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抗HBsAg单链抗体靶向干扰素的构建及原核表达 被引量：7
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作者 夏小兵 成军 +6 位作者 杨继珍 钟彦伟 王刚 方宏清 刘妍 李克 董菁 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2002年第1期28-30,共3页
目的 构建抗ＨＢｓＡｇ人源单链抗体与人干扰素α的融合分子－抗ＨＢｓＡｇ单链抗体靶向干扰素，并在大肠杆菌中表达出活性融合蛋白。方法 利用限制性内切酶分别从含有抗ＨＢｓＡｇ人源单链抗体与人干扰素α的质粒中切出目的基因，连接... 目的 构建抗ＨＢｓＡｇ人源单链抗体与人干扰素α的融合分子－抗ＨＢｓＡｇ单链抗体靶向干扰素，并在大肠杆菌中表达出活性融合蛋白。方法 利用限制性内切酶分别从含有抗ＨＢｓＡｇ人源单链抗体与人干扰素α的质粒中切出目的基因，连接到ｐＥＴ２２ｂ质粒中，构建成单链抗体靶向干扰素表达载体。利用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ电泳、竞争性抑制实验与抗病毒实验对表达产物进行分析鉴定。结果 构建出含有抗体靶向干扰素融合基因的表达质粒，诱导１２ｈ后，在ＳＤＳ—ＰＡＧＥ上可以观察到相对分子质量约４５×１０４的目的蛋白，竞争性抑制实验与抗病毒实验表明表达的融合蛋白保留了单链抗体的ＨＢｓＡｇ特异结合活性与干扰素的抗病毒活性。结论 抗ＨＢｓＡｇ单链靶抗体靶向干扰素融合分子的构建及在大肠杆菌中的表达是成功的。 展开更多
关键词 融合蛋白 靶向干扰素α 单链抗体 构建 抗HBsAg单链抗体 原核 肿瘤 基因治疗
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