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丹参注射液诱导间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量:113
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作者 项鹏 夏文杰 +5 位作者 王连荣 陈振光 张丽蓉 张秀明 李艳 李树浓 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期321-324,I001,共5页
【目的】丹参注射液体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。【方法】采用Ficoll Paque液离心分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,分别采用含丹参注射液或硫代甘油等试剂的无血清达乐伯克改良必... 【目的】丹参注射液体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。【方法】采用Ficoll Paque液离心分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,分别采用含丹参注射液或硫代甘油等试剂的无血清达乐伯克改良必需基本培养基 (DMEM )诱导MSC分化为神经元 ,免疫组化鉴定神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白(NF M )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、巢蛋白 (nestin)的表达。【结果】成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得 0 5× 10 6,15代可获得 (2~ 3)× 10 12 个细胞 ,细胞流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD44、CD90、CD10 5、CD16 6表达阳性 ,CD11a、CD14、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性。加入丹参或硫代甘油诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF M、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 神经元 丹参注射液 细胞分化
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成人骨髓间质干细胞定向诱导为神经元样细胞的研究 被引量:56
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作者 项鹏 夏文杰 +4 位作者 张丽蓉 陈振光 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期385-387,I001,共4页
目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Ficoll -Paque液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,分别采用含巯基乙醇和硫代甘油等试剂的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴... 目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Ficoll -Paque液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,分别采用含巯基乙醇和硫代甘油等试剂的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增 5代可获 5× 10 7个细胞。加入巯基乙醇等或硫代甘油等诱导剂诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF表达阳性 ,GFAP阴性。结论 :成人骨髓间质干细胞在体外可以分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 神经元 神经系统疾病 MSC
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三七总皂甙诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量:57
3
作者 撒亚莲 李海标 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期409-410,437,共3页
【目的】用三七总皂甙 (totalPanaxnotoginsengsaponins)在体外定向诱导SD青年鼠骨髓间质干细胞 (mesenchy malstemcell,rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM冲洗骨髓腔 ,收集骨髓细胞悬液 ,接种在塑料培养瓶中。经体外扩增、... 【目的】用三七总皂甙 (totalPanaxnotoginsengsaponins)在体外定向诱导SD青年鼠骨髓间质干细胞 (mesenchy malstemcell,rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM冲洗骨髓腔 ,收集骨髓细胞悬液 ,接种在塑料培养瓶中。经体外扩增、纯化 ,选用第 5代后的间质干细胞进行诱导分化。用 10 μg/LbFGF预诱导 2 4h ,更换成含三七总皂甙的无血清培养基DMEM诱导间质干细胞分化为神经元样细胞。用免疫组化SABC法鉴定神经丝蛋白 (NF M )、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白 (nestin)、微管联合蛋白 2 (MAP 2 )、生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。【结果】第5代间质干细胞形态达到均一 ,呈梭形。用三七总皂甙诱导 30min到 5h ,间质干细胞胞体逐渐增大并伸出细长突起 ,形似神经细胞。免疫组化显示NF M、NSE、MAP 2、GAP 4 3、nestin表达阳性 ,而GFAP阴性。【结论】三七总皂甙可诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 三七总皂甙 骨髓间质干细胞 分化 神经元样细胞
