期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到1篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
蜡样芽孢杆菌非溶血性肠毒素基因的原核表达及多克隆抗体制备 被引量：5
1
作者 鲁爽 聂志超 +2 位作者 董歆 孟旭 陈克平 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期635-638,共4页
目的分别对非溶血性肠毒素基因(Nhe)的3个亚基进行原核表达,并对蜡样芽孢杆菌分泌的非溶血性肠毒素蛋白进行免疫学鉴定。方法根据NCBI数据库非溶血性肠毒素NheA、NheB、NheC基因序列设计引物,以蜡样芽孢杆菌的基因组为模板,PCR扩增NheA... 目的分别对非溶血性肠毒素基因(Nhe)的3个亚基进行原核表达,并对蜡样芽孢杆菌分泌的非溶血性肠毒素蛋白进行免疫学鉴定。方法根据NCBI数据库非溶血性肠毒素NheA、NheB、NheC基因序列设计引物,以蜡样芽孢杆菌的基因组为模板,PCR扩增NheA、NheB、NheC基因。分别将3个基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化到大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目的蛋白,进行SDS-PAGE分析以及Western blot分析,并免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。结果经PCR和酶切鉴定,成功构建重组表达载体。重组表达载体分别转化至BL21(DE3),经IPTG诱导表达相应的目的蛋白,分子质量单位分别为NheA 40ku,NheB 44ku,NheC 40ku。经电离飞行时间质谱鉴定,重组蛋白NheA、NheB和NheC表达正确。3种目的蛋白经SDS-PAGE电泳后分别割胶回收,免疫新西兰大白兔,获得重组多克隆抗体。结论成功构建了NheA、NheB、NheC基因重组表达载体,表达的重组蛋白免疫新西兰兔获得相应的克隆抗体,为进一步研究非溶血型肠毒素的结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 非溶血型肠毒素 原核表达 多克隆抗体
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部