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人牙髓细胞体外培养条件的优化 被引量:4
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作者 严焱 刘正 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1999年第1期18-20,共3页
目的:优化体外人牙髓细胞(HDPC)培养条件,以提高HDPC原代培养成功率。方法:采用玻璃及塑料培养瓶、高糖DMEM以及标准型、合格型胎牛血清,分别比较原代牙髓组织细胞游出率。结果:塑料培养瓶细胞游出率以及细胞游出最... 目的:优化体外人牙髓细胞(HDPC)培养条件,以提高HDPC原代培养成功率。方法:采用玻璃及塑料培养瓶、高糖DMEM以及标准型、合格型胎牛血清,分别比较原代牙髓组织细胞游出率。结果:塑料培养瓶细胞游出率以及细胞游出最短时间均明显优于常用玻璃培养瓶;两种不同型号胎牛血清比较为标准型胎牛血清的组织块贴壁以及细胞游出率均优于合格型胎牛血清;高糖DMEM适合于HPDC培养。结论:商品塑料培养瓶、标准胎牛血清、高糖DMEM是提高体外HDPC培养成功率的关键。 展开更多
关键词 体外培养 人牙髓细胞 培养瓶 胎牛血清 dmem
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薇乔网片及其胶原蛋白复合物在体外降解的研究 被引量:1
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作者 刘德昌 陈国平 《实用骨科杂志》 2005年第2期125-127,共3页
目的 观察薇乔网片及其胶原蛋白复合物的降解。方法 将薇乔网片和胶原蛋白复合后的薇乔网片,剪成直径为1.5 cm大小,分为6组。浸没在高糖DMEM溶液中,每周取出1组,经过洗涤,冷冻,真空干燥后,称重。结果 薇乔网片和复合后的薇乔网片在4... 目的 观察薇乔网片及其胶原蛋白复合物的降解。方法 将薇乔网片和胶原蛋白复合后的薇乔网片,剪成直径为1.5 cm大小,分为6组。浸没在高糖DMEM溶液中,每周取出1组,经过洗涤,冷冻,真空干燥后,称重。结果 薇乔网片和复合后的薇乔网片在4~5周内降解。结论 复合的薇乔网片可作为组织工程的支架材料。 展开更多
关键词 薇乔网片 蛋白复合物 体外降解 dmem 胶原蛋白 真空干燥 支架材料 组织工程
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人原始生殖细胞分离培养的初步研究 被引量:4
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作者 撒亚莲 黄锦桃 李海标 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期325-328,共4页
[目的]探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。[方法]用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加10μmol/L福司克林(forskolin)和5~μg/L碱性成纤维细胞... [目的]探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。[方法]用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加10μmol/L福司克林(forskolin)和5~μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的培养液中培养、传代,并对子代细胞进行碱性磷酸酶活性检测和体外分化实验。[结果]原代培养时形成许多大小不等,形态各异的由人原始生殖细胞组成的集落,约5~7d传代。传代后,集落生长,变大。细胞培养到第七代,检测碱性磷酸酶染色为强阳性,体外分化实验有拟胚体形成。[结论]人原始生殖细胞可以用胰蛋白酶消化分离培养。用高糖DMEM培养基,添加forskolin和bFGF有利于人原始生殖细胞增殖。体外分化实验初步证实人原始生殖细胞具有多向分化潜能。 展开更多
关键词 人原始生殖细胞 细胞培养 胰蛋白酶消化法 福司克林 碱性成纤维细胞生长因子 dmem培养基
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α-MEM培养基和高糖DMEM培养基对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响 被引量:4
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作者 曾汝君 马亚仙 +4 位作者 张郡 罗云瑶 谯小勇 刘玲 许良智 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期745-749,790,共6页