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大鼠骨髓间质干细胞用中药绞股蓝诱导为神经细胞的研究 被引量:39
4
作者 董燕湘 董晓先 +1 位作者 何慧华 刘金保 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期355-358,共4页
目的 体外诱导大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)分化为神经细胞。方法 用SD大鼠股骨骨髓细胞体外培养。用绞股蓝总甙加入无血清L DMEM诱导MSC分化为神经细胞。免疫细胞化学鉴定有神经元烯醇化酶 (NSE)、神经干细胞标志物巢蛋白 (nestin)和... 目的 体外诱导大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)分化为神经细胞。方法 用SD大鼠股骨骨髓细胞体外培养。用绞股蓝总甙加入无血清L DMEM诱导MSC分化为神经细胞。免疫细胞化学鉴定有神经元烯醇化酶 (NSE)、神经干细胞标志物巢蛋白 (nestin)和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 大鼠骨髓间质干细胞在体外扩增 5~ 2 2代 ,对照组不加任何诱导剂 ,MSC可分化为神经样细胞 (5 3 1%± 4 3% )。加入绞股蓝诱导剂诱导 1~ 5h ,MSC形态转变为典型的神经样细胞(90 0 %± 4 6 % )。免疫细胞化学染色显示诱导出的神经样细胞 ,NSE、nestin、GFAP表达阳性。继续培养 12~ 19d ,5d后对照组所有细胞逐渐死亡。绞股蓝组持续诱导 12~ 19d后神经样细胞形态完好 ,大部分细胞变为圆形并聚集成团 ,NSE、nestin、GFAP表达阳性。如果换回正常培养液 ,神经样细胞可逆转回MSC并传代。结论 骨髓本身可能存在神经干细胞。大鼠骨髓间质干细胞用中成药绞股蓝诱导可分化为多种形态的神经样细胞。 展开更多
关键词 大鼠 骨髓间质干细胞 绞股蓝 神经细胞 细胞分化 免疫细胞化学 脑部疾病
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天麻诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究 被引量:31
5
作者 董晓先 刘金保 +1 位作者 董燕湘 肖庆忠 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期51-54,共4页
目的 :探讨天麻对体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞的影响。方法 :通过贴壁法分离大鼠MSC ,体外扩增培养。中药天麻定向诱导分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原... 目的 :探讨天麻对体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞的影响。方法 :通过贴壁法分离大鼠MSC ,体外扩增培养。中药天麻定向诱导分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志物神经原烯醇化酶 (NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、巢蛋白 (Nestin)。结果 :大鼠MSC可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。天麻诱导 2h后大部分可分化为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色NSE、Nestin呈阳性 ,GFAP阴性。结论 :大鼠MSC可诱导分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 天麻 诱导 骨髓间质干细胞 神经元样细胞 实验研究 中药
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多种中药成分诱导大鼠骨髓间质干细胞转变为神经元样细胞 被引量:32
6
作者 刘金保 董晓先 +4 位作者 董燕湘 何慧华 董伟华 梁仲培 肖庆忠 《中国药物与临床》 CAS 2003年第3期234-236,共3页
目的 体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神... 目的 体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。结果 大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD1 4、CD1 1α、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性 ,CD2 9、CD44、CD90、CD1 0 5、CD1 66呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导 1~ 3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (nestin)呈阳性 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阴性。 展开更多
关键词 中药成分 诱导 大鼠 骨髓间质干细胞 神经元样细胞
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黄连素诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量:31
7
