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PDGFRβ-PI3K信号轴介导骨折愈合过程中骨膜细胞激活的分子机制研究
1
作者 李伍建 何少波 +2 位作者 任聪 郑琎喆 刘继超 《检验医学与临床》 CAS 2024年第15期2265-2269,共5页
目的验证血小板源性生长因子受体β/磷酸肌醇3-激酶(PDGFRβ-PI3K)相互作用对于介导骨折后强大的骨膜细胞活化是否有必要。方法收集正常活动或骨折手术后3 d的小鼠骨膜细胞进行体外原代培养,分为空白组、阴性组、shPDGFβ组和各预处理组... 目的验证血小板源性生长因子受体β/磷酸肌醇3-激酶(PDGFRβ-PI3K)相互作用对于介导骨折后强大的骨膜细胞活化是否有必要。方法收集正常活动或骨折手术后3 d的小鼠骨膜细胞进行体外原代培养,分为空白组、阴性组、shPDGFβ组和各预处理组,空白组不做任何处理,阴性组和shPDGFβ组分别转染对照shRNA和PDGFRβshRNA慢病毒,72 h后用于实验,各预处理组包括用生长因子(PDGF-BB,10 ng/mL)、PDGFR抑制剂(SU16f,5μmol/L)、小分子AKT激活剂(SC79,4μg/mL)或PI3K激活剂(740 Y-P,25 nmol/L)单独或序贯处理30 min。采用Western blot试验、流式细胞术、EdU染色实验检测各组细胞蛋白表达水平和增殖活力。结果与正常活动小鼠的骨膜细胞比较,骨折小鼠的骨膜细胞中PDGFRβ蛋白表达水平升高约2.31倍。通过流式细胞术验证,骨折小鼠骨膜细胞中PDGFRβ阳性率为(73.26±3.17)%。在骨折小鼠的骨膜细胞实验中,shPDGFRβ组细胞p-AKT蛋白表达水平均低于空白组和阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05);而PDGF-BB组和SC79组细胞p-AKT蛋白表达水平一致,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组(PI3K:1.22±0.09,p-Tyr-PDGFRβ:0.01±0.01)比较,PI3K激活剂740 Y-P组可上调PI3K水平(1.67±0.13)和p-Tyr-PDGFRβ水平(0.07±0.01),差异均有统计学意义(P<0.05),但对PDGFβ水平无明显干扰。另外,与740 Y-P组[p-AKT(Ser473):0.32±0.03]比较,740 Y-P+PDGF-BB组进一步上调了骨膜细胞中p-Tyr-PDGFRβ水平(0.19±0.01)和p-AKT(Ser473)水平(0.51±0.05),差异均有统计学意义(P<0.05)。在体外增殖实验中,没有对于用740 Y-P预处理的细胞,加入PDGF-BB后,细胞增殖活性几乎恢复至阴性组水平,明显高于未用740 Y-P预处理的细胞。结论PDGFRβ-PI3K信号轴对于骨折愈合早期阶段的骨膜活化是有必要的。 展开更多
关键词 血小板源性生长因子受体β 磷脂酰肌醇3-激酶 骨折愈合 骨膜活化 分子机制
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自体骨膜活化多孔陶瓷块修复长骨干缺损的实验研究
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作者 张聪 汪建新 +2 位作者 冯怀志 卢冰 张兴栋 《西南国防医药》 CAS 2002年第6期503-506,F003,共5页
目的:利用自体骨膜中所含成骨细胞及生长因子与多孔生物活性陶瓷复合,制备一种活化的骨替代材料,修复长骨干缺损。方法:从21只狗的股骨干上切取骨膜片,吸附包裹于25cm长1.5Cm、直径1.2Cm、中心有一孔的柱状陶瓷块表面;然后植入自体股部... 目的:利用自体骨膜中所含成骨细胞及生长因子与多孔生物活性陶瓷复合,制备一种活化的骨替代材料,修复长骨干缺损。方法:从21只狗的股骨干上切取骨膜片,吸附包裹于25cm长1.5Cm、直径1.2Cm、中心有一孔的柱状陶瓷块表面;然后植入自体股部肌群内,1月后将其中4块取出作组织学观察,了解异位成骨情况。另21块直接移植替代相应大小的股骨干缺损。分别于2月、4月、6月取出替代骨段(含材料及相临骨组织)作生物力学测定、X线衍射分析和组织学观察。结果:植入肌内1月时,陶瓷块表面的骨膜增生变厚,骨膜-材料界面成骨细胞大量增生并向陶瓷空隙内爬行,可见新骨形成。植入骨缺损后,随时间延长,抗弯强度逐渐增加,6月时已接近正常骨的抗弯强度。X线衍射分析提示,2月时TCP迅速降解,6月时的X线转靶谱图已接近自体骨。组织学观察,2月时新生骨组织迅速增加,植入物与上下骨面融合。4月和6月时,大部分材料为新生骨组织所替代,新骨比例远大于陶瓷材料,植入物内大量骨小梁形成,哈佛系统清晰可见,成熟骨组织充满材料的孔隙并相互连接。结论:实验结果提示,用自体骨膜与双相多孔陶瓷复合在自体内培养,可使骨膜中的生长因子及成骨细胞活跃,从而提高陶瓷材料的生物活性,用于修复长骨干缺损可加速新骨形成,达到负重骨替代的目的。 展开更多
关键词 自体骨膜活化 多孔陶瓷块 修复 长骨干缺损 实验研究
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