目的比较α-MEM和高糖DMEM两种培养基对小鼠破骨细胞前体细胞系RAW264.7细胞分化的影响。方法 (1)根据培养基和是否添加核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)将细胞分为4组:α-MEM培养... 目的比较α-MEM和高糖DMEM两种培养基对小鼠破骨细胞前体细胞系RAW264.7细胞分化的影响。方法 (1)根据培养基和是否添加核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)将细胞分为4组:α-MEM培养基组、添加RANKL的α-MEM培养基组、高糖DMEM培养基组、添加RANKL的高糖DMEM培养基组;(2)于培养第3天收集细胞,分别通过q PCR、免疫印迹实验观察分化相关标记物抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)、活化的T细胞核因子(nuclear factor of activated T-cells 1,NFATc1)、核因子κB受体活化因子(receptor activator for nuclear factor-κB,RANK)和组织蛋白酶(Cathepsin)K的mRNA及蛋白表达水平,并做TRAP染色观察各组成熟破骨细胞的形成情况,探讨添加RANKL后α-MEM培养基和高糖DMEM培养基对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响。结果 (1)与添加RANKL的高糖DMEM培养基相比,添加RANKL的α-MEM培养基使RAW264.7细胞的分化相关标记物TRAP、NFATc1、RANK及cathepsin K的mRNA表达水平增加,TRAP、NFATc1及cathepsin K的蛋白表达水平增加;(2)在α-MEM培养基或高糖DMEM培养基中添加RANKL均可使RAW264.7细胞分化为成熟破骨细胞,但添加RANKL的α-MEM培养基处理的细胞组中形成的成熟破骨细胞更多。结论添加RANKL的α-MEM培养基有利于RAW264.7细胞向破骨细胞分化。 展开更多
关键词 RAW264.7细胞 dmem培养基 α-MEM培养基 破骨细胞 核因子kB受体激活蛋白配体
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培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导分化破骨细胞的影响
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作者 刘昕 李圆圆 +4 位作者 刘红 李艳 潘静华 王少君 赵宏艳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1422-1427,共6页
目的 探讨培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法 实验分为3组:高糖DMEM培养基组(DMEM组);高糖DMEM/α-MEM培养基组(DMEM/α-MEM组);α-MEM培养基组(α-MEM组)。按常规方法采用上述3种培养基进行破骨细胞培养,培... 目的 探讨培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法 实验分为3组:高糖DMEM培养基组(DMEM组);高糖DMEM/α-MEM培养基组(DMEM/α-MEM组);α-MEM培养基组(α-MEM组)。按常规方法采用上述3种培养基进行破骨细胞培养,培养5 d后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)染色观察各组破骨细胞的形成情况,并采用实时荧光定量PCR方法观察破骨细胞分化相关标志物NFATc-1、c-Fos和TRAF-6 mRNA的表达;培养11 d后采用甲苯胺蓝染色进行骨陷窝面积分析,观察破骨细胞骨吸收功能情况。结果 3组均可以观察到典型的TRAP^(+)破骨细胞。与DMEM组相比,DMEM/α-MEM组、α-MEM组TRAP^(+)破骨细胞数量明显增加(P<0.01),但各组形态略有不同。在骨吸收功能上,与DMEM组和DMEM/α-MEM组相比,α-MEM组骨陷窝面积明显增加(P<0.01)。在破骨细胞分化相关调控因子表达上,与DMEM组相比,α-MEM组NFATc-1、c-Fos和TRAF-6 mRNA表达显著增加(P<0.01,P<0.05);DMEM/α-MEM组NFATc-1 mRNA表达显著增加(P<0.01),c-Fos和TRAF-6 mRNA表达有增加的趋势,但差异无统计学意义;α-MEM组与DMEM/α-MEM组比较差异无统计学意义。结论 高糖DMEM培养基、高糖DMEM/α-MEM培养基、α-MEM培养基均可用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导分化破骨细胞的实验;从破骨细胞数量、状态及功能来看,α-MEM培养基更适合做为破骨细胞分化培养基。 展开更多
关键词 破骨细胞 小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 dmem培养基 α-MEM培养基
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