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用ISSR标记研究高卢蜜环菌系统发生学的尝试 被引量:31
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作者 孙立夫 杨国亭 +2 位作者 秦国夫 宋玉双 宋瑞清 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期317-322,共6页
用ISSR(Inter SimpleSequenceRepeat)标记对黑龙江省牡丹江地区高卢蜜环菌的系统发生学进行了研究 ,用 6个引物对 35个菌株的DNA模板进行扩增。结果表明该地区的 35个菌株分属 3个不同的发育系 ,并且 3个发育系在地理分布上是交错在一... 用ISSR(Inter SimpleSequenceRepeat)标记对黑龙江省牡丹江地区高卢蜜环菌的系统发生学进行了研究 ,用 6个引物对 35个菌株的DNA模板进行扩增。结果表明该地区的 35个菌株分属 3个不同的发育系 ,并且 3个发育系在地理分布上是交错在一起的。同时表明ISSR标记是研究蜜环菌系统发育关系的理想的分子标记手段。 展开更多
关键词 ISSR标记 高卢 系统发生学 担子亚门
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北半球高卢蜜环菌的遗传多样性与分子鉴定 被引量:14
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作者 秦国夫 赵俊 +1 位作者 田淑敏 JarkkoHantula 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第2期61-68,共8页
从北美、欧洲和中国收集 2 3个高卢蜜环菌菌株 ,PCR扩增其rDNA的IGS和ITS区域 ,用AluⅠ、HaeⅢ、HinfⅠ和TagⅠ四种限制性内切酶进行酶切 ,同时结合随机扩增微卫星 (RAMS)多态性 ,对北半球的高卢蜜环菌的遗传多样性进行了分析。结果发... 从北美、欧洲和中国收集 2 3个高卢蜜环菌菌株 ,PCR扩增其rDNA的IGS和ITS区域 ,用AluⅠ、HaeⅢ、HinfⅠ和TagⅠ四种限制性内切酶进行酶切 ,同时结合随机扩增微卫星 (RAMS)多态性 ,对北半球的高卢蜜环菌的遗传多样性进行了分析。结果发现了高卢蜜环菌的 6种IGS RFLP图谱类型 ,其中gal(B)和gal(D)是国内外尚无报道的新的IGS RFLP型。RFLP系统树发现该种有明显的大陆之间遗传分化 ,存在中国、欧洲、北美和亚洲 4个亚群体。RAMS分析表明北半球高卢蜜环菌存在亚洲、欧洲、北美 中国和北美 欧洲等 4个高卢蜜环菌发育系 ,而且不同大陆的高卢蜜环菌具有较近的亲缘关系 ,而相同大陆的却具有不同的起源 ,特别是北美的高卢蜜环菌两个发育系异源性很高 ,北美东部的发育系同欧洲的关系比较近 ,而北美西部的同亚洲关系比较近。 展开更多
关键词 高卢 遗传多样性 IGS-RFLP RAMS分析 遗传分化 林木病原
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高卢蜜环菌PCR-RFLP快速鉴别方法研究 被引量:12
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作者 梁宇庭 蒋超 +2 位作者 周骏辉 胡启跳 袁媛 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期3622-3626,共5页
