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抗MATSA单克隆抗体的制备与鉴定
被引量：
1
1
作者
王业荣
李立
+1 位作者
刘文明
童德文
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2009年第6期25-28,共4页
【目的】制备抗鸡马立克氏病肿瘤相关表面抗原（Marek＇s disease tumor-associated surface antigen,MATSA）的单克隆抗体（Monoclonal antibodies,McAb）,为马立克氏病的相关研究及研制以MATSA单克隆抗体为载体的抗肿瘤药物提供材料...
【目的】制备抗鸡马立克氏病肿瘤相关表面抗原（Marek＇s disease tumor-associated surface antigen,MATSA）的单克隆抗体（Monoclonal antibodies,McAb）,为马立克氏病的相关研究及研制以MATSA单克隆抗体为载体的抗肿瘤药物提供材料。【方法】用纯化的MATSA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,并对其染色体进行分析。将阳性杂交瘤细胞株接种Balb/c小鼠,制备McAb腹水,采用硫酸铵盐析法粗提McAb,并鉴定其所属亚类。【结果】获得了3株能稳定分泌MATSA McAb的杂交瘤细胞株B3、H6和D6,其培养上清液抗体效价为2^6-2^7,Balb/c小鼠接种细胞制得的腹水效价为2^10-2^11。染色体分析结果显示,3株杂交瘤细胞染色体数目均为52±2对。3株杂交瘤细胞株所分泌的McAb均为IgG 2b亚类,可与MSB1细胞反应。【结论】获得了MATSA的McAb。
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关键词
马立克
氏
病
肿瘤
相关
表面抗原
单克隆抗体
杂交瘤细胞株
下载PDF
职称材料
马立克病肿瘤相关抗原间接ELISA检测方法的建立
被引量：
2
2
作者
穆杨
王玉东
+5 位作者
张彦明
李崴
李玉清
郑增忍
高敬
童德文
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期538-542,共5页
用自制并纯化的马立克病肿瘤相关表面抗原(MATSA)免疫SPF级BALB／c小鼠制备阳性对照抗体,以SPF级BALB／c小鼠血清为阴性对照抗体,筛选间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。结果,包被液为0．1 mol／L pH 9．6的碳酸盐缓冲液,抗原包被...
用自制并纯化的马立克病肿瘤相关表面抗原(MATSA)免疫SPF级BALB／c小鼠制备阳性对照抗体,以SPF级BALB／c小鼠血清为阴性对照抗体,筛选间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。结果,包被液为0．1 mol／L pH 9．6的碳酸盐缓冲液,抗原包被浓度为4μg／mL,封闭液为含10 g／L BSA的PBST,抗血清稀释比例为1:800,酶标抗体稀释比例为1:1200,酶标抗体作用时间为37℃温育45 min,底物作用时间为37℃温育15 min,终止液为2 mol／L H2SO4,洗涤4次,每次1min为最佳反应条件。将建立的方法应用于MATSA单克隆抗体研制过程中阳性克隆的筛选,成功获得了MATSA的单克隆抗体,表明该优化条件为间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。
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关键词
马立克
病
肿瘤
相关
表面抗原
间接ELISA
条件
筛选
下载PDF
职称材料
MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化
3
作者
穆杨
张彦明
+4 位作者
童德文
王玉东
李崴
李玉清
郑增忍
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2006年第12期1-5,共5页
将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1...
