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雷公藤红素对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响 被引量:6
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作者 杨益 唐文军 +1 位作者 卓曼云 王隆辉 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期1788-1790,共3页
目的探究雷公藤红素对骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡的影响。方法取骨肉瘤Saos-2细胞,分为低、中、高剂量实验组,分别以1.0,2.5,4.0μmol·L-1雷公藤红素处理,对照组细胞以等量0.9%NaCl处理。给药48h后,用CCK-8法检测骨肉瘤Saos-2细... 目的探究雷公藤红素对骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡的影响。方法取骨肉瘤Saos-2细胞,分为低、中、高剂量实验组,分别以1.0,2.5,4.0μmol·L-1雷公藤红素处理,对照组细胞以等量0.9%NaCl处理。给药48h后,用CCK-8法检测骨肉瘤Saos-2细胞增殖情况,用Hoechst33258染色检测骨肉瘤Saos-2细胞凋亡率,用蛋白免疫印迹法检测骨肉瘤Saos-2细胞凋亡相关蛋白表达情况。给药24h后,用流式细胞术检测骨肉瘤Saos-2细胞活性氧自由基(ROS)水平。结果给药48h后,对照组及低、中、高剂量实验组骨肉瘤Saos-2细胞存活率分别为(97.25±1.24)%,(52.07±4.63)%,(44.14±4.56)%,(23.06±4.12)%;凋亡率分别为(6.31±2.47)%,(15.03±2.54)%,(19.79±2.26)%,(33.49±2.51)%;半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白相对表达量分别为0.09±0.02,0.43±0.07,0.96±0.11,1.13±0.10;半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)蛋白相对表达量分别为1.23±0.23,0.84±0.19,0.71±0.15,0.46±0.05;B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白相对表达量分别为0.95±0.14,0.89±0.13,0.81±0.11,0.37±0.06;Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量分别为0.36±0.02,0.55±0.04,0.78±0.07,0.86±0.09;给药24h后,ROS荧光强度值分别为0.36±0.13,1.32±0.69,1.76±0.81,2.74±0.88。低、中、高剂量实验组的上述指标分别与与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论雷公藤红素可通过上调骨肉瘤Saos-2细胞ROS水平及促凋亡蛋白Caspase-3,Bax表达,下调抑凋亡蛋白Caspase-9,Bcl-2表达,进而抑制其增殖,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤saos-2细胞 雷公藤红素 活性氧
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RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响 被引量:1
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作者 施鑫鹤 耿晢 +4 位作者 施星臣 马克君 朱宏文 任雯 周雅丽 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期604-609,共6页
目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对... 目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对照si RNA,并与p SIREN-retro Q质粒连接。将重组p SIREN-retro Q质粒通过Lipofectamine 2000脂质体转染骨肉瘤Saos-2细胞。实时PCR和Western blot分别检测MBP-1表达。CCK-8法对MBP-1沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长进行检测。Western blot检测对照组和沉默组cyclin D1和cyclin E的表达。结果通过PCR扩增及测序,说明已成功构建MBP-1沉默及对照重组p SIREN-retro Q质粒。实时PCR结果显示,沉默组MBP-1 m RNA相对表达量与对照组相比显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,沉默组MBP-1蛋白表达量与对照组相比也显著下调。CCK-8法结果表明,沉默组细胞在48、72和96 h时增殖能力均比对照组显著升高(P<0.05)。沉默组cyclin D1和cyclin E的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论 MBP-1基因沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长被明显促进,为寻找骨肉瘤基因治疗新靶点打下基础。 展开更多
关键词 骨肉瘤saos-2细胞 RNA干扰 c-myc启动子结合蛋白1 细胞生长
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siRNA沉默TAp73对骨肉瘤细胞的增殖和侵袭力的作用研究 被引量:2
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作者 薛剑 靳安民 +1 位作者 吕海 闵少雄 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第2期170-173,179,共5页
目的探讨通过siRNA沉默细胞TAp73蛋白表达对骨肉瘤Saos-2细胞的增殖、周期以及侵袭力的作用研究。方法以骨肉瘤Saos-2细胞系为研究对象,设计合成沉默TAp73的siRNA片段,转染入Saos-2细胞,用Western-blot法检测干扰后TAp73蛋白的表达水平,... 目的探讨通过siRNA沉默细胞TAp73蛋白表达对骨肉瘤Saos-2细胞的增殖、周期以及侵袭力的作用研究。方法以骨肉瘤Saos-2细胞系为研究对象,设计合成沉默TAp73的siRNA片段,转染入Saos-2细胞,用Western-blot法检测干扰后TAp73蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,利用流式细胞仪检测细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力。结果 Western-blot检测显示siRNA对TAp73蛋白表达有显著下调作用;CCK-8检测实验组细胞增殖明显(P<0.05);细胞周期检测显示细胞处于DNA合成期(S期)的细胞比例上升;穿过人工基底膜的细胞数量也明显增加,由(84.17±1.35)增加为(92.67±2.80)(P<0.05)。结论抗癌基因TAp73在骨肉瘤的增殖、凋亡和侵袭过程中发挥有重要作用,可能成为控制肿瘤增殖和转移的关键性因素。 展开更多
关键词 骨肉瘤saos-2细胞 TAp73 SIRNA 侵袭 增殖
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松乳菇多糖对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡和迁移的影响 被引量:7
4
作者 江波 张雅稚 《中医学报》 CAS 2019年第8期1680-1685,共6页
目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC... 目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响;Transwell小室法检测细胞的侵袭和迁移能力;Western blot法检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白和核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路蛋白的表达。结果:松乳菇多糖以时间和浓度依赖性抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,促进人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞侵袭和迁移,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞COX-2、NF-κB和NF-κB p65蛋白的表达。结论:松乳菇多糖可抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,降低其侵袭和迁移能力,其作用机制可能与阻滞NF-κB信号通路和下调COX-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 松乳菇多糖 骨肉瘤saos-2细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移能力 NF-ΚB COX-2
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银杏内脂B对人骨肉瘤Saos-2细胞的抑制作用研究
5
作者 章磊 孙畅 +2 位作者 流小舟 吴苏稼 黎承军 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第2期107-113,共7页
目的探讨银杏内脂B(GB)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2... 目的探讨银杏内脂B(GB)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2细胞凋亡率,Transwell小室迁移与侵袭实验检测GB对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响;提取GB处理后Saos-2细胞的mRNA和蛋白,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9的基因及蛋白表达水平,Western blotting法检测Erk和Akt磷酸化及cleaved-caspase-3水平。结果 GB能明显抑制Saos-2细胞的增殖,且呈时间和浓度依赖性,600和1200μmol/L GB可诱导Saos-2细胞凋亡,GB对Saos-2细胞的迁移及侵袭的抑制作用呈浓度依赖性;GB可升高Bax mRNA和蛋白水平,但降低Bcl-2、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白水平;高浓度GB能抑制Erk和Akt的磷酸化且升高cleaved-caspase-3水平。结论 GB具有抑制Saos-2细胞增殖及迁移侵袭和诱导细胞凋亡作用,其机制可能与抑制Erk和Akt磷酸化有关。 展开更多
关键词 骨肉瘤saos-2细胞 银杏内脂B 增殖 凋亡 侵袭
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