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来源于橄榄绿链霉菌A1的高比活木聚糖酶XYNB的高效表达及性质的比较分析
被引量：
10
1
作者
何永志
姚斌
+5 位作者
王亚茹
袁铁峥
罗会颖
史秀云
伍宁丰
范云六
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期340-344,共5页
高效表达高比活木聚糖酶是进一步提高木聚糖酶发酵效价、降低其生产成本的有效途径。将橄榄绿链霉菌 (Streptomycesolivaceoviridis)A1的高比活木聚糖酶成熟蛋白编码基因xynB克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中 ,转化毕赤酵母得到重组酵母 ...
高效表达高比活木聚糖酶是进一步提高木聚糖酶发酵效价、降低其生产成本的有效途径。将橄榄绿链霉菌 (Streptomycesolivaceoviridis)A1的高比活木聚糖酶成熟蛋白编码基因xynB克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中 ,转化毕赤酵母得到重组酵母 ,在重组酵母中木聚糖酶基因得到了高效分泌表达 ,且表达产物具有生物学活性。在 3L发酵罐中蛋白表达量约 1 4mg mL ,酶活性 (效价 )为 1 2 0 0IU mL。SDS PAGE分析表明 ,表达的木聚糖酶XYNBa为糖基化蛋白 ,分子量为 31kD ,经脱糖基化处理得到 2 1kD的XYNBb ,与橄榄绿链霉菌A1所产原酶XYNB大小一致。通过对XYNB、XYNBa及XYNBb酶学性质的比较发现 :三者在比活性、Vmax及热稳定性方面有较大差异。该酶对不同木聚糖的酶解产物的糖份分析表明 :酶解产物的主要成分为木二糖、木三糖和木四糖 ,占总糖含量的 95
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关键词
高
比
活
木聚糖酶
高
效表达
毕赤酵母
酶学性质
下载PDF
职称材料
在烟草中表达的高比活性木聚糖酶XYNB
被引量：
2
2
作者
杨培龙
姚斌
+4 位作者
王亚茹
罗会颖
袁铁铮
柏映国
范云六
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期176-181,共6页
来源于橄榄绿链霉菌(Streptomyces olivaceoviridis)A1的木聚糖酶XYNB是一性质优良的高比活性木聚糖酶,已在饲料中作为添加剂应用。本研究利用携带双35S启动子和AMV增强子的表达载体,在烟草中高效表达了XYNB。转基因烟草及其子代植株基...
来源于橄榄绿链霉菌(Streptomyces olivaceoviridis)A1的木聚糖酶XYNB是一性质优良的高比活性木聚糖酶,已在饲料中作为添加剂应用。本研究利用携带双35S启动子和AMV增强子的表达载体,在烟草中高效表达了XYNB。转基因烟草及其子代植株基因组PCR检测证实xynB基因已整合到转基因烟草的基因组中,ELISA和SDS-PAGE以及Westernblot分析确证了xynB基因的高效表达,木聚糖酶活性分析证实了表达酶具有正常的生物学活性。表达的XYNB约占叶片总蛋白含量的6%,转基因烟草表现的最高酶活性约为170 IU/g鲜叶片(23 IU/mg总蛋白)。表达酶蛋白分子量为20.8 kD,与理论分子量相当。转基因植株可以正常生长和繁殖,T1子代植株表现了与亲代相似的酶活性,具有较好的遗传稳定性。
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关键词
高
比
活
性
木聚糖酶
转基因植物
烟草
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职称材料
题名
来源于橄榄绿链霉菌A1的高比活木聚糖酶XYNB的高效表达及性质的比较分析
被引量：
10
1
作者
何永志
姚斌
王亚茹
袁铁峥
罗会颖
史秀云
伍宁丰
范云六
机构
中国农业科学院饲料研究所
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期340-344,共5页
基金
国家"8 63计划" ( 2 0 0 1AA2 14 0 41)~~
文摘
高效表达高比活木聚糖酶是进一步提高木聚糖酶发酵效价、降低其生产成本的有效途径。将橄榄绿链霉菌 (Streptomycesolivaceoviridis)A1的高比活木聚糖酶成熟蛋白编码基因xynB克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中 ,转化毕赤酵母得到重组酵母 ,在重组酵母中木聚糖酶基因得到了高效分泌表达 ,且表达产物具有生物学活性。在 3L发酵罐中蛋白表达量约 1 4mg mL ,酶活性 (效价 )为 1 2 0 0IU mL。SDS PAGE分析表明 ,表达的木聚糖酶XYNBa为糖基化蛋白 ,分子量为 31kD ,经脱糖基化处理得到 2 1kD的XYNBb ,与橄榄绿链霉菌A1所产原酶XYNB大小一致。通过对XYNB、XYNBa及XYNBb酶学性质的比较发现 :三者在比活性、Vmax及热稳定性方面有较大差异。该酶对不同木聚糖的酶解产物的糖份分析表明 :酶解产物的主要成分为木二糖、木三糖和木四糖 ,占总糖含量的 95
关键词
高
比
活
木聚糖酶
高
效表达
毕赤酵母
酶学性质
Keywords
Xylanase with high specific activity, Overexpression, Pichia pastoris, Enzymatic properties
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
在烟草中表达的高比活性木聚糖酶XYNB
被引量：
2
2
作者
杨培龙
姚斌
王亚茹
罗会颖
袁铁铮
柏映国
范云六
机构
中国农业科学院饲料研究所
中国农业科学院生物技术研究所
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期176-181,共6页
基金
国家高技术研究与发展计划(863计划)项目(2003AA214030)
国家转基因植物研究与产业化开发项目(JY03-A-16-02)资助
文摘
来源于橄榄绿链霉菌(Streptomyces olivaceoviridis)A1的木聚糖酶XYNB是一性质优良的高比活性木聚糖酶,已在饲料中作为添加剂应用。本研究利用携带双35S启动子和AMV增强子的表达载体,在烟草中高效表达了XYNB。转基因烟草及其子代植株基因组PCR检测证实xynB基因已整合到转基因烟草的基因组中,ELISA和SDS-PAGE以及Westernblot分析确证了xynB基因的高效表达,木聚糖酶活性分析证实了表达酶具有正常的生物学活性。表达的XYNB约占叶片总蛋白含量的6%,转基因烟草表现的最高酶活性约为170 IU/g鲜叶片(23 IU/mg总蛋白)。表达酶蛋白分子量为20.8 kD,与理论分子量相当。转基因植株可以正常生长和繁殖,T1子代植株表现了与亲代相似的酶活性,具有较好的遗传稳定性。
关键词
高
比
活
性
木聚糖酶
转基因植物
烟草
Keywords
Xylanase with high specific activity
Transgenic plant
Tobacco
分类号
S572 [农业科学—烟草工业]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
来源于橄榄绿链霉菌A1的高比活木聚糖酶XYNB的高效表达及性质的比较分析
何永志
姚斌
王亚茹
袁铁峥
罗会颖
史秀云
伍宁丰
范云六
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
10
下载PDF
职称材料
2
在烟草中表达的高比活性木聚糖酶XYNB
杨培龙
姚斌
王亚茹
罗会颖
袁铁铮
柏映国
范云六
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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