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棉花GhLTPG6基因的克隆、表达模式及功能初步分析
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作者 吴翠翠 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第17期5578-5586,共9页
脂质是生物膜的主要组成成分,它参与植物碳源储存、抵抗病原菌侵袭等多种生理过程。植物中脂质转运蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored lipid transfer protein,LTPG)参与植物体内蜡质的运输,在调控植物生长发育过程发挥重要... 脂质是生物膜的主要组成成分,它参与植物碳源储存、抵抗病原菌侵袭等多种生理过程。植物中脂质转运蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored lipid transfer protein,LTPG)参与植物体内蜡质的运输,在调控植物生长发育过程发挥重要作用。本研究从陆地棉TM-1中克隆了1个脂质转运蛋白基因GhLTPG6(GH_D05G0009),分析了GhLTPG6在不同组织器官及低温、高温、高盐和干旱胁迫下的转录响应。序列分析表明GhLTPG6的c DNA全长645 bp,并分析GhLTPG6基因的理化性质及其功能结构域,其包含1个LTPG结构域(AAI)。系统进化树分析表明GhLTPG6与AtLTPG6在同一进化分枝上,亲缘关系最近。亚细胞定位结果显示GhLTPG6定位于质膜上。RT-qPCR分析表明GhLTPG6在10DPA的纤维中表达量最高,GhLTPG6异源过表达拟南芥发现,GhLTPG6对拟南芥莲座叶表皮毛的长度有促进作用,而对其密度无显著影响,说明GhLTPG6可能对棉花的伸长起重要作用。低温处理后,GhLTPG6的表达量随着时间推移逐渐降低,而在高温、高盐和干旱处理后,GhLTPG6的表达量逐渐上升,说明GhLTPG6同时参与棉花的抗逆胁迫。以上研究结果表明GhLTPG6基因可能在棉花伸长期起重要作用,且可能参与棉花的非生物胁迫响应,该基因功能具有潜在的多效性。 展开更多
关键词 陆地棉 过表达 脂质转运蛋白 亚细胞定位 顺式元件分析 表达分析
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獐茅HAK基因表达调控区的分离及其在水稻中的功能分析 被引量:3
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作者 张高华 王鹤 +3 位作者 王旭达 丰明 李怀梅 李树英 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期742-748,共7页
獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用。为了进一步了解AlHAK1基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1基因... 獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用。为了进一步了解AlHAK1基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1基因转录起始位点上游长度约1.3 kb的启动子区域。启动子顺式元件分析显示该序列具有典型的TATA和CAAT盒,以及一些与植物生长发育和环境响应相关的顺式元件。为了明确AlHAK1启动子的功能,将其与GUS基因融合构建到植物表达载体pCAMBIA1301上,通过农杆菌介导转化法导入水稻中。对转基因植株进行GUS组织化学染色,结果显示在转化AlHAK1启动子水稻的根、茎、叶、花药和内外稃部位均检测到GUS活性。GUS荧光定量分析显示AlHAK1启动子调节GUS表达活性低于组成型启动子CaMV35S和Ubiquitin,但其根部和茎部的GUS活性相对较高。对转化植株进行不同胁迫处理后检测GUS活性,结果表明受到ABA、干旱、高温的诱导后其茎部和根部GUS活性有所提高,推测位于该启动子-682 bp的HSE元件和-1 268 bp的MybBS元件可能在高温、ABA和干旱诱导的表达调控中起作用。 展开更多
关键词 獐茅 高亲和性K+转运蛋白基因(HAK1) 启动子克隆 顺式元件分析 GUS组织化学染色
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水稻OsTLP12基因启动子GUS表达载体的构建与转化
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作者 杜文 陈秋红 雷东阳 《农业科学》 CAS 2024年第6期692-701,共10页
植物中类甜蛋白TLPs不仅参与宿主抵御真菌入侵的过程,还参与植物对非生物胁迫的防御。本试验采用PCR技术从籼稻特青中克隆了OsTLP12基因上游2000 bp的启动子片段,并分析了其中所含的顺式作用元件。随后,构建了与GUS报告基因融合的表达载... 植物中类甜蛋白TLPs不仅参与宿主抵御真菌入侵的过程,还参与植物对非生物胁迫的防御。本试验采用PCR技术从籼稻特青中克隆了OsTLP12基因上游2000 bp的启动子片段,并分析了其中所含的顺式作用元件。随后,构建了与GUS报告基因融合的表达载体,并通过农杆菌介导的转化方法将融合表达载体导入水稻中,随后进行了转化植株的筛选,并对转基因植株进行了GUS染色分析。本研究得到以下结果:1) 成功克隆了水稻中OsTLP12基因的启动子片段,并将其与含有GUS报告基因的表达载体融合,获得了融合表达载体;2) OsTLP12基因启动子区域含有多个生物和非生物逆境反应相关的顺式元件;3) 成功将融合表达载体转化进入水稻中,并筛选出阳性转基因幼苗;4) 对转基因幼苗进行了GUS染色,以检测OsTLP12基因启动子驱动的GUS表达情况。 展开更多
关键词 水稻 OsTLP12基因 启动子 顺式作用元件分析 遗传转化 GUS染色
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拟南芥Peptide5和Peptide6的表达谱分析
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作者 蒋细兵 余迪求 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1615-1620,共6页
通过对5个拟南芥(Arabidopsis thalianaL.)预测性多肽进行RT-PCR分析,在mRNA水平证实了Peptide5和Peptide6预测性多肽的真实性。表达谱分析表明:两基因在不同的发育期和不同的组织普遍表达,为组成型基因;对NaCl、聚乙二醇4000(PEG4000)... 通过对5个拟南芥(Arabidopsis thalianaL.)预测性多肽进行RT-PCR分析,在mRNA水平证实了Peptide5和Peptide6预测性多肽的真实性。表达谱分析表明:两基因在不同的发育期和不同的组织普遍表达,为组成型基因;对NaCl、聚乙二醇4000(PEG4000)、茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)、机械损伤和冷害做出基因转录水平的响应。启动子顺式作用元件分析提示,拟南芥Peptide5基因可能参与了次生木质部的形成。 展开更多
关键词 预测性多肽基因 Peptide5 Peptide6 表达谱 顺式作用元件分析
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