蜜环菌是名贵中药天麻、猪苓栽培过程中必备的共生菌,蜜环菌的菌索侵入天麻块茎或猪苓菌核后被后者消化利用,成为它们重要的营养源。不同性质的蜜环菌影响天麻、猪苓的生长。作者收集了13个地区的市售蜜环菌,经过IGS鉴定均为高卢蜜环菌... 蜜环菌是名贵中药天麻、猪苓栽培过程中必备的共生菌,蜜环菌的菌索侵入天麻块茎或猪苓菌核后被后者消化利用,成为它们重要的营养源。不同性质的蜜环菌影响天麻、猪苓的生长。作者收集了13个地区的市售蜜环菌,经过IGS鉴定均为高卢蜜环菌。在基因水平和代谢水平上筛选出了蔗糖含量具有显著差异的2种高卢蜜环菌,命名为A型和B型,并建立了简单、准确的高卢蜜环菌DNA分子标记鉴定方法。通过比较高卢蜜环菌A型和B型蔗糖酶基因序列差异,根据差异片段设计聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态(PCR-RFLP)鉴别方法,即引物ZTM.F/ZTM.R可扩增高卢蜜环菌A型和B型,产生约304 bp长度条带,限制性内切酶EcoR V可以识别高卢蜜环菌A型和B型的差异序列,仅高卢蜜环菌B型可以被酶切形成2个片段,从而特异性鉴别高卢蜜环菌为B型。该实验建立的PCR-RFLP可以作为高卢蜜环菌A型和B型的DNA鉴别方法。在天麻和猪苓的栽培过程中,可根据品种、生长阶段、生态环境等不同需要,选择合适的菌株,因地制宜提升它们的产量和品质。 展开更多
关键词 高卢 聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态性 分子鉴定
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蜜环菌胞外酶和多糖含量变化规律研究 被引量:11
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作者 刘天睿 张薇薇 +4 位作者 王忠巧 杨勇述 徐怀有 宋明海 包海鹰 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第1期57-61,共5页
目的:比较高卢蜜环菌M1、M2两菌株胞外酶活性、菌丝多糖变化规律及菌株生长量,初步筛选出优良菌株。方法:利用改良PDA固体培养基培养菌株M1和M2,采用十字交叉法测定生长量,ABTS法及DNS显色法检测胞外酶活性,用浓硫酸-苯酚法对二者多糖... 目的:比较高卢蜜环菌M1、M2两菌株胞外酶活性、菌丝多糖变化规律及菌株生长量,初步筛选出优良菌株。方法:利用改良PDA固体培养基培养菌株M1和M2,采用十字交叉法测定生长量,ABTS法及DNS显色法检测胞外酶活性,用浓硫酸-苯酚法对二者多糖含量进行测定。结果:M1菌株生长速度快,菌索粗壮,分支较多,长势较好。木聚糖酶是蜜环菌主要作用的胞外酶,其活力远高于纤维素酶、漆酶和果胶酶,M1菌株的木聚糖酶活力更高。M1和M2菌丝体多糖含量最高分别为38.958 mg/g和32.717 mg/g,多糖的累积与其分泌的胞外酶漆酶、木聚糖酶活力呈现显著相关性。结论:通过对M1、M2两菌株生长量、胞外酶活力及菌丝体多糖的比较和分析,初步认为M1为优势菌株。 展开更多
关键词 高卢 胞外酶 多糖
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一株适合红天麻伴栽的蜜环菌菌株筛选 被引量:9
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作者 程瑞 刘天睿 +3 位作者 李仰华 周俊辉 赵玉洋 袁媛 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期374-381,共8页
为了筛选适宜红天麻伴栽的蜜环菌菌株,该研究通过对不同产区伴栽天麻的蜜环菌菌株的分离鉴定、蜜环菌菌株的生长特征比较及伴栽天麻实验,筛选出了1株适宜红天麻伴栽的高卢蜜环菌菌株。收集4个天麻产区伴栽天麻使用的菌材,分离菌材上的... 为了筛选适宜红天麻伴栽的蜜环菌菌株,该研究通过对不同产区伴栽天麻的蜜环菌菌株的分离鉴定、蜜环菌菌株的生长特征比较及伴栽天麻实验,筛选出了1株适宜红天麻伴栽的高卢蜜环菌菌株。