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hpRNA的茎环比例对RNA介导的病毒抗性产生的影响 被引量：7
1
作者 李云 宋云枝 +1 位作者 朱常香 温孚江 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期468-477,共10页
以马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因3′端50bp片段为hpRNA的茎,以pUC19不同长度的序列为hpRNA的环,构建了茎环比例分别为4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4和1∶8的植物表达载体。利用农杆菌介导法转化烟草品种NC... 以马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因3′端50bp片段为hpRNA的茎,以pUC19不同长度的序列为hpRNA的环,构建了茎环比例分别为4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4和1∶8的植物表达载体。利用农杆菌介导法转化烟草品种NC89,获得了多种转基因植株。室内抗病性检测发现:不同茎环比例的hpRNA介导的病毒抗性效率不同;茎环比例为4∶1、2∶1和1∶1时效率较高,抗性植株的比例达60%左右;随着环长度的逐渐增加,抗性植株的比例逐渐降低;当茎环比例为1∶8时,抗性植株的比例仅为9.52%。Southern blot分析结果表明:外源基因已整合于烟草的基因组中,且转基因植株的抗病性与转基因的拷贝数之间无明显的相关性。Northern blot分析结果表明:目的片段转录产物的积累量与植株的抗病性呈负相关,证明所获得的抗病性是RNA介导的。 展开更多
关键词 ^马铃薯y病毒坏死株系(pvy^n) RnA介导的病毒抗性 HPRnA 茎环比例
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烟草感染马铃薯Y病毒脉坏死株系后内源激素的变化 被引量：6
2
作者 钟丽娟 赵秀香 +2 位作者 贾玉才 宋影 吴元华 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第15期3724-3725,共2页
研究了烟草抗病品种VAM和感病品种K326感染马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)后体内乙烯和吲哚乙酸(IAA)的变化及其与发病的关系。结果表明,乙烯生成速率增加和IAA含量的升高与PVYN引起的烟草叶脉坏死密切相关。抗病品种VAM随接种时间的延长... 研究了烟草抗病品种VAM和感病品种K326感染马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)后体内乙烯和吲哚乙酸(IAA)的变化及其与发病的关系。结果表明,乙烯生成速率增加和IAA含量的升高与PVYN引起的烟草叶脉坏死密切相关。抗病品种VAM随接种时间的延长,乙烯生成速率和IAA含量的变化比较平缓,而感病品种K326随症状表现的加重,乙烯生成速率和IAA含量的变化非常显著。 展开更多
关键词 烟草 ^马铃薯y病毒脉坏死株系(pvy^n) 乙烯 吲哚乙酸
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巢式-多重RT-Realtime PCR检测马铃薯Y病毒脉坏死株系的方法 被引量：1
3
作者 粟智平 耿金培 +2 位作者 杨益娥 钟响 张京萱 《检验检疫科学》 2009年第4期8-11,共4页
马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Yvein necrosis strain,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本研究根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependentRNA polymerase,RDRP)基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一... 马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Yvein necrosis strain,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本研究根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependentRNA polymerase,RDRP)基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一条TaqMAN荧光探针,建立了巢式-多重RT-Real-time PCR检测PVYn的新方法。该方法采用E.Z.N.ATM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术。实验结果表明,本方法检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Real time PCR等方法高。该方法检测灵敏度可达3 fg/μL植物总RNA。利用四对引物和一条TaqMAN探针对PCR阳性产物进行确认,检测的准确性比其它方法高。 展开更多
关键词 ^马铃薯y病毒脉坏死株系(pvy^n) 巢式-多重RT-RealtimePCR 检测
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