作者 项平 李海标 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期51-53,共3页
目的 :黄连素体外定向诱导SD大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。方法 :用全骨髓细胞悬液体外扩增和纯化骨髓间质干细胞。选用第 5代以后骨髓间质干细胞进行诱导分化 ,用含 10 μg/L碱性细胞生长因子 (bFGF)的完全培养液预诱导 2 4... 目的 :黄连素体外定向诱导SD大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。方法 :用全骨髓细胞悬液体外扩增和纯化骨髓间质干细胞。选用第 5代以后骨髓间质干细胞进行诱导分化 ,用含 10 μg/L碱性细胞生长因子 (bFGF)的完全培养液预诱导 2 4h ,后更换含黄连素的无血清DMEM诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。免疫组化鉴定神经元烯醇酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 :大鼠骨髓间质干细胞体外扩增第 5代后细胞形态达到均一 ,成梭形。加黄连素诱导 1h -8h ,间质干细胞胞体逐渐增大并伸出细长突起 ,形似神经细胞。免疫组化显示诱导的神经元样细胞NSE、NF表达阳性 ,GFAP阴性。结论 展开更多
关键词 黄连素 大鼠 骨髓间质干细胞 神经元样细胞 细胞分化
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麝香组分诱导成年大鼠骨髓间质干细胞体外定向分化为神经元样细胞的能力 被引量:27
8
作者 肖庆忠 温冠媚 +4 位作者 李浩威 黄少华 张秀明 李艳 李树浓 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期405-408,F001,共5页
【目的】探讨麝香组分体外诱导成年大鼠骨髓间质干细胞 (adultratbonemarrowmesenchymalstemcells,rBMM SCs)定向分化为神经元样细胞的能力。【方法】分别采用含麝香多肽或麝香酮的L DMEM培养基体外定向诱导第 5代至 10代的rBMMSCs,并... 【目的】探讨麝香组分体外诱导成年大鼠骨髓间质干细胞 (adultratbonemarrowmesenchymalstemcells,rBMM SCs)定向分化为神经元样细胞的能力。【方法】分别采用含麝香多肽或麝香酮的L DMEM培养基体外定向诱导第 5代至 10代的rBMMSCs,并分别应用相差显微镜观察神经元样细胞和免疫细胞组化检测神经元样细胞所表达的神经干细胞特异性标志 (nestin)、神经元特异性标志 [神经元特异性烯醇化酶 (neuronspecificenolase ,NSE)和神经丝蛋白 (neurofilament ,NF) ]及星形胶质细胞特异性标志 [胶质纤维酸性蛋白 (gliafiberacidprotein ,GFAP) ],并进行神经元样细胞记数分析。【结果】成年大鼠BMMSCs在加入含麝香多肽的无血清L DMEM培养基诱导后 ,发现细胞胞体收缩 ,突起伸出 ,形似神经元 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。神经元样细胞记数分析发现 :rBMMSCs经过麝香多肽诱导后 ,NSE+ 神经元样细胞和NF H+ 神经元样细胞的比例分别高达 93 5和 88 2 %;而用含麝香酮的无血清L DMEM培养基却无上述变化。【结论】麝香多肽能在体外诱导rBMMSCs定向分化为神经元样细胞 ,而麝香酮却无此能力。 展开更多
关键词 麝香组分 大鼠 骨髓间质干细胞 体外定向 分化 神经元样细胞 麝香多肽 麝香酮
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骨髓间质干细胞降低大鼠移植物抗宿主反应的实验研究 被引量:36
9
作者 田莹 邓宇斌 +2 位作者 王亚柱 王晔 朱文标 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期29-33,共5页
目的探讨MSCs对GVHD的作用及其机制。方法建立大鼠同种异体骨髓移植模型,同时输入供者的T淋巴细胞诱导出移植物抗宿主反应,联合或不联合移植供体来源的MSCs,观察受鼠的生存时间,同时利用RT-PCR法研究Th1/Th2淋巴细胞亚群的比例,用ELISA... 目的探讨MSCs对GVHD的作用及其机制。方法建立大鼠同种异体骨髓移植模型,同时输入供者的T淋巴细胞诱导出移植物抗宿主反应,联合或不联合移植供体来源的MSCs,观察受鼠的生存时间,同时利用RT-PCR法研究Th1/Th2淋巴细胞亚群的比例,用ELISA法检测移植后体内IL-4细胞因子的浓度。结果GVHD组的平均生存时间为(17.30±2.33)天,实验组的平均生存时间为(24.10±2.36)天,与单独移植HSCs相比,MSCs与HSCs共移植明显延长的受鼠的生存时间。同时,GVHD组Th1/Th2细胞比值为1.29±0.06,IL-4因子的浓度平均为(14.84±2.59)pg/mL,实验组Th1/Th2细胞比值为(0.77±0.14),IL-4因子的浓度平均为(40.09±13.99)pg/mL。MSCs与HSCs共移植降低了体内Th1/Th2淋巴细胞亚群的比例,提高了体内IL-4细胞因子的浓度。结论MSCs与HSCs共移植能有效抑制HSCs移植后致死性GVHD的发生,延长生存时间,同时MSCs可能通过作用于体内Th1/Th2淋巴细胞亚群的比例,促进体内IL-4细胞因子的分泌从而间接发挥了抑制GVHD的作用。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 造血干细胞移植 同种异体移植 移植物抗宿主病
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丹参素定向诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究 被引量:34
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作者 余勤 罗依 +4 位作者 鄂艳 盛丽先 董勤 丁伟 郭莹 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期49-53,共5页