将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1细胞进行间接荧光抗体染色以检测M ATSA的分离情况。获得的M ATSA粗提物经超滤浓缩和Sephadex G-75凝胶纯化后,用SDS-PAGE检测纯化的结果。试验结果表明,从M SB 1细胞表面分离到M ATSA,经电泳获得了纯化的M ATSA,其相对分子质量约为35 ku。结果为M ATSA单克隆抗体的制备及其相关的研究奠定了基础。
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关键词
MSB1
马立克
病
肿瘤
相关
表面抗原
MATSA的分离与纯化
下载PDF
职称材料
题名
抗MATSA单克隆抗体的制备与鉴定
被引量：
1
1
作者
王业荣
李立
刘文明
童德文
机构
西北农林科技大学动物医学院
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2009年第6期25-28,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30371067)
西北农林科技大学青年学术骨干支持计划项目(11241)
文摘
【目的】制备抗鸡马立克氏病肿瘤相关表面抗原（Marek＇s disease tumor-associated surface antigen,MATSA）的单克隆抗体（Monoclonal antibodies,McAb）,为马立克氏病的相关研究及研制以MATSA单克隆抗体为载体的抗肿瘤药物提供材料。【方法】用纯化的MATSA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,并对其染色体进行分析。将阳性杂交瘤细胞株接种Balb/c小鼠,制备McAb腹水,采用硫酸铵盐析法粗提McAb,并鉴定其所属亚类。【结果】获得了3株能稳定分泌MATSA McAb的杂交瘤细胞株B3、H6和D6,其培养上清液抗体效价为2^6-2^7,Balb/c小鼠接种细胞制得的腹水效价为2^10-2^11。染色体分析结果显示,3株杂交瘤细胞染色体数目均为52±2对。3株杂交瘤细胞株所分泌的McAb均为IgG 2b亚类,可与MSB1细胞反应。【结论】获得了MATSA的McAb。
关键词
马立克
氏
病
肿瘤
相关
表面抗原
单克隆抗体
杂交瘤细胞株
Keywords
MATSA
monoclonal antibody
hybridoma cell strain
分类号
S859.8 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
马立克病肿瘤相关抗原间接ELISA检测方法的建立
被引量：
2
2
作者
穆杨
王玉东
张彦明
李崴
李玉清
郑增忍
高敬
童德文
机构
西北农林科技大学动物科技学院
农业部动物检疫所
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期538-542,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30371067)霍英东教育基金资助项目(91033)
文摘
用自制并纯化的马立克病肿瘤相关表面抗原(MATSA)免疫SPF级BALB／c小鼠制备阳性对照抗体,以SPF级BALB／c小鼠血清为阴性对照抗体,筛选间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。结果,包被液为0．1 mol／L pH 9．6的碳酸盐缓冲液,抗原包被浓度为4μg／mL,封闭液为含10 g／L BSA的PBST,抗血清稀释比例为1:800,酶标抗体稀释比例为1:1200,酶标抗体作用时间为37℃温育45 min,底物作用时间为37℃温育15 min,终止液为2 mol／L H2SO4,洗涤4次,每次1min为最佳反应条件。将建立的方法应用于MATSA单克隆抗体研制过程中阳性克隆的筛选,成功获得了MATSA的单克隆抗体,表明该优化条件为间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。
关键词
马立克
病
肿瘤
相关
表面抗原
间接ELISA
条件
筛选
Keywords
MATSA
indirect ELISA
condition
screening
分类号
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化
3
作者
穆杨
张彦明
童德文
王玉东
李崴
李玉清
郑增忍
机构
西北农林科技大学动物科技学院
农业部动物检疫所
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2006年第12期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30371067)
霍英东教育基金项目(91033)
文摘
将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1细胞进行间接荧光抗体染色以检测M ATSA的分离情况。获得的M ATSA粗提物经超滤浓缩和Sephadex G-75凝胶纯化后,用SDS-PAGE检测纯化的结果。试验结果表明,从M SB 1细胞表面分离到M ATSA,经电泳获得了纯化的M ATSA,其相对分子质量约为35 ku。结果为M ATSA单克隆抗体的制备及其相关的研究奠定了基础。
关键词
MSB1
马立克
病
肿瘤
相关
表面抗原
MATSA的分离与纯化
Keywords
MSB1
marek＇s disease tumor-associated surface antigen
separation and purification of MATSA
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗MATSA单克隆抗体的制备与鉴定
王业荣
李立
刘文明
童德文
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2009
1
下载PDF
职称材料
2
马立克病肿瘤相关抗原间接ELISA检测方法的建立
穆杨
王玉东
张彦明
李崴
李玉清
郑增忍
高敬
童德文
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
下载PDF
职称材料
3
MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化
穆杨
张彦明
童德文
王玉东
李崴
李玉清
郑增忍
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2006
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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