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非编码基因MALAT1功能性序列真核表达载体的构建及其在SW620细胞中的表达 被引量：4
1
作者 杨敏慧 王双双 +2 位作者 王晓燕 徐川 李祖国 《热带医学杂志》 CAS 2010年第3期248-252,257,F0003,共7页
目的构建人肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)功能性序列重组真核荧光表达载体,并在人大肠癌SW620细胞株中表达。方法采用RT-touchdown PCR方法,从人正常大肠黏膜组织中提取总RNA,扩增MALAT1功能性序列,将扩增产物克隆至pTA2载体,测序证实... 目的构建人肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)功能性序列重组真核荧光表达载体,并在人大肠癌SW620细胞株中表达。方法采用RT-touchdown PCR方法,从人正常大肠黏膜组织中提取总RNA,扩增MALAT1功能性序列,将扩增产物克隆至pTA2载体,测序证实后,克隆至pEGFP-C1质粒中,构建重组真核荧光表达载体;阳离子脂质体介导下转染人大肠癌SW620细胞,荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。通过Real-time PCR检测质粒转染前后MALAT1/fgf mRNA表达水平的变化。结果经pTA2载体和pEGFP-C1载体克隆、酶切鉴定及序列分析后,证实人MALAT1功能性序列重组真核荧光表达载体构建成功。在荧光显微下观察到带绿色荧光的SW620细胞。pEGFP-C1-MALAT1/fgf转染前后SW620细胞MALAT1/fgf mRNA表达水平倍比关系为2.376±0.573,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了人MALAT1功能性序列真核荧光表达载体pEGFP-C1-MALAT1/fgf,转染SW620细胞后可引起MALAT1/fgf mRNA表达上调,为进一步研究MALAT1的结构、功能及其与人大肠癌的关联奠定了基础。 展开更多
关键词 非编码转录本 MALAT1 真核表达载体 人大肠癌SW620细胞 RT-touchdownPCR
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长链非编码RNA与心血管疾病的研究进展 被引量：1
2
作者 赵洋 刘洋 +2 位作者 杨一波 廉瑞 宋春莉 《中国实验诊断学》 2017年第8期1463-1466,共4页
目前,心血管疾病已经成为了严重威胁人类生命健康的重大慢性疾病之一。尽管日益发展的医疗技术使心血管疾病的患者经过医治后,症状能够得到一定的缓解,生活质量得到改善,但是至今仍无法从根本上使心血管疾病得到逆转或终止其进一步发展... 目前,心血管疾病已经成为了严重威胁人类生命健康的重大慢性疾病之一。尽管日益发展的医疗技术使心血管疾病的患者经过医治后,症状能够得到一定的缓解,生活质量得到改善,但是至今仍无法从根本上使心血管疾病得到逆转或终止其进一步发展。不仅如此,相比于过去几十年,人类新的不良生活习惯也渐渐成为心血管疾病新的危险因素, 展开更多
关键词 心血管疾病 RNA 不良生活习惯 慢性疾病 医疗技术 基因沉默 心肌细胞凋亡 非编码转录本 血管平滑肌细胞 心血管系统疾病
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两个东亚钳蝎毒素非编码转录本:蝎毒腺细胞存在NMD途径的证据 被引量：1
3
作者 朱顺义 曹志贱 李文鑫 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第16期1359-1363,共5页
从中国东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch, BmK)毒腺组织cDNA文库中分离到两个毒素基因的非编码转录本, 命名为BmαTX15-SP和BmTXKβ-SP. 核苷酸序列分析表明它们的5′端序列分别与BmαTX15和BmTXKβ毒素cDNA的5′UTR和上游ORF序列一致,... 从中国东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch, BmK)毒腺组织cDNA文库中分离到两个毒素基因的非编码转录本, 命名为BmαTX15-SP和BmTXKβ-SP. 核苷酸序列分析表明它们的5′端序列分别与BmαTX15和BmTXKβ毒素cDNA的5′UTR和上游ORF序列一致, 下游则缺乏任何同源性. 两个非编码转录本含有多个短的ORF(≤34 aa), 3′端含有一个AATAAA加尾信号, 距poly (A) 尾14 - 18 nt. 基因组织结构分析表明, 两个非编码转录本并非错误剪接的产物. 研究结果为蝎毒腺细胞可能存在类似于哺乳动物和酵母的无义介导的mRNA降解途径提供了证据. 展开更多
关键词 东亚错蝎 非编码转录本 NMD 毒素 基因组织 核苷酸序列分析 MRNA降解
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哺乳动物的印记基因
4
作者 韩晓蕾 姚潮刚 +3 位作者 韩杨 高鹏飞 逄大欣 李占军 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期63-65,共3页
基因组印记(Genomic imprinting),又称为遗传印记(Genetic imprinting),是近年来发现的一种不遵从孟德尔定律的依靠单亲传递某些遗传学性状的现象。在配子或合子发生期间,来自亲本的等位基因或染色体在发育过程中产生专一性的加工修饰,... 基因组印记(Genomic imprinting),又称为遗传印记(Genetic imprinting),是近年来发现的一种不遵从孟德尔定律的依靠单亲传递某些遗传学性状的现象。在配子或合子发生期间,来自亲本的等位基因或染色体在发育过程中产生专一性的加工修饰,导致后代体细胞中两个亲本来源的等位基因有不同的表达活性,具有这种现象的基因称为印记基因(imprinted gene)。 展开更多
关键词 印记基因 亲本来源 遗传印记 IMPRINTING 孟德尔定律 卵母细胞 遗传疾病 母源基因 非编码转录本 早期胚胎
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长链非编码RNA HOXA末端转录本反义RNA在膀胱癌中的表达及其对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响 被引量：7
5
作者 汤利 郭永连 +2 位作者 陈琳 李国灏 张伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期682-684,共3页
目的探讨长链非编码RNA HOXA末端转录本反义RNA(HOTTIP)在膀胱癌细胞中的表达,及其对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其作用机制。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HOTTIP在癌旁组织和膀胱肿瘤组织、正常上皮细胞和膀胱癌细... 目的探讨长链非编码RNA HOXA末端转录本反义RNA(HOTTIP)在膀胱癌细胞中的表达,及其对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其作用机制。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HOTTIP在癌旁组织和膀胱肿瘤组织、正常上皮细胞和膀胱癌细胞间的表达差异;细胞计数试剂盒(CCK-8)观察膀胱癌细胞的增殖情况;流式细胞术检测膀胱癌细胞的细胞周期进程;运用Transwell和划痕愈合实验观察细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂(TIMPs)蛋白表达水平。结果HOTTIP在膀胱肿瘤组织中的表达(1.943±0.251)明显高于癌旁组织中的表达(1.002±0.091),差异有统计学意义(P<0.05);人源正常上皮细胞(SV-HUC-1)中HOTTIP的表达明显低于5637和T24中的表达(1.003±0.092比2.241±0.306和1.692±0.203),差异有统计学意义(P<0.05)。HOTTIP干扰组(si-HOTTIP)和阴性转染组(si-NC)干预5637和T24细胞48 h后,5637(0.881±0.182比1.824±0.193)和T24(0.623±0.094比1.332±0.153)细胞增殖能力显著降低(P<0.05),细胞周期均被阻滞在G0~G1期,细胞的迁移距离及穿膜率均降低,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均降低,TIMP1和TIMP2蛋白表达水平增加。结论长链非编码RNA HOTTIP在膀胱肿瘤组织和细胞中下调,通过降低MMPs和升高TIMPs促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNAHOXA末端转录本反义RNA 膀胱癌 增殖 迁移 侵袭
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