目的研究丹参素体外定向诱导骨髓间质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)分化为神经元样细胞。方法利用Ficoll Paque液将骨髓细胞进行密度梯度离心和贴壁筛选分离出MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达。采用含丹参素的无血清... 目的研究丹参素体外定向诱导骨髓间质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)分化为神经元样细胞。方法利用Ficoll Paque液将骨髓细胞进行密度梯度离心和贴壁筛选分离出MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达。采用含丹参素的无血清L DMEM诱导MSC分化为神经元样细胞 ,并且探讨丹参素不同浓度及不同作用时间对MSC诱导分化为神经元样细胞的影响。以免疫组化方法检测神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF M )、巢蛋白 (nestin)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果MSC在体外传代扩增后 ,流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD4 4、CD16 6表达阳性 ,CD14、CD34、CD4 5、HLA DR为阴性。丹参素诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ,呈典型的核周体形态 ,类似神经元 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF M、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。结论丹参素可以在体外诱导MSC分化为神经元样细胞 ,其诱导转化率与丹参素浓度和作用时间有关。 展开更多
关键词 丹参素 神经元样细胞 骨髓间质干细胞 表达 分化 MSC NF 结论 目的 典型
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骨形成蛋白-2基因转染人骨髓间质干细胞诱导异位成骨的实验研究 被引量:21
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作者 朱六龙 戴克戎 +4 位作者 汤亭亭 郁朝锋 徐旻 徐小良 楼觉人 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第2期131-135,共5页
目的 评价腺病毒介导的人骨形成蛋白 - 2基因 (Adv- h BMP- 2 )转染人骨髓间质干细胞 (MSCs)的诱导成骨能力。方法 从人骨髓中分离培养获取 MSCs,分为三组 :1Adv- h BMP- 2转染细胞组 ;2 Adv- βgal转染细胞组 ;3未转染细胞组。分别... 目的 评价腺病毒介导的人骨形成蛋白 - 2基因 (Adv- h BMP- 2 )转染人骨髓间质干细胞 (MSCs)的诱导成骨能力。方法 从人骨髓中分离培养获取 MSCs,分为三组 :1Adv- h BMP- 2转染细胞组 ;2 Adv- βgal转染细胞组 ;3未转染细胞组。分别于体外行 Western immunoblot试验、碱性磷酸酶 (AL P)和 Von Kossa染色、AL P定量测定 ,以及裸鼠肌内诱导成骨试验。共 9只裸鼠 ,双侧股后肌群内注射 ,每组 6侧。结果  Adv- h BMP- 2组 MSCs可分泌 BMP- 2蛋白 ;转染后第 9天 AL P染色多数细胞为阳性 ,其它两组 AL P染色阳性细胞少见 ;AL P活性第 3天开始升高 ,12天达高峰为 14 .76单位 ,与其它两组比较有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ;于第 2 1天后出现钙结节 ,而其它两组未见。裸鼠肌内注射后 4周 Adv- h BMP- 2组 X线片均有异位成骨 ,Adv- βgal转染细胞组未见明显成骨 ,未转染细胞组仅有少量骨形成。组织学检查发现 :Adv- h BMP- 2组也可见典型的板层骨和骨髓腔形成 ,Adv- βgal组主要为纤维组织 ,未转染组也可见散在骨小梁形成。结论  Adv- h BMP- 2基因转染可诱导人骨髓间质干细胞成骨。 展开更多
关键词 腺病毒 骨形成蛋白-2 基因治疗 骨髓间质干细胞 骨生成 骨缺损
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Effects of Buyang Huanwu Tang Combined with Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell Transplantation on the Expression of VEGF and Ki-67 in the Brain Tissue of the Cerebral Ischemia-Reperfusion Model Rat 被引量:30
12
作者 张运克 韩雪永 车志英 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2010年第4期278-282,共5页
