了从河北省采集的31份血清或组织样品,其中CSFV、HP-PRRSV、C-PRRSV以及CSFV与HP-PRRSV混合感染的检出率分别为19.4%、22.6%、0%与9.7%,多重与单项RT-PCR的符合率为100%。本试验建立的多重RT-PCR方法可同时鉴别CSFV、HP-PRRSV与C-PRRSV,适于猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速检测与流行病学调查。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性/经典毒株 多重RT-PCR 应用

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