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鬼臼毒素纳米脂质载体通过非Caspase依赖途径诱导VK2/E6E7细胞凋亡机制的研究 被引量:2
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作者 李雪芽 肖艳 曾抗 《皮肤性病诊疗学杂志》 2013年第2期89-92,共4页
目的:探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)诱导人永生化阴道上皮细胞(VK2/E6E7)凋亡的作用及机制。方法:取对数期生长VK2/E6E7细胞,分别加入POD-NLC和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养24小时。实验分为4组:A组:空白对照组;B组:0.25μg/mL ... 目的:探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)诱导人永生化阴道上皮细胞(VK2/E6E7)凋亡的作用及机制。方法:取对数期生长VK2/E6E7细胞,分别加入POD-NLC和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养24小时。实验分为4组:A组:空白对照组;B组:0.25μg/mL POD-NLC+Caspase抑制剂组;C组:1μg/mL POD-NLC+Caspase抑制剂组;D组:空白NLC+Caspase抑制剂组。采用流式细胞仪检测ROS水平,qPCR检测AIF mRNA表达,蛋白印迹检测各组细胞AIF、cyt-C蛋白表达。结果:B组、C组均可以上调ROS、AIF、cyt-C水平,与A组及D组相比均有统计学差异(P值均<0.05);B组与C组AIF mRNA及AIF蛋白表达无统计学差异(P值均>0.05);ROS、cyt-C各组间比较均有统计学意义(P值均<0.05)。结论:鬼臼毒素纳米脂质载体可以通过非Caspase依赖途径诱导永生化阴道上皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 鬼臼毒素纳米脂质载体 凋亡机制 caspase依赖途径 VK2 E6E7细胞
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问号钩端螺旋体经线粒体相关信号通路诱导巨噬细胞凋亡的研究 被引量:3
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作者 范兴丽 董海艳 严杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期807-812,共6页
目的确定线粒体相关信号转导途径在问号钩端螺旋体(简称钩体)诱导小鼠单核一巨噬细胞凋亡过程中的作用。方法建立问号钩体黄疸出血群赖株诱导小鼠单核.巨噬样细胞株J774A.1凋亡模型。采用透射电镜观察感染细胞线粒体病变情况,JC-1... 目的确定线粒体相关信号转导途径在问号钩端螺旋体(简称钩体)诱导小鼠单核一巨噬细胞凋亡过程中的作用。方法建立问号钩体黄疸出血群赖株诱导小鼠单核.巨噬样细胞株J774A.1凋亡模型。采用透射电镜观察感染细胞线粒体病变情况,JC-1染色法检测感染细胞线粒体膜电位变化,荧光探针DCFH-DA检测感染细胞内活性氧(ROS)水平。采用试剂盒检测感染细胞caspase.8和caspase-9活性变化。流式细胞术检测感染细胞凋亡情况以及caspase阻断剂阻断凋亡的效果。采用Westernblot检测线粒体内和胞质中的细胞色素C(CytC)以及凋亡诱导因子(AIF)、核酸内切酶G(EndoG)和Smac水平。应用免疫荧光染色法检测AIF和EndoG从细胞质至核内的转位。结果问号钩体赖株可诱导J774A.1细胞凋亡。感染细胞的线粒体有明显病变,线粒体膜电位降低且胞内活性氧水平升高。感染细胞caspase-8活化,caspase-9则否,但caspase阻断剂不能完全阻断细胞凋亡。感染细胞AIF和EndoG从线粒体释放至胞质并转位至细胞核内。未检测到感染细胞胞质内CytC水平升高及Smac的释放。结论线粒体可通过非caspase途径的AIF和EndoG参与问号钩体诱导单核-巨噬细胞凋亡的过程。 展开更多
关键词 问号钩端螺旋体 细胞凋亡 线粒体 caspase依赖凋亡途径
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