Objective:To explore the mechanism of Buyang Huanwu Tang (补阳还五汤 Decoction Invigorating Yang for Recuperation) combined with bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) transplantation in protecting nerves of cerebr... Objective:To explore the mechanism of Buyang Huanwu Tang (补阳还五汤 Decoction Invigorating Yang for Recuperation) combined with bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) transplantation in protecting nerves of cerebral ischemic injury. Methods: Local cerebral ischemia-reperfusion rat model was established with modified Zea-Longa thread-occlusion method, and MSCs were injected into the caudal vein, and Buyang Huanwu Tang(补阳还五汤)was administrated. Vascular endothelial growth factor (VEGF) and Ki-67 expression in the ischemic side of the brain in the cerebral ischemic-reperfusion rat were detected with immuno-histochemical staining method. Results: VEGF and Ki-67 expressions were significantly up-regulated in the MSCs group and the combination group, with significant differences as compared with the model group and the sham operation group (P<0.05), and with the most strongest effect in the combination group. Conclusion: Buyang Huanwu Tang(补阳还五汤)combined with MSCs transplantation repairs the injured blood vessels and lesion tissues possibly by up-regulation of VEGF and Ki-67 expression. 展开更多
关键词 Buyang Huanwu Tang marrow mesenchymal stem cell cerebral ischemia-reperfusion immunohistochemical method vascular endothelial growth factor (VEGF) and Ki-67
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成年骨髓间质干细胞体外诱导分化成神经细胞研究 被引量:18
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作者 徐如祥 戴宜武 +4 位作者 姜晓丹 邹雨汐 刘智良 杜谋选 蔡颖谦 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2002年第1期63-67,共5页
目的 探索成年骨髓间质干细胞(ABMMSC)诱导分化为神经细胞(神经元和神经胶质细胞)的可行性,为ABMMSC在神经科学领域内的应用提供参考。方法 以成年犬ABMMSC为实验对象,利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、... 目的 探索成年骨髓间质干细胞(ABMMSC)诱导分化为神经细胞(神经元和神经胶质细胞)的可行性,为ABMMSC在神经科学领域内的应用提供参考。方法 以成年犬ABMMSC为实验对象,利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、维甲酸(RA)、脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞系源神经营养因子(GDNF)等作为增殖及分化诱导因子,采用两步法进行增殖培养,分化诱导;免疫细胞化学法进行细胞性质鉴定。结果 加和bFGF、EGF后增殖培养48h,换液、去除非粘附细胞,再增殖培养72h,可见细胞分裂相(成纤维细胞样细胞)和簇样克隆形成(中小型细胞)。加入RA、BDNF、GDNF诱导3d,部分细胞有神经元特异性烯醇酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)成分表达;第10d可见有神经元、神经胶质形态样细胞形成。经细胞成分(NSE、GFAP)鉴定证实为神经元、神经胶质细胞。结论ABMSC在体外培养条件下,经过bFGF、EGF、RA、BDNF、GDNF等因子的“程序性”作用,可以向神经元、神经胶质前体细胞及其终末细胞方向分化。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 分化 神经元 胶质细胞 体外诱导 成年人
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小鼠骨髓间质干细胞的生物学特点及分化潜能鉴定 被引量:19
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作者 周进明 邹仲敏 +6 位作者 郭朝华 何颖 张勇 王劲 王蒙 罗成基 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期58-61,共4页
目的 建立一种体外分离、培养和鉴定小鼠骨髓间质干细胞的方法 ,探讨体外培养中间质干细胞的一些生物学特点 ,为利用MSCs促进创伤修复提供实验基础。方法 分离 5~ 6周龄的小鼠胫骨、股骨 ,用预冷的IMDM培养基冲洗出骨髓 ,经密度梯度... 目的 建立一种体外分离、培养和鉴定小鼠骨髓间质干细胞的方法 ,探讨体外培养中间质干细胞的一些生物学特点 ,为利用MSCs促进创伤修复提供实验基础。方法 分离 5~ 6周龄的小鼠胫骨、股骨 ,用预冷的IMDM培养基冲洗出骨髓 ,经密度梯度离心得到骨髓单个核细胞 ,接种后 1 2~ 1 6d形成单层贴壁的成纤维状细胞。体外多向诱导分化鉴定分离的细胞 ,用传代的细胞进行生长曲线的测定、观察其接种贴壁率、检测细胞周期和超微结构。结果 体外传代培养的MSCs具有分化形成成骨和成脂细胞的能力 ;MSCs倍增时间约为 3 8h ,传代后 1 2h贴壁达 90 %以上 ,细胞周期显示有 80 %细胞处于G0 G1 期 ,并用电镜照片显示其超微结构。结论 在本实验条件下 ,体外培养的MSCs具有多向分化潜能 ,体外生长稳定 ,传代后的细胞适应性强 ,增殖较快 ,超微结构和细胞周期表现出较早期细胞特点。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 细胞培养 骨髓分化潜能 小鼠 造血干细胞