收集4个天麻产区伴栽天麻使用的菌材,分离菌材上的蜜环菌菌株(G、Y、S、H),采用形态学鉴定与系统发育树相结合的方法,对蜜环菌菌株进行鉴定,确定栽培天麻常用的蜜环菌菌株种类;基于课题组的前期研究对蜜环菌菌株蔗糖酶基因型进行鉴定,以确定蜜环菌菌株的基因型特征;通过对蜜环菌菌株菌索生长速度、直径、干重及多糖含量的测定确定蜜环菌菌株的生长特征;结合蜜环菌菌株的生物学特性和蔗糖酶基因型特征,选择了2株不同的菌株进行天麻伴栽实验,测定天麻产量、天麻素和对羟基苯甲醇含量,筛选出最适合红天麻伴栽的菌株。该研究发现4株蜜环菌菌株均为高卢蜜环菌Armillaria gallica;同一蔗糖酶基因型的菌株G、H菌索总长度、生长速度、直径、分支数、干重和多糖含量均高于同一蔗糖酶基因型的菌株S、Y;分别使用菌株H、S伴栽天麻,发现使用生长速度更快、分支数更多的菌株H伴栽天麻的产量为6.528 kg·m^(-2)、天麻素和对羟基苯甲醇总量为0.566%,均高于菌株S伴栽的天麻,分别是菌株S伴栽的4.58、1.30倍。通过比较4株蜜环菌的生长特性和蔗糖酶基因型筛选出了2株蜜环菌菌株H、S,结合2株菌株伴栽天麻的产量、天麻素和对羟基苯甲醇总含量,优选出了菌株H为红天麻伴栽的优势菌株,为天麻的高产优质栽培提供依据。 展开更多
关键词 高卢 天麻 蔗糖酶基因型 生长特性
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农杆菌介导的高卢蜜环菌遗传转化体系的优化 被引量:3
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作者 滕夕莹 韩鹏杰 +4 位作者 张雪艳 周骏辉 赵玉洋 黄璐琦 袁媛 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期124-130,共7页
目的:该研究在已有高卢蜜环菌遗传转化体系的基础上,对遗传转化体系进行优化以提高转化效率,为后续蜜环菌分子标记辅助育种、基因功能的研究奠定基础。方法:首先构建遗传转化的质粒pH101-PAgGPD-GFP-TrpC,将其转化到大肠埃希菌中扩大培... 目的:该研究在已有高卢蜜环菌遗传转化体系的基础上,对遗传转化体系进行优化以提高转化效率,为后续蜜环菌分子标记辅助育种、基因功能的研究奠定基础。方法:首先构建遗传转化的质粒pH101-PAgGPD-GFP-TrpC,将其转化到大肠埃希菌中扩大培养并提取质粒。提取的质粒分别转化LBA4404,EHA105,GV3101,AGL-1共4种不同的农杆菌。用转化后的农杆菌浸染高卢蜜环菌,筛选出转化率最高的农杆菌。再分别从抗生素种类及浓度、共培养时间、菌液浓度和浸染方法 5个方面对农杆菌介导的高卢蜜环菌遗传转化体系进行优化。采用Synbiosis ProtoCol 3测量影像分析仪观察蜜环菌在不同条件下的表型谱。结果:优化后高卢蜜环菌遗传转化条件为农杆菌菌株采用EHA105,菌液浓度为吸光度A_(600nm)=0.6;共培养时间为2 d,浸染方式为负压浸染10 min,初筛培养基为含400 mg·L^(-1)头孢噻肟钠,10 mg·L^(-1)潮霉素的PDA培养基,复筛培养基为含12 mg·L^(-1)潮霉素的PDA培养基。结论:该研究在已经建立的高卢蜜环菌的遗传转化体系的基础上成功对该体系进行了优化,且优化前后的转化率差异存在明显统计学意义(P<0.05),即优化后高卢蜜环菌的转化效率约为4.33%,相比于优化前提高了约8倍。 展开更多
关键词 遗传转化 高卢 体系优化
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高卢蜜环菌杂交菌株筛选初探 被引量:3
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作者 赵俊 赵杰 秦国夫 《食用菌学报》 2007年第4期31-35,共5页
提出蜜环菌单孢亲本菌株及杂交菌株的筛选标准,从114个高卢蜜环菌菌株中选出15个欧洲、北美及中国的单孢亲本菌株,通过杂交,筛选出6个具有杂交优势的组合(A3E3、A3C1、A3C3、A3C4、A3C3和A1C3)。
关键词 高卢 杂交 筛选
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