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大鼠颌骨与胫骨骨髓基质细胞生物学特性和基因表达差异的比较 被引量：3
1
作者 金辰怡 刘宏伟 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2016年第3期162-169,共8页
目的 :比较大鼠颌骨来源骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨来源骨髓基质细胞(T-BMSCs)生物学特性的差异。方法:体外通过全骨髓贴壁法,分离和培养SD大鼠M-BMSCs和T-BMSCs,取第3代细胞用于:1流式细胞检测鉴定表面标志;2MTT、细胞周期、克隆形... 目的 :比较大鼠颌骨来源骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨来源骨髓基质细胞(T-BMSCs)生物学特性的差异。方法:体外通过全骨髓贴壁法,分离和培养SD大鼠M-BMSCs和T-BMSCs,取第3代细胞用于:1流式细胞检测鉴定表面标志;2MTT、细胞周期、克隆形成率检测细胞增殖能力差异;3成骨、成脂诱导及染色检测细胞多项分化潜能;4碱性磷酸酶(ALP)活性、染色、免疫荧光染色检测细胞成骨活性的差异;5荧光定量PCR检测Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I的表达差异和成骨诱导后各基因的表达变化。结果:1 M-BMSCs和T-BMSCs阳性表达CD29、CD44,阴性表达CD45;2MTT、细胞周期检测、克隆形成率显示T-BMSCs细胞增殖能力较高;3M-BMSCs在成骨诱导后矿化能力更强;而T-BMSCs成脂诱导形成脂滴的能力更强;4M-BMSCs表达ALP的水平更高;5荧光定量PCR示2种细胞的Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、ColⅠ表达存在差异。结论:体外培养的M-BMSCs和TBMSCs有着不同的生物学特点,其相关基因Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、ColⅠ的表达上存在差异。 展开更多
关键词 颌骨骨髓基质细胞 胫骨骨髓基质细胞 WNT1 WNT5A HOXA11
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颌骨骨髓基质细胞对牙周膜细胞生物学特性的影响 被引量：3
2
作者 金振宇 刘宏伟 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2016年第1期22-27,共6页
目的观察间接共培养犬颌骨骨髓基质细胞(canine maxillary bone marrow stromal cells,c M-BMSCs)对犬牙周膜细胞(canine periodontal ligament cells,c PDLCs)生物学特性的影响。方法原代培养犬颌骨骨髓基质细胞和犬牙周膜细胞。MTT法... 目的观察间接共培养犬颌骨骨髓基质细胞(canine maxillary bone marrow stromal cells,c M-BMSCs)对犬牙周膜细胞(canine periodontal ligament cells,c PDLCs)生物学特性的影响。方法原代培养犬颌骨骨髓基质细胞和犬牙周膜细胞。MTT法检测犬牙周膜细胞增殖速率;利用Transwell结构建立犬颌骨骨髓基质细胞与犬牙周膜细胞共培养体系;q PCR法检测犬牙周膜细胞矿化相关基因核心结合因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)的变化;Western印迹法检测Runx2和OCN蛋白的表达变化。构建牙片/细胞膜片复合体植入裸鼠皮下。结果两种细胞体外均贴壁生长,呈纺锤状外形;颌骨骨髓基质细胞间接共培养下对牙周膜细胞增殖有抑制作用;共培养组牙周膜细胞ALP活性高于对照组;q PCR和Western印迹法均能检测到牙周膜细胞Runx2、OCN的表达,共培养组牙周膜细胞的Runx2和OCN的表达均高于对照组。经过颌骨骨髓基质细胞条件培养液诱导后的牙周膜细胞与牙本质片复合形成了排列更加有序的牙周膜/牙骨质样结构,单纯的牙周膜细胞膜片不能新生类似的牙周组织复合结构。结论犬颌骨骨髓基质细胞间接共培养情况下可能会限制牙周膜细胞的增殖,促进牙周膜细胞向成骨样细胞分化。 展开更多
关键词 颌骨骨髓基质细胞 牙周膜细胞 共培养 条件培养液
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犬不同部位BMSCs对牙周膜细胞增殖和成骨分化的影响
3