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体外定向诱导人骨髓间质干细胞分化为成骨细胞的研究 被引量:23
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作者 张丽蓉 夏文杰 +4 位作者 项鹏 陈振光 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期745-748,I001,共5页
目的 :建立体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为成骨细胞的模型。方法 :采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达 ,应用地塞米松、β -甘油磷酸钠、vitaminC定向诱导MSC分化为... 目的 :建立体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为成骨细胞的模型。方法 :采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达 ,应用地塞米松、β -甘油磷酸钠、vitaminC定向诱导MSC分化为成骨细胞 ,检测碱性磷酸酶 (AP)活性、钙沉积、骨桥蛋白的表达鉴定成骨细胞 ,比较P3和P10代MSC成骨分化的能力。结果 :MSC在体外扩增原代可获得 (5 - 6 )× 10 5个细胞 ,10代可获得 2× 10 10个细胞。流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD4 4、CD5 9、CD10 5、CD16 6表达阳性 ,CD11a、CD14、CD33、CD34、CD4 5、CD38、CD80、CD86、CD117表达为阴性。加入成骨诱导剂 ,细胞形态发生变化 ,AP活性增强 ,骨桥蛋白表达阳性 ,钙沉积逐渐出现。P3和P10代的MSC均有良好的分化为成骨细胞的能力。结论 :成人骨髓间质干细胞在体外可分化为成骨细胞。 展开更多
关键词 体外定向诱导 骨髓间质干细胞 成骨细胞 骨组织工程
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体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为胰岛素分泌细胞(英文) 被引量:17
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作者 贾延劼 钟乐 +3 位作者 宋建辉 罗芳 孙吉平 杨于嘉 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2003年第5期393-397,F004,共6页
目的探索大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法。为解决胰岛移植物来源匮乏这一问题提供新的思路。方法 采用横向分化技术,将成年大鼠骨髓间质干细胞诱导成为胰岛素分泌细胞。间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、... 目的探索大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法。为解决胰岛移植物来源匮乏这一问题提供新的思路。方法 采用横向分化技术,将成年大鼠骨髓间质干细胞诱导成为胰岛素分泌细胞。间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素及Pdx-1的表达,RT-PCR法检测诱导前后细胞nestin,胰岛素-1,葡萄糖转运子-2,葡萄糖激酶及其转录因子Isl-1,Pdx-1,Pax-4和Pax-6 mRNA的表达;测定24 h胰岛素分泌量和胰岛素刺激实验评价诱导前后细胞的功能。结果 诱导5 h,nestin阳性细胞为(44.6±7.3)%;诱导24 h,nestin阳性细胞增至(61.8±8.4)%;此后,nestin阳性细胞数目开始下降,诱导第14天后,nestin表达基本消失。诱导后的胰岛素分泌细胞可以表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素和Pdx-1等蛋白;表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2、葡萄糖激酶及其多种转录因子mRNA;胰岛素分泌量增加;胰岛素刺激实验反应敏感等。而诱导前MSCc不县备上述特点。结论 大鼠骨髓间质干细胞体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞,为胰岛移植开辟新的研究思路。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 胰岛素分泌细胞 细胞分化 胰岛移植
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转染骨形态发生蛋白-2基因的人骨髓间质干细胞复合异种骨支架异位成骨的效果 被引量:18
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作者 李建军 王文军 +4 位作者 韩冬 景元海 王宏 王玲 徐莘香 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期347-350,共4页