作者 冯源 金振宇 刘宏伟 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2015年第2期96-101,共6页
目的:研究犬髂骨骨髓基质细胞(iliac bone marrow stromal cells,I-BMSCs)和犬颌骨骨髓基质细胞(maxilla bone marrow stromal cells,M-BMSCs)对犬牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)增殖和成骨分化的影响,了解不同部位来源... 目的:研究犬髂骨骨髓基质细胞(iliac bone marrow stromal cells,I-BMSCs)和犬颌骨骨髓基质细胞(maxilla bone marrow stromal cells,M-BMSCs)对犬牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)增殖和成骨分化的影响,了解不同部位来源的骨髓基质细胞对牙周膜细胞调控作用的差异性。方法:原代培养犬髂骨骨髓基质细胞、颌骨骨髓基质细胞和牙周膜细胞。分别建立犬髂骨和颌骨来源的骨髓基质细胞与牙周膜细胞的Transwell共培养体系;制备骨髓基质细胞条件培养液培养牙周膜细胞,MTT法检测牙周膜细胞生长曲线;利用实时荧光定量PCR法检测牙周膜细胞成骨相关基因核心结合因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)的变化;Westernblot法检测牙周膜细胞Runx2和OCN蛋白的表达变化。结果:髂骨骨髓基质细胞条件培养液能促进牙周膜细胞的增殖;颌骨骨髓基质细胞条件培养液对牙周膜细胞增殖有抑制作用;QPCR检测到共培养组牙周膜细胞Runx2、OCN、ALP基因表达高于对照组,Westernblot检测到共培养组牙周膜细胞的Runx2和OCN的蛋白表达高于对照组,且颌骨骨髓基质细胞诱导牙周膜细胞成骨分化效果更显著。结论:犬颌骨骨髓基质细胞条件培养液可能会抑制牙周膜细胞的增殖,相较于髂骨骨髓基质细胞,颌骨骨髓基质细胞促进牙周膜细胞成骨分化效果更显著,颌骨骨髓基质细胞和牙周膜细胞共同作为种子细胞可能更有利于牙周组织再生。 展开更多
关键词 髂骨骨髓基质细胞 颌骨骨髓基质细胞 牙周膜细胞 共培养
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大鼠颌骨与胫骨骨髓基质细胞间接共培养后生物学差异的比较
4
作者 金辰怡 刘宏伟 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期198-203,共6页
目的 SD大鼠颌骨骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨骨髓基质细胞(T-BMSCs)体外间接共培养后,检测两者生物学特性和相关基因表达的变化。方法应用全骨髓贴壁法,分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs。取第三代细胞用Transwell小室间接共培养后,做以下... 目的 SD大鼠颌骨骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨骨髓基质细胞(T-BMSCs)体外间接共培养后,检测两者生物学特性和相关基因表达的变化。方法应用全骨髓贴壁法,分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs。取第三代细胞用Transwell小室间接共培养后,做以下检测。1MTT检测细胞增殖能力差异;2ALP活性、ALP染色、免疫荧光染色检测细胞成骨活性的差异;3荧光定量PCR检测Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I的表达差异和成骨诱导后的表达变化。结果 1全骨髓贴壁法能分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs;2间接共培养后,M-BMSCs和T-BMSCs增殖活力减弱;3共培养条件提高了T-BMSCs和抑制M-BMSCs早期表达ALP的能力;4间接共培养后,M-BMSCs和TBMSCs中Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I基因表达出现变化。结论 M-BMSCs和T-BMSCs间接共培养后,两者的生物学特点的改变和相关基因表达改变。 展开更多
关键词 颌骨骨髓基质细胞 胫骨骨髓基质细胞 间接共培养 WNT1 WNT5A HOXA11
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