目的 观察骨形态发生蛋白 - 2 (BMP - 2 )基因转染的人骨髓间质干细胞复合异种骨支架异位成骨效果。 方法 分组 :(1)BMP - 2基因转染细胞 +异种骨支架 [去抗原牛松质骨 (BCB) ];(2 )对照基因转染细胞 +BCB ;(3)未转染细胞 +重组BMP -... 目的 观察骨形态发生蛋白 - 2 (BMP - 2 )基因转染的人骨髓间质干细胞复合异种骨支架异位成骨效果。 方法 分组 :(1)BMP - 2基因转染细胞 +异种骨支架 [去抗原牛松质骨 (BCB) ];(2 )对照基因转染细胞 +BCB ;(3)未转染细胞 +重组BMP - 2 +BCB ;(4)未转染细胞+BCB ;(5 )BCB。分别将各组人工骨植入裸鼠皮下 ,于术后 4 ,8周行组织学观察。 结果 体内植入后 3d ,细胞持续表达外源基因。BMP - 2基因转染组 8周时完全由新形成的编织骨构成 ,血管丰富。 结论 BMP - 2基因转染后细胞复合BCB支架 ,可以在异位形成骨组织并诱导毛细血管长入。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白-2 基因转染 骨髓间质干细胞 异种骨支架 异位成骨 基因治疗 骨生成 BMP-2
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BMP-2和FGF-2对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响 被引量:25
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作者 张为西 陈松林 +4 位作者 姚晓黎 卢锡林 周琛 冷雁 Xingming Shi 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1062-1065,共4页
目的:观察骨形成蛋白(BMP-2)和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的影响。方法:取3-18月雄性C57BL/6J小鼠(共50只)的骨髓细胞,分离贴壁培养后,用免疫磁珠法纯化,并鉴定为MSCs后,再进行... 目的:观察骨形成蛋白(BMP-2)和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的影响。方法:取3-18月雄性C57BL/6J小鼠(共50只)的骨髓细胞,分离贴壁培养后,用免疫磁珠法纯化,并鉴定为MSCs后,再进行贴壁培养24h后,分别在成骨细胞诱导培养液中加入100μg/LBMP-2和0.5nmol/LFGF-2持续诱导7、14、21d后,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测,Vonkossa染色以及茜素红染色,并用递转录荧光定量PCR法检测向成骨细胞分化的标志性基因(Runx2/cbfa1、Alp、collagen-1、osteocalcin)的表达情况。结果:BMP-2刺激组的ALP活性以及钙化结节明显高于对照组,Runx2/cbfa1,ALP,collage-1,osteocalcin的mRNA呈高表达;FGF-2刺激组的ALP活性以及钙化结节也高于对照组,Runx2/cbfa1、Alp、collagen-1、osteocalcin的mRNA表达量也高于对照组,但不如BMP-2明显。结论:BMP-2和FGF-2在不同程度上促进体外培养的小鼠MSCs向成骨细胞方向分化。 展开更多
关键词 小鼠 骨髓间质干细胞 BMP-2 FGF-2
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骨髓间质干细胞复合多孔磷酸钙陶瓷修复兔颅骨缺损的研究 被引量:20
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作者 薄斌 王常勇 +5 位作者 郭希民 赵强 段翠密 王永红 张旭辉 卢建熙 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第4期335-338,共4页
目的 探讨以骨髓间质干细胞 (MSCs)作为种子细胞、β-磷酸三钙 (β- TCP)多孔生物陶瓷作为支架材料构建组织工程化人工骨 ,修复兔实验性颅骨标准缺损的可行性。 方法 选择 5月龄新西兰大白兔 34只 ,制作颅骨标准缺损后分成 3组。A组 ... 目的 探讨以骨髓间质干细胞 (MSCs)作为种子细胞、β-磷酸三钙 (β- TCP)多孔生物陶瓷作为支架材料构建组织工程化人工骨 ,修复兔实验性颅骨标准缺损的可行性。 方法 选择 5月龄新西兰大白兔 34只 ,制作颅骨标准缺损后分成 3组。A组 (n=2 0 ) :分离培养兔同胎异体 MSCs,体外扩增后接种到预制的 β- TCP多孔生物陶瓷材料上 ,细胞 -材料复合体经体外孵育后 ,无菌条件下植入颅骨缺损 ;B组 (n=10 ) :采用单纯β- TCP材料修复兔颅骨缺损 ;C组(n=4 ) :兔实验性颅骨标准缺损区未做骨修复。术后 6周和 12周分别处死动物、取材 ,进行缺损区大体、组织学、组织化学和免疫组织化学分析。 结果 颅骨缺损处 A组术后 6周表面肉眼可见骨样组织形成 ,组织学提示材料部分降解 ,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生骨组织 ,成骨细胞外基质丰富 , 型胶原染色阳性 ;术后 12周 ,支架材料几乎完全降解 ,缺损区被新生骨组织所取代。B组术后 6周 ,可见从缺损区边缘有新生骨组织向支架材料内长入 ,支架材料部分吸收 ;术后 12周 ,可见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生骨组织逐渐增多 ,但材料的中心部位未发现新生骨形成。C组术后 12周 ,仅见少量骨组织从缺损区边缘向缺损区内长入 ,缺损中央大部分区域未得到修复。 展开更多
关键词 颅骨缺损 骨髓间质干细胞 多孔磷酸钙陶瓷 修复 组织工程骨
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中国组织工程研究回顾与发展 被引量:16
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作者 曹谊林 崔磊 刘伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期485-486,共2页
关键词 组织工程学 研究 发展 中国 胚胎干细胞 培养 诱导分化 鉴定 骨髓间质干细胞 分离